崔建坡 冶鵬娟 韓雪 李春麗

哮喘是兒童期常見的氣道慢性炎癥疾病，同時也是多基因遺傳病，其發(fā)病是由氣道炎癥細胞、氣道結構細胞、細胞組分等共同參與。哮喘是以慢性氣道炎癥和氣道高反應為為主要特征[1]。支氣管哮喘在兒童中很常見。在我國，哮喘患病率達到4%，其中兒童占總人數大約3%，且發(fā)病率在持續(xù)上升。哮喘患兒主要臨床特征為咳嗽、咳痰、呼吸困難等癥狀，反復發(fā)作，尤其在晨起和夜間較明顯[2]。支氣管哮喘主要病理機制是呼吸道重塑、呼吸道炎癥。有文獻顯示[3]改善巨噬細胞包吞作用可能能改善嗜酸性粒細胞哮喘炎癥。半乳糖凝集素-3(Galectin-3)是由巨噬細胞分泌的β-半乳糖苷結合凝集素，在胞吐過程中起調節(jié)作用，與炎癥反應反復發(fā)作相關[4]。維生素D參與抗炎、免疫調節(jié)、減輕呼吸道重塑等過程，有研究顯示[5]在大鼠顱骨細胞中，25(OH)D3可上調Galectin-3水平。本文擬檢測支氣管哮喘患兒血清25(OH)D3、Galectin-3水平，探討25(OH)D3與Galectin-3在支氣管哮喘患兒發(fā)病中的意義，為提高支氣管哮喘患兒治療提供新的思路。

資料與方法

一、一般資料

選取本院2017年10月～2018年10月門診收治支氣管哮喘患兒127例為觀察組，男70例，女57例；年齡3歲～12歲，平均年齡(7.24±3.63)歲，平均體重(20.72±6.36) kg。納入標準：符合2016年制定《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南(2016年版)》診斷標準[6]。排除標準：先天性心肺疾病患兒；呼吸道反復感染患兒；6個月內補充維生素D患兒；自身免疫缺陷患兒；肝腎功能異?；純?。選取本院同期體檢健康兒童127例為對照組，男62例，女65例；年齡3歲～12歲，平均年齡(7.94±3.08)歲，平均體重(21.05±6.94)kg。兩組兒童性別、年齡、體重，差異無統計學意義(χ2=1.009，t=1.657、0.395，P=0.315、0.099、0.693)。兩組兒童父母均知情同意，本研究通過本院倫理委員會批準，符合《世界醫(yī)學協會赫爾辛基宣言》。

二、主要試劑及儀器

血清總IgE(TIgE)ELISA試劑盒，上海江萊生物科技有限公司；Galectin-3 ELISA試劑盒(DGAL30)，美國R&D公司；1200SR全自動化學發(fā)光免疫分析儀及25(OH)D3定量測定試劑盒，美國雅培公司；Master Screen 肺功能儀，德國Jaeger公司。

三、血清Galectin-3、25(OH)D3、血清總IgE水平測定

所有受試者在就診當日清晨空腹抽取靜脈血4 mL，靜置40min，4℃，3500r/min，離心10min，留上清，分裝，保存于-80℃?zhèn)溆谩２捎萌詣踊瘜W發(fā)光免疫分析儀及配套試劑盒，測定25(OH)D3水平，根據維生素D缺乏和防治指南，將25(OH)D3水平分為以下三組，(1)25(OH)D3缺乏組31例，25(OH)D3<20 ng/mL；(2)25(OH)D3不足組68例，20 ng/mL ≤25(OH)D3≤ 30 ng/mL；(3)25(OH)D3正常組28例，25(OH)D3> 30 ng/mL[7]。采用酶聯免疫法測定Galectin-3、總免疫球蛋白(IgE)水平，分別用Galectin-3、血清總IgE(TIgE) ELISA試劑盒。

四、肺功能檢測

應用Master Screen 肺功能儀對所有受試者進行肺功能檢查，每位受試者測定3次以上，保留最佳3次數值，取平均數。主要測試參數為：第一秒用力呼氣容積(forced expiratory volume in one second，FEV1)、一秒用力呼氣量占用力肺活量比值(FEV1/FVC%)、最大呼氣50%流量(Maximal expiratory 50% flow，MEF50)，最大呼氣25%流量(Maximal expiratory 50% flow，MEF25)。肺功能檢查于抽血檢測Galectin-3、25(OH)D3、血清總IgE之前進行。

五、統計學方法

結 果

一、觀察組和對照組血清Galectin-3水平與25(OH)D3水平比較

與對照組相比，觀察組患兒血清Galectin-3水平較高(P<0.05)，25(OH)D3水平、肺功能參數FEV1、FEV1/FVC%、MEF25、MEF50較低(P<0.05)(見表1，2)。

表1 觀察組和對照組血清Galectin-3水平與25(OH)D水平比較

表2 觀察組和對照組肺功能檢測情況

二、不同血清25(OH)D3水平支氣管哮喘患兒血清Galectin-3水平25(OH)D3、TIgE水平比較

與25(OH)D3正常組相比，25(OH)D3不足組、25(OH)D3缺乏組患兒血清Galectin-3、TIgE水平較高(P<0.05)，25(OH)D3水平較低(P<0.05)；與25(OH)D3不足組相比，25(OH)D3缺乏組患兒血清Galectin-3、TIgE水平較高(P<0.05)，25(OH)D3水平較低(P<0.05)(見表3)。

表3 不同血清25(OH)D3水平支氣管哮喘患兒血清指標水平比較

三、不同血清25(OH)D3水平支氣管哮喘患兒肺功能檢測情況

與25(OH)D3正常組相比，25(OH)D3不足組、25(OH)D3缺乏組患兒肺功能參數MEF25、MEF50較低(P<0.05)；肺功能參數FEV1、FEV1/FVC%無顯著差異(P>0.05)；與25(OH)D3不足組相比，25(OH)D3缺乏組患兒肺功能參數MEF25、MEF50較低(P<0.05)(見表4)。

表4 不同血清25(OH)D3水平患兒肺功能檢測情況

四、不同血清25(OH)D3水平支氣管哮喘患兒血清Galectin-3水平與25(OH)D3水平與血清TIgE和肺功能相關性

Pearson相關分析結果顯示，血清Galectin-3水平與血清TIgE水平呈正相關(P<0.05)，與肺功能參數MEF25、MEF50呈負相關(P<0.05)，血清25(OH)D3水平與血清TIgE水平呈負相關(P<0.05)，與肺功能參數MEF25、MEF50呈正相關(P<0.05)(見表5)。

表5 血清Galectin-3水平、25(OH)D3水平與血清TIgE和肺功能相關性

討 論

近年來，兒童支氣管哮喘患病率在全球范圍內逐年增長。維生素D是脂溶性維生素，具有促進調節(jié)鈣、磷代謝和骨代謝的作用，還有調節(jié)免疫和抗炎等作用，在哮喘發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮著重要作用[8]。有文獻提示[9]，維生素D缺乏癥與哮喘、支氣管擴張、囊性纖維化、支氣管炎、阻塞性肺疾病發(fā)病相關。Esfandiar等[10]發(fā)現在維生素D缺乏兒童患哮喘的風險是維生素D正常兒童的3～16倍，維生素D缺乏增加了兒童哮喘的風險。Uysalol等[11]研究報道哮喘患兒血清25(OH)D3水平顯著低于對照組。參與哮喘的呼吸道炎癥細胞包括嗜酸性粒細胞、巨噬細胞等，他們參與哮喘炎癥反應。Galectin-3通過嗜酸性粒細胞與呼吸道上皮細胞緊密黏合，釋放炎癥因子，促進哮喘發(fā)生。Erriah等[12]發(fā)現哮喘巨噬細胞吞噬作用降低，在哮喘患兒中，Galectin-3能增加巨噬細胞吞噬作用。Feng等[13]發(fā)現Galectin-3在急性加重期慢性阻塞性肺疾病患者血清水平顯著高于恢復期慢性阻塞性肺疾病患者，Galectin-3可能影響慢性阻塞性肺疾病患者炎癥反應。Agoston-Coldea等[14]報道了慢性阻塞性肺疾病患者血清Galectin-3水平顯著高于健康者，Galectin-3可能影響慢性阻塞性肺疾病疾病發(fā)生。本研究發(fā)現支氣管哮喘患兒血清25(OH)D3水平、肺功能參數FEV1、FEV1/FVC%、MEF25、MEF50顯著低于對照組，血清Galectin-3水平顯著高于對照組，提示25(OH)D3和Galectin-3可能參與了支氣管哮喘的發(fā)生，25(OH)D3和Galectin-3可能影響支氣管哮喘患兒肺功能受損。蔣鯤等[5]發(fā)現，25(OH)D3通過有減輕呼吸道重塑和呼吸道炎癥的作用。25(OH)D3缺乏組、25(OH)D3不足組血清Galectin-3水平、血清TIgE水平均顯著高于對照組，血清25(OH)D3水平顯著低于對照組，與本研究結果一致。Kang等[15]發(fā)現哮喘患者血清TIgE水平顯著較高。本研究發(fā)現與25(OH)D3正常組相比，25(OH)D3不足組、25(OH)D3缺乏組患兒血清Galectin-3、TIgE水平顯著較高；與25(OH)D3不足組相比，25(OH)D3缺乏組患兒血清Galectin-3、TIgE水平顯著較高，提示25(OH)D3、Galectin-3、TIgE可能皆參與支氣管患兒炎性反應。

肺功能參數是評估哮喘病情重要依據之一。曾晶等[16]發(fā)現支氣管哮喘患兒血清25(OH)D3水平與大氣道通氣指標FEV1、FEV1/FVC%無相關性，但與小氣道指標(MEF25、MEF50)呈正相關。張惠琴等[17]發(fā)現肺功能參數MEF25、MEF50與哮喘嚴重程度相關。馮榮學[18]發(fā)現血清25(OH)D3與總血清TIgE水平呈負相關。本研究發(fā)現與25(OH)D3正常組相比，25(OH)D3不足組、25(OH)D3缺乏組患兒肺功能參數MEF25、MEF50較低，肺功能參數FEV1、FEV1/FVC無顯著差異，與25(OH)D3不足組相比，25(OH)D3缺乏組患兒肺功能參數MEF25、MEF50較低，提示25(OH)D3水平變化可能影響支氣管哮喘患兒肺功能。進一步Pearson相關分析結果顯示，血清Galectin-3水平與血清TIgE水平呈正相關，血清25(OH)D3水平與血清TIgE水平呈負相關，提示在支氣管哮喘患兒中，Galectin-3、25(OH)D3與通過影響TIgE，影響疾病發(fā)生。血清Galectin-3水平與肺功能參數MEF25、MEF50呈負相關，與血清25(OH)D3水平肺功能參數MEF25、MEF50呈正相關，提示Galectin-3、25(OH)D3水平變化可能與支氣管哮喘兒小氣道受損有關。

綜上所述，支氣管哮喘患兒Galectin-3水平上調，25(OH)D3水平下調，二者皆與肺功能小氣道參數相關，可能為支氣管哮喘患兒治療提供新思路。但本研究受研究數量所限，Galectin-3與25(OH)D3在臨床的價值需要進一步探討。