左紅巖，張澤勛，王 磊，于海洋

心力衰竭是臨床上常見的心血管疾病，屬于危重癥之一。心力衰竭是由慢性原發(fā)性心肌疾病和長(zhǎng)期心室壓力及心室容量負(fù)荷過重，導(dǎo)致心肌收縮力減弱而不能維持心排血量，是各種心血管疾病的終末階段[1]。其發(fā)病機(jī)制尚不明確，但其隨年齡的增長(zhǎng)，發(fā)病率逐漸升高，已成為21世紀(jì)全球流行性疾病，對(duì)人類的身體健康和生命安全帶來了巨大的威脅[2]。目前，臨床上通過彩色普勒超聲收集心肌收縮、舒張等相關(guān)資料進(jìn)行判斷，這無疑增加誤診率和漏診率，使病人錯(cuò)過最佳的治療時(shí)間。因此，可通過檢測(cè)生化指標(biāo)，進(jìn)一步對(duì)病人病癥嚴(yán)重程度進(jìn)行評(píng)估、分析。血漿腦鈉肽(BNP)主要來源于心室，是一種多肽類激素，是由心室細(xì)胞受到牽拉后釋放，具有較強(qiáng)的利鈉、利尿以及抗心肌纖維的作用[3]。熱休克蛋白70(HSP70)也稱為應(yīng)激蛋白，是一組具有分子結(jié)構(gòu)、生化性質(zhì)、免疫結(jié)構(gòu)高度保守的蛋白[4]。過氧化物酶(MPO)是由內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，能夠通過促進(jìn)氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)進(jìn)而加重心室重構(gòu)[5]。本研究旨在探討血漿BNP、HSP70、MPO檢測(cè)對(duì)老年心力衰竭的診斷價(jià)值，為心力衰竭臨床診斷提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017年1月—2019年4月在任丘市中醫(yī)院治療的老年心力衰竭病人250例，根據(jù)病人入院時(shí)紐約心臟病協(xié)會(huì)(NYHA)心功能分級(jí)分為Ⅰ級(jí)+Ⅱ級(jí)組、Ⅲ級(jí)組、Ⅳ級(jí)組。Ⅰ級(jí)+Ⅱ級(jí)組80例，男43例，女37例；年齡62～78(65.6±3.2)歲；其中有心力衰竭家族史46例，冠心病22例，心肌病10例。Ⅲ級(jí)組80例，男40例，女40例；年齡60～77(65.8±3.1)歲；其中有心力衰竭家族史48例，冠心病21例，心肌病11例。Ⅳ級(jí)組90例，男45例，女45例；年齡61～77(64.3±2.8)歲；其中有心力衰竭家族史57例，冠心病25例，心肌病10例。選取同時(shí)期在我院體檢健康的志愿者100名作為對(duì)照組，男50名，女50名；年齡61～72(66.2±2.7)歲；其中有心力衰竭家族史56例。4組研究對(duì)象性別、年齡等基本資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) 伴有充血性心力衰竭癥狀，并排除心臟瓣膜病、縮窄性心包炎和其他非心臟疾??；左心室收縮功能異常和左心室舒張功能異常等；病人及其家屬簽署知情同意書。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) 慢性阻塞性肺氣腫；肺心??；肺動(dòng)脈高壓者；嚴(yán)重肝腎功能不全；腫瘤；慢性疾病終末期。

1.4 方法

1.4.1 臨床資料收集 統(tǒng)計(jì)4組研究對(duì)象的性別、年齡、吸煙、家族史、冠心病、心肌病等臨床資料。

1.4.2 BNP、HSP70、MPO水平檢測(cè) 采集研究對(duì)象清晨靜脈血，置入一次性的抗凝管中保存，3 000 r/min轉(zhuǎn)速離心機(jī)離心10 min后，分離上清，在-80 ℃冰箱中保存。采用免疫化學(xué)發(fā)光法對(duì)BNP水平進(jìn)行檢測(cè)，采用酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)HSP70、MPO水平進(jìn)行檢測(cè)，具體方法：取50 mmol/L碳酸鹽包緩沖液對(duì)HSP70、MPO進(jìn)行稀釋，且加入聚苯乙烯的反應(yīng)孔中，加蓋處理后，在4 ℃下放置24 h，次日洗滌3次后，拋干，在每孔中均加入稀釋液(pH值為7.4，0.02 mol/L Tris-HCl緩沖液)稀釋待測(cè)標(biāo)本0.1 mL，加入陽(yáng)性、陰性對(duì)照標(biāo)本，在42 ℃下放置60 min，將液體移除并洗滌3次后，拋干，在每孔中加入HSP70、MPO抗體0.1 mL，再次置留60 min，將液體移除并洗滌3次，拋干，并在每孔中加入底物液(0.1 mol/L的Na2HPO4，0.05 mol/L的枸櫞酸)混勻，且加入0.1 mL鄰苯二胺，遮光20 min，再次加入2 mol/L的H2SO40.05 mL放置各孔內(nèi)，終止反應(yīng)。使用酶標(biāo)儀檢測(cè)A450，分析HSP70、MPO水平。

1.4.3 診斷效能 靈敏度=真陽(yáng)性例數(shù)/(真陽(yáng)性例數(shù)+假陰性例數(shù))×100%；特異度=真陰性例數(shù)/(真陰性例數(shù)+假陽(yáng)性例數(shù))×100%；準(zhǔn)確率=(真陽(yáng)性例數(shù)+真陰性例數(shù))/總例數(shù)×100%。

2 結(jié) 果

2.1 4組不同時(shí)間點(diǎn)BNP表達(dá)水平比較 對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)BNP表達(dá)水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；Ⅰ級(jí)+Ⅱ級(jí)組、Ⅲ級(jí)組、Ⅳ級(jí)組第1天、第2天、第3天、第5天BNP表達(dá)水平逐漸升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Ⅰ級(jí)+Ⅱ級(jí)組、Ⅲ級(jí)組、Ⅳ級(jí)組各時(shí)間點(diǎn)BNP表達(dá)水平均高于對(duì)照組(P<0.05)；Ⅲ級(jí)組、Ⅳ級(jí)組各時(shí)間點(diǎn)BNP表達(dá)水平均高于Ⅰ級(jí)+Ⅱ級(jí)組(P<0.05)；Ⅳ級(jí)組各時(shí)間點(diǎn)BNP表達(dá)水平均高于Ⅲ級(jí)組(P<0.05)。詳見表1。

表1 4組不同時(shí)間點(diǎn)BNP表達(dá)水平比較(±s) 單位：pg/mL

2.2 4組不同時(shí)間點(diǎn)HSP70水平比較 對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)HSP70表達(dá)水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；Ⅰ級(jí)+Ⅱ級(jí)組、Ⅲ級(jí)組、Ⅳ級(jí)組第1天、第2天、第3天、第5天HSP70表達(dá)水平逐漸升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Ⅰ級(jí)+Ⅱ級(jí)組、Ⅲ級(jí)組、Ⅳ級(jí)組各時(shí)間點(diǎn)HSP70表達(dá)水平均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；Ⅲ級(jí)組、Ⅳ級(jí)組各時(shí)間點(diǎn)HSP70表達(dá)水平均高于Ⅰ級(jí)+Ⅱ級(jí)組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；Ⅳ級(jí)組各時(shí)間點(diǎn)HSP70表達(dá)水平均高于Ⅲ級(jí)組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 4組不同時(shí)間點(diǎn)HSP70水平比較(±s) 單位：ng/L

2.3 4組不同時(shí)間點(diǎn)MPO水平比較 對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)MPO表達(dá)水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；Ⅰ級(jí)+Ⅱ級(jí)組、Ⅲ級(jí)組、Ⅳ級(jí)組第1天、第2天、第3天、第5天MPO表達(dá)水平逐漸升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Ⅰ級(jí)+Ⅱ級(jí)組、Ⅲ級(jí)組、Ⅳ級(jí)組各時(shí)間點(diǎn)MPO表達(dá)水平均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；Ⅲ級(jí)組、Ⅳ級(jí)組各時(shí)間點(diǎn)MPO表達(dá)水平均高于Ⅰ級(jí)+Ⅱ級(jí)組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；Ⅳ級(jí)組各時(shí)間點(diǎn)MPO表達(dá)水平均高于Ⅲ級(jí)組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表3。

表3 4組不同時(shí)間點(diǎn)MPO水平比較(±s) 單位：μg/L

2.4 BNP、HSP70、MPO檢測(cè)對(duì)老年心力衰竭的診斷價(jià)值 BNP、HSP70、MPO聯(lián)合檢測(cè)敏感度、特異度、準(zhǔn)確率分別為95.5%、86.0%、93.6%，均高于BNP、HSP70、MPO單項(xiàng)檢測(cè)。詳見表4。

表4 BNP、HSP70、MPO檢測(cè)對(duì)老年心力衰竭的診斷價(jià)值 單位：%

3 討 論

慢性心力衰竭是一種發(fā)病機(jī)制復(fù)雜的疾病，主要是以心功能不全、外周血流異常為臨床表現(xiàn)的綜合征，具有并發(fā)癥多、病死率高、難以治愈等特點(diǎn)[6]。韋洪弟等[7]研究認(rèn)為，對(duì)于老年性慢性心力衰竭病人應(yīng)及時(shí)對(duì)危險(xiǎn)因素進(jìn)行分析并采取相應(yīng)的預(yù)防措施，以期有效降低老年性慢性心力衰竭發(fā)病率。慢性心力衰竭的形成主要是由各種功能性疾病導(dǎo)致心室結(jié)構(gòu)改變，致使射血能力受到損害，進(jìn)而使心臟排血量下降[8]。當(dāng)各個(gè)器官血供缺乏時(shí)，機(jī)體功能急劇下降，主要表現(xiàn)為疲倦乏力、呼吸困難、體力活動(dòng)受限等。有研究表明，老年心力衰竭病人的原發(fā)病常多種并存，呼吸道感染可加重心力衰竭程度[9]。楊鵬會(huì)等[10]研究指出，老年性慢性心力衰竭的預(yù)防工作應(yīng)該重視家庭管控內(nèi)容(服藥、飲食、運(yùn)動(dòng)、宣教以及攝水量等)，從而減少慢性心力衰竭發(fā)作次數(shù)。

BNP主要用于心力衰竭的診斷，是預(yù)后評(píng)價(jià)的重要標(biāo)志物，不僅是急慢性心力衰竭診斷的重要指標(biāo)，而且在心力衰竭病人的預(yù)防篩查、預(yù)后評(píng)估、危險(xiǎn)分層中也發(fā)揮著重要作用[11]。劉琦等[12]研究表明，血漿pro-BNP和C反應(yīng)蛋白(CRP)水平明顯升高的老年急性腦梗死急性期病人認(rèn)知功能更差，預(yù)后不佳。BNP對(duì)有效篩查、早期發(fā)現(xiàn)心力衰竭高風(fēng)險(xiǎn)人群具有重要作用[13]。本研究結(jié)果顯示，BNP水平隨著心功能分級(jí)的增加而升高，且第1天、第2天、第3天、第5天BNP表達(dá)水平逐漸升高。

HSP70是一種非核糖體結(jié)合性分子伴侶，它的表達(dá)在應(yīng)激狀態(tài)下處于上調(diào)狀態(tài)，當(dāng)機(jī)體處于高溫狀態(tài)下時(shí)，能夠通過激活HSP70起到保護(hù)作用。劉佼磊等[14]研究指出，血清HSP70、BNP水平與慢性充血性心力衰竭心功能密切相關(guān)，隨心力衰竭嚴(yán)重程度的增加而升高，且HSP70、BNP之間具有相關(guān)性，對(duì)心力衰竭的臨床診斷與病情評(píng)估具有重要價(jià)值。HSP70普遍存在于細(xì)胞質(zhì)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、細(xì)胞核等部位，對(duì)多種細(xì)胞均具有保護(hù)作用[15-16]。本研究結(jié)果顯示，Ⅰ級(jí)+Ⅱ級(jí)組、Ⅲ級(jí)組、Ⅳ級(jí)組HSP70水平高于對(duì)照組，且隨著時(shí)間和心功能分級(jí)的增加而升高。

MPO是一種由單位膜包裹的囊泡，主要存在于肝細(xì)胞和腎細(xì)胞中。MPO能夠催化過氧化氫，促進(jìn)內(nèi)皮功能的損傷，加速過氧化反應(yīng)，參與心血管疾病的進(jìn)展[17]。劉麗紅等[18]研究表明，MPO檢測(cè)可以有效評(píng)估慢性心力衰竭的嚴(yán)重程度，尤其在輕度慢性心力衰竭的診斷中具有重要意義，為慢性心力衰竭的早期診斷和治療提供依據(jù)。有研究表明，血清MPO濃度在老年心力衰竭病人中升高，可能參與心力衰竭的發(fā)生、發(fā)展過程，MPO的檢測(cè)有助于慢性心力衰竭病情的判斷[19]。本研究結(jié)果顯示，Ⅰ級(jí)+Ⅱ級(jí)組、Ⅲ級(jí)組、Ⅳ級(jí)組MPO水平高于對(duì)照組，且隨時(shí)間和心功能等級(jí)增加而升高，與胡堅(jiān)等[20]的研究結(jié)果一致。生物標(biāo)志物診斷疾病具有標(biāo)本易獲取、檢測(cè)快捷、對(duì)病人產(chǎn)生的創(chuàng)傷小等優(yōu)點(diǎn)，但單一指標(biāo)的檢測(cè)診斷老年心力衰竭的靈敏度和特異度均較低，準(zhǔn)確率不能滿足臨床需求。本研究結(jié)果顯示，BNP、HSP70、MPO聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度、準(zhǔn)確率均高于單項(xiàng)檢測(cè)，說明BNP、HSP70、MPO聯(lián)合檢測(cè)能提高對(duì)老年心力衰竭的診斷效能。

綜上所述，老年心力衰竭中BNP、HSP70、MPO水平升高，BNP、HSP70、MPO聯(lián)合檢驗(yàn)診斷價(jià)值較高，對(duì)臨床上老年心力衰竭的診治具有重要意義。