王玉龍,張存政,劉鳳權(quán)

(1.江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與營(yíng)養(yǎng)研究所,江蘇 南京 210014;2.江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所,江蘇 南京 210014)

汞(Hg)作為典型的高毒性重金屬,常以有機(jī)態(tài)(甲基汞:CH3Hg+)和無(wú)機(jī)態(tài)(Hg2+)形式存在,可損傷中樞神經(jīng)系統(tǒng)和腎臟,引起共濟(jì)失調(diào)、震顫、聽(tīng)力和視力障礙等病癥[1]。人為排放(如化石燃料燃燒、氯堿工業(yè))和自然排放(如火山噴發(fā)、地?zé)?是Hg污染的主要來(lái)源,經(jīng)過(guò)大氣循環(huán)和水生態(tài)系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)、富集,最終通過(guò)食物鏈危害人類健康[2]。其高毒性突出了Hg微量分析的重要性,尤其對(duì)農(nóng)業(yè)和食品工業(yè)。

基于抗原抗體特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫檢測(cè)方法具有高效、快速和低成本的優(yōu)點(diǎn),可作為傳統(tǒng)儀器檢測(cè)[如原子吸收光譜法(AAS)和電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)]的輔助工具,用于樣品的高通量篩查[3-5]。理論上免疫檢測(cè)技術(shù)適用于任何能產(chǎn)生合適抗體的靶標(biāo)物分析。金屬離子的抗體制備廣義上屬于小分子半抗原的抗體范疇,但嚴(yán)格意義上來(lái)說(shuō),其獨(dú)特的半抗原結(jié)構(gòu)使其成為一類特殊代表。前期研究表明,誘導(dǎo)小分子抗體的半抗原通常含有芳香環(huán)或帶電荷的極性區(qū)域[6]。金屬離子結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,同時(shí)具有電荷,在機(jī)體內(nèi)與生物分子發(fā)生強(qiáng)烈不可逆反應(yīng)。一般情況下,金屬離子本身不能作為完整的抗原決定簇而引起免疫反應(yīng),通常需與一些來(lái)自其他配體上的附加基團(tuán)形成抗原決定簇[7-8]。螯合劑(chelator)是最為常用的一類配體,通過(guò)與金屬離子配位結(jié)合,形成緊密穩(wěn)定的具有完整抗原決定簇的復(fù)合物,同時(shí)大大減弱帶電金屬離子與生物分子的反應(yīng)能力[9-10]。而Wylie等[11]和Wang等[12]利用一類含有—SH結(jié)構(gòu)的配體化合物(如谷胱甘肽、6-巰基煙酸),其誘導(dǎo)的抗體能識(shí)別單獨(dú)的Hg2+,這大大簡(jiǎn)化金屬-螯合劑復(fù)合物抗體只結(jié)合金屬-螯合物,對(duì)單獨(dú)金屬離子不識(shí)別,從而需添加螯合劑的繁瑣樣品前處理過(guò)程。更重要的是,該類型Hg2+抗體克服了金屬-螯合劑抗體容易與其他金屬離子存在交叉反應(yīng)的缺陷,對(duì)Hg2+特異性較高。這類抗體似乎超出了金屬誘導(dǎo)特定抗體形成所需的抗原有效尺寸和結(jié)構(gòu)要求范疇。因此基于該類特殊識(shí)別Hg2+以及識(shí)別傳統(tǒng)Hg-螯合劑復(fù)合物的Hg抗體,本文綜述了關(guān)于重金屬Hg特異性抗體的制備(半抗原結(jié)構(gòu))、抗體-抗原識(shí)別機(jī)制以及免疫檢測(cè)方法研究進(jìn)展。

1 Hg半抗原及抗體制備

利用人工金屬半抗原制備金屬離子抗體最早可追溯到1985年,Reardan等[13]報(bào)道In3+-EDTA抗體對(duì)不同金屬螯合物識(shí)別能力的研究。此后,多種基于螯合劑(EDTA或DTPA)的金屬離子抗體被研究報(bào)道[8,14-17],其中包含Hg2+-EDTA和Hg2+-DTPA單克隆抗體[18-20]。Hg2+與此類螯合劑配位結(jié)合,形成1個(gè)類似籠狀結(jié)構(gòu),構(gòu)成具有完整抗原決定簇的金屬-螯合劑復(fù)合物(metal-chelate complex)(圖1)。此外,該類螯合劑通常具有1個(gè)能夠與載體蛋白質(zhì)形成穩(wěn)定共價(jià)鍵的活性基團(tuán)(常稱為雙功能螯合劑,如Aminobenzyl-EDTA、ITCBE、SCN-Bn-CHX-A”-DTPA等),形成具有免疫原性的金屬-螯合劑-載體蛋白復(fù)合物。

不同于金屬-螯合劑半抗原中金屬離子被包裹在螯合化合物分子內(nèi)部,一類特定的含巰基(—SH)化合物,如谷胱甘肽(GSH)和6-巰基煙酸(MNA),能最大化暴露金屬離子,被用來(lái)制備Hg半抗原[11-12]。Hg2+和—SH具有極高的親和力(解離常數(shù)低至10-42),使制備的Hg半抗原在生理?xiàng)l件下依然穩(wěn)定。其中谷胱甘肽是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成的三肽,半胱氨酸殘基上的—SH,在適當(dāng)?shù)臈l件下易與作為單價(jià)配體的汞離子緊密結(jié)合。此外,MNA中含有1個(gè)吡啶環(huán)和1個(gè)巰基,吡啶環(huán)具有較強(qiáng)剛性,有望大大增強(qiáng)抗原的免疫原性。

另外,一類基于分子內(nèi)羥汞化反應(yīng)合成的有機(jī)汞半抗原,其結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定[21](表1中Organomercury hapten 1)。水溶性的半抗原很容易通過(guò)其氨基與蛋白質(zhì)載體共價(jià)結(jié)合,利用該結(jié)構(gòu)制備的抗體既能與汞的有機(jī)態(tài)(CH3Hg+)結(jié)合,又能與其無(wú)機(jī)態(tài)(Hg2+)結(jié)合。

表1 汞抗體制備所用螯合劑或半抗原

2 Hg抗原-抗體識(shí)別機(jī)制

抗原-抗體相互作用或結(jié)合特性認(rèn)知對(duì)基于抗體關(guān)聯(lián)體系(如免疫分析、免疫治療和診斷)至關(guān)重要,尤其針對(duì)金屬半抗原這樣一類小分子半抗原的特殊子集。此外,Hg2+-GSH或Hg2+-MNA抗體獨(dú)特的識(shí)別Hg2+特性,超出了金屬誘導(dǎo)特定抗體形成的分子大小和結(jié)構(gòu)要求范疇。探究該類Hg抗原-抗體的識(shí)別機(jī)制,有助于指導(dǎo)其他類似性質(zhì)金屬的抗體制備。

2.1 結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)

結(jié)構(gòu)互補(bǔ)是任何一種抗原-抗體識(shí)別的基礎(chǔ)理論,金屬離子與螯合劑結(jié)合,形成特定的復(fù)合物構(gòu)型,如金屬-EDTA六配位結(jié)構(gòu)和金屬-DTPA八配位結(jié)構(gòu)。在這種情況下,免疫系統(tǒng)似乎更傾向于對(duì)特定的金屬-螯合物產(chǎn)生的復(fù)合體構(gòu)象作出應(yīng)答,也就是說(shuō),金屬-螯合劑結(jié)構(gòu)決定了抗體的親合力和特異性。其中,改變金屬離子或螯合劑種類和結(jié)構(gòu)均能導(dǎo)致金屬-螯合劑抗體識(shí)別性能的差異。如在EDTA結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上引入環(huán)己基環(huán)(反式-1,2-環(huán)己二胺四乙酸,CDTA),使得CDTA化合物結(jié)構(gòu)中的氮變得更具堿性,這有助于增加氮-金屬鍵的結(jié)合強(qiáng)度以及增加金屬螯合物的穩(wěn)定性,導(dǎo)致抗Cd2+-EDTA抗體(E5)與Cd2+-CDTA的結(jié)合比Cd2+-EDTA復(fù)合物更緊密[22]。抗Pb2+-DTPA單克隆抗體(2C12)在半抗原連接區(qū)引入芐基或在DTPA結(jié)構(gòu)上引入剛性亞環(huán)己基,抗體的親合力分別提高30倍和9 100倍[23]。此外,抗Cd2+-EDTA抗體(2A81G5),其親合力與二價(jià)金屬離子的大小有很好的相關(guān)性[24]。進(jìn)一步研究顯示,不同金屬離子大小對(duì)抗體親和力的影響似乎不僅與離子半徑有關(guān),而且還通過(guò)金屬離子對(duì)整體金屬-螯合劑復(fù)合體構(gòu)象產(chǎn)生影響[22]。盡管對(duì)于目前已報(bào)道的Hg2+-EDTA和Hg2+-DTPA抗體的識(shí)別機(jī)制并無(wú)研究,但對(duì)其他金屬-螯合劑抗體(如E5和2A81G5)的結(jié)合特性規(guī)律研究,可為該類Hg2+-螯合劑抗體提供強(qiáng)有力的借鑒。

大多數(shù)情況下,金屬-螯合劑抗體除了對(duì)目標(biāo)金屬離子具有很強(qiáng)的親合力外,或多或少存在與其他金屬-螯合劑或者單獨(dú)螯合劑結(jié)構(gòu)結(jié)合的情況,這也證明了該類抗體通過(guò)有限的分子接觸識(shí)別金屬-螯合劑半抗原,即抗體與螯合物相互作用的同時(shí),也存在抗體與金屬離子的直接作用[25-26]。換句話說(shuō),這類抗體主要針對(duì)金屬-螯合劑復(fù)合物整體,而不僅僅是金屬離子本身。

Hg2+-GSH和Hg2+-MNA抗體能識(shí)別單獨(dú)的Hg2+,這可能與該類配合體和Hg2+結(jié)合的特殊方式有關(guān)。Hg2+-螯合劑結(jié)構(gòu)中,Hg2+與螯合劑配位結(jié)合,其被掩蓋在螯合劑分子中,形成1個(gè)類似籠狀結(jié)構(gòu);而Hg2+-GSH或Hg2+-MNA,Hg2+只單獨(dú)與—SH發(fā)生作用,這種簡(jiǎn)單結(jié)合能最大化暴露Hg2+,增加Hg2+被免疫系統(tǒng)視為1個(gè)單獨(dú)表位的可能性,而不僅僅作為1個(gè)較大的抗原決定簇的組成部分[11]。這類特殊抗體似乎顛覆了傳統(tǒng)金屬誘導(dǎo)特定抗體形成的分子大小和結(jié)構(gòu)要求的認(rèn)知。但需要說(shuō)明的是,該類情況并非無(wú)先例,在伴有高銅血癥和高鈣血癥的骨髓瘤患者中,發(fā)現(xiàn)了能與銅和鈣結(jié)合的抗體[27]。此外,在骨科患者植入金屬裝置后,也發(fā)現(xiàn)存在此類抗體[28]。這些研究表明,在適當(dāng)?shù)臈l件下,金屬離子可以直接作為誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生獨(dú)立表位。

2.2 分子基礎(chǔ)

分子生物學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)的快速發(fā)展,使得進(jìn)一步探究金屬抗原-抗體分子識(shí)別機(jī)制成為可能。目前對(duì)于Hg2+-EDTA和Hg2+-DTPA抗體識(shí)別機(jī)制缺乏研究,但我們依然可以從前人對(duì)其他金屬-螯合劑抗體的分子識(shí)別機(jī)制研究得到參考依據(jù)。一項(xiàng)對(duì)In3+-EDTA抗體(CHA255)的分子特征研究顯示,在抗體重鏈互補(bǔ)區(qū)(CDR3)存在1個(gè)組氨酸殘基,其直接與In3+配位結(jié)合[26]。然而,在相應(yīng)的Fe3+-EDTA復(fù)合物中并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)這種組氨酸配位,這些解釋了CHA255抗體對(duì)Fe3+-EDTA親和識(shí)別較In3+-EDTA下降1個(gè)數(shù)量級(jí)的問(wèn)題。此外,In3+-EDTA半抗原與抗體蛋白質(zhì)或包埋的水分子之間的氫鍵、范德華力和離子對(duì)也參與該類金屬抗體-抗原分子結(jié)合。也就是說(shuō),若1種金屬-螯合劑抗體可以為特定的金屬離子提供高度的特異性,就可以通過(guò)抗原結(jié)合位點(diǎn)上的特定氨基酸殘基與金屬離子直接作用[29]。

對(duì)Hg2+-GSH抗體(4A10)可變區(qū)測(cè)序發(fā)現(xiàn),其高變區(qū)含有1個(gè)不配對(duì)的半胱氨酸殘基,而該類不配對(duì)殘基在鼠類抗體中是極為罕見(jiàn)的[6]。當(dāng)對(duì)該半胱氨酸定點(diǎn)突變?yōu)槔野彼峄蚪z氨酸時(shí),抗體喪失對(duì)Hg2+的結(jié)合能力。此外,在對(duì)2種與4A10抗體含有相同半胱氨酸殘基位置的特異性流感抗體進(jìn)行突變研究時(shí)發(fā)現(xiàn),有1種抗體能與Hg2+反應(yīng),雖然結(jié)合力沒(méi)有4A10強(qiáng)烈。這些結(jié)果表明,可變區(qū)中不配對(duì)的半胱氨酸殘基是Hg2+結(jié)合的絕對(duì)必要條件;除此之外,其他結(jié)構(gòu)特征對(duì)于為Hg2+結(jié)合創(chuàng)造合適的環(huán)境也非常重要,這進(jìn)一步證明金屬抗體與金屬離子可以直接作用。

3 Hg免疫分析

Hg免疫分析通?；诟?jìng)爭(zhēng)模式,Hg2+-螯合劑或Hg2+只含有單個(gè)抗原表位,其只能被單種抗體識(shí)別,需要競(jìng)爭(zhēng)物(competitor)和游離的Hg2+-螯合劑或Hg2+共同競(jìng)爭(zhēng)抗體有限的抗原結(jié)合位點(diǎn)(圖2)。對(duì)于基于傳統(tǒng)Hg2+-EDTA或Hg2+-DTPA抗體的免疫檢測(cè)體系來(lái)說(shuō),樣品中添加過(guò)量的螯合劑是必不可少的操作步驟,螯合劑結(jié)合樣品中游離的目標(biāo)Hg2+,形成Hg2+-螯合劑復(fù)合物,因?yàn)樵擃惪贵w只表現(xiàn)出對(duì)復(fù)合物強(qiáng)烈的結(jié)合能力。而Hg2+-GSH或Hg2+-MNA抗體,因其能識(shí)別單獨(dú)的Hg2+,無(wú)需添加配體化合物,大大簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序。多種不同信號(hào)轉(zhuǎn)化的檢測(cè)體系(經(jīng)典ELISA、免疫層析試紙條、微流控免疫分析、電致發(fā)光免疫分析和流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光免疫分析等)和樣品處理技術(shù)(固相萃取、磁珠分離等)被用于Hg2+和有機(jī)汞[21]的快速免疫分析中,檢測(cè)對(duì)象覆蓋水樣、奶制品、農(nóng)產(chǎn)品和化妝品等典型Hg2+潛在高殘留樣品(表2)。

表2 Hg2+免疫分析

3.1 酶聯(lián)免疫吸附分析(ELISA)

ELISA實(shí)質(zhì)為一項(xiàng)基于固相微孔板的異相免疫分析,主要通過(guò)酶催化實(shí)現(xiàn)信號(hào)放大檢測(cè)[38-40]。辣根過(guò)氧化物酶-3,3′,5,5′-四甲基聯(lián)苯胺(HRP-TMB)是最為常用的酶底物體系,肉眼觀測(cè)溶液顏色的變化(藍(lán)色深淺)或測(cè)定吸光度(測(cè)定硫酸終止后溶液D450)即可實(shí)現(xiàn)定性或定量檢測(cè)。已報(bào)道的ELISA對(duì)于Hg2+的最低檢測(cè)限均低至ng·mL-1[12,19,30],非常適合大批量的樣品篩查。此外,該類方法與儀器檢測(cè)方法結(jié)果比較一致,在處理基質(zhì)影響較低或前處理較簡(jiǎn)單的樣品時(shí),甚至可以作為儀器方法的代替品。

3.2 免疫層析試紙條(ICTS)

ICTS最典型的代表是早早孕檢測(cè)試紙,其特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單,檢測(cè)時(shí)間短(10～15 min),所需樣品體積小(100～200 μL)以及結(jié)果可視化(通過(guò)肉眼即可判斷),能夠用于現(xiàn)場(chǎng)實(shí)時(shí)分析[41-43]。目前對(duì)于Hg2+開(kāi)發(fā)出以膠體金為示蹤物的傳統(tǒng)ICTS或者以免疫層析為平臺(tái)結(jié)合化學(xué)發(fā)光、電化學(xué)檢測(cè)和表面增強(qiáng)拉曼散射等分析手段的多種高靈敏檢測(cè)系統(tǒng)[31-34]。膠體金ICTS可根據(jù)不同樣品中Hg2+的最大殘留限量(MRL)設(shè)定其檢測(cè)閾值(Cut-off),通過(guò)肉眼判斷消線與否,實(shí)現(xiàn)Hg2+現(xiàn)場(chǎng)原位分析。

3.3 微流控免疫分析(MFIA)

Date等[35]將微流控免疫分析和固相萃取(SPE)結(jié)合,開(kāi)發(fā)出一種小型、集成和自動(dòng)化的Hg2+免疫快速檢測(cè)裝置。SPE結(jié)合免疫測(cè)定已被證實(shí)為一種低成本、高效益的檢測(cè)系統(tǒng),在對(duì)環(huán)境樣品中的農(nóng)藥免疫分析中,具有去除多種農(nóng)藥交叉反應(yīng)雜質(zhì)的功能[44-45]。微流控免疫分析具有高度的集成和自動(dòng)化,并且裝置小型化,有助于降低檢測(cè)成本[46-47]。該檢測(cè)系統(tǒng)能在10 min內(nèi)產(chǎn)生結(jié)果,對(duì)飲用水中的Hg2+最低檢測(cè)限達(dá)0.83 ng·mL-1,遠(yuǎn)低于美國(guó)環(huán)境保護(hù)署(EPA)規(guī)定的飲用水最高Hg2+含量標(biāo)準(zhǔn)(2 ng·mL-1)。

3.4 電致發(fā)光免疫分析(ECLIA)

材料科學(xué)的發(fā)展,特別是基于納米材料的光學(xué)探針體系被用于物質(zhì)定量分析中。其中量子點(diǎn)(quantum dot)作為一類新的發(fā)光體,在提升電致發(fā)光性能的同時(shí),又可通過(guò)不同生物分子的功能化,為分析物的超靈敏定量檢測(cè)提供優(yōu)異的平臺(tái)[48-49]。ECLIA對(duì)Hg2+的檢測(cè)限達(dá)到6.2 pg·mL-1[36]。

3.5 流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光免疫分析(FI-CLIA)

FI-CLIA是流動(dòng)注射分析與化學(xué)發(fā)光分析聯(lián)用的一種方法。流動(dòng)注射分析法采用自動(dòng)化進(jìn)樣,操作方便并且不受時(shí)間及外界條件影響,可以彌補(bǔ)化學(xué)發(fā)光分析法本身依賴于時(shí)間并受各種化學(xué)和物理參數(shù)的影響,導(dǎo)致選擇性與重現(xiàn)性較差的缺陷[50-51]。在Hg2+的FI-CLIA中,具有較大比表面積的樹(shù)脂微球被用來(lái)作為固相載體吸附更多的蛋白競(jìng)爭(zhēng)復(fù)合物,以提升檢測(cè)靈敏度[37]。此外,HRP催化的Luminol-PIP-H2O2發(fā)光體系保證了穩(wěn)定強(qiáng)烈的光學(xué)信號(hào)。

4 總結(jié)與展望

對(duì)Hg的免疫檢測(cè)至今已發(fā)展約30年,多種基于Hg2+-螯合劑、Hg2+-GSH或Hg2+-MNA的抗體(多克隆和單克隆抗體)被研究報(bào)道,識(shí)別Hg的形態(tài)主要為Hg2+,但也存在部分抗體識(shí)別有機(jī)汞。其中Hg2+-GSH或Hg2+-MNA抗體表現(xiàn)出區(qū)別于傳統(tǒng)金屬-螯合劑抗體只識(shí)別金屬-螯合劑復(fù)合物的特點(diǎn),其能與單獨(dú)的Hg2+結(jié)合。該類抗體的開(kāi)發(fā)應(yīng)用,理論上證實(shí)在特定情況下,金屬離子可以作為1個(gè)獨(dú)立表位被免疫系統(tǒng)識(shí)別;檢測(cè)方法應(yīng)用上則避免了傳統(tǒng)金屬-螯合劑抗體需加入螯合劑的樣品前處理過(guò)程,有助于檢測(cè)方法的簡(jiǎn)化。

對(duì)于Hg2+的免疫檢測(cè),與其他有害物質(zhì)快速檢測(cè)有著相同的趨勢(shì),即要求檢測(cè)系統(tǒng)更加敏感、簡(jiǎn)單和便攜,但仍然存在著巨大挑戰(zhàn)。其中,非靶標(biāo)金屬離子對(duì)基于金屬-螯合劑抗體免疫檢測(cè)的干擾是一個(gè)共性問(wèn)題。這一點(diǎn)在Hg2+-螯合劑抗體免疫檢測(cè)系統(tǒng)中也依然存在,特別是當(dāng)真實(shí)樣品中含有中、高濃度的非靶標(biāo)金屬離子時(shí),會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的假陽(yáng)性干擾。提高Hg2+-螯合劑抗體對(duì)目標(biāo)Hg2+的特異性結(jié)合能力,可以降低其他金屬離子的交叉反應(yīng)。通過(guò)合理的金屬半抗原設(shè)計(jì)(如計(jì)算機(jī)輔助分子建模技術(shù)),可以誘導(dǎo)產(chǎn)生親合力更高的抗體。此外,抗體工程化改造(如基于噬菌體展示抗體庫(kù)的體外親合成熟)可提升抗體的識(shí)別性能。無(wú)論是指導(dǎo)半抗原設(shè)計(jì),還是抗體改造,對(duì)抗體-抗原識(shí)別機(jī)制的解析是獲取高性能抗體的理論基礎(chǔ),目前對(duì)于Hg-螯合劑抗體結(jié)合特性的研究急需加強(qiáng)。此外,對(duì)于新型Hg2+-GSH和Hg2+-MNA抗體的分子基礎(chǔ)進(jìn)一步研究,為制備其他具有類似性能的金屬離子抗體意義重大。

免疫分析技術(shù)發(fā)展迅速,尤其是新興納米材料的引入,使得檢測(cè)方法的敏感性有大幅提升。但值得注意的是,經(jīng)典的ELISA依然是Hg2+實(shí)際應(yīng)用快速檢測(cè)的主要技術(shù)。此外,免疫層析試紙條在Hg2+現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)中顯示出獨(dú)特優(yōu)勢(shì),特別是對(duì)于溶液樣品。目前對(duì)于水樣品中Hg的免疫檢測(cè)研究較多,需加強(qiáng)對(duì)復(fù)雜樣品Hg檢測(cè)的研究。固相萃取、磁珠分離等樣品前處理技術(shù)[20],可大大去除復(fù)雜樣品基質(zhì)干擾,提升檢測(cè)性能。提高免疫分析方法的穩(wěn)定性以及經(jīng)濟(jì)實(shí)用性,構(gòu)建能滿足復(fù)雜基質(zhì)中Hg快速篩查需求的產(chǎn)品是Hg免疫檢測(cè)研究的最終目標(biāo)。

Hg抗體目前大多數(shù)為傳統(tǒng)抗體,納米抗體(一種源于駝?lì)悇?dòng)物中經(jīng)人工重組表達(dá)其重鏈可變區(qū)VHH片段獲得的單域重鏈抗體)的興起,無(wú)論是其易于基因操作(比如信號(hào)標(biāo)簽融合插入),還是其易于保存(質(zhì)粒存儲(chǔ))等特點(diǎn),似乎都為建立穩(wěn)定、簡(jiǎn)便的Hg免疫分析提供借鑒,這一點(diǎn)對(duì)于能夠長(zhǎng)期提供穩(wěn)定抗體試劑產(chǎn)品尤其重要。此外,納米抗體獨(dú)特的結(jié)構(gòu)也為高性能Hg抗體的篩選提供了可能。