杜民杰

摘要：本研究驗證了分光光度法測定白酒中氰化物含量的國標方法，并對實驗操作中的關(guān)鍵點作了探討。結(jié)果表明，氰化物濃度在0-2.0mg/L范圍內(nèi)線性良好，檢出限為0.02mg/L，回收率在90.00%-101.33%之間，RSD為1.2%。

關(guān)鍵詞：白酒；氰化物；分光光度法

氰化物是劇毒物質(zhì)，進入機體會使細胞色素氧化酶失活，導(dǎo)致人體缺氧窒息。白酒中的氰化物主要由植物原料中的氰甙類配糖體在制酒過程中經(jīng)水解產(chǎn)生，GB2757-2012中規(guī)定其限量為8.0mg/L，飲用氰化物超標的白酒會嚴重危害飲酒者的生命健康。目前，GB5009.36-2016中規(guī)定了分光光度法、氣相色譜法兩種氰化物定量檢測方法，對于基層實驗室而言，前者設(shè)備成本較低、操作簡便快速。因此，本研究對白酒中氰化物測定的分光光度法進行了驗證，并探討了實驗環(huán)節(jié)中的關(guān)鍵點。

1. 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

白酒（購自某超市）；氰化物標準溶液（GBW（E）080115，50μg/mL）。

氫氧化鈉；酚酞指示劑；乙酸；異煙酸；吡唑啉酮；氯胺T；去離子水等。

721G可見分光光度計（上海儀電公司）；電熱板；恒溫水浴鍋。

1.2 實驗方法

1.2.1 標準系列配制

準確吸取1.0mL氰化物標準溶液，用氫氧化鈉溶液（2g/L）定容至50mL，制得1μg/mL的標準中間液。分別吸取0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0mL上述中間液于10mL比色管中，加入氫氧化鈉溶液至5mL，待處理。

1.2.2 白酒試樣制備

準確吸取1.0mL酒樣至50mL燒杯中，加5mL氫氧化鈉溶液（2g/L），放置10min，用120℃電熱板加熱至約剩1mL轉(zhuǎn)移至10mL比色管中，以氫氧化鈉溶液（2g/L）多次洗滌燒杯后并入洗滌液至5mL。

1.2.3 試樣溶液測定

于放置標準系列和酒樣的比色管中滴入2滴酚酞指示劑，加入乙酸溶液（1+24）至紅色褪去，再以氫氧化鈉溶液（2g/L）調(diào)至近紅色后，依次加入2mL磷酸鹽緩沖溶液、0.2mL氯胺T溶液（10g/L），搖勻后放置3min，然后加入2mL異煙酸-吡唑啉酮溶液，用去離子水定容，振蕩搖勻，最后于37℃下水浴40min后在波長638nm測定吸光度，以標準系列點所含氰化物質(zhì)量為橫坐標，對應(yīng)的吸光度為縱坐標，制作標準曲線，并以此定量酒樣中的氰化物含量。

2. 結(jié)果與討論

2.1 線性關(guān)系及檢出限

測定標準系列的吸光度值，繪制標準曲線，回歸方程為y=0.2923x-0.0667，R2=0.9991。按照取樣量為1.0mL，定容體積為10mL，做20次空白平行試驗，測定并記錄吸光度值，根據(jù)公式DL=3SD/b（b為標曲斜率）計算得本方法的檢出限為0.02mg/L。

2.2 加標回收率與精密度

在白酒試樣（本底為0.33mg/L）中添加低（0.5mg/L）、中（1.0mg/L）、高（1.5mg/L）不同濃度水平的標準溶液，各濃度水平平行測定2次，考察加標回收率；將上述白酒試樣平行測定6次，考察精密度，經(jīng)計算得本方法的加標回收率在90.00%-101.33%之間，相對標準偏差RSD=1.2%。

2.3 實驗室間比對試驗

為驗證本實驗方法的有效性，確保出具的數(shù)據(jù)準確可靠，本實驗室與河南華測檢測技術(shù)有限公司實驗室進行比對試驗，某批次的古月牌清香型白酒兩家實驗室測得氰化物含量均為0.29mg/L，比對結(jié)果滿意。

2.4 實驗操作關(guān)鍵點探討

分光光度法測定白酒中的氰化物需要將氰化物轉(zhuǎn)化為氯化氰，而該過程必須在體系pH=7.0條件下進行，實驗中需要兩次調(diào)節(jié)pH，然而酸堿用量須少于0.8mL才能確保最后定容準確。分光光度法基于朗伯比爾定律來定量，若顯色液渾濁對吸光度值影響很大，因此，酸堿調(diào)節(jié)過程要掌握好酸堿用量，以免超過定容體積導(dǎo)致實驗失敗。此外，對于渾濁或有色酒樣必須按照GB5009.36-2016中5.2.2蒸餾后取餾出液測定，以消除渾濁，準確定量。

3. 結(jié)論

白酒是節(jié)日慶典、親友聚會的必需品，氰化物含量是酒類的重要指標之一，白酒中氰化物的檢測是酒廠出廠檢驗和食品安全抽檢的常規(guī)項目。本研究驗證了白酒中氰化物檢測的國標方法，并對實驗關(guān)鍵點進行探討，旨在滿足本中心檢測需求的同時，為其它實驗室驗證方法提供參考。