劉勇鵬 張濤 王秋嶺 姚小丹 宋丹陽 王改革 賈延釗 姚秋菊 孫治強(qiáng)

摘 ? ?要：當(dāng)前對(duì)綠色農(nóng)產(chǎn)品的消費(fèi)需求，客觀上限制了高毒化學(xué)農(nóng)藥在防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲上的使用。生物菌劑具有安全高效、不污染環(huán)境的優(yōu)點(diǎn)，使其防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲的優(yōu)勢(shì)更明顯，受到蔬菜種植者和消費(fèi)者的重視和青睞。筆者概述了根結(jié)線蟲、設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲病發(fā)生條件、致病原理與危害，分析了當(dāng)前生物菌劑的研究應(yīng)用現(xiàn)狀，以期為生物菌劑的發(fā)展提供重要的參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：設(shè)施蔬菜;根結(jié)線蟲;生物菌劑;安全高效

中圖分類號(hào)：S641+S642 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1673-2871（2020）10-009-06

Abstract： At present， the consumption demand for green agricultural products restricts the use of highly toxic chemical pesticides in the control of vegetable root knot nematodes. Biological fungicide has the advantages of safety， high efficiency and no pollution to the environment， which makes it more and more obvious in the prevention and control of root knot nematode disease of vegetables in greenhouse， and it is valued and favored by vegetable growers and consumers. Based on the overview of root knot nematode， the occurrence conditions， pathogenic mechanism and damage of root knot nematode to protected vegetables， and the current research and application of biological agents， hoping to provide an important reference basis for the development of biological agents.

Key words： Protected vegetables; Biocontrol agents; Root knot nematode; Safety and efficiency

設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲病是典型的土傳病害，主要危害蔬菜的根系，通過寄生在蔬菜作物的幼根上并形成根結(jié)，誘導(dǎo)植物細(xì)胞轉(zhuǎn)化為特異性的取食位點(diǎn)，從中攝取營養(yǎng)維持根節(jié)線蟲的發(fā)育和繁殖，進(jìn)而破壞蔬菜根部細(xì)胞的組織結(jié)構(gòu)與活力，阻礙礦質(zhì)營養(yǎng)及水分的運(yùn)輸，導(dǎo)致植株葉片發(fā)黃變小、營養(yǎng)失調(diào)、植株矮小、不結(jié)實(shí)或結(jié)實(shí)不良[1-2]。據(jù)報(bào)道，全世界發(fā)現(xiàn)的根結(jié)線蟲有80多種，寄主植物2 000多種[3]。設(shè)施蔬菜，尤其是在日光溫室中的蔬菜，由于連作次數(shù)多，環(huán)境溫度高，因此根結(jié)線蟲危害最嚴(yán)重。據(jù)報(bào)道，在設(shè)施蔬菜中由根結(jié)線蟲引起的病害可直接導(dǎo)致減產(chǎn)50%～80%，已經(jīng)成為設(shè)施蔬菜發(fā)展的主要障礙[4]。生物菌劑防治是主要利用自然界中根結(jié)線蟲的細(xì)菌、真菌等微生物天敵進(jìn)行防治，其中關(guān)于食線蟲真菌、穿刺芽孢桿菌、根際細(xì)菌的研究較多，在作用機(jī)制方面也取得了重大進(jìn)展，是當(dāng)前設(shè)施蔬菜防治根結(jié)線蟲病的熱點(diǎn)及主要研究方向[5-6]。本文概述根結(jié)線蟲、設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲發(fā)病條件、致病原理及危害、國內(nèi)外生物菌劑研究的現(xiàn)狀，為進(jìn)一步對(duì)擴(kuò)大生物菌劑在防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲病方面的應(yīng)用提供理論參考依據(jù)。

1 根結(jié)線蟲概述

根結(jié)線蟲（Meloidogyne spp.）屬于土壤定居性內(nèi)寄生線蟲，屬于線蟲門側(cè)尾腺綱（Secernentea）墊刃目（Tylenchida）異皮總科（Heteroderidea）根結(jié)線蟲科（Meloidogyne）根結(jié)線蟲屬（Meloidogyne Goeldi），已經(jīng)成為危害農(nóng)作物的重要病原生物之一[7]，在1879年被首次發(fā)現(xiàn)，隨后又有新種不斷被發(fā)現(xiàn)，根結(jié)線蟲危害的報(bào)道也不斷增多。目前我國設(shè)施蔬菜生產(chǎn)上最嚴(yán)重的病原線蟲是南方根結(jié)線蟲，其繁殖速度快、抗性強(qiáng)、易傳播，也是當(dāng)前防治的主要對(duì)象[8]。

1.1 雌雄根結(jié)線蟲主要特征

雄蟲蟲體外觀呈蠕蟲狀，雌蟲蟲體外觀呈圓形至梨形。雌蟲不存在孢囊期，有略彎曲的頸，最大長度3 000 μm，最大寬度750 μm。雄蟲具體環(huán)，最大長度2 500 μm，最小長度600 μm。根結(jié)線蟲卵外觀呈腎臟形到長橢圓形，顏色多為淡褐色，大小在408～3 784 μm2之間。此外，2齡侵染幼蟲呈蠕蟲狀，無色透明，外觀不規(guī)則，尾部呈圓錐狀，尾尖有透明區(qū)又叫透明尾，最大長度500 μm，最大寬度16 μm?？卺樌w細(xì)，在15 μm左右。3齡及4齡根結(jié)線蟲幼蟲時(shí)期蟲體膨大成囊狀，固定寄生于作物根結(jié)內(nèi)，且有明顯突尾等[9]。

1.2 根結(jié)線蟲習(xí)性及繁衍

根結(jié)線蟲從卵開始孵化到幼蟲，再到成蟲，最后到兩性成蟲交配產(chǎn)卵的整個(gè)生長發(fā)育循環(huán)過程為根結(jié)線蟲的生活史。通常分為卵、幼蟲和成蟲3個(gè)時(shí)期。根結(jié)線蟲以卵、2齡幼蟲及雌成蟲3種形態(tài)隨植株病根在土壤中繼續(xù)存活，并在次年再次對(duì)植株進(jìn)行侵染傷害[10]。研究發(fā)現(xiàn)，根結(jié)線蟲2齡期是防治的關(guān)鍵時(shí)期。有數(shù)據(jù)顯示，在正常的溫濕度條件下，南方根結(jié)線蟲平均40 d 左右發(fā)生1代，河南一年發(fā)生3～4代，且世代重疊發(fā)生，再侵染發(fā)生次數(shù)較多。有研究表明，根結(jié)線蟲生活周期與當(dāng)?shù)販貪穸取⒆魑锷L季節(jié)、降雨量等有很大關(guān)系[11-12]。

2 設(shè)施蔬菜內(nèi)根結(jié)線蟲發(fā)病條件、致病原理及主要危害

2.1 設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲發(fā)病條件

根結(jié)線蟲最適土壤溫度平均在25 ℃左右。設(shè)施保護(hù)地比露地土壤環(huán)境升溫早、根結(jié)線蟲初侵染時(shí)間早、繁殖世代數(shù)多，因而保護(hù)地蔬菜根結(jié)線蟲危害比露地栽培嚴(yán)重[13];土壤濕度及結(jié)構(gòu)影響根結(jié)線蟲孵化及生存[14]。設(shè)施內(nèi)濕度大，土壤結(jié)構(gòu)單一，是設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲病害發(fā)生的重要原因之一;連作更是根結(jié)線蟲病害發(fā)生的重要原因之一。由于設(shè)施結(jié)構(gòu)的不可移動(dòng)性，設(shè)施蔬菜栽培中主要的栽培模式是連作，其根結(jié)線蟲危害更加嚴(yán)重，尤其在冬季日光溫室內(nèi)，室內(nèi)環(huán)境溫度較高，適宜栽培的蔬菜種類較少，連作年限較長，根結(jié)線蟲可繼續(xù)繁殖危害，發(fā)病也更加嚴(yán)重[15];近年來在設(shè)施蔬菜的生產(chǎn)中，化肥的大量施用以及栽培技術(shù)的不規(guī)范，導(dǎo)致土壤結(jié)構(gòu)及營養(yǎng)失調(diào)，也使設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲發(fā)生更為嚴(yán)重;設(shè)施蔬菜種植主要集中在高附加值類蔬菜，大多是瓜類及茄果類蔬菜，這類蔬菜差不多都是根結(jié)線蟲的易感寄主，進(jìn)一步加劇了設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲病的發(fā)生;在品種抗性選育方面，只有番茄、辣椒等少數(shù)蔬菜培育出抗性品種，但其品種價(jià)格較高，退化快，也使設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲病的發(fā)生率逐年增加，危害程度日益加重[16-17]。

2.2 設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲致病原理及危害

近年來，設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲病害主要以黃瓜、番茄、絲瓜、苦瓜、芹菜等最為嚴(yán)重，病害一旦發(fā)生能直接導(dǎo)致減產(chǎn)一半左右，嚴(yán)重時(shí)甚至絕收。茄子、豆類、咖啡等8種非易感根結(jié)線蟲的蔬菜作物損失率也在25%左右。全世界因根結(jié)線蟲造成的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)損失最高可達(dá)25%[18]。根結(jié)線蟲主要侵染設(shè)施內(nèi)蔬菜的側(cè)根和須根，設(shè)施蔬菜被線蟲侵染后根部表面會(huì)形成大小不同的根結(jié)（根瘤），早期根結(jié)為白色，后期變?yōu)楹稚?，表面出現(xiàn)皸裂皺縮，侵染嚴(yán)重的根系則全部糜爛。內(nèi)部表現(xiàn)主要為根結(jié)線蟲的2齡幼蟲侵入蔬菜根系頂部的分生組織，由食道分泌并形成一種生物酶和植物刺激素，刺激寄主細(xì)胞發(fā)生有絲分裂，并形成巨型細(xì)胞，進(jìn)而在根部形成根結(jié)，阻礙根系營養(yǎng)對(duì)地上部的供應(yīng)，導(dǎo)致植株地上部營養(yǎng)失調(diào)，影響植物的株高、莖粗等生物形態(tài)指標(biāo)及作物抗氧化系統(tǒng)，以及內(nèi)源激素、光合作用及營養(yǎng)元素的吸收分配，最終導(dǎo)致設(shè)施蔬菜產(chǎn)量和品質(zhì)的嚴(yán)重下降[19]。此外，2齡幼蟲侵入植株根系后會(huì)產(chǎn)生傷口，此時(shí)土壤中的有害病原菌也會(huì)趁機(jī)從傷口侵入到植物體內(nèi)，造成青枯病、枯萎病、立枯病、根腐病等其他土傳病害的發(fā)生與危害，對(duì)設(shè)施內(nèi)蔬菜造成二次傷害[20]。

3 設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲生物菌劑防治現(xiàn)狀

用生物菌劑防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲主要是依靠根結(jié)線蟲的天敵，主要包括真菌、細(xì)菌、病毒、立克氏體、放線菌、捕食性線蟲、渦蟲和原生動(dòng)物等[21]。目前，生物菌劑具有安全、環(huán)保的優(yōu)點(diǎn)，是當(dāng)前防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲病的熱點(diǎn)研究課題[22]。在當(dāng)前研究中針對(duì)食線蟲真菌、穿刺芽孢桿菌、根際細(xì)菌及放線菌的報(bào)道較多，而關(guān)于其他生物方法防治的較少。筆者主要從真菌、細(xì)菌及放線菌3個(gè)方面進(jìn)行綜述分析。

3.1 真菌性生物菌劑防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲研究現(xiàn)狀

真菌的生防機(jī)制是寄生、拮抗、捕食或毒殺[23]，目前報(bào)道的根結(jié)線蟲寄生真菌有30多種。主要報(bào)道的真菌有淡紫擬青霉（Paecilomyces lilacinus）、粉紅粘帚霉菌（Gliocladium roseum）、厚垣輪枝菌（Verticillium chlamydosporium）、哈次木霉（Trichoderma harzianum）及綠色木霉（Trichoderma viride）、枯草芽孢桿菌、疣孢漆斑菌等。如黃闊等[24]通過田間試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，土壤中添加微生物菌劑淡紫擬青霉、枯草芽孢桿菌、熒光假單胞桿菌均能夠控制煙草根結(jié)線蟲病，防效可達(dá)80%，且能增強(qiáng)土壤微生物群落多樣性。在主要寄生真菌類型方面，肖順[25]研究發(fā)現(xiàn)，根結(jié)線蟲的寄生真菌主要是卵囊寄生真菌。對(duì)主要食線真菌淡紫擬青霉、厚垣輪枝菌，楊凡等[26]研究表明，pt361淡紫紫孢菌株對(duì)線蟲卵寄生率達(dá)75%，且其菌株混合發(fā)酵液對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲幼蟲致死率超過90%。許艷麗等[27]研究發(fā)現(xiàn)，鐮孢菌屬（Fusarium spp.）、厚垣輪枝菌（Verticillium chlamydosporium）和淡紫擬青霉菌（Paecilomyces lilacinus）廣泛存在于連作大豆田中，試驗(yàn)室條件下混合寄生真菌發(fā)酵液均對(duì)大豆胞囊線蟲胞囊和卵孵化具有強(qiáng)烈的抑制作用，胞囊孵化抑制率在59.1%～87.8%，卵孵化抑制率在72.1%～84.7%，大豆胞囊線蟲2齡幼蟲的致死率在48 h時(shí)超過94%，在72 h時(shí)達(dá)到了100%。劉勇鵬等[28]試驗(yàn)研究也發(fā)現(xiàn)，不同用量的淡紫擬青霉菌劑與厚垣輪枝菌制劑對(duì)番茄根結(jié)線蟲病防治也有明顯的效果，且對(duì)寄主番茄的生長發(fā)育也有很好的調(diào)控作用。劉暢[29]等研究發(fā)現(xiàn)，在25 ℃條件下，厚垣輪枝菌寄生卵防治效應(yīng)產(chǎn)生較快，使用一定劑量90 d后，對(duì)溫室盆栽番茄根結(jié)線蟲病的防效可以達(dá)到65%。宋益民等[30]介紹了淡紫擬青霉微生物農(nóng)藥的特點(diǎn)和使用方法，為當(dāng)前生產(chǎn)上防治蔬菜根結(jié)線蟲病提供了一定的參考依據(jù)。整體研究表明淡紫擬靑霉、厚垣輪枝菌不僅對(duì)設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲病具有很好的防治效果，而且對(duì)植株的生長發(fā)育也有一定的促進(jìn)作用。對(duì)哈茨木霉菌、枯草芽孢桿菌，如馬金慧等[31]研究發(fā)現(xiàn)，木霉菌TRI2發(fā)酵液在一定時(shí)間內(nèi)可以全部殺死根結(jié)線蟲，在盆栽試驗(yàn)中黃瓜根結(jié)減退率在60%以上，在田間對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲的防治效果也在70%以上。翟明娟等[32]研究發(fā)現(xiàn)，從土壤中分離到木霉菌株Tvir-6發(fā)酵液在24 h 內(nèi)對(duì)根結(jié)線蟲2齡幼蟲的校正死亡率高達(dá)98%，在田間試驗(yàn)中防效達(dá)到64.9%，并可使黃瓜產(chǎn)量提高34.1%。段玉璽等[33]也進(jìn)行了哈次木霉Snef85發(fā)酵液對(duì)根結(jié)線蟲的毒力測(cè)試效果及精確防效的研究等。此外，丁國春等[34]研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌AR11菌株對(duì)番茄根部根結(jié)和卵塊的形成有明顯的抑制作用，低濃度的菌懸液和上清液對(duì)卵的孵化具有抑制作用，對(duì)番茄的生長也有促進(jìn)作用。在其他微生物真菌方面，最早錢振官等[35]在1993年報(bào)道，寡孢節(jié)叢孢菌（Arthiobotrys oligospora）屬于捕食性線蟲真菌，褶生輪枝菌（Verticillium lamelicola）是寄生性線蟲真菌，對(duì)根結(jié)線蟲均有很好的防治效果。賴寶春等[36]發(fā)現(xiàn)了一株具有殺線蟲活性的鐮刀菌，對(duì)根結(jié)線蟲寄生和繁殖也有很好的抑制效果。廖夢(mèng)婕等[37]也初步明確了蠟質(zhì)芽胞桿菌AR156防治南方根結(jié)線蟲的生防相關(guān)功能基因M60家族肽酶。路鵬鵬等[38]發(fā)現(xiàn)，枝頂孢霉制劑對(duì)土壤微生態(tài)環(huán)境的影響主要在幼苗期，能夠促進(jìn)黃瓜幼苗生長且對(duì)根結(jié)線蟲也有很好的防治作用。整體而言，在真菌性生物菌劑防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲方面，研究廣泛，應(yīng)用較多，理論體系也最為成熟。

3.2 細(xì)菌性生物菌劑防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲研究現(xiàn)狀

目前，應(yīng)用細(xì)菌防治根結(jié)線蟲方面在國內(nèi)外研究上也已經(jīng)取得了一些進(jìn)展。國內(nèi)報(bào)道，劉志明等[39]從1995年起就開展了致病細(xì)菌防治根結(jié)線蟲幼蟲的試驗(yàn)研究，并對(duì)致病細(xì)菌開展篩選及分離工作。黃金鈴等[40]進(jìn)行了根際細(xì)菌菌株防治番茄根結(jié)線蟲的盆栽試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)巨大芽孢桿菌處理60 d對(duì)番茄根結(jié)線蟲病的防效達(dá)60%。許園園等[41]研究發(fā)現(xiàn)，在蘇云金桿菌無晶體突變株BMB171中異源表達(dá)cry21-99基因，其表達(dá)產(chǎn)物形成菱形晶體，對(duì)南方根結(jié)線蟲有毒殺活性，同時(shí)，還在分子水平上預(yù)測(cè)了Cry毒素以外的殺線蟲毒力因子和次生代謝產(chǎn)物，為細(xì)菌生物制劑在分子研究水平上提供了重要的理論依據(jù)。彭雙等[42]為了獲得防治植物寄生線蟲的微生物菌種資源和防效穩(wěn)定的生物菌劑，發(fā)現(xiàn)植物內(nèi)生細(xì)菌BCM2和CCM7單菌株的固體菌劑對(duì)番茄根結(jié)線蟲病的防效最高，均達(dá)到了85%。為高殺線蟲活性的細(xì)菌性生物菌劑制備提供了重要的理論支撐。唐佳頻等[43]從1 432株細(xì)菌離體篩選得到了9株具有抗南方根結(jié)線蟲的細(xì)菌，其中南極土壤來源的菌株惡臭假單胞菌（Pseudomonas putida）1A00316，其生防效果達(dá)到71.67%，該菌不僅有直接抗蟲作用，還存在間接抗蟲機(jī)制。王貽蓮等[44]研究越南伯克氏B418及其與蠟樣芽胞桿菌BCJB01、木霉菌LTR-2和T11-W組合菌劑的配套應(yīng)用技術(shù)，整地時(shí)添加營養(yǎng)基質(zhì)，可顯著提高B418菌劑對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲的田間防治效果。此外，國外研究報(bào)道，穿刺巴氏桿菌對(duì)花生根結(jié)線蟲病有很好的防治效果[45]。國內(nèi)研究也發(fā)現(xiàn)了穿刺巴氏桿菌對(duì)感染根結(jié)線蟲的植物有很好的保護(hù)作用，可降低根結(jié)線蟲蟲口密度。其次，研究發(fā)現(xiàn)利用巴氏芽菌侵入南方根結(jié)線蟲2齡幼蟲后，幼蟲生命活性降低并很快死亡，且大田試驗(yàn)也證明了巴斯德氏芽菌對(duì)根結(jié)線蟲病的防治具有突出效果[46]。此外，代先強(qiáng)等[47]也發(fā)現(xiàn)巴氏桿菌對(duì)煙草根結(jié)線蟲病起到很好的防治效果。綜上可知，隨著對(duì)芽孢桿菌、穿刺巴氏桿菌及根際細(xì)菌等生防細(xì)菌因子研究的不斷加深，細(xì)菌性生物菌劑在防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲方面將扮演著越來越重要的角色。

3.3 放線菌及其他因子生物菌劑防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲研究現(xiàn)狀

在放線菌的菌素種類上，羅紅麗等[48]研究報(bào)道從感染植物根部的根結(jié)線蟲卵和雌蟲中分離得到放線菌20株。分離菌株分屬于鏈霉菌屬（Streptomyces）、諾卡氏菌屬（Nocardia）和假諾卡氏菌屬（Pseudonocardia），其中鏈霉菌占80%左右，對(duì)根結(jié)線蟲卵的平均寄生率為54%。此外，眾所周知，抗生素的產(chǎn)生主要依賴放線菌。而當(dāng)前針對(duì)設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲防治最多的抗生素是阿維菌素，針對(duì)其研究的報(bào)道也較多，有報(bào)道表明其與化學(xué)制劑噻唑膦配合使用對(duì)蔬菜根結(jié)線蟲病的防效在90%以上，但其產(chǎn)生的抗藥性問題也引起了人們的高度關(guān)注[49]。當(dāng)前放線菌等其他因子防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲，雖然對(duì)根結(jié)線蟲有很高的寄生性及拮抗作用，但抗生素類的抗藥性也成了其發(fā)展的主要障礙。王波等[50]最新研究發(fā)現(xiàn)，淡紫擬青霉與放線菌的復(fù)配菌劑對(duì)根結(jié)線蟲的防治效果比單菌株的顯著，對(duì)番茄的根結(jié)形成和根結(jié)線蟲卵塊形成的抑制率分別為68.7%和58.4%。因此，在該類生物菌劑上復(fù)配其他微生物制劑將是未來研究的熱點(diǎn)。

4 討論與展望

隨著人們生活水平的提高，生活品質(zhì)不斷改善，對(duì)蔬菜需求量也越來越大，設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲病作為當(dāng)前設(shè)施蔬菜生產(chǎn)的主要病害，安全高效的防治技術(shù)也越來越受到人們的廣泛關(guān)注[51]。雖然一些高毒化學(xué)殺線蟲劑正在逐漸淘汰，但是低毒的化學(xué)殺線蟲劑仍然會(huì)在一定程度上污染土壤微生態(tài)環(huán)境及危害人類的健康。相反，生物菌劑具有促進(jìn)作物生長發(fā)育、改善土壤生態(tài)環(huán)境、提高作物品質(zhì)產(chǎn)量以及不污染環(huán)境的優(yōu)點(diǎn)，是當(dāng)前防治根結(jié)線蟲研究的熱點(diǎn)[52]。

當(dāng)前針對(duì)設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲的生物菌劑防治主要集中在真菌上，相關(guān)的研究報(bào)道最多，主要是食線真菌淡紫擬青霉、厚垣輪枝菌、木霉菌、枯草芽孢桿菌等。研究表明，多種食線真菌不僅對(duì)設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲具有很好的防治效果，且對(duì)植株的生長發(fā)育也有一定的促進(jìn)作用。其次，在細(xì)菌制劑方面，相關(guān)研究報(bào)道也比較多，主要是孢桿菌、穿刺巴氏桿菌及根際細(xì)菌。尤其在根際細(xì)菌方面，理論基礎(chǔ)相對(duì)完備，是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。而放線菌制劑主要是利用其產(chǎn)生物抗生素，相關(guān)報(bào)道大多是阿維菌素，其他的研究報(bào)道相對(duì)較少，因抗生素抗性問題的產(chǎn)生，未來研究的主要方向集中到與其他微生物制劑的復(fù)配上。同時(shí)，隨著生物菌劑在設(shè)施蔬菜生產(chǎn)中的應(yīng)用，也出現(xiàn)了防治效果差、種類多、價(jià)格高、使用繁瑣及（放線菌抗生素類的）抗性等問題。

因此，針對(duì)生物菌劑防治設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲方面，一是應(yīng)加大科研力度，系統(tǒng)研究微生物菌劑的使用濃度、時(shí)間、方法等，建立符合生產(chǎn)實(shí)際的應(yīng)用技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)及體系。二是應(yīng)用技術(shù)與理論研究結(jié)合，在生理、生化、分子技術(shù)方面揭示其作用機(jī)制，篩選高活性殺線蟲菌劑。如董海龍等[53]從疣孢漆斑菌等高等真菌中篩選毒殺線蟲的活性化合物，獲得了新型、安全的高效殺線蟲劑。三是應(yīng)開展多種不同機(jī)制組合防治及藥肥協(xié)同應(yīng)用技術(shù)研究。如聶海珍等[54]在棉隆熏蒸處理后再施用淡紫擬青霉菌劑，不僅能提高大棚番茄產(chǎn)量，而且對(duì)番茄根結(jié)線蟲病有很好的防治效果。王廣印等[55]研究發(fā)現(xiàn)，“棉隆+生物菌劑”配施處理土壤可使設(shè)施大棚內(nèi)番茄產(chǎn)量明顯高于對(duì)照和棉隆處理，且降低莖基腐病發(fā)病率80%左右，降低根結(jié)線蟲發(fā)病率15%以上，防治根結(jié)線蟲病效果在31%左右。張全力等[56]研究發(fā)現(xiàn)，生產(chǎn)添加補(bǔ)充番茄生長所必需的中微量元素的多功能生物菌肥，也能使番茄增產(chǎn)20%～30%。相信未來通過對(duì)生物菌劑的不斷研究創(chuàng)新，生物菌劑在設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲防治上會(huì)取得進(jìn)一步的突破性進(jìn)展及形成更加成熟的理論體系。

參考文獻(xiàn)

[1] 王暄，秦鑫，李紅梅，等.植物寄生線蟲效應(yīng)子研究進(jìn)展[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2019，42（6）：986-995.

[2] 李戌清，鄭經(jīng)武，鄭積榮，等.幾種藥劑對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲的田間防效試驗(yàn)[J].長江蔬菜，2012（12）：72-74.

[3] MYSLIWIEC P A，BROWN M L，KLABUNDE C N，et al.Are physicians doing too much colonoscopy？ A national survey of colorectal surveillance after polypectomy[J].Annals of Internal Medicine，2004，141（4）：264-271.

[4] 吳超群，楊澤茂，吳才君，等.設(shè)施蔬菜根結(jié)線蟲危害及其防控機(jī)制研究進(jìn)展[J].北方園藝，2018（11）：164-172.

[5] LEKEAH DURDEN，DONG WANG，DANIEL PANACCIONE，et al.Decreased root-knot nematode gall formation in roots of the morning glory Ipomoea tricolor symbiotic with ergot alkaloid-producing fungal Periglandula sp.[J].Journal of Chemical Ecology，2019，45（11）：879-887.

[6] HOLBEIN J，F(xiàn)RANKE R B，MARHAVY P，et al.Root endodermal barrier system contributes to defence againt plant parasitic cyst and root-knot nematodes[J].The Plant Journal，2019，100（2）：221-236.

[7] 路雪君，廖曉蘭，成飛雪，等.根結(jié)線蟲的生物防治研究進(jìn)展[J].中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào)，2010，012（004）：44-48.

[8] TERRA W C，CAMPOS V P，MARTINS S J，et al.Volatile organic molecules from Fusarium oxysporum strain 21 with nematicidal activity against Meloidogyne incognita[J].Crop Protection，2018，106（8）：125-131.

[9] 羅諾德·佩里，英里斯·莫恩斯.植物線蟲學(xué)[M].簡(jiǎn)恒，主譯.北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2011：63-64.

[10] VERA-OBANDO N，OGATA-GUTIERREZ K，ZUNIGA DAVILA D.Characterizationof plant growth-promoting bacteria and In vitro antagonistic activity on root-knot nematodes （Meloidogyne spp.）[M]//Microbial Probiotics for Agricultural Systems，2019：100-130.

[11] 賀新剛，張艷梅.溫室黃瓜根結(jié)線蟲病的發(fā)生規(guī)律及防治對(duì)策[J].上海蔬菜，2008（3）：68-69.

[12] 劉巧真，郭芳陽，吳照輝，等.烤煙連作土壤障礙因子及防治措施[J].中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2012，28（10）：87-90.

[13] 王金華.北方保護(hù)地黃瓜根結(jié)線蟲病研究與防治[J].農(nóng)業(yè)開發(fā)與裝備，2014（12）：119-120.

[14] HAIJI-HEDFI L，NAIMA M，HAMDI BOUGHALLEB，et al.Fungal diversity in rhizosphere of root-knot nematode infected tomatoes in Tunisia[J].Symbiosis，2019，79（1）：171-181.

[15] OKA Y，SAROYA Y.Effect of fluensulfone and fluopyram on the mobility and infection of second：tage juveniles of Meloidogyne incognita and M. javanica[J].Pest Management Science，2019，75（8）：2095-2106.

[16] HWANG S M，PARK M S，KIM J C，et al.Occurrence of Meloidogyne incognita infecting resistant cultivars and development of an efficient screening method for resistant tomato to the mi-virulent nematode[J].Korean Journal of Horticultural Science and Technology，2014，32（2）：217-226.

[17] AHMAD L，SIDDIQUI Z A，ALLAH E F.Effects of interaction of Meloidogyne incognita，Alternaria dauci and Rhizoctonia solani on the growth，chlorophyll，carotenoid and proline contents of carrot in three types of soil[J].Acta Agriculturae Scandinavica，Section B - Soil & Plant Science，2019，69（4）：324-331.

[18] LI D，ZHAI M，SHI Q，et al.Comparison of the chemotaxis and the infection ability of Me3 virulent and avirulent populations of Meloidogyne incognita to host root[J].acta phytopathologica sinica，2018，48（01）：128-136.

[19] 劉亞麗.根結(jié)線蟲侵染對(duì)小黑豆根結(jié)部位內(nèi)源激素的影響研究[D].沈陽：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016：1-68.

[20] FAMINA C C，USMAN A，NASSER K M M.Comparative study on the host susceptibility of different banana cultivars to plant parasitic nematodes in Malappuram district of Kerala， India[J].Archives of Phytopathology & Plant Protection，2019，52（5/6）：407-416.

[21] JAVED N，GOWEN S R，ELHASSAN S A，et a1.Efficacy of neem （Azadirachta indica）formulations on biology of rootknot nematodes （Meloidogyne javanica）on tomato[J].Crop Protection，2007，27（1）：36-43.

[22] SHARMA P，PANDEY R.Biological control of root-knot nematode;Meloidogyne incognita in the medicinal plant; Withania somnifera and the effect of biocontrol agents on plant growth[J].African Journal of Agricultural Research，2009，4（6）：564-567.

[23] AKHTER G，ZAFAR A，KHAN W，et al.In vitro nemato-toxic potential of some leaf extracts on juvenile mortality of Meloidogyne incognita race-3[J].Archives of Phytopathology & Plant Protection，2018，51（7/8）：399-407.

[24] 黃闊，江其鵬，姚曉遠(yuǎn)，等.微生物菌劑對(duì)煙草根結(jié)線蟲及根際微生物群落多樣性的影響[J].中國煙草科學(xué)，2019（5）：36-43.

[25] 肖順.根結(jié)線蟲寄生真菌資源與淡紫擬青霉PL89的研究[D].福州：福建農(nóng)林大學(xué)，2006：1-30.

[26] 楊凡，蔡毓新，賈文華，等.淡紫紫孢菌對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲的防治效果[J].中國瓜菜，2018，31（7）：35-38.

[27] 許艷麗，魯建聰，宋潔，等.混合寄生真菌發(fā)酵液對(duì)大豆胞囊線蟲的毒力和防效[J].土壤與作物，2018，7（2）：248-256.

[28] 劉勇鵬，趙群法，張濤，等.生物殺線蟲劑對(duì)日光溫室番茄根結(jié)線蟲病防效研究[J].河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，51（6）：815-821.

[29] 劉暢.厚垣輪枝菌V_（10）菌株對(duì)南方根結(jié)線蟲的寄生和防治作用[J].廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2004，35（2）：135-137.

[30] 宋益民，姜永平，邱海榮，等.蔬菜根結(jié)線蟲病發(fā)生與防治[J].蔬菜，2018（1）：153-55.

[31] 馬金慧，朱萍萍，茆振川，等.哈茨木霉菌株TRI2的鑒定及其對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲的防治作用[J].中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2014，30（22）：263-269.

[32] 翟明娟，李登輝，馬玉琴，等.綠色木霉菌株Tvir-6 對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲的防治效果研究[J].中國蔬菜，2017（10）：67-72.

[33] 段玉璽，靳瑩瑩，王勝君，等.生防菌株Snef85的鑒定及其發(fā)酵液對(duì)不同種類線蟲的毒力[J].植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2008，35（2）：132-136.

[34] 丁國春，付鵬，李紅梅，等.枯草芽孢桿菌AR11菌株對(duì)南方根結(jié)線蟲的生物防治[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005（2）：46-49.

[35] 錢振官，張大業(yè)，馬承鑄，等.寡孢節(jié)叢孢菌和褶生輪枝菌對(duì)根結(jié)線蟲的致病力[J].生物防治通報(bào)，1993，9（2）：91-92.

[36] 賴寶春，胡先奇.淡紫擬青霉對(duì)燈盞花根結(jié)線蟲的防效測(cè)定[J].青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2014，31（3）：205-208.

[37] 廖夢(mèng)婕，汪宏凱，蔣春號(hào)，等.M60家族肽酶參與調(diào)控蠟質(zhì)芽胞桿菌AR156防治南方根結(jié)線蟲病的作用機(jī)制[J].微生物學(xué)通報(bào)，2019（1）：84-92.

[38] 路鵬鵬，陳銳，孫曉宇，等.枝頂孢霉制劑防治根結(jié)線蟲過程中土壤酶活性和微生物數(shù)量的變化[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，45（6）：277-280.

[39] 劉志明，余玉冰，秦碧霞，等.根結(jié)線蟲幼蟲致病細(xì)菌的篩選[J].中國生物防治學(xué)報(bào)，2000，16（3）：142-142.

[40] 黃金玲，劉志明，陸秀紅，等.根際細(xì)菌9個(gè)菌株對(duì)南方根結(jié)線蟲的盆栽防效[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，29（6）：700-703.

[41] 許園園，余蕓，范雅靜，等.晶胞粘連蘇云金芽胞桿菌C15殺線蟲毒力因子發(fā)掘與功能鑒定[J].生物資源，2019（4）：314-323.

[42] 彭雙，楊茹，閆淑珍，等.殺線蟲植物內(nèi)生細(xì)菌和根際放線菌對(duì)根結(jié)線蟲的防效[J].植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2012，39（1）：63-69.

[43] 唐佳頻，邵宗澤，張智濤，等.南極土壤來源的惡臭假單胞菌1A00316抗南方根結(jié)線蟲的機(jī)制[J].應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào)， 2014， 20（6）：1046-1051.

[44] 王貽蓮，王珍偉，劉寶軍，等.越南伯克氏菌及其組合生防菌防治黃瓜根結(jié)線蟲田間試驗(yàn)[J].山東科學(xué)，2018，31（1）：39-42.

[45] DAVIES K G.Chapter 9 understanding the interaction between an obligate Hyperparasitic bacterium， Pasteuria penetrans and its obligate plant-parasitic nematode host，Meloidogyne spp.[J].Advances in Parasitology，2009，68（68）：211-245.

[46] 王志偉，翁忠賀，肖日新，等.海南省根結(jié)線蟲的危害及其對(duì)侵入巴斯德氏芽菌的親和性[J].熱帶作物學(xué)報(bào)，2007，28（4）：102-107.

[47] 代先強(qiáng)，陳昌權(quán)，肖鵬程，等.煙草根結(jié)線蟲的綜合防治[J].煙草科技，2002（11）：47-48.

[48] 羅紅麗，孫漫紅，謝建平，等.根結(jié)線蟲放線菌及其生物防治活性研究[J].微生物學(xué)報(bào)，2006（4）：598-601.

[49] RAO M S，REDDY P P，NAGESH M.Management of Meloidogyne incognita on tomato by integrating glomus mosseae with Pasteuria penetrans under field conditions[J].Indian Journal of Nematology，1999，29（2）：171-173.

[50] 王波，李紅梅，王碧，等.淡紫擬青霉與放線菌代謝物復(fù)配對(duì)南方根結(jié)線蟲的防治[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，32（1）：55-60.

[51] 王瑞嬌，鄭小蘭，劉勇鵬，等.蕓苔素內(nèi)酯的復(fù)合應(yīng)用對(duì)番茄根結(jié)線蟲抑制效果的研究[J].河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，51（1）：29-35.

[52] 王立偉，王明友.生物菌肥對(duì)番茄連作土壤質(zhì)量及根結(jié)線蟲病的影響[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，43（4）：51-55.

[53] 董海龍，王海香，張作剛，等.抑殺根結(jié)線蟲的疣孢漆斑菌代謝活性物質(zhì)的分離鑒定[J].植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2019，46（3）：721-722.

[54] 聶海珍，孫漫紅，李世東，等.棉隆與淡紫擬青霉聯(lián)合防治番茄根結(jié)線蟲病的效果評(píng)價(jià)[J].植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2016，43（4）：689-696.

[55] 王廣印，郭衛(wèi)麗，陳碧華，等.棉隆及與生物菌肥配施對(duì)大棚秋番茄生長、產(chǎn)量及病蟲草害的影響[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2019，35（2）：48-52.

[56] 張全力，王麗川，張秋蘭，等.多功能生物菌肥防治番茄根結(jié)線蟲病試驗(yàn)初報(bào)[J].基層農(nóng)技推廣，2018，6（1）：39-41.