張 倩，黃進(jìn)強(qiáng)，權(quán)金強(qiáng)，吳深基，王曉讕，潘玉財

( 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，甘肅 蘭州 730070 )

影響魚類生長的因素大致分為兩大類，一類是魚類本身的內(nèi)源因子，另一類是魚類生存的外部環(huán)境因子。內(nèi)源因子與魚類自身基因的調(diào)控、親本的遺傳特性等相關(guān)，以此決定魚類的生長發(fā)育；外源因子(包括溫度、溶解氧、光照等其他環(huán)境因子)通過刺激機(jī)體代謝水平，直接或間接影響魚類的生長發(fā)育，其中溶解氧是魚類生長和活動的主要限制因子[1-2]。目前低氧脅迫已經(jīng)成為魚類生理學(xué)的研究熱點之一，研究表明，適宜的溶解氧水平可促進(jìn)魚類的孵化成活、生長發(fā)育及攝食等，而在過飽和或低溶解氧水體中的魚類，很可能產(chǎn)生強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)而影響其正常生活[3]。特別是低氧環(huán)境下，易使魚類正常的呼吸和生理代謝發(fā)生紊亂，導(dǎo)致魚類攝食量下降、生長緩慢，甚至影響魚類的行為、形態(tài)學(xué)特征及生存策略[4-6]。研究發(fā)現(xiàn)，在低氧環(huán)境中西伯利亞鱘(Acipenserbaerii)血清中丙二醛、總蛋白含量均呈先升后降的趨勢；河川沙塘鱧(Odontobutispotamophila)心臟、肝臟、鰓中過氧化氫酶活力顯著上升[7-8]；Lushchak等[9]發(fā)現(xiàn)，金魚(Carassiusauratus)在經(jīng)過8 h低氧處理后肝臟中谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著增加79%，復(fù)氧14 h后，大腦中谷胱甘肽過氧化物酶活性仍然較高；葛氏鱸塘鱧(Perccottusglenii)在低氧處理2、6 h和10 h下肝臟的超氧化物歧化酶活性顯著上調(diào)[10]。

血清生理生化指標(biāo)是反映動物環(huán)境應(yīng)激時體內(nèi)物質(zhì)代謝和組織器官機(jī)能狀態(tài)變化的一個重要特征，研究發(fā)現(xiàn)，溶解氧水平明顯影響?zhàn)B殖魚類的血液指標(biāo)，而鰓作為魚類的呼吸器官，最先感知溶解氧的變化，為機(jī)體正常代謝供給氧氣發(fā)揮著重要作用[11-12]。研究表明，低氧條件下，魚體肌肉組織中氧化應(yīng)激現(xiàn)象明顯[10,13]。因此，通過研究低氧條件下魚類血清、鰓和肌肉組織生理水平的變化及其應(yīng)激效應(yīng)，對水產(chǎn)養(yǎng)殖具有重大指導(dǎo)意義，亦可為探討魚類適應(yīng)低氧環(huán)境的策略提供參考資料。

鯽魚(Carassiusauratus)，屬鯉形目、鯉科、鯽屬，由于其營養(yǎng)價值高、肉質(zhì)較嫩、味道鮮美，且生長速度快、適應(yīng)性強(qiáng)、食性雜等眾多優(yōu)勢，在我國淡水養(yǎng)殖業(yè)中占據(jù)重要地位[14-16]。鯽魚生活于中下層水域，相對其他常見淡水養(yǎng)殖魚類對低氧有極強(qiáng)的耐受性，是一個研究低氧脅迫的良好模型[11,17]。然而，目前關(guān)于低氧脅迫及復(fù)氧對鯽魚氧化應(yīng)激影響的研究未見報道。筆者通過對養(yǎng)殖水環(huán)境中溶解氧水平的調(diào)控，分析在急性低氧和常氧恢復(fù)后的不同時間點鯽魚血清、肌肉及鰓組織中抗氧化酶的變化，探究急性低氧脅迫對鯽魚氧化應(yīng)激的影響，以期為鯽魚的健康養(yǎng)殖提供科學(xué)的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

試驗用鯽魚購自蘭州市水產(chǎn)品交易市場，將試驗魚運輸至實驗室循環(huán)流水室內(nèi)養(yǎng)殖槽中暫養(yǎng)14 d，暫養(yǎng)期間連續(xù)充氣保持溶解氧>6.7 mg/L，溫度(25±1) ℃，試驗用水均為曝氣后的自來水，日換水量約為暫養(yǎng)水體積的1/3。

1.2 試驗設(shè)計

暫養(yǎng)結(jié)束后，挑選40尾規(guī)格相近[體質(zhì)量(250±10) g，體長(24±0.5) cm]、體質(zhì)健壯、體表無傷的鯽魚用于試驗。通過迅速往養(yǎng)殖槽中注入氮氣來降低溶解氧水平，使溶解氧在30 min內(nèi)降至(1.0±0.1) mg/L，達(dá)到所需含量后開始計時，利用溶氧儀來實時監(jiān)測溶解氧水平的變化，試驗過程中通過調(diào)節(jié)注入空氣和氮氣的量來維持所需要的溶解氧水平。試驗分為低氧脅迫(0、3、6、12、24 h)和常氧恢復(fù)(3、6 h)兩個階段，常氧恢復(fù)試驗在低氧脅迫24 h取樣結(jié)束后立即進(jìn)行，恢復(fù)期間溶解氧水平為(6.7±0.1) mg/L。

1.3 樣品采集與處理

降低溶解氧水平前隨機(jī)取5尾鯽魚作為對照組，在低氧脅迫(3、6、12、24 h)和常氧恢復(fù)(3、6 h)的各時間點進(jìn)行尾靜脈采血約2 mL，每個時間點取5尾作為生物學(xué)重復(fù)，血液置于冰箱4 ℃靜置2 h后，3500 r/min離心10 min，取上層血清于-80 ℃保存用于測定血清生化指標(biāo)。采血結(jié)束后剖取鯽魚肌肉和鰓組織(采樣時間點及樣品數(shù)量同血清)，置于液氮中速凍后保存于冰箱-80 ℃中用于后續(xù)組織中生化指標(biāo)的測定。

1.4 樣品測定

測定血清、肌肉和鰓組織中抗氧化指標(biāo)，主要包括超氧化物歧化酶(A001-1)、過氧化氫酶(A007-1)、谷胱甘肽過氧化物酶(A005)、總抗氧化能力(A015)、丙二醛(A003-1)和總蛋白(A045-3)，試劑盒均購自南京建成生物工程有限公司，吸光度利用紫外可見分光光度計(UNICO UV-3802)測定。

1.5 試驗數(shù)據(jù)分析

試驗數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，利用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析以及Duncan′s多重比較進(jìn)行數(shù)據(jù)差異性分析，P<0.05為有顯著統(tǒng)計學(xué)差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 急性低氧脅迫和復(fù)氧對鯽魚血清中氧化應(yīng)激的影響

低氧脅迫后，鯽魚血清中丙二醛濃度顯著升高(P<0.05)，低氧脅迫6 h，丙二醛濃度達(dá)到最高，較對照組升高了62%，隨著脅迫時間的延長，在脅迫12、24 h時，丙二醛濃度顯著下降(P<0.05)；恢復(fù)3 h時，鯽魚血清中丙二醛濃度較脅迫24 h顯著上升23%(P<0.05)，恢復(fù)6 h，丙二醛濃度開始下降，與對照組相比差異不顯著(P>0.05)(圖1)。超氧化物歧化酶活力在低氧脅迫初期顯著升高24%(P<0.05)，隨后在脅迫6 h略有下降，脅迫12、24 h時，鯽魚血清中超氧化物歧化酶活力較對照組顯著升高40%、38%(P<0.05)；恢復(fù)后，鯽魚血清中超氧化物歧化酶活力較脅迫24 h顯著下降12%、27%(P<0.05)，恢復(fù)6 h時，鯽魚血清中超氧化物歧化酶活力略高于對照組，差異不顯著(P>0.05)(圖2)。過氧化氫酶活力總體呈升高趨勢，低氧6、12、24 h時，較對照組顯著升高了55%、67%、72%(P<0.05)；恢復(fù)3 h與6 h時，過氧化氫酶活力較低氧24 h時顯著下降(P<0.05)，與對照組相比，血清中過氧化氫酶活力略升高，差異不顯著(P>0.05)(圖3)。谷胱甘肽過氧化物酶活力迅速升高，低氧脅迫12 h時酶活力最高，較對照組顯著升高42%(P<0.05)，隨著脅迫時間的延長，血清中谷胱甘肽過氧化物酶活力開始下降，脅迫24 h時酶活力較12 h時顯著下降30%(P<0.05)；恢復(fù)3 h時，鯽魚血清中谷胱甘肽過氧化物酶活力較脅迫24 h時顯著升高21%(P<0.05)，隨后逐漸恢復(fù)到初始水平(圖4)。急性低氧脅迫后，鯽魚血清中總抗氧化能力活力顯著上升，脅迫24 h時酶活力達(dá)到最高，低氧3、6、12、24 h時較對照組分別顯著升高16%、47%、41%和52%(P<0.05)；恢復(fù)溶氧3、6 h時，血清中酶活力較脅迫24 h時顯著下降24%、39%(P<0.05)，恢復(fù)6 h酶活力略高于對照組，差異不顯著(P>0.05)(圖5)。

圖5 低氧脅迫及復(fù)氧對鯽魚血清中總抗氧化能力的影響

圖4 低氧脅迫及復(fù)氧對鯽魚血清中谷胱甘肽過氧化物酶活力的影響

2.2 急性低氧脅迫和復(fù)氧對鯽魚肌肉和鰓組織中氧化應(yīng)激的影響

肌肉組織中丙二醛含量在急性低氧脅迫3、6、12 h后顯著升高(P<0.05)，在24 h后又恢復(fù)到初始水平；恢復(fù)3 h后，丙二醛含量又顯著高于對照組(P<0.05)，恢復(fù)6 h后，顯著下降，但仍高于對照組(P<0.05)(圖6)。低氧脅迫3、6、12、24 h與復(fù)氧3h后超氧化物歧化酶活力顯著升高(P<0.05)，恢復(fù)6 h后與對照組差異不顯著(P>0.05)(圖7)。過氧化氫酶與谷胱甘肽過氧化物酶活力在低氧脅迫后顯著上升(P<0.05)(圖8～9)，酶活力在低氧6 h時，達(dá)到最高(P<0.05)，低氧12 h時，酶活力略有下降；恢復(fù)6 h后過氧化氫酶活力顯著高于對照組(P<0.05)，谷胱甘肽過氧化物酶活力恢復(fù)到初始值?？偪寡趸芰υ诘脱趺{迫3 h后持續(xù)升高，保持在較高水平，低氧24 h與恢復(fù)3 h時顯著升高(P<0.05)，24 h時酶活力達(dá)到峰值，恢復(fù)6 h后，與對照組差異不顯著(圖10)?？偟鞍踪|(zhì)量濃度在低氧脅迫后緩慢上升，脅迫12 h時質(zhì)量濃度顯著升高(P<0.05)，24 h時質(zhì)量濃度略有下降；恢復(fù)3 h時，質(zhì)量濃度顯著下降，恢復(fù)6 h后，恢復(fù)到初始值(圖11)。

急性低氧脅迫后，鯽魚鰓組織中丙二醛含量在脅迫3、12、24 h，恢復(fù)3 h時顯著升高(P<0.05)，在低氧24 h時含量最高，恢復(fù)6 h后，略高于對照組，與對照組差異不顯著(P>0.05)(圖6)。低氧6 h時，超氧化物歧化酶活力較對照組顯著升高41%(P<0.05)，達(dá)到峰值，其余時間點超氧化物歧化酶活力較初始值略有變化，差異不顯著(P>0.05)(圖7)。過氧化氫酶活力在脅迫6、24 h時顯著增長48%、40%(P<0.05)，其他時間點與對照組差異不顯著(P>0.05)，恢復(fù)6 h后，酶活力略高于初始值，差異不顯著(P>0.05)(圖8)。低氧脅迫后谷胱甘肽過氧化物酶活力顯著升高，6 h時活力最高，比對照組顯著增長了52%(P<0.05)，恢復(fù)6 h后與對照組差異不顯著(P>0.05)(圖9)?？偪寡趸芰υ诿{迫3、24 h與恢復(fù)3 h時酶活力顯著升高，脅迫3 h時達(dá)到最大，相比對照組顯著升高48%(P<0.05)，其余時間點與對照組相比差異不顯著(P>0.05)(圖10)?？偟鞍踪|(zhì)量濃度在脅迫3 h時顯著升高19%(P<0.05)，其余各時間點質(zhì)量濃度高于對照組，但差異不顯著(P>0.05)(圖11)。

圖6 低氧脅迫及復(fù)氧對鯽魚肌肉和鰓組織中丙二醛含量的影響

圖7 低氧脅迫及復(fù)氧對鯽魚肌肉和鰓組織中超氧化物歧化酶活力的影響

圖8 低氧脅迫及復(fù)氧對鯽魚肌肉和鰓組織中過氧化氫酶活力的影響

圖9 低氧脅迫及復(fù)氧對鯽魚肌肉和鰓組織中谷胱甘肽過氧化物酶活力的影響

圖10 低氧脅迫及復(fù)氧對鯽魚肌肉和鰓組織中總抗氧化能力的影響

圖11 低氧脅迫及復(fù)氧對鯽魚肌肉和鰓組織中總蛋白質(zhì)量濃度的影響

3 討 論

魚類在新陳代謝的過程中，細(xì)胞內(nèi)氧化與抗氧化之間一直處于動態(tài)平衡[18]，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生大量的活性氧自由基超過機(jī)體的承載范圍時，細(xì)胞內(nèi)過多的自由基會攻擊各種生物膜中所含的不飽和脂肪酸，發(fā)生連鎖的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，并因此產(chǎn)生丙二醛等脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，對機(jī)體造成損傷[19-22]。為避免這種情況，機(jī)體在長期的進(jìn)化過程中，形成了一套完整的保護(hù)體系，即抗氧化防御系統(tǒng)來清除體內(nèi)多余的氧自由基，保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷[23-24]。超氧化物歧化酶、過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶等作為抗氧化防御系統(tǒng)中的重要組成部分，在機(jī)體的氧化與抗氧化平衡中起著重要作用，對機(jī)體細(xì)胞損傷后的氧化過程具有很強(qiáng)的防御功能[21]。研究認(rèn)為，超氧化物歧化酶在清除體內(nèi)活性氧自由基的過程中最早發(fā)揮作用，它促使超氧陰離子(O2-·)歧化為H2O2和H2O，隨后過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶再將H2O2催化為H2O和O2，因此超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶和過氧化氫酶等具有清除體內(nèi)多余的活性氧自由基和保護(hù)機(jī)體免受氧化損傷的作用[21]。

3.1 急性低氧脅迫和復(fù)氧對鯽魚血清中氧化應(yīng)激的影響

丙二醛的含量可反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度，從而間接反映出細(xì)胞損傷的程度[25]。本試驗中，隨著溶解氧水平的下降，鯽魚血清、肌肉和鰓組織中丙二醛含量初期快速升高，這表明低氧迫使鯽魚處于應(yīng)激狀態(tài)，由于機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生大量的活性氧自由基，使得機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化程度升高，產(chǎn)生大量的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，隨著脅迫時間的延長，丙二醛含量顯著下降，機(jī)體通過調(diào)節(jié)抗氧化酶的活性來抵御缺氧造成的氧化壓力，保護(hù)機(jī)體免受氧化損傷；恢復(fù)溶氧后丙二醛含量再次升高，恢復(fù)后期丙二醛含量逐漸下降至初始水平，說明此時恢復(fù)溶氧對鯽魚而言也是一種應(yīng)激[26]，機(jī)體會再次激活體內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)。這與Filho等[3,13]限制溶解氧供應(yīng)對魚類影響的研究結(jié)果一致。

張國松[27]在瓦氏黃顙魚(Pelteobagrusvachelli)應(yīng)對低氧脅迫的耐受機(jī)制的研究中發(fā)現(xiàn)，低氧脅迫促使瓦氏黃顙魚大腦中超氧化物歧化酶活力持續(xù)上調(diào)，常氧恢復(fù)后超氧化物歧化酶活力與對照組相近，本試驗結(jié)果與之相似。本試驗中，急性低氧脅迫后，鯽魚血清中超氧化物歧化酶活力在短期內(nèi)迅速升高，表明當(dāng)機(jī)體受到低氧刺激時，超氧化物歧化酶首先發(fā)揮作用，促使超氧陰離子(O2-·)歧化為H2O2和H2O，隨著脅迫時間的延長，超氧化物歧化酶活力略有下降，隨后顯著升高，這是由于低氧脅迫下鯽魚通過無氧呼吸途徑[28]，產(chǎn)生大量活性氧自由基，使得抗氧化酶活力下降，但隨著時間的延長，鯽魚機(jī)體內(nèi)出現(xiàn)了代償應(yīng)激導(dǎo)致超氧化物歧化酶活力迅速上升，從而抵御氧自由基對機(jī)體的損傷。常氧恢復(fù)后期酶活力略高于對照組，推測此時常氧恢復(fù)促使機(jī)體仍處于應(yīng)激狀態(tài)，超氧化物歧化酶持續(xù)為清除體內(nèi)活性氧自由基發(fā)揮作用。

本試驗中過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶活力在急性低氧脅迫后顯著升高，常氧恢復(fù)后與對照組相比差異不顯著，表明了機(jī)體內(nèi)抗氧化酶類的協(xié)同性。楊凱[29]的研究結(jié)果表明，低氧脅迫后黃顙魚(P.fulvidraco)血清中過氧化氫酶活力顯著增大，但隨著時間延長活性逐漸下降，這與本試驗結(jié)果類似，說明血清中過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶在鯽魚面臨氧化應(yīng)激時出現(xiàn)協(xié)同調(diào)節(jié)作用，避免機(jī)體受到氧化損傷的危害。陳世喜等[30]研究發(fā)現(xiàn)，急性低氧脅迫下，卵形鯧鲹(Trachinotusovatus)幼魚肝臟中過氧化氫酶顯著升高后維持在一個較高水平，而谷胱甘肽過氧化物酶活力在持續(xù)上升后逐漸下降，慢性低氧脅迫后谷胱甘肽過氧化物酶活力顯著升高，與本試驗結(jié)果類似。

李根瑞[31]研究發(fā)現(xiàn)，仿刺參(Apostichopusjaponicus)在低氧環(huán)境中肌肉、呼吸樹和消化道中總抗氧化能力顯著升高，復(fù)氧初期總抗氧化能力仍顯著高于對照組，隨后慢慢恢復(fù)到初始水平。管越強(qiáng)等[32]在研究低氧脅迫對日本沼蝦(Macrobrachiumnipponense)的影響時發(fā)現(xiàn)相似結(jié)果，低氧脅迫后日本沼蝦肝胰腺和肌肉中總抗氧化能力有顯著影響。本試驗中，鯽魚體內(nèi)總抗氧化能力在低氧脅迫后迅速顯著上升，表明鯽魚能快速對低氧脅迫產(chǎn)生響應(yīng)，有效清除體內(nèi)氧自由基，常氧恢復(fù)后總抗氧化能力較低氧脅迫后期顯著下降，恢復(fù)后期總抗氧化能力略高于對照組，推測是常氧恢復(fù)后機(jī)體在短期內(nèi)對總抗氧化能力的代謝不完全造成的。

3.2 急性低氧脅迫和復(fù)氧對鯽魚肌肉和鰓組織中氧化應(yīng)激的影響

機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài)時，當(dāng)機(jī)體內(nèi)大量產(chǎn)生的活性氧因不能及時清除而累積在體內(nèi)時，就會導(dǎo)致生物膜上的脂質(zhì)物質(zhì)遭受過氧化，生成丙二醛等有害物質(zhì)，造成機(jī)體多種酶失活，導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生變性甚至死亡，使機(jī)體的免疫能力下降[33-34]。本試驗中，急性低氧脅迫3 h后，鯽魚肌肉和鰓組織中丙二醛含量顯著升高，肌肉組織中丙二醛含量達(dá)到峰值，鰓組織中丙二醛含量在脅迫24 h達(dá)到峰值。恢復(fù)溶氧后，丙二醛含量在組織中先升后降，與對照組差異不顯著。表明機(jī)體在低氧刺激后，由于體內(nèi)大量產(chǎn)生活性氧，導(dǎo)致機(jī)體脂質(zhì)過氧化程度升高，產(chǎn)生大量丙二醛，丙二醛含量在體內(nèi)的變化在一定程度上反映了機(jī)體保護(hù)自身的反應(yīng)機(jī)制。常氧恢復(fù)后組織中丙二醛含量在短暫升高后恢復(fù)至初始值，說明此時復(fù)氧對鯽魚造成了二次應(yīng)激，體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)再次調(diào)動保護(hù)機(jī)體免受損傷。郭志雄等[35]在急性低氧脅迫對軍曹魚肝臟氧化應(yīng)激的影響中發(fā)現(xiàn)同樣結(jié)果，脅迫后軍曹魚體內(nèi)丙二醛含量顯著上升。

當(dāng)?shù)脱趺{迫導(dǎo)致體內(nèi)活性氧自由基增多時，超氧化物歧化酶活力也會隨之發(fā)生變化。馬粒雅等[36]在溶解氧變化對中華烏塘鱧(Bostrychussinensis)酶活的影響中發(fā)現(xiàn)，隨著溶解氧含量的變化，中華烏塘鱧肝臟和腸內(nèi)超氧化物酶活力在溶解氧水平下降初期變化不大，在溶解氧水平降至1.04 mg/L時，酶活力顯著上升，達(dá)到峰值后開始逐漸下降，隨著溶解氧水平降到0 mg/L，酶活力又開始增大。本試驗中，急性低氧脅迫后，鯽魚肌肉和鰓組織中超氧化物歧化酶出現(xiàn)了波動性的變化，表明超氧化物歧化酶能通過酶活性的變化來調(diào)節(jié)體內(nèi)自由基的平衡，維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。

過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶在機(jī)體抗氧化系統(tǒng)中的主要作用是清除H2O2，起到保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整性的作用[29]。楊明等[37]在研究日本沼蝦在低氧脅迫和復(fù)氧下體內(nèi)抗氧化酶活力的變化中發(fā)現(xiàn)，低氧脅迫后日本沼蝦肌肉、鰓組織中過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶活力在脅迫12 h時酶活力顯著高于對照組，復(fù)氧后酶活力出現(xiàn)波動性變化。本試驗中，鯽魚在急性低氧脅迫后，肌肉組織及鰓組織中過氧化氫酶及谷胱甘肽過氧化物酶活力顯著升高，在脅迫6 h時達(dá)到峰值，脅迫12 h二者酶活力顯著下降，這表明機(jī)體內(nèi)過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶具有一定的協(xié)同作用，二者共同為清除體內(nèi)脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物發(fā)生作用，而在12 h酶活力顯著下降，其原因可能是超氧化物歧化酶通過歧化反應(yīng)產(chǎn)生過量的H2O2，超過了機(jī)體的承受范圍，導(dǎo)致酶活力受到抑制。復(fù)氧后，機(jī)體內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)清除了過量的有害物質(zhì)，酶活力逐漸恢復(fù)至初始值。

總抗氧化能力是用于衡量機(jī)體抗氧化系統(tǒng)功能狀況的綜合性指標(biāo)，代表和反映了機(jī)體抗氧化防御系統(tǒng)對外來刺激的代償能力以及機(jī)體自由基代謝的狀態(tài)[19]。本試驗中，鯽魚肌肉組織中總抗氧化能力在脅迫后持續(xù)升高，脅迫24 h時最大，鰓組織中總抗氧化能力在脅迫3 h達(dá)到峰值后開始下降，脅迫24 h顯著升高，表明機(jī)體在應(yīng)激狀態(tài)下，體內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)能在應(yīng)對不良刺激時做出響應(yīng)，保護(hù)機(jī)體。復(fù)氧后肌肉及鰓組織中總抗氧化能力開始下降，恢復(fù)至初始值。這與李根瑞[31]研究結(jié)果相似。

總蛋白具有維持血液正常膠體滲透壓和pH恒定的作用，并與脂肪酸、固醇等物質(zhì)運輸及免疫功能相關(guān)[33]。本試驗中，急性低氧脅迫下鯽魚組織中總蛋白含量隨脅迫時間的延長而逐漸升高，常氧恢復(fù)后總蛋白含量與對照組差異不顯著。這同陳靜怡等[7]研究發(fā)現(xiàn)20、28 ℃時低氧脅迫導(dǎo)致西伯利亞鱘血清中總蛋白含量隨脅迫時間的延長而升高，在達(dá)到峰值后逐漸降低，最終與對照組差異不顯著的結(jié)果相似。

4 結(jié) 論

急性低氧脅迫會使魚類產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，而應(yīng)激后的快速恢復(fù)溶氧，也會使魚類產(chǎn)生應(yīng)激，調(diào)動體內(nèi)的抗氧化防御系統(tǒng)。低氧脅迫下，鯽魚血清、肌肉和鰓組織中抗氧化酶活力升高，共同清除體內(nèi)因缺氧產(chǎn)生的大量活性氧自由基，常氧恢復(fù)后，機(jī)體又會產(chǎn)生大量活性氧自由基，同時再次調(diào)動抗氧化系統(tǒng)開啟防御機(jī)制，抵御氧化應(yīng)激對機(jī)體造成的損傷，這是機(jī)體為了適應(yīng)低氧脅迫和脅迫后復(fù)氧所采取的抗氧化策略。本試驗結(jié)果為魚類低氧脅迫生理學(xué)研究提供了基礎(chǔ)資料，也為鯽魚養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展提供理論依據(jù)。