程琳杰，吳榮書

（云南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南昆明650201）

隨著物質(zhì)生活的不斷提高，糖尿病發(fā)病人群有增加的趨勢，目前糖尿病尚不能完全治愈，而針對(duì)性藥物大多是由化學(xué)方法合成，雖會(huì)起到一定控制血糖的作用，但長期服用，也會(huì)同時(shí)出現(xiàn)一些副作用，如耐藥性、器官的損害等[1]?，F(xiàn)有研究證明，植物中所提取的多糖、黃酮等功能物質(zhì)，對(duì)高血糖動(dòng)物有降低血糖的功效，在達(dá)到有效控制血糖的同時(shí)，可降低對(duì)身體的危害性[2]。

茉莉花是一種木犀科素馨屬植物，氣味極香，是制作花茶的重要原料之一，還是重要的香精香料[3]。茉莉花具有消脹氣、理氣止痛、溫中和胃、消腫解暑、強(qiáng)化免疫系統(tǒng)的功效，并對(duì)痢疾、腹痛、結(jié)膜炎及瘡毒等具有良好的消炎解毒的作用[4]。近年來，對(duì)于茉莉花的主要研究集中在揮發(fā)油、脂肪類、黃酮、多糖類成分上。研究證明，多糖具有調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、降膽固醇、降血脂等功效[5]?；谀壳暗难芯勘砻?，茉莉花具有提高免疫力、預(yù)防心腦血管疾病等多種作用[6]。

紫蘇含有較高的營養(yǎng)價(jià)值，莖、葉、籽均可食用，其葉中含有多種黃酮及黃酮苷類化合物，大量優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)，氨基酸種類多、含量豐富，其中的酚類物質(zhì)，具有抗菌、消炎、延緩衰老、抑制腫瘤、降血脂、抗菌等作用[7]；同時(shí)還富有植物蛋白及多種微量元素。紫蘇葉作為藥食同源植物，被廣泛用于醫(yī)藥、食品、香料等行業(yè)[8]。

目前尚未發(fā)現(xiàn)對(duì)于茉莉紫蘇的有效物質(zhì)進(jìn)行粗提，并將粗提液進(jìn)行濃縮、復(fù)合，對(duì)動(dòng)物小鼠進(jìn)行降血糖的實(shí)驗(yàn)研究，基于現(xiàn)狀，本試驗(yàn)使用茉莉花與紫蘇葉的復(fù)配濃縮液，對(duì)鏈脲佐菌素的高血糖小鼠模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，通過茉莉紫蘇復(fù)合濃縮液的低、中、高3個(gè)劑量組對(duì)高血糖小鼠的飲食、體重、血糖及臟器指數(shù)的影響，證明茉莉紫蘇復(fù)合濃縮液對(duì)高血糖具有明顯降低作用，驗(yàn)證其降血糖功能，為保健食品進(jìn)一步研究，提升食用鮮花產(chǎn)業(yè)奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

茉莉花：昆明中藥材市場；紫蘇葉：安徽多善堂藥業(yè)有限公司；果糖（biosharp）：上海麥克林生物科技有限公司；清潔級(jí)昆明種雄性小白鼠 90 只，（20±2）g、鏈脲佐菌素：上海阿拉丁生化科技股份有限公司；二甲雙胍格列本脲：亞寶藥業(yè)四川制藥有限公司。

1.2 試驗(yàn)儀器

粉碎機(jī)（JHF-250A）：昆明鐵申商貿(mào)有限公司；超聲波清洗儀（SK2200H）：上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司；酶標(biāo)儀（WELL Read）：上海豫東科技有限公司；真空濃縮離心機(jī)（miVac Quattro）：上海精密科學(xué)儀器有限公司；三諾血糖測試儀（GA-3）：三諾生物傳感股份有限公司；離心儀（TDL-50B）：上海儀器廠。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 茉莉紫蘇復(fù)合濃縮液的制備

茉莉花破碎，按料液比1∶25（g/mL）加水，浸提溫度75℃，浸提時(shí)間90 min，超聲時(shí)間20 min進(jìn)行提取，提取液在40℃下濃縮9 h，得到茉莉濃縮液；紫蘇葉破碎，按料液比1∶20（g/mL）加水，浸提溫度75℃，浸提時(shí)間40 min，超聲時(shí)間40 min的條件進(jìn)行提取，濃縮液在60℃下濃縮5 h，得到紫蘇濃縮液；將得到的茉莉花濃縮液與紫蘇濃縮液按照9∶1的體積比進(jìn)行混合，復(fù)合濃縮液冷藏備用。

1.3.2 動(dòng)物高血糖模型的建立

選擇體質(zhì)量為（20±2）g的昆明種雄性小鼠70只[9]，適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d，3 d后，隨機(jī)取8只小鼠作為正常對(duì)照組，其余小鼠作為高血糖模型組，并將高血糖模型組的飲用水換成濃度為20%的果糖水，正常對(duì)照組飲食不變，繼續(xù)喂養(yǎng)21 d后，斷糧斷水12 h，采用腹腔注射方法，對(duì)正常對(duì)照組小鼠腹腔注射生理鹽水、高血糖模型組注射鏈脲佐菌素溶液[現(xiàn)配現(xiàn)用，低溫保存，采用pH值為4.4的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液配制濃度為1.5%的鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）溶液]，1次/d，72 h后對(duì)除正常對(duì)照組外的其他組小鼠進(jìn)行尾尖采血測血糖[10]，對(duì)血糖不達(dá)標(biāo)的小鼠，繼續(xù)采用相同的操作方法，采用三諾血糖儀測定小鼠血糖，選取空腹血糖值大于11.1 mmol/L的小鼠[11]進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.3.3 分組設(shè)計(jì)

除正常對(duì)照組外，其余高血糖建模小鼠隨機(jī)分為5組：模型組、給藥組、低劑量組、中劑量組、高劑量組，每組8只。低劑量組、中劑量組、高劑量組分別灌胃6、12、18 mL/（kg·d）[12]，給藥組每天灌胃二甲雙胍格列本脲（150 mg/kg）1次[13]，正常對(duì)照組和模型組分別灌胃等體積的生理鹽水每日1次，連續(xù)28 d，各組給基礎(chǔ)飼料和蒸餾水。分別在第0天、第14天、第28天，對(duì)各組小鼠測體重，并斷尾取血，測定血糖，測血糖前，斷糧斷水12 h。每日在灌胃前，稱量記錄飲水量、進(jìn)食量。

1.3.4 檢測指標(biāo)

分別于小鼠建模前、建模后、給藥的第7天、第14天、第28天，斷水?dāng)嗉Z12 h，斷尾取血，測定血糖值。給藥28d后，小鼠摘眼球取血，收集血液，采用4000r/min、離心15 min，提取血清，測定甘油三酯（triglyceride，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein，LDL-C）4項(xiàng)指標(biāo)；解剖，取肝臟、脾、胸腺，生理鹽水沖洗，濾紙吸干稱量，記錄臟器指數(shù)，內(nèi)臟指數(shù)=內(nèi)臟質(zhì)量（mg）/小鼠質(zhì)量（g）[14]。

1.3.5 數(shù)據(jù)分析

應(yīng)用SPSS19.0軟件，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 茉莉紫蘇濃縮液對(duì)小鼠飲水量、進(jìn)食量及體重的影響

高血糖的小鼠，體態(tài)改變明顯，毛發(fā)稀疏，體重與正常組比較增長緩慢或下降，出現(xiàn)多飲、多食、多尿的現(xiàn)象，與正常組相比，墊料更換更為頻繁。在給藥后，“三多”癥狀得到緩解，結(jié)果如表1、表2、圖1所示。

表1結(jié)果表明，在灌胃開始的第1周，糖尿病模型組、給藥組、低劑量組、中劑量組、高劑量組與正常對(duì)照組差異極顯著，飲水量與正常組相比較，遠(yuǎn)多于正常小鼠，到第2周時(shí)，給藥組、中劑量組、高劑量組與糖尿病模型組差異極顯著，在第3周到第4周，給藥組、低劑量組、中劑量組、高劑量組與糖尿病模型組差異極顯著。

表1 茉莉紫蘇混合濃縮液對(duì)小鼠飲水量的影響Table 1 Effect of jasmine perilla mixed concentrate on drinking water in mice

表2表明，在第1周，糖尿病模型組、給藥組、低劑量組、中劑量組、高劑量組的進(jìn)食量與正常組都存在極顯著性差異，在第3周到第4周，給藥組、低劑量組、中劑量組、高劑量組與糖尿病模型組有極顯著性差異，證明在不斷給藥期間，小鼠的“三多”癥狀有緩解。

表2 茉莉紫蘇濃縮液對(duì)小鼠進(jìn)食量的影響Table 2 Effect of jasmine perilla concentrate on feed consumption in mice

圖1 茉莉紫蘇濃縮液對(duì)小鼠體重的影響Fig.1 Effect of jasmine perilla concentrate on body weight of mice

模型組、低劑量兩組小鼠體重增長緩慢，與正常組呈現(xiàn)極顯著差異，給藥組、高劑量組在第28天與模型組呈現(xiàn)極顯著差異，證明在灌胃期間小鼠高血糖所引起的消瘦減輕。

2.2 濃縮液對(duì)小鼠血糖值及血清TG、TC、HDL-C、LDL-C的影響

茉莉紫蘇濃縮液對(duì)小鼠血糖的影響見表3。

通過對(duì)比在建模前及灌胃第0天、第14天、第28天的血糖的變化值（如表3所示），正常組血糖水平保持穩(wěn)定，建模后測量血糖，血糖值顯示：模型組、給藥組、茉莉紫蘇復(fù)合液的低劑量組、中劑量組、高劑量組與正常組小鼠血糖有極顯著差異，而與模型組無差異；實(shí)驗(yàn)?zāi)┢跍y得血糖值，模型組血糖持續(xù)保持在較高水平，而低劑量組、中劑量組、高劑量組雖與正常組存在極顯著差異，但與模型組相比較，血糖值均降低，中劑量組、高劑量組降低明顯，證明茉莉紫蘇復(fù)合濃縮液具有一定降低血糖的功效。

表3 茉莉紫蘇濃縮液對(duì)小鼠血糖的影響Table 3 Effect of jasmine perilla concentrate on blood glucose in mice

茉莉紫蘇濃縮液對(duì)小鼠血清指標(biāo)的影響見表4。

表4 茉莉紫蘇濃縮液對(duì)小鼠血清指標(biāo)的影響Table 4 Effect of jasmine perilla concentrate on serum index in mice

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組的甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白均與正常組有顯著性差異，低劑量組的TG、LDL-C雖與正常組有顯著性差異，但明顯小于模型組，并與模型組存在顯著性差異，高劑量組的TG、TC、HDL-C、LDL-C均與模型組有顯著性差異，證明茉莉紫蘇復(fù)合濃縮液能夠改善高血糖對(duì)小鼠造成的血脂紊亂。

茉莉紫蘇濃縮液對(duì)小鼠臟器指數(shù)的影響見表5。

經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，動(dòng)物的臟器指數(shù)能夠反映動(dòng)物內(nèi)臟病變情況和營養(yǎng)狀態(tài)，長期高血糖則會(huì)造成肝臟受損，并影響機(jī)體的免疫功能[15]。如表5結(jié)果所示，模型組小鼠和低劑量小鼠肝臟指數(shù)與正常組呈極顯著差異，明顯要高于其他組別，并于解剖時(shí)觀察到模型組小鼠的肝臟呈現(xiàn)腫脹狀態(tài)。給藥組、茉莉紫蘇濃縮液的中劑量組、高劑量組的肝臟指數(shù)均下降，證明茉莉紫蘇復(fù)合濃縮液對(duì)高血糖小鼠的肝臟具有保護(hù)作用。模型組的脾臟指數(shù)，由于高血糖的影響遠(yuǎn)小于正常組，給藥組、茉莉紫蘇濃縮液的低劑量組、中劑量組、高劑量組的脾臟指數(shù)均高于模型組，證明茉莉紫蘇濃縮液對(duì)小鼠的免疫器官具有保護(hù)作用。模型組、給藥組、低劑量組、中劑量組的胸腺指數(shù)雖與正常值有顯著差異，但通過數(shù)據(jù)對(duì)比，低劑量組、中劑量組、高劑量組的胸腺指數(shù)均高于模型組，證明茉莉紫蘇液對(duì)高血糖小鼠的胸腺器官有保護(hù)作用。

表5 茉莉紫蘇濃縮液對(duì)小鼠臟器指數(shù)的影響Table 5 Effect of jasmine perilla concentrate on organ index of mice

3 結(jié)論

由于現(xiàn)代生活水平提高，生活方式的改變，高糖高脂食物的攝入逐漸增加，再加之久坐不動(dòng)的工作和學(xué)習(xí)方式，導(dǎo)致糖尿病出現(xiàn)年齡下降，人口增多的趨勢。糖尿病是由于胰島素分泌紊亂或作用發(fā)生障礙引起的以高血糖為主要癥狀的疾病[16]。糖尿病及糖尿病帶來的并發(fā)癥，所造成的器官損害、功能減退、衰竭[17]，是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)亟待解決的問題，但目前臨床藥物的長期攝入，雖會(huì)起到降血糖的作用，同時(shí)會(huì)產(chǎn)生較多不良影響，基于此，從植物中提取有效物質(zhì)開發(fā)成藥物或功能食品，用于治療或緩解高血糖癥狀具有極其重要的意義。

鄒瑤等[18]基于從茉莉花渣中分離出茉莉多糖、多種二萜、三萜類物質(zhì)，探討茉莉花渣對(duì)四氧嘧啶建立的高血糖小鼠的降血糖作用，并得出有效結(jié)論，證明茉莉花渣多糖具有一定降血糖作用，并對(duì)高血糖造成的臟器損傷具有一定的保護(hù)作用。李項(xiàng)輝[19]通過試驗(yàn)證明紫蘇葉提取物對(duì)來源于豬胰腸、大米酵母的α-葡萄糖苷酶有較好的抑制作用，并通過細(xì)胞試驗(yàn)，進(jìn)一步得出紫蘇降血糖的主要機(jī)理。

STZ是通過自由基損傷胰島β細(xì)胞，胰島素合成減少，誘發(fā)糖尿病，引起高血糖[20]。本試驗(yàn)基于對(duì)茉莉花、紫蘇葉的研究現(xiàn)狀，通過對(duì)鏈脲佐菌素造成的高血糖小鼠進(jìn)行灌胃不同劑量的茉莉紫蘇復(fù)合濃縮液，結(jié)果證明茉莉紫蘇復(fù)合濃縮液能夠有效降低小鼠血糖，高劑量能夠顯著降低小鼠 TG、TC、LDL-C，對(duì)HDL-C有升高效果，低、中高劑量組雖然與模型組沒有顯著差異，但數(shù)據(jù)對(duì)比顯示，也同樣可以降低高血糖小鼠的TG、TC、LDL-C，提高HDL-C，并且復(fù)合濃縮液可對(duì)小鼠內(nèi)臟器官起到一定保護(hù)作用。試驗(yàn)證明茉莉紫蘇復(fù)合濃縮液可以作為降血糖的保健食品來開發(fā)，但具體的作用機(jī)制還需要進(jìn)一步研究。