王秋艷，張志剛，劉光輝

（1.新野縣動物疫病預防控制中心，河南新野 473500；2.河南省農業(yè)農村廳，河南鄭州 450008；3.河南省動物疫病預防控制中心，河南鄭州 450008）

禽流感（avian influenza，AI）是由A 型禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）引起的一種高度接觸性、急性傳染病。近年來，高致病性禽流感（HPAI）給養(yǎng)禽業(yè)造成的經(jīng)濟損失巨大。為有效防控HPAI，我國采取強制免疫政策。重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗（H5N1 Re-11株+Re-12 株，H7N9 H7 Re-2 株）是在我國廣泛應用的疫苗。河南省從2019 年開始使用重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗進行免疫。為評價重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗免疫雞群的臨床使用效果，2019 年7—12 月在河南省進行了臨床效果調查和免疫抗體檢測，以期為全國高致病性禽流感疫苗的使用提供參考。

1 材料與方法

1.1 臨床效果調查

1.1.1 調查范圍 在河南全省范圍內，選取104個涉農縣轄區(qū)內使用重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗（H5N1 Re-11 株+Re-12 株，H7N9 H7 Re-2 株）免疫的940 個存欄500 只以上的養(yǎng)雞場。

1.1.2 調查方法 采取現(xiàn)場調查與問卷調查相結合的方式。現(xiàn)場查閱養(yǎng)雞場相關生產記錄和疫苗使用記錄等資料，向養(yǎng)雞場獸醫(yī)技術人員詢問有關養(yǎng)殖場基本情況、生產情況、疫病防控情況、禽流感疫苗使用情況、疫苗使用效果、疫苗有效性評價，并填寫調查問卷。問卷內容主要包括，養(yǎng)雞場基本情況、禽流感疫苗使用情況、疫苗使用效果、疫苗有效性評價等。對疫苗有效性評價分為“好”“一般”“差”3 個等級：疫苗免疫后抗體水平較高、無不良反應為“好”；疫苗免疫后抗體水平高、出現(xiàn)不良反應為“一般”；疫苗免疫后抗體水平低、出現(xiàn)嚴重死亡為“差”。

1.2 H5 和H7 亞型免疫抗體檢測

1.2.1 樣品來源 全血樣品來自328 個使用重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗免疫的養(yǎng)雞場，在免疫后28 d 左右采集。按照《河南省農業(yè)農村廳關于印發(fā)＜2019 年河南省動物疫病監(jiān)測與流行病學調查計劃＞的通知》要求和抽樣比例，每場采集30 份全血樣品，共分離血清9 655 份。

1.2.2 檢測及結果判定 依據(jù)《高致病性禽流感診斷技術》（GB/T 18936—2003），采用HA 和HI 試驗，對H5 和H7 亞型免疫抗體進行檢測和結果判定。HI 抗體滴度達≥24為免疫抗體合格，群體陽性率≥70%為合格。

2 結果與分析

2.1 臨床效果

全省政府招標的重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗生產企業(yè)共有6 家。被調查的940 個養(yǎng)雞場，共計免疫雞3 308 335 只。免疫后1 周內出現(xiàn)不良反應的養(yǎng)雞場共190 個，占20.21%，有3 754 雞只出現(xiàn)不良反應，占0.11%；出現(xiàn)發(fā)病的養(yǎng)雞場共140 個，占14.89%，有2 975 雞只發(fā)病，占0.09%；出現(xiàn)死亡的養(yǎng)雞場共51 個，占5.43%，有1 360 雞只死亡，占0.04%。詳細結果見表1。

由表1 可見：6 家企業(yè)生產的三價滅活疫苗在免疫后1 周內均出現(xiàn)一定比例的不良反應（0.11%）以及極低的發(fā)病率（0.09%）和死亡率（0.04%）。不同企業(yè)疫苗有一定差異：甲、丁企業(yè)疫苗免疫后的不良反應率較低（0.08%），而丙企業(yè)較高（0.36%）；丁企業(yè)疫苗免疫后的雞只發(fā)病率最低（0.07%），而己企業(yè)較高（0.14%）；丁企業(yè)疫苗免疫后的雞只死亡率最低（0.03%），但戊、己企業(yè)較高（0.06%）。

表1 疫苗臨床應用效果

在被調查的940 個養(yǎng)雞場中，除95 個未反饋評價結果外，其余845 個對所使用的重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗進行了總體評價。其中：評價“好”的649 個，占76.81%；評價“一般”的196 個，占23.19%；評價“差”的無。

2.2 免疫抗體檢測

共檢測328 個養(yǎng)雞場，其中對9 655 份雞血清樣品進行了H5 亞型Re-11 株抗體檢測，檢出免疫合格場320 個，場群合格率為97.56%，檢出免疫抗體陽性樣品9 095 份，個體免疫抗體陽性率為94.20%；對9 616 份雞血清樣品進行了H5 亞型Re-12 株抗體檢測，檢出免疫合格場316 個，場群合格率為96.34%，檢出免疫抗體陽性樣品8 914 份，個體免疫抗體陽性率為92.70%；對9 655 份雞血清樣品進行了H7 亞型Re-2 株抗體檢測，檢出免疫合格場322 個，場群合格率為98.17%，檢出免疫抗體陽性樣品9 140 份，個體免疫抗體陽性率為94.67%。6 家生產企業(yè)疫苗的場群合格率和個體免疫抗體陽性率均超過了90%。詳細結果見表2～3。

3 討論

3.1 臨床效果

6 家企業(yè)生產的疫苗在免疫后1 周內均會出現(xiàn)較低水平的不良反應以及發(fā)病和死亡情況。分析原因：一是雞只本身的問題。雞只可能受母源抗體、藥物、潛伏感染等因素影響，經(jīng)免疫接種后，仍不具備足夠抵抗感染的能力，因而出現(xiàn)不良反應，甚至發(fā)病和死亡；不同品種雞群對疫苗的免疫應答也不同。二是疫苗本身的問題。因為不同廠家的疫苗存在抗原含量、生產工藝、免疫佐劑以及保存運輸?shù)确矫娴牟煌?，所以會導致一些差異。三是環(huán)境和養(yǎng)雞場管理的問題。疫苗使用操作不當、接種不規(guī)范、生物安全措施不到位、飼養(yǎng)環(huán)境差、空氣污濁、氣溫過高或過低等均是導致免疫后出現(xiàn)應激反應、應激發(fā)病和應激死亡的誘因。因此，在做好抗體監(jiān)測、保障群體抗體水平良好的同時，還應當注重養(yǎng)殖的其他重要環(huán)節(jié)，建立有效的綜合防控體系，同時結合品種、環(huán)境衛(wèi)生狀況、季節(jié)和氣溫、免疫接種次數(shù)等進行綜合分析。

表2 不同企業(yè)疫苗的場群免疫檢測結果

表3 不同企業(yè)疫苗的個體免疫檢測結果

3.2 免疫效果

從檢測結果看，群體免疫抗體陽性率均在88%以上，顯著高于規(guī)定的最低標準70%，說明6 家企業(yè)生產疫苗的免疫保護效果較好。但仍有個別養(yǎng)雞場的群體陽性率不合格，需要加強免疫，查找原因，及時補免。這也說明定期開展禽流感流行病學調查和疫苗免疫效果評估具有重要的臨床指導意義。

4 結論

940 個養(yǎng)雞場的重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗臨床效果評價結果表明，6 家企業(yè)生產疫苗的雞群臨床應用效果較好，平均場群免疫合格率和個體免疫抗體陽性率均超過了90%，達到了較高水平。不良反應率以及發(fā)病率和死亡率極低。但在免疫過程中，應盡量消除影響疫苗臨床效果的不利因素，定期開展免疫效果監(jiān)測，及時調整免疫程序。