黃 貴，王 磊，張曉膺

(蘇州大學(xué)附屬第三醫(yī)院 a. 乳腺外科，b. 心胸外科，中國 常州 213003)

量子點具有光電性質(zhì)穩(wěn)定性良好、熒光量子產(chǎn)率較高、抗干擾性較強、比表面積大且易于修飾等優(yōu)點，因而被廣泛用于疾病診斷、藥物載體運輸以及生物成像等生物醫(yī)藥學(xué)研究和光電器件的制備中[1，2]，但量子點的應(yīng)用一直受到其潛在毒性的限制。科學(xué)實驗及工業(yè)生產(chǎn)中排放的量子點不可避免地進入環(huán)境，也給生態(tài)環(huán)境及人體健康造成嚴重的威脅[3]。

考慮到量子點優(yōu)良的光學(xué)性能，其已成為生命科學(xué)研究及藥物開發(fā)中不可或缺的工具。研究者開始針對量子點的生物毒性進行減毒處理，包括采用殼層結(jié)構(gòu)(ZnS或CdS)或更換非金屬核(碳量子點或ZnS)[4，5]。這些處理被認為可以降低量子點中的重金屬釋放，但量子點自身納米效應(yīng)引發(fā)的毒性依然存在，并被認為是量子點毒性的主要來源[6]。因此，篩選降低納米粒子毒性的配伍試劑成為一種新的嘗試辦法。

盡管量子點的毒性機理各異，但其毒性中伴隨的氧化應(yīng)激壓力升高現(xiàn)象獲得了較多研究者的認可[7,8]。有鑒于此，篩選抗氧化試劑與量子點進行配伍或進行量子點修飾成為可能。我國是中藥的發(fā)源地，有大量的中草藥被發(fā)現(xiàn)并用于疾病治療中。這些中藥因來源于自然，具有良好的生物親和力，因此常被用于配伍藥方的研制中，用于增強效果與降低毒性[9]。這一類的藥物包括甘草、乳薊以及熊膽粉等，考慮到中藥成分的復(fù)雜性，研究者進一步提純了其中的主要成分，包括甘草酸、熊去氧膽酸以及水飛薊賓等，研究其與其他藥物或毒素的聯(lián)合作用[10-12]。結(jié)果表明，這些成分具有優(yōu)良的抗氧化能力，并可實現(xiàn)對多種肝臟及腎臟毒素的解毒作用。然而這些成分是否同樣能應(yīng)用于量子點解毒中仍未可知，同時其中涉及的相關(guān)機制仍需進一步探討。

此外，不論是筆者還是其他研究團隊均發(fā)現(xiàn)，ATP結(jié)合(ABC)轉(zhuǎn)運蛋白參與了量子點的外排過程，因此可能對其標記及載體效果帶來較大影響[13,14]。同時腫瘤細胞易于通過高表達ABC轉(zhuǎn)運蛋白獲得耐藥性，從而降低基于量子點的腫瘤標記或納米載藥效應(yīng)[15]。隨著對中藥成分研究的深入，其介導(dǎo)的ABC轉(zhuǎn)運蛋白抑制效應(yīng)逐漸被發(fā)現(xiàn)，例如，紫草素被發(fā)現(xiàn)可顯著抑制人卵巢癌細胞中的多藥耐藥蛋白(MDR1)，從而增加了紫杉醇的細胞毒性[16]。類似的結(jié)果也被發(fā)現(xiàn)于水飛薊賓[17]及熊去氧膽酸[18]中，從而提示我們可通過篩選合適的配伍中藥成分，同時獲得增強腫瘤治療效果及保護正常組織的功效。

作為一種常見的腫瘤，乳腺癌細胞具有較強的氧化還原體系和抗氧化能力，且易于在藥物處理過程中獲得多藥耐藥作用，因此常被用于包括量子點在內(nèi)的多種納米粒子、藥物及化學(xué)試劑的毒性機制研究中[19-22]。因此，本文中以乳腺癌細胞系(SK-BR-3)為模型，首先研究量子點氧化應(yīng)激毒性的來源，其次檢測中草藥成分對巰基丙酸修飾碲化鎘(MPA-CdTe)量子點毒性的降低作用，并通過氧化應(yīng)激壓力水平、抗氧化酶及ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因水平變化，解析其中可能的原理。其中，MPA-CdTe量子點為有較多文獻報道的典型易致毒性量子點[23]。

1 材料與方法

1.1 材料

人乳腺癌(SK-BR-3)細胞購自上海中科院細胞庫；DMEM培養(yǎng)基來自Thermo fisher公司；從Sigma-Aldrich公司購買如下產(chǎn)品：巰基丙酸(MPA)，NaBH4，Te粉，CdCl2，噻唑藍(MTT)、5，5′-二硫代(雙硝基苯甲酸)(DTNB)，甘草酸，甘草酸二銨，水飛薊賓及熊去氧膽酸；胰酶、乙二胺四乙酸(EDTA)、磷酸緩沖液(PBS)、RNA提取及逆轉(zhuǎn)錄試劑盒購自生工生物工程(上海)股份有限公司；超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)檢測試劑盒來自碧云天生物技術(shù)研究所；其余試劑為國產(chǎn)，分析純。

1.2 方法

1.2.1 量子點合成及表征 采用水熱法合成MPA-CdTe量子點[24]，即以Te粉、CdCl2及NaBH4為原料，以MPA為穩(wěn)定劑，在氮氣保護下，加熱至200 ℃，回流法制備量子點。所獲得量子點經(jīng)異丙醇沉淀收集后，烘干稱取質(zhì)量，并加入超純水配制為200 g·L-1的溶液。取溶液在紫外可見分光光度計(Cary 300，Agilent Technologies Inc.，美國)中檢測吸收光譜；在熒光光譜儀(Edinburgh FLS920，Edinburgh Instruments Ltd.，英國)中，以340 nm為激發(fā)波長，檢測熒光發(fā)射光譜。將量子點溶液滴于碳膜支撐的銅網(wǎng)上(商品)，紅外燈下烘干，利用透射電鏡(HT7700，Hitachi High-Tech，日本)進行檢測，獲得量子點的大小以及粒徑分布信息。量子點溶液靜置48 h后，15 294×g離心，取上清用PinAAcle 900T原子吸收光譜儀(PerkinElmer，美國)進行檢測，并發(fā)現(xiàn)其中游離Cd2+濃度為量子點濃度的1%。

1.2.2 細胞培養(yǎng) SK-BR-3細胞培養(yǎng)于含10%胎牛血清及雙抗(青霉素及鏈霉素均為10 g·L-1)的DMEM培養(yǎng)基中，細胞生長于37 ℃，含5%CO2的培養(yǎng)箱中，每隔24 h更換培養(yǎng)基，當細胞長至80%融合后，用EDTA-胰酶緩沖液(含2.5 g·L-1胰酶及1 g·L-1EDTA的PBS溶液)進行消化傳代。

1.2.3 細胞處理 SK-BR-3細胞長至80%融合后，分別進行量子點或量子點-中藥成分配伍處理。對于量子點單處理組，細胞經(jīng)PBS洗滌后，加入含MPA-CdTe量子點25，50，100，200，400 nmol·L-1的DMEM培養(yǎng)基處理。為準確反映量子點自身的毒性，同時進行對比實驗，分別向細胞中加入含CdCl2濃度為0.25，0.5，1，2，4 nmol·L-1的DMEM培養(yǎng)液。對于配伍處理組，細胞經(jīng)PBS洗滌后，置于含100 nmol·L-1的MPA-CdTe量子點及甘草酸(5，10，20 μmol·L-1)、熊去氧膽酸(25，50，100 μmol·L-1)或水飛薊賓(100，200，400 μmol·L-1)的DMEM培養(yǎng)基中。上述處理48 h后，收集細胞進行后續(xù)指標檢測。本文中甘草酸、熊去氧膽酸直接溶解于培養(yǎng)基中，水飛薊賓則首先溶解于二甲基亞砜，并在臨用前用培養(yǎng)基進行稀釋。二甲基亞砜終濃度不超過0.1%，中藥成分濃度參考文獻值[10-12]，并經(jīng)預(yù)實驗證明為不具有毒性的最大濃度。CdCl2濃度選擇為量子點濃度的1/100，因其為量子點溶液靜置48 h后釋放的游離Cd2+濃度。

1.2.4 細胞MTT實驗 對照組及處理組的細胞經(jīng)PBS洗滌后，加入600 μL MTT溶液(1 g·L-1，配制于PBS中)，37 ℃含5%CO2的培養(yǎng)箱中孵育3 h，之后以1 mL含0.1%鹽酸的異丙醇萃取，所得溶液測570 nm下的吸光度。

1.2.5 GSH檢測 培養(yǎng)中的細胞經(jīng)處理后，采用PBS洗滌并加入500 μL TritonX-100溶液(1%溶解于PBS中)，30 min后收集裂解液，12 000 r·min-1離心去沉淀，取10 μL上清液并加入200 μL含1 g·L-1DTNB的PBS緩沖液，30 min后檢測412 nm處的吸光度，GSH含量根據(jù)標準品進行計算，并表征為對照組的百分比。

1.2.6 SOD檢測 細胞經(jīng)處理后，采用PBS洗滌并經(jīng)500 μL TritonX-100溶液裂解后，取10 μL裂解液用氮藍四唑法試劑盒進行檢測，另取10 μL裂解液用BCA總蛋白檢測試劑盒測定總蛋白含量。SOD酶活依據(jù)氮藍四唑生成藍甲臜(560 nm)的抑制率來計算，經(jīng)總蛋白校準后，表征為對照組的百分比。

1.2.7 MDA檢測 細胞經(jīng)處理后，采用PBS洗滌并經(jīng)500 μL TritonX-100溶液裂解后，取100 μL裂解液，采用脂質(zhì)氧化試劑盒進行檢測。MDA水平表征為MDA-硫代巴比妥酸復(fù)合物(535 nm)的形成速度。經(jīng)總蛋白校準后，表征為對照組的百分比。

1.2.8 RT-PCR檢測 細胞總RNA用Thermofisher 公司提供的離心柱型RNA 提取試劑盒制備，RNA濃度采用紫外吸光光度法(260 nm)測定[25]。第一鏈cDNA的合成及進一步的PCR擴增試劑盒均來自上海生工，過程均按相應(yīng)試劑盒說明書進行。PCR反應(yīng)中所用的引物，包括β-肌動蛋白(ACTIN)、谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)、多藥耐藥蛋白(MDR1)及多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP1)，采用Primer 5.0軟件進行設(shè)計[26]并總結(jié)于表1，擴增儀器為7900HT Fast 熒光定量PCR儀，條件為95 ℃10 min，40個循環(huán)(94 ℃10 s，60 ℃10 s，72 ℃10 s)，之后72 ℃3 min進行延伸，RNA表達水平檢測方法為2-ΔΔCT，參考基因為β-ACTIN。

表1 實驗中采用的基因引物

1.2.9 Zeta電位及水合直徑檢測 量子點母液用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基稀釋至400 nmol·L-1，分別向其中加入20 μmol·L-1甘草酸、100 μmol·L-1熊去氧膽酸或400 μmol·L-1水飛薊賓混合，48 h后，采用馬爾文粒度儀(Zetasizer Nano ZS 90，Malvern Panlytical，英國)進行混合液中量子點的Zeta電位與水合直徑檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

實驗中所涉及結(jié)果均為3批次不同樣品結(jié)果的平均值。數(shù)據(jù)處理應(yīng)用SPSS 16.0進行。組間數(shù)據(jù)差異基于方差分析進行，兩組數(shù)據(jù)之間的對比則應(yīng)用LSD法。P<0.05代表差異具有顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 量子點理化性質(zhì)表征

經(jīng)TEM檢測，所得量子點為單分散納米粒子，平均粒徑為(5.35±0.94) nm(圖1A)。為進一步表征合成的量子點，筆者對其吸收及熒光發(fā)射光譜(380～700 nm)進行檢測，所得結(jié)果顯示量子點在所測范圍內(nèi)具有較長的吸收光譜及良好的熒光發(fā)射光譜。最大發(fā)射波長可確定在560 nm(圖1B)，為綠色熒光。該量子點可用于后續(xù)毒性研究中。

(A)量子點透射電鏡圖，表征量子點直徑；(B)量子點溶液紫外/可見吸收(虛線)及熒光發(fā)射光譜(實線)，激發(fā)波長為340 nm。

2.2 量子點引起的毒性及氧化應(yīng)激壓力檢測

經(jīng)量子點處理后，SK-BR-3細胞表現(xiàn)出明顯的細胞毒性(圖2)，且半數(shù)致死量可確定在100 nmol·L-1附近。進一步對其引起的氧化應(yīng)激壓力檢測可知，細胞中的GSH水平及SOD酶活均隨量子點濃度的升高而降低，而MDA水平則隨量子點的處理而逐漸上升。例如，經(jīng)25 nmol·L-1量子點處理后，細胞GSH水平、SOD酶活及MDA分別為對照組的(86.32±3.33)%，(86.79±7.85)%及(111.20±14.06)%，即變化不大。但當量子點濃度增長為100 nmol·L-1后，上述參數(shù)變?yōu)?43.31±7.70)%，(59.18±12.00)%及(179.39±42.18)%。可見量子點的細胞毒性伴隨著氧化應(yīng)激壓力的產(chǎn)生。更重要的是，同等游離濃度的Cd2+尚未產(chǎn)生顯著的毒性，不論是細胞活率，或者GSH，SOD及MDA水平均未發(fā)生顯著變化，因此本實驗中所用的MPA-CdTe量子點毒性主要來自于自身。

圖2 量子點(A)及CdCl2(B)處理SK-BR-3細胞48 h后引發(fā)的毒性及氧化應(yīng)激損傷

2.3 中藥成分對量子點毒性影響

通過與量子點共處理細胞，3種中藥成分表現(xiàn)出不同的效果(圖3)。其中甘草酸與水飛薊賓表現(xiàn)出濃度依賴性的減毒作用，而熊去氧膽酸則無明顯效果。其中，量子點采用半數(shù)致死量附近的100 nmol·L-1作為對照，其造成的細胞活率為(49.69±1.93)%。經(jīng)10 μmol·L-1甘草酸共處理后，細胞活率升高為(74.20±3.81)%(P<0.01)，而20 μmol·L-1甘草酸共處理進一步將細胞活率提升至(85.47±1.31)%(P<0.001)。水飛薊賓共處理組明顯的細胞活率提升出現(xiàn)于最大濃度，即400 μmol·L-1處，細胞活率為(66.89±5.22)%(P<0.01)。熊去氧膽酸共處理組細胞活率并未有明顯的改變。

甘草酸(GA，5，10，20 μmol·L-1)、熊去氧膽酸(UDA，25，50，100 μmol·L-1)及水飛薊賓(SLB，100，200，400 μmol·L-1)與100 nmol·L-1量子點共處理SK-BR-3細胞48 h后的細胞活率。**P<0.01，***P<0.001，對比于量子點單處理組。圖3 中藥成分與量子點共處理后細胞活率的升高情況 Fig. 3 Increase of cell viability after co-treatment of traditional Chinese medicine ingredients with quantum dots

2.4 中草藥成分對量子點氧化應(yīng)激壓力的減小作用

為檢測中草藥成分對量子點的減毒作用來源，筆者針對兩者共處理后細胞的氧化應(yīng)激壓力水平進行了檢測(圖4)。結(jié)果表明，甘草酸和水飛薊賓能夠濃度依賴性地降低細胞中的氧化應(yīng)激壓力，但熊去氧膽酸效果則較弱。例如，經(jīng)100 nmol·L-1量子點處理48 h后，SK-BR-3細胞中的GSH水平為對照組的(43.31±7.70)%，但20 μmol·L-1甘草酸共處理可使細胞GSH水平至對照組相當?shù)乃?P<0.001)。對應(yīng)的，400 μmol·L-1水飛薊賓共處理后細胞GSH水平為對照組的(73.14±11.85)%(P<0.01)。熊去氧膽酸100 μmol·L-1共處理后細胞GSH水平依然保持在(56.89±9.29)%，雖然較量子點單處理組有一定上升，但無顯著性差異(P>0.05)。

甘草酸(GA，5，10，20 μmol·L-1)、熊去氧膽酸(UDA，25，50，100 μmol·L-1)及水飛薊賓(SLB，100，200，400 μmol·L-1)與100 nmol·L-1量子點共處理SK-BR-3細胞48 h后的GSH水平(A)、SOD活性(B)及MDA水平(C)。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001對比于量子點單處理組。

2.5 抗氧化酶的基因表達變化

為進一步闡釋甘草酸及水飛薊賓這兩種中草藥成分緩解量子點毒性的內(nèi)在機理，筆者進一步對量子點單處理組及量子點和中草藥成分共處理組的兩種關(guān)鍵抗氧化酶GST及SOD的基因表達水平進行檢測(圖5)。結(jié)果表明，100 nmol·L-1的量子點處理可顯著降低乳腺癌細胞中的GST及SOD基因表達水平，分別至對照組的0.40±0.25及0.78±0.23倍(P<0.05)。這些酶的基因表達水平可在GA及SLB處理后恢復(fù)，并最高可被誘導(dǎo)至對照組的6.34±0.37倍及6.84±0.58倍(20 μmol·L-1GA處理組，P<0.001)。

甘草酸(GA，10，20 μmol·L-1)及水飛薊賓(SLB，200，400 μmol·L-1)與100 nmol·L-1量子點共處理SK-BR-3細胞48 h后的GST與SOD酶的基因表達水平。*P<0.05，***P<0.001對比于未處理對照組；#P<0.05，###P<0.001對比于量子點單處理組。

2.6 ABC轉(zhuǎn)運蛋白的基因表達變化

本文還探索了中草藥成分與量子點對ABC轉(zhuǎn)運蛋白表達的影響。如圖6所示，100 nmol·L-1量子點可顯著誘導(dǎo)MDR1與MRP1的基因表達，使其表達量分別為對照組的6.03±1.48倍及5.46±1.69倍(P<0.001)即為可促進多藥耐藥現(xiàn)象的產(chǎn)生。但這種促進作用被甘草酸及水飛薊賓降低，最低可分別至對照組的3.03±1.18倍及3.75±1.02倍(P<0.001)。

2.7 中草藥成分與量子點的直接相互作用研究

為避免中草藥成分與量子點之間的直接作用對其毒性產(chǎn)生影響，筆者對兩者混合48 h后的量子點Zeta電位與水合直徑進行檢測。結(jié)果表明，中草藥成分的存在并未影響量子點的表面電荷與水合直徑(表2，P>0.05)，即中草藥成分與量子點并未發(fā)生明顯的相互作用。

Fig. 5 Gene expressions of anti-oxidative enzymes of cells treated with Chinese herbal ingredients and quantum dots甘草酸(GA，10，20 μmol·L-1)及水飛薊賓(SLB，200，400 μmol·L-1)與100 nmol·L-1量子點共處理SK-BR-3細胞48 h后的MDR1與MRP的基因表達水平。***P<0.001對比于未處理組； ##P<0.01，###P<0.001對比于未處理對照組。

表2 中草藥成分與量子點相互作用后的Zeta-電位和水合直徑

3 討論

盡管具有良好的光學(xué)特性，基于量子點開發(fā)的載體藥物及熒光探針依然無法進入臨床及動物實驗，這主要是因為其潛在的生物毒性[27]。在傳統(tǒng)研究中，量子點釋放的游離Cd2+被認為是量子點毒性的主要來源[28,29]。為此，研究者構(gòu)建了CdS或ZnS殼層結(jié)構(gòu)來減少Cd2+釋放，或通過更換核心結(jié)構(gòu)，如開發(fā)AgS及ZnS乃至碳量子點[30,31]。遺憾的是，這些努力并不能完全消除量子點本身的毒性，如碳量子點被發(fā)現(xiàn)仍會抑制小球藻的生長[32]。這是因為量子點毒性來源可能來自于自身的納米效應(yīng)[33]。然而，不論游離Cd2+還是量子點自身的納米效應(yīng)，均被發(fā)現(xiàn)通過誘導(dǎo)過氧化壓力引發(fā)細胞及器官毒性[34,35]。因此，本文以具有較多毒性報道的MPA-CdTe 量子點為代表[36]，以文獻報道中具有較強抗氧化能力的甘草酸、水飛薊賓及熊去氧膽酸為中藥成分代表[37-39]，研究中藥成分對量子點的解毒作用，以期推出用于量子點應(yīng)用配伍及毒性治療法的方案。

應(yīng)用MPA-CdTe 量子點，筆者發(fā)現(xiàn)其對SK-BR-3細胞造成了濃度依賴性的毒性，表現(xiàn)為細胞活率的下降及氧化應(yīng)激壓力的上升(圖2A)。該結(jié)果與文獻報道的量子點毒性機理一致，并揭示過氧化損傷為量子點毒性的重要來源[36]。通過與同等濃度的游離Cd2+作用效果對比可知，該量子點的毒性主要來源于自身，因其釋放的Cd2+尚不足以引發(fā)細胞的任何變化(圖2B)。事實上，這也與文獻之前報道的結(jié)果一致，即量子點毒性往往大于其可能釋放的重金屬離子[40]。因此提示針對量子點的毒性研究應(yīng)更多地關(guān)注其自身的納米效應(yīng)。

進一步地，量子點毒性可能被甘草酸、熊去氧膽酸及水飛薊賓等中藥成分緩解(圖3)。報道發(fā)現(xiàn)[41-43]，甘草酸、熊去氧膽酸及水飛薊賓均具有較強的還原性，可降低配伍藥物引發(fā)的過氧化壓力，進而起到解毒的作用。然而筆者的實驗結(jié)果表明，僅有甘草酸表達出了較強的解毒效果，水飛薊賓效果相對較弱，熊去氧膽酸則未見效果。這可能與不同試劑的還原性大小相關(guān)，即不同草藥成分對細胞氧化應(yīng)激壓力的降低能力不同，并通過本實驗中GSH，SOD及MDA的檢測得到了證明(圖4)。更重要的是，其他納米粒子，包括納米金、納米銀、二氧化鈦以及二氧化硅等納米粒子均被發(fā)現(xiàn)引發(fā)了顯著的細胞過氧化損傷[44]，并被認為是納米粒子共同的致毒性機理。因此本文結(jié)果表明，還原性中藥成分不僅能夠用于量子點毒性防治，也可用于其他納米材料毒性的治療中。

本文的研究結(jié)果表明，甘草酸和水飛薊賓的處理還導(dǎo)致了抗氧化酶GST和SOD的表達水平上升(圖5)。過去的文獻表明，GST及SOD是機體及細胞實現(xiàn)消除過氧化壓力，實現(xiàn)自我保護的主要蛋白[45]。其中，GST可通過催化GSH與重金屬等外源物的結(jié)合反應(yīng)，防止過氧化自由基的產(chǎn)生，起到解毒作用。SOD則是生物體內(nèi)的抗氧化金屬酶，能催化超氧陰離子自由基歧化生成氧和過氧化氫，在機體氧化與抗氧化平衡中起到至關(guān)重要的作用。已有眾多的報道發(fā)現(xiàn)，GST及SOD均可在細胞或機體受到輕度過氧化損傷時上升表達，從而起到自我保護的作用[46,47]。然而，當外源物濃度超過細胞承受極限時，細胞出現(xiàn)嚴重損傷并出現(xiàn)GSH，GST及SOD水平的急劇下降(圖2)。因此，甘草酸與水飛薊賓的加入不僅實現(xiàn)了細胞過氧化損傷的修復(fù)，也有利于提升細胞自我保護機制，具有良好的保健效果。

此外，本文的一個有趣發(fā)現(xiàn)在于甘草酸與水飛薊賓對于ABC轉(zhuǎn)運蛋白的抑制作用(圖6)。這一發(fā)現(xiàn)與文獻報道的結(jié)果相符，表明中草藥成分有作為轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑的潛力。長期的研究表明，包括MDR1及MRP1在內(nèi)的ABC轉(zhuǎn)運蛋白可在藥物處理后上調(diào)，通過消耗ATP實現(xiàn)對多種藥物的外排作用，也即多藥耐藥現(xiàn)象的產(chǎn)生。盡管迄今為止，已經(jīng)過3代的抑制劑篩選，依然無法發(fā)現(xiàn)能夠真正用于臨床的多藥耐藥抑制劑[15,48]。這其中，生物安全性問題即為限制抑制劑使用的重要因素之一。有鑒于此，甘草酸、水飛薊賓等中草藥成分的高生物安全性可使其成為優(yōu)良的ABC轉(zhuǎn)運蛋白抑制劑，從而作為腫瘤治療中的有效配伍成分。

考慮到中草藥成分仍可通過與量子點結(jié)合改變其理化性質(zhì)，進而降低其毒性。本文檢測了培養(yǎng)基中量子點與各中草藥成分混合后的水合粒徑及表面電荷，結(jié)果表明其并無明顯變化(表1)。與此同時，考慮到本文中所用MPA-COOH-QDs表面為負電荷，該類型量子點廣泛報道的吸附對象為正電荷金屬或其他正電荷底物，且作用機理為靜電吸附[49,50]。而甘草酸、水飛薊賓及熊去氧膽酸均為負電荷成分，因此其與量子點相互作用的可能性較小。因此，中草藥成分的確通過影響細胞氧化應(yīng)激通路，進而改變了量子點毒性，并可通過調(diào)控轉(zhuǎn)運蛋白功能抑制多藥耐藥現(xiàn)象。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，MPA-CdTe量子點過氧化毒性主要來源于自身，而不是其釋放的游離Cd2+。甘草酸及水飛薊賓能夠顯著降低量子點的過氧化毒性、提高細胞抗氧化能力及抑制腫瘤細胞多藥耐藥作用，從而可以作為量子點應(yīng)用中配伍藥物，在降低細胞毒性的同時提高藥物作用效果。