王東輝，曹麗萍，湯彤國(guó)

（1.張掖市甘州區(qū)畜牧獸醫(yī)工作站，甘肅 張掖 734000；2.甘肅省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 蘭州 730046；3.張掖市甘州區(qū)黨寨鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，甘肅 張掖 734000）

1 材料方法

2019年9月30日-10月22日，選擇張掖市甘州區(qū)農(nóng)區(qū)某鄉(xiāng)鎮(zhèn)1戶(hù)舍飼養(yǎng)羊戶(hù)飼養(yǎng)的1群綿羊，除去種公羊和出生3月齡以?xún)?nèi)的羔羊，將剩余的53只母羊作為試驗(yàn)羊只；試驗(yàn)所用3種疫苗均為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部批準(zhǔn)的正規(guī)企業(yè)生產(chǎn)，其中：小反芻獸疫-山羊痘二聯(lián)活疫苗(Clone9株+AV41株)批號(hào)c0919013，山羊痘活疫苗批號(hào)19115009，小反芻獸疫疫苗批號(hào)2018023-1；試驗(yàn)所用羊痘間接ELISA抗體檢測(cè)試劑盒由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，批號(hào)為20190919119，小反芻獸疫病毒阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒由青島立見(jiàn)診斷技術(shù)發(fā)展中心生產(chǎn)，批號(hào)020171907；試驗(yàn)所用酶標(biāo)儀為深圳雷杜公司生產(chǎn)，型號(hào)RT6100。

將試驗(yàn)羊只隨機(jī)分為4組。試驗(yàn)1組（小反芻獸疫-山羊痘二聯(lián)活疫苗免疫組），分配試驗(yàn)羊20只；對(duì)照1組（山羊痘活疫苗免疫組），分配試驗(yàn)羊15只；對(duì)照2組（小反芻獸疫疫苗免疫組），分配試驗(yàn)羊15只；試驗(yàn)2組（山羊痘活疫苗與小反芻獸疫疫苗同時(shí)分點(diǎn)免疫組），剩余的試驗(yàn)羊3只，用油漆對(duì)各組試驗(yàn)羊做了明顯的區(qū)分標(biāo)記，對(duì)各組分別按照各種疫苗說(shuō)明書(shū)規(guī)定劑量和部位進(jìn)行免疫注射。

表1 小反芻獸疫-山羊痘二聯(lián)苗免疫效果實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

按照試驗(yàn)指標(biāo)設(shè)置了試驗(yàn)期羊只采食、精神狀態(tài)及發(fā)病死亡等不良反應(yīng)記錄表，由畜主每天記錄，以取得安全性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)；免疫前和免疫后第8 d、15 d、22 d分別對(duì)各組羊只采血，分離出羊血清后統(tǒng)一編號(hào)集中保存，用于實(shí)驗(yàn)室抗體檢測(cè)，以取得免疫性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)。

第8 d、第15 d試驗(yàn)1組羊痘和小反芻獸疫抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)羊只增加數(shù)量與對(duì)照1、對(duì)照2組增加數(shù)量的差異顯著性采用生物統(tǒng)計(jì)均數(shù)差異性T檢驗(yàn)方法進(jìn)行檢驗(yàn)。

2 試驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)畜主記錄，在整個(gè)試驗(yàn)期，試驗(yàn)羊群均未表現(xiàn)出食欲減退、免疫過(guò)敏、流產(chǎn)和死亡等不良反應(yīng)。

在實(shí)驗(yàn)室對(duì)免疫前和免疫后第8 d、15 d、22 d各組羊只采集的血清，應(yīng)用酶標(biāo)儀按照羊痘間接ELISA抗體檢測(cè)試劑盒和小反芻獸疫阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法進(jìn)行免疫抗體效價(jià)檢測(cè)，并對(duì)第8 d、第15 d試驗(yàn)1組羊痘和小反芻獸疫抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)羊只增加量與對(duì)照1、對(duì)照2組增加量的顯著性采用生物統(tǒng)計(jì)均數(shù)差異性T檢驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表1。

3 討論分析

在試驗(yàn)過(guò)程中，試驗(yàn)羊群未出現(xiàn)過(guò)敏、流產(chǎn)和死亡，也沒(méi)有其他不良反應(yīng)，表明該二聯(lián)苗具有較好的安全性。

從實(shí)驗(yàn)室抗體檢測(cè)結(jié)果看，該二聯(lián)苗在注射后第8 d產(chǎn)生免疫抗體，其中：羊痘抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)個(gè)體增加數(shù)與對(duì)照1組相比無(wú)顯著差異，小反芻獸疫抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)個(gè)體增加數(shù)與對(duì)照2組相比差異極顯著；第15 d抗體水平達(dá)到高峰，二聯(lián)苗與單苗比較羊痘抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)個(gè)體增加數(shù)與對(duì)照1組相比差異顯著，小反芻獸疫抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)個(gè)體增加數(shù)與對(duì)照2組相比差異極顯著，說(shuō)明該二聯(lián)苗在抗體產(chǎn)生速度上優(yōu)于對(duì)照組，具有較好的免疫效果。

鑒于試驗(yàn)條件所限，沒(méi)有做攻毒和抗體消減實(shí)驗(yàn)，缺乏對(duì)該二聯(lián)疫苗保護(hù)性及免疫抗體維持時(shí)間等實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

試驗(yàn)2組系附帶試驗(yàn)兩種疫苗同時(shí)免疫之效果，與本試驗(yàn)關(guān)系不大，可忽略。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)表明，該小反芻獸疫-山羊痘二聯(lián)活疫苗用于綿羊小反芻獸疫和羊痘兩種疫病的預(yù)防免疫，具有較好的安全性和較強(qiáng)的免疫效果，僅從免疫安全性、免疫后抗體產(chǎn)生快慢和抗體水平以及疫苗和人工成本等經(jīng)濟(jì)性綜合考慮，該二聯(lián)苗對(duì)小反芻獸疫疫苗和山羊痘疫苗具有一定的可替代性。