杜月娥,徐路瓊

1.云南省大理州中心血站，云南大理 671000；2.云南省曲靖市第一人民醫(yī)院輸血科，云南曲靖 655000

MNS血型系統(tǒng)是由46種抗原組成的高度復(fù)雜的血型系統(tǒng)，其中最為重要的抗原是M、N、S、s 4種，它們對(duì)應(yīng)的抗體與輸血反應(yīng)有關(guān)[1]?？?S抗體以IgG型較多，一般由紅細(xì)胞免疫產(chǎn)生，IgM型的抗體少見(jiàn)，可導(dǎo)致新生兒溶血病和溶血性輸血反應(yīng)[2]。中國(guó)人S-s+頻率為 93.44%[3]，S抗原的陽(yáng)性率較低，所以抗-S的檢出率很低，筆者在工作中發(fā)現(xiàn)1例抗-S抗體合并自身抗體的罕見(jiàn)病例，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1病例資料 患者，女性, 78歲, 漢族，孕次不詳，產(chǎn)3次, 因左側(cè)輸尿管結(jié)石伴左腎積水，左側(cè)輸尿管狹窄，泌尿道感染，有冠心病、慢性心功能不全、高血壓到曲靖市第一人民醫(yī)院就診。門(mén)診擬“左輸尿管狹窄伴結(jié)石”收治入院，否認(rèn)輸血史。醫(yī)院術(shù)前常規(guī)手術(shù)備血發(fā)現(xiàn)抗體篩選陽(yáng)性，申請(qǐng)?zhí)嘏鋺腋〖t細(xì)胞2 U。

1.2儀器與試劑 抗-A、抗-B、Ac、Bc、Oc、抗-C、抗-c、抗-D(IgM)、抗-E、抗-e、篩選細(xì)胞、多抗、單抗-IgG、抗-C3d抗體均由上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供;進(jìn)口譜細(xì)胞(Sanquin公司)、單抗卡(強(qiáng)生公司)；日本久保田公司KA-2200型離心機(jī)、瑞士達(dá)亞美公司Incubator 37 ℃ SⅠ型孵育器、centrifuge12SⅡ型離心機(jī)、北京市醫(yī)療設(shè)備廠(chǎng)BHW2型電熱恒溫水浴箱。

1.3血清學(xué)方法 試管法進(jìn)行ABO、RhD、MNS血型鑒定。直接抗人球蛋白試驗(yàn)，患者紅細(xì)胞3洗后配成2%～5%紅細(xì)胞懸液分別加多抗(IgG+C3d)、抗-IgG、抗-C3d，試管法立即離心觀察結(jié)果。抗體篩選用試管法室溫鹽水介質(zhì)直接離心檢測(cè)IgM抗體，間接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)檢測(cè)IgG抗體。直抗陽(yáng)性做酸放散試驗(yàn)，壓積紅細(xì)胞(RBC)與酸釋放液A(1∶1)反應(yīng)離心取上清液，B液調(diào)節(jié)pH值至7。放散液與血清分別用進(jìn)口譜細(xì)胞進(jìn)行抗體鑒定。鹽水法、聚凝胺法和抗球蛋白卡法交叉配血。吸收放散試驗(yàn)，選大S陰性的壓積細(xì)胞300 μL與患者血漿(1∶3)比例混勻30 min，離心取上清液，用冰鹽水洗滌6次后做酸放散，收集放散液與SS細(xì)胞和ss細(xì)胞進(jìn)行抗人球蛋白試驗(yàn)，根據(jù)放散液與SS細(xì)胞和ss細(xì)胞的反應(yīng)格局判斷抗體類(lèi)型，見(jiàn)表1。所有試驗(yàn)按試劑說(shuō)明書(shū)和文獻(xiàn)[4]方法進(jìn)行。

表1 放散液與SS細(xì)胞和ss細(xì)胞反應(yīng)格局表

2 結(jié) 果

2.1患者血型鑒定和直接抗球蛋白試驗(yàn) 患者M(jìn)NS血型為MNss，ABO血型正定型為 B型, RhD陽(yáng)性,但反定型與自身細(xì)胞和試劑紅細(xì)胞都有凝集反應(yīng)，考慮患者存在自身抗體和不規(guī)則抗體。直接抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果：多抗(3+)、抗-IgG(2+)、抗-C3d(1+)，均為陽(yáng)性結(jié)果。

2.2抗體篩選 患者血清和抗體篩選細(xì)胞鹽水介質(zhì)有凝集，37 ℃ 3 min散開(kāi)。抗體篩選結(jié)果沒(méi)有任何格局，可能和自身細(xì)胞陽(yáng)性有關(guān)，需進(jìn)行抗體鑒定。

2.3抗體鑒定 采用微柱凝膠法，患者紅細(xì)胞制備的放散液和患者血清與Sanquin進(jìn)口譜細(xì)胞進(jìn)行抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)。根據(jù)譜細(xì)胞的格局表可初步判斷患者體內(nèi)存在抗-S抗體和自身抗體。但如果是抗-S抗體，抗體格局表2號(hào)、5號(hào)、10號(hào)細(xì)胞應(yīng)沒(méi)有凝集，本病例是否還存在其他不規(guī)則抗體或抗-S抗體(吸收放散試驗(yàn))是應(yīng)該考慮的問(wèn)題。

2.4抗-S抗體效價(jià)測(cè)定 對(duì)倍稀釋患者血清, 加入S抗原陽(yáng)性紅細(xì)胞測(cè)定效價(jià), 結(jié)果為4(IAT)。

2.5吸收放散 放散液與進(jìn)口譜細(xì)胞5號(hào)SS細(xì)胞,6號(hào)SS細(xì)胞, 10號(hào)ss細(xì)胞反應(yīng)陽(yáng)性，凝集強(qiáng)度一致，根據(jù)表1判斷結(jié)果，檢出抗-S抗體和自身抗體。

2.6交叉配血 選ABO、RH(D)同型，S陰性獻(xiàn)血者。主次側(cè)在鹽水、聚凝胺、抗球蛋白卡3種介質(zhì)中均有凝集?；颊咄瑫r(shí)存在自身抗體是導(dǎo)致配血不合的主要原因。術(shù)中緩慢輸注S陰性的懸浮紅細(xì)胞2 U，無(wú)明顯的輸血不良反應(yīng)，輸注效果明顯，患者術(shù)后恢復(fù)良好。

3 討 論

MNS血型系統(tǒng)是1927年被發(fā)現(xiàn)的，是人類(lèi)歷史上第2個(gè)被發(fā)現(xiàn)的血型系統(tǒng)[5]，IgM型抗-M抗體是MNS血型系統(tǒng)的常見(jiàn)天然抗體[6]，該抗體通常會(huì)導(dǎo)致ABO血型正反不符、鹽水介質(zhì)抗體篩查實(shí)驗(yàn)和交叉配血試驗(yàn)出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，大多沒(méi)有臨床意義?？筃和抗S抗體則不同，雖然也有自然發(fā)生的IgM型的抗體,但絕大多數(shù)是由多次輸注紅細(xì)胞或妊娠免疫產(chǎn)生的IgG型抗體[7]。輸血工作者應(yīng)詳細(xì)了解患者的輸血史和妊娠史，同時(shí)要用兩種或兩種以上的介質(zhì)進(jìn)行抗體篩查實(shí)驗(yàn)，如抗體篩查實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，則在相應(yīng)介質(zhì)下用譜細(xì)胞鑒定抗體的特異性，并選擇對(duì)應(yīng)抗原陰性的獻(xiàn)血員紅細(xì)胞輸注，以避免發(fā)生輸血不良反應(yīng)。

本文中的患者血清和酸放散液在與譜細(xì)胞反應(yīng)中出現(xiàn)抗-S抗體和自身抗體格局,通過(guò)吸收放散試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)了患者體內(nèi)存在抗-S抗體和自身抗體。該患者沒(méi)有輸血史 ,有多次妊娠史，可能在妊娠過(guò)程中多次受到了S抗原陽(yáng)性紅細(xì)胞刺激后產(chǎn)生了抗-S。這種既有同種抗體和自身抗體的樣本，在輸血前免疫血液學(xué)檢測(cè)過(guò)程中應(yīng)特別慎重。如果患者血清與反定型細(xì)胞、抗體篩選細(xì)胞的凝集強(qiáng)度與自身細(xì)胞的凝集強(qiáng)度有差異,就應(yīng)該考慮可能有自身抗體合并同種抗體,提示在血型鑒定和抗體篩選過(guò)程中,用于自身對(duì)照的紅細(xì)胞必須經(jīng)過(guò)洗滌。有自身抗體存在的樣本，必須加以重視，做抗體鑒定和交叉配血實(shí)驗(yàn)時(shí)必須通過(guò)吸收放散試驗(yàn)把自身抗體的干擾排除掉，避免漏檢不規(guī)則抗體，保證血清學(xué)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確和輸血安全性[8]。

含有不規(guī)則抗體的患者在輸血前進(jìn)行抗體篩查試驗(yàn)尤其重要，不規(guī)則抗體不僅會(huì)造成血型鑒定困難，而且在抗體篩選細(xì)胞和譜細(xì)胞試驗(yàn)中，不同抗體的凝集格局會(huì)造成相互干擾，使抗體鑒定困難。本案例存在自身抗體，不僅干擾了正反定型，還導(dǎo)致抗-S抗體在譜細(xì)胞反應(yīng)格局表中不明顯，只有通過(guò)進(jìn)一步的吸收放散試驗(yàn)、放散液分別與SS細(xì)胞和ss細(xì)胞反應(yīng)排除類(lèi)抗體。不規(guī)則抗體同時(shí)合并自身抗體時(shí)，自身抗體的存在往往會(huì)掩蓋同種抗體，血清學(xué)檢測(cè)中應(yīng)嚴(yán)格掌握操作流程，降低同種抗體的漏檢率，以保證臨床用血安全。