何 珊，李雙潔，周榮云，朱美芹，朱 聰，朱建中

（1.揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，揚(yáng)州 225009；2.揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)研究中心，揚(yáng)州 225009；3.江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心，揚(yáng)州 225009；4.農(nóng)業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品安全國際聯(lián)合研究實(shí)驗(yàn)室，揚(yáng)州 225009）

天然免疫系統(tǒng)存在于所有多細(xì)胞動物中，是機(jī)體抗感染機(jī)制中的第一道防線。模式識別受體（pattem recognition receptor, PRRs）能夠識別病原體相關(guān)分子模式（pathogen-associated molecule patterns，PAMPs），從而區(qū)分非機(jī)體自身的病原微生物[1-4]。模式識別受體主要包括Toll樣受體（toll-like receptors，TLRs）、NOD樣受體（NOD-like receptors，NLRs）、RIG-I樣受體（RIG-I receptors，RLRs）、C型凝集素樣受體（C-type lectin receptors，CLRs）和胞質(zhì)中的DNA識別受體等。

第一大類PRRs是TLRs，最早被發(fā)現(xiàn)。目前家族內(nèi)至少包括11名成員，可分別識別不同的PAMPs[5]。TLR1、2、4、5、6、10表達(dá)于細(xì)胞表面，TLR3、7、8、9主要定位于細(xì)胞質(zhì)中內(nèi)體。第二大類是核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域受體NLRs[6]，是胞質(zhì)內(nèi)識別受體，能夠識別細(xì)菌細(xì)胞的脂多糖和肽聚糖等多種組分。所有NLR成員具有相似的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)：N末端效應(yīng)結(jié)構(gòu)域，中間核苷酸結(jié)合和寡聚化結(jié)構(gòu)域（nucleotide binding oligomerization domain，NOD）和C-端富含亮氨酸的重復(fù)序列（LRR）[7]?；贜末端效應(yīng)結(jié)構(gòu)域，NLR分為5個亞家族：NLRA（核酸激活結(jié)構(gòu)域）、NLRB（細(xì)胞凋亡重復(fù)的桿狀病毒抑制劑）、NLRC（半胱天冬酶活化募集結(jié)構(gòu)域 CARD）、NLRP（Pyrin結(jié)構(gòu)域，PYD）和NLRX（未知域名）[8]。除NOD1和NOD2外，所有NLR激活后均誘導(dǎo)炎性小體產(chǎn)生。第三類是視黃酸/維甲酸誘導(dǎo)基因Ⅰ樣受體RLRs，是胞質(zhì)內(nèi)重要的抗病毒識別受體[9]。RLRs包括視黃酸誘導(dǎo)基因Ⅰ（RIG-I）、黑素瘤分化相關(guān)基因5（MDA5）和LGP2。很多細(xì)胞通過該受體家族識別病毒RNA或其復(fù)制中間產(chǎn)物，在抗病毒天然免疫中起重要的作用。第四類是C型凝集素樣受體CLRs，最早被認(rèn)為是Ca2+依賴型受體，具有碳水化合物識別域（carbohydrate recognition domain，CRD），有碳水化合物結(jié)合活性。CLRs可分為跨膜型和分泌型兩種，跨膜型的主要代表為選擇素家族、MR家族等，分泌型主要為膠原凝集素家族[10]。第五類為胞漿內(nèi)DNA識別受體包括cGAS、DAI、AIM2、DDX41、IFI16、DHX9、DHX36、DDX60、DNAPK、MRE11等，是較晚發(fā)現(xiàn)的PRRs，主要存在于胞質(zhì)中，部分存在于細(xì)胞核，如：IFI16、DNA-PK和MRE11。另外還有其他一些受體家族，如清道夫受體、甲酸基多肽受體、補(bǔ)體受體等[11]。

宿主PRRs識別并感知來自病毒、細(xì)菌、真菌和原生動物等的各種PAMPs，其范圍從脂蛋白、碳水化合物、脂多糖到核酸。其中，DNA和RNA作為重要的PAMPs得到了廣泛的關(guān)注。病毒DNA和RNA最為典型，病原體在細(xì)胞內(nèi)大量復(fù)制，并積累大量的核酸，能被細(xì)胞內(nèi)PRRs識別。識別DNA的受體除前面提及的胞漿內(nèi)DNA受體外，還有內(nèi)體TLR9[12]；識別RNA的受體是TLR3、TLR7、TLR8、RIG-I，MDA5、LGP2、NLRP3和NOD2等。由于RNA病毒表現(xiàn)出快速的復(fù)制動力學(xué)、高突變率和復(fù)雜的進(jìn)化動力學(xué)的特點(diǎn)，引發(fā)動物疾病的危害性更大，因此研究和了解RNA受體在識別RNA病毒感染和啟動保護(hù)性免疫應(yīng)答中發(fā)揮的作用，受體相互之間是否存在協(xié)同或拮抗關(guān)系對控制RNA病毒感染、保護(hù)宿主和促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展尤其重要[13]。RNA受體包括識別單鏈RNA（single-stranded RNA，ssRNA）的受體（TLR7和TLR8），還有識別雙鏈RNA（doublestranded RNA，dsRNA）受體（TLR3、RIG-I、MDA5、LGP2和NLRP3等），后者在抗病毒免疫中起到更廣泛的作用。養(yǎng)豬業(yè)常見的病毒性疾病包括豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征（俗稱“藍(lán)耳病”）、口蹄疫、流行性腹瀉病毒病和傳染性胃腸炎等，養(yǎng)禽業(yè)常見的病毒性疾病包括禽流感和新城疫等，這些病毒均屬于單鏈RNA病毒，但病毒復(fù)制過程中形成的復(fù)制中間體dsRNA都能被dsRNA受體所識別。本文主要針對幾種重要的dsRNA受體TLR3、RIG-I和MDA5及其抗病毒作用進(jìn)行綜述。

1 dsRNA受體TLR3結(jié)構(gòu)和功能

所有TLRs都是I型跨膜蛋白，由N端胞外域或細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域（ECD），中間跨膜結(jié)構(gòu)域（TM）和C端細(xì)胞質(zhì)Toll/IL-1受體（Toll／IL-1-receptor homologous region，TIR）結(jié)構(gòu)域組成。TIR是一個高度保守的蛋白質(zhì)互作區(qū)域，在TLRs的信號傳導(dǎo)中發(fā)揮重要作用。ECD含有20～26個富含亮氨酸的重復(fù)序列（LRR），形成馬蹄形螺線管或環(huán)狀結(jié)構(gòu)。這些LRR與病原的識別有直接聯(lián)系。單個LRR包括α螺旋和β折疊，每個LRR的α螺旋位于螺線管結(jié)構(gòu)的凸面上，而每個LRR的β折疊組裝并形成螺線管結(jié)構(gòu)的凹面。與其他含LRR的蛋白質(zhì)不同，TLR在馬蹄型結(jié)構(gòu)側(cè)凸表面上結(jié)合其配體包括激動劑[14]。所有TLR活化都需要形成M形二聚體或多聚體，使得兩個TLR ECD的C末端區(qū)域接近，反過來導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)TIR結(jié)構(gòu)域的多聚化，通過TIR同源結(jié)構(gòu)域相互作用來募集下游銜接蛋白/接頭蛋白，進(jìn)一步形成稱為信號體的信號復(fù)合物并激活下游轉(zhuǎn)錄因子：一種是核因子κB轉(zhuǎn)錄因子（NF-B），能夠誘導(dǎo)促炎性細(xì)胞因子的表達(dá)；另一種是干擾素調(diào)節(jié)因子（interferon regulatory factor，IRF），誘導(dǎo)抗病毒I型干擾素（interferon，IFN）的產(chǎn)生[15]。

TLR3廣泛分布于除漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞（pDC）和中性粒細(xì)胞之外的所有先天免疫細(xì)胞中，并在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（endoplasmic reticulum，ER）合成后通過跨膜蛋白UNC93B1轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞內(nèi)體中[16]。TLR3識別病毒的雙鏈RNA（dsRNA）、人工合成的dsRNA類似物聚肌苷酸-聚胞苷酸（poly I:C）和宿主的mRNA[17]。TLR3胞外區(qū)（ECD）的晶體結(jié)構(gòu)是TLR蛋白中第一個被解析的晶體結(jié)構(gòu)，以螺線管結(jié)構(gòu)單體形式存在。在與dsRNA結(jié)合時，TLR3 ECD N和C端的側(cè)凸面正電荷區(qū)域與帶負(fù)電荷的dsRNA磷酸戊糖骨架結(jié)合，并形成二聚體[18]。Sarkar等[19]發(fā)現(xiàn)，與其他TLRs不同，TLR3胞漿側(cè)的肽鏈中含有5個酪氨酸殘基（Tyr），分別為Tyr733、Tyr756、Tyr759、Tyr764和Tyr858。Tyr733和Tyr759突變成苯丙氨酸（Phe）時能降低識別dsRNA后活化的效率，當(dāng)這些酪氨酸殘基全部突變時，dsRNA引導(dǎo)的信號識別被阻斷。這一發(fā)現(xiàn)對TLR3信號傳導(dǎo)認(rèn)識至關(guān)重要。

2 dsRNA受體RIG-I和MDA5結(jié)構(gòu)與功能

RLRs幾乎在所有哺乳動物細(xì)胞類型中表達(dá)，并且作為細(xì)胞漿RNA受體的主要家族，在病毒識別和保護(hù)性免疫應(yīng)答中起關(guān)鍵作用[20-21]。原型RIG-I最初是通過篩選cDNA文庫被發(fā)現(xiàn)的[22-23]，該家族的其他成員包括MDA5和LGP2。RIG-I和MDA5具有相似的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)：N端有兩個半胱天冬酶活化募集結(jié)構(gòu)域（2CARDs）；中間為RNA解旋酶結(jié)構(gòu)域，能夠和C端結(jié)構(gòu)域一起結(jié)合RNA；C端是編碼自身活化抑制域（RD），或被稱為調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域（RD），負(fù)責(zé)識別并結(jié)合病毒RNA。沒有病毒感染時，RIG-I呈靜息狀態(tài)，活性區(qū)2CARDs與CTD和RNA解旋酶結(jié)構(gòu)域結(jié)合，后者阻止2CARDs與修飾蛋白接觸活化[24]。盡管RIG-I和MDA5在結(jié)構(gòu)上很類似，但兩者在RNA識別中還是具有一定差異性，RIG-I能夠識別5'-三磷酸dsRNA（5'-ppp-dsRNA）和短鏈dsRNA（＜300 bp），而MDA5優(yōu)先識別的是長鏈dsRNA（＞1000 bp）。5'-pppRNA是多數(shù)病毒RNA在胞質(zhì)中合成時會出現(xiàn)的一種特異性修飾。Poly I:C是人工合成的dsRNA類似物聚肌苷酸-聚胞苷酸，各種長度dsRNA的混合物，因此也可以被RIG-I和MDA-5識別。第三個成員LGP2缺乏N端的2CARDs，沒有信號傳導(dǎo)活性[25]，但由于能夠結(jié)合RNA，LGP2可以調(diào)節(jié)RIG-I和MDA5信號傳導(dǎo)[20,26]。

3 dsRNA識別受體 TLR3、RIG-I和MDA5的信號通路

機(jī)體的天然免疫通過識別入侵的病原微生物（如病毒）的PAMPs，然后釋放有抗病毒作用的細(xì)胞因子（如IFN-I）從而誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗病毒免疫反應(yīng)，并將病毒清除。TLR3是第一個被報(bào)道的dsRNA病毒受體，可識別病毒的雙鏈RNA（dsRNA）和dsRNA的人工合成類似物poly I:C。TLR3是唯一不使用MyD88作為銜接蛋白的TLR，而是使用誘導(dǎo)β干擾素的TIR結(jié)構(gòu)域銜接蛋白（TIR domain containing adaptor inducing interferon-β，TRIF）作為其下游接頭分子。TLR3活化后通過自身的TIR結(jié)構(gòu)域基于同源作用募集TRIF，推測形成信號復(fù)合物Tiffosome，進(jìn)而結(jié)合腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子（TNF receptor associated factors，TRAF）3和6，分別激活蛋白激酶TBK1/IKKε和IKK/IKKβ。最終引起下游兩類轉(zhuǎn)錄因子IRF3/7和NF-κB的轉(zhuǎn)位入核并引起活化，分別誘導(dǎo)Ⅰ型IFN尤其是IFN-β和炎癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生（圖1），誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗病毒反應(yīng)。

RIG-I和MDA5作為胞漿內(nèi)的模式識別受體，識別病毒來源的雙鏈RNA，活化途徑類似，但具有識別不同病毒入侵的功能。病毒感染宿主后，RIG-I和MDA5識別配體dsRNA后被活化，在ATP水解酶的作用下構(gòu)象發(fā)生了改變，暴露CARDs，并由細(xì)胞漿轉(zhuǎn)移到一個線粒體相關(guān)膜上，在此與含有CARD結(jié)構(gòu)域的線粒體抗病毒信號蛋白（MAVS，也稱CARDIF/VISA/IPS-1）同源結(jié)構(gòu)域相互作用，引起MAVS的活化。MAVS是RIG-I和MDA5下游的接頭蛋白，通過招募TRAF3進(jìn)而激活蛋白激酶TBK-1和IKKε，磷酸化并激活轉(zhuǎn)錄因子IRF3/7?；罨腎RF3/7從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中，從而誘導(dǎo)具有抗病毒作用的I型IFN的生成[27]。同時，活化的MAVS還可以借助TRAF6、FADD、RIPI、TRADD、Caspase8/10將信號傳導(dǎo)給IKK復(fù)合物（IKKα、IKKβ、IKKγ），進(jìn)而導(dǎo)致NF-κB活化，活化后NF-κB二聚體進(jìn)入細(xì)胞核調(diào)節(jié)促炎因子和相關(guān)趨化因子產(chǎn)生（圖1）。研究發(fā)現(xiàn)，CARD缺失的RIG-I可抑制干擾素產(chǎn)生[28]。另外，還有一種接頭分子STING也可以與RIG-I、MAVS相互作用活化IRF，但STING在RLR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中具體作用機(jī)制尚不清楚[29]。

4 dsRNA受體間的相互作用

圖1 dsRNA介導(dǎo)的TLR3和RIG-I/MDA5信號途徑Fig.1 The signaling pathways triggered by dsRNA and mediated by TLR3 and RIG-I/MDA5

不同PRRs識別不同PAMPs，引發(fā)多種信號通路。而各種通路間也存在一些交叉互作，由此形成了巨大的病原微生物-天然免疫相互作用網(wǎng)絡(luò)。在此列舉幾個已知相互關(guān)系的例子：病毒感染激活RLRs后誘導(dǎo)的IRF3信號競爭性占據(jù)IL-12啟動子后會抑制細(xì)菌感染后TLRs所誘導(dǎo)的IRF5信號，表明RLRs和TLRs途徑之間存在著某種抑制作用[30]。RIG-I在病毒感染后，可以促NLRs介導(dǎo)的炎性小體活化和IL-1β的成熟[31]，但是NLRs對RLRs介導(dǎo)的Ⅰ型IFN產(chǎn)生起負(fù)調(diào)控作用[32]，表明RLRs和NLRs信號通路間也存在相互作用。TLRs和NOD蛋白在細(xì)菌感染宿主時起關(guān)鍵作用。一方面，NOD1和NOD2刺激劑與TLR2、TLR3、TLR4和TLR9刺激劑都可以促進(jìn)樹突狀細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的成熟，具有協(xié)同作用；另一方面，NLRs抑制TLRs信號的調(diào)控。表明TLRs與NLRs也相互影響[33]。就dsRNA受體而言，同屬RLRs家族卻缺失2CARDs的LGP2和RIG-I競爭性地結(jié)合病毒RNA，能負(fù)調(diào)控RIG-I信號[34]。相反，該蛋白導(dǎo)致MDA5免疫應(yīng)答信號上調(diào)[35]。TLR3可以促進(jìn)西尼羅河病毒（West nile virus，WNV）的復(fù)制和發(fā)病[36]；而RIG-I激活caspase-12可以抵抗WNV[37]。這提示TLR3和RIG-I在WNV感染中存在某種拮抗作用。有了對以上受體間相互作用的初步了解，不禁思考TLR3、RIG-I和MDA5既然都能夠識別dsRNA，又分別屬于TLRs和RLRs，那么三者之間尤其在不同動物種屬中是否也存在著某種具體相互作用？目前我們對家豬（Porcine，p）TLR3，RIG-I和MDA5初步研究顯示，在共轉(zhuǎn)染人293T細(xì)胞和基因敲低豬細(xì)胞中，pTLR3可以負(fù)調(diào)控pRIG-I和pMDA5下游組成性NF-κB活性，反過來，pRIG-I和pMDA5卻都能正調(diào)控TLR3下游刺激誘導(dǎo)性IRF活性。以上結(jié)果表明，不同家豬dsRNA受體的免疫應(yīng)答信號通路之間存在著或協(xié)同或拮抗的截然不同作用。如果在不同豬病毒感染條件下，這些dsRNA受體間的相互作用情況可能還會不一樣，雖然受體間相互作用復(fù)雜，但值得深究。

5 dsRNA受體的抗病毒作用

TLRs和RLRs的主要區(qū)別在于細(xì)胞定位和特異性配體的不同，這些促成了宿主細(xì)胞復(fù)雜的抗病毒防御機(jī)制。TLR3識別呼腸孤病毒（Reovirus）的基因組dsRNA，也識別其他病毒復(fù)制中間體dsRNA，激發(fā)保護(hù)性免疫反應(yīng)，從而限制病毒復(fù)制；這些病毒包括腦心肌炎病毒（Encephalomyocarditis virus，EMCV）、禽流感病毒（Avian influenza virus，AIV）、在豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）和雞馬立克氏病病毒（Marek's disease virus，MDV）等[38]。體內(nèi)研究顯示，TLR3在宿主抗小鼠巨細(xì)胞病毒（Mouse cytomegalovirus，MCMV）感染中起一定作用[39-40]。雞感染高致病性禽流感（Highly pathogenic avian influenza，HPAI）H5N1 24 h后，在各類臟器如脾臟、肺臟和腦組織中發(fā)現(xiàn)TLR3和IFN-β表達(dá)水平顯著上調(diào)[41]。另外發(fā)現(xiàn)，PRRSV感染豬6 h左右，肺泡巨噬細(xì)胞（pulmonaryalveolar macrophages，PAMs）和外周血單核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMCs）中TLR3的表達(dá)受到抑制，然而在感染24 h后PAMs和未成熟樹突狀細(xì)胞（immature dendritic cells，imDCs）正常表達(dá)TLR3[42]。TLR3對這些病毒是否有抵抗作用以及抗病毒機(jī)制尚不清楚，有待進(jìn)一步研究。TLR3信號通路在抗皰疹病毒感染以及抗腫瘤免疫中起著不可替代的作用：MDV是一種α亞科皰疹病毒，近期結(jié)果顯示，激活TLR3應(yīng)答不僅能在體外有效抑制MDV的復(fù)制，同時也能夠明顯抑制體內(nèi)MD腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。這為開發(fā)新型MDV疫苗以及抗腫瘤藥物提供了一定的參考價值和理論依據(jù)[43]。

病毒感染期間，其復(fù)制產(chǎn)物多在細(xì)胞漿中積聚，因此，RIG-I和MDA5誘導(dǎo)的應(yīng)答比在細(xì)胞內(nèi)體TLR3誘導(dǎo)的應(yīng)答更能持久和顯著。RIG-I特異性識別大多數(shù)單負(fù)鏈RNA病毒，其在復(fù)制期間產(chǎn)生大量短的5'ppp-dsRNA。這些病毒包括副粘病毒家族的新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）、正粘病毒科的流感病毒、彈狀病毒科的水皰性口炎病毒（Vesicular stomatitis virus，VSV）和狂犬病病毒（Rabies virus，RV）等。RIG-I還識別單正鏈RNA病毒，例如日本腦炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）。此外，還有一些DNA病毒也被RIG-I感知，如腺病毒和痘苗病毒，因?yàn)檫@些病毒在復(fù)制過程中通過Ⅲ型RNA聚合酶產(chǎn)生小的dsRNA。MDA5識別長鏈dsRNA，例如小核糖核酸病毒科的EMCV[44]。另一方面，RIG-I和MDA5都交叉檢測相同的病毒，如：呼腸孤病毒科的輪狀病毒（Rotavirus）[45]、經(jīng)典豬瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）等[46]。CSFV感染期間，一方面，TLR3感知復(fù)制中間體dsRNA[47-49]，誘導(dǎo)IFN-β基因的表達(dá)。另一方面，細(xì)胞漿中存在的病毒RNA通過RIG-I和MDA-5識別[50]。Dong等[51]發(fā)現(xiàn)CSFV通過RIG-I和MDA-5依賴的IRF-3和NF-κB途徑誘導(dǎo)I型IFN的表達(dá)。

6 了解dsRNA受體及其信號通路能夠改善抗病毒策略

dsRNA是細(xì)胞功能廣泛且有效的調(diào)節(jié)劑，其作用由dsRNA結(jié)合蛋白或受體介導(dǎo)，在相關(guān)病毒疾病的發(fā)現(xiàn)和治療中起重要作用。研究RNA受體，包括細(xì)胞內(nèi)定位、配體識別結(jié)合、結(jié)構(gòu)與功能、激活機(jī)制、細(xì)胞信號傳導(dǎo)途徑，以及不同RNA受體之間的相互作用，有助于理解病毒感染和有效應(yīng)對。首先，不同病毒RNA由不同RNA受體識別，并激活細(xì)胞信號和產(chǎn)生應(yīng)答反應(yīng)，在這種情況下，了解RNA受體對所識別的病毒種類變得至關(guān)重要。其次，不同受體感知配體的細(xì)胞種類和細(xì)胞內(nèi)定位不同，已知TLR3、TLR7、TLR8主要在巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞（dendritic cells，DC）中表達(dá)，并識別由細(xì)胞吞噬到達(dá)細(xì)胞內(nèi)體的病毒RNA，而RLRs（RIG-I，MDA5）普遍表達(dá)于細(xì)胞漿，感知細(xì)胞漿內(nèi)的病毒RNA，因此，將RNA受體刺激劑遞送進(jìn)細(xì)胞的途徑對于是否能夠激發(fā)更有效的免疫應(yīng)答尤為關(guān)鍵。比如，polyI:C直接加入細(xì)胞主要激發(fā)TLR3活化途徑，而通過轉(zhuǎn)染方式激發(fā)RIG-I和MDA5活化。第三，基于RNA受體的配體識別和激活機(jī)制，可以開發(fā)具有更高效力的小分子激動劑，直接用于抗病毒治療，或制作出有效的病毒疫苗佐劑。第四，針對TLRs、RLRs、NLRs相互作用，雖然目前信息不完整，但可以基于受體互作調(diào)節(jié)信息，考慮組合使用不同刺激劑，以達(dá)到最優(yōu)抗病毒效果[52]。

7 總結(jié)

本文描述了在識別病毒時起關(guān)鍵作用的dsRNA受體TLR3、RIG-I和MDA5的結(jié)構(gòu)、信號通路及抗病毒作用，旨在闡明這些不同類別dsRNA受體在識別配體和激發(fā)下游信號活性中的區(qū)別及關(guān)聯(lián)。迄今為止，已經(jīng)有很多關(guān)于TLR3和RLRs（RIG-I/MDA5）對病毒識別并誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的研究，但兩者在dsRNA識別結(jié)合配體、激活機(jī)制以及誘導(dǎo)細(xì)胞信號傳導(dǎo)途徑過程中是否相互促進(jìn)或抑制尚待進(jìn)一步研究。同樣，不同的病毒感染或感染的不同階段，TLR3和RLRs相互作用是否會發(fā)生變化？以及TLR3主要互作于RIG-I還是MDA5？RIG-I對TLR3的影響是否與MDA5對TLR3影響類似？隨著時間的推移和科技手段的進(jìn)步，人們對于天然免疫尤其是信號通路方面研究越來越深入。但RNA病毒種類繁多，尤其是不同種屬動物的RNA病毒，因而需要更加完善和深入的RNA受體免疫生物學(xué)理解和認(rèn)識。相信上述疑問的解決能夠給抗動物病毒免疫研究和疾病治療方面帶來重要啟發(fā)。