李銀花
食物作為維持人類健康生活的基礎(chǔ),與人民群眾的生命健康有直接聯(lián)系。據(jù)統(tǒng)計,我國的食物中毒案例70%以上都是由沙門氏菌引起的。沙門氏菌不僅會引起細菌感染,還會引發(fā)腸胃炎等慢性疾病,給患者的生活質(zhì)量帶來較大的負面影響。本文主要介紹沙門氏菌的檢測方法與實驗關(guān)鍵點。
沙門氏菌并不是指一種細菌,而是一群寄居在人和動物腸道內(nèi)的相似細菌的統(tǒng)稱(是一個菌屬),隸屬于腸桿菌科,顯微鏡下的形態(tài)呈短棒狀。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的沙門氏菌有一千多種,它們不僅能使動物發(fā)病,還能使人類發(fā)生傷寒、胃腸炎,甚至敗血癥。人們在日常飲食中如果不慎攝入沙門氏菌,其會在人的腸道內(nèi)大量繁殖,隨后通過淋巴進入血液,引發(fā)中毒癥狀。初期的臨床癥狀一般為發(fā)熱、嘔吐、惡心、腹瀉及腹痛等。
沙門氏菌主要存活在動物或者人類的腸道內(nèi),引發(fā)沙門氏菌感染的不僅有動物性食品感染(動物肉、內(nèi)臟、雞蛋、生奶),而且有人類衛(wèi)生感染(便后不洗手等衛(wèi)生行為)和植物傳染感染。研究顯示攜帶沙門氏菌的人類也是主要的傳染源之一。
(一)分離培養(yǎng)法
沙門氏菌的檢測不僅是食品安全的基礎(chǔ)保證,也是人們身體健康和生命安全的基礎(chǔ)保障。分離培養(yǎng)法是沙門氏菌檢測的基礎(chǔ),要遵循以下流程。
1.前增菌。使食物樣品在含有營養(yǎng)的非選擇性培養(yǎng)基中增菌,使受損傷的沙門氏菌細胞恢復(fù)到穩(wěn)定的生理狀態(tài)。
2.選擇性增菌。在含選擇性抑制劑的促生長培養(yǎng)基中,樣品進一步增菌。此培養(yǎng)基允許沙門氏菌持續(xù)增殖,同時阻止大多數(shù)其他細菌的增殖。
3.選擇性平板分離。這一步采用固體選擇性培養(yǎng)基,抑制非沙門氏菌的生長,提供肉眼可見的疑似沙門氏菌純菌落的識別。
4.生物化學(xué)篩選。排除大多數(shù)非沙門氏菌,提供沙門氏菌培養(yǎng)物菌屬的初步鑒定。
5.通過血清學(xué)技術(shù)鑒定培養(yǎng)物菌種。
(二)分子生物學(xué)方法
分子生物學(xué)檢測方法主要是通過特異性核酸序列檢測,分析遺傳物質(zhì),檢測致病菌。分子生物學(xué)法較快的檢測速度和較高的檢測精確度,在沙門氏菌檢測中被廣泛應(yīng)用。
(三)免疫學(xué)方法
隨著沙門氏菌特異性的提升和抗體研制技術(shù)的發(fā)展,沙門氏菌免疫學(xué)檢測方法的應(yīng)用度逐年提升。運用免疫學(xué)方法對沙門氏菌進行檢測,具有檢測特異性好、速度快、反應(yīng)靈敏等特點。對于不同的食品基質(zhì),同種免疫學(xué)方法的檢測效果也有所不同,需要進行大量實驗并積累一定的數(shù)據(jù),以供針對不同情況選擇檢測方案。
(一)樣品處理
沙門氏菌的檢測過程中,檢測樣品對后期檢測數(shù)據(jù)的精準(zhǔn)性有直接影響,樣品處理的過程中可以降低競爭菌群的生長時間,減少對沙門氏菌損傷的同時提升取樣的代表性,為數(shù)據(jù)的精準(zhǔn)性提供保障。
(二)培養(yǎng)基
培養(yǎng)基的選擇應(yīng)避免使用單一的培養(yǎng)基,因為在單一培養(yǎng)基中準(zhǔn)確無誤的培養(yǎng)沙門氏菌是一種概率性事件,要通過培養(yǎng)基的多樣性來提升后期檢測過程中樣品的多樣性。培養(yǎng)基和試劑的使用要以說明書為依據(jù)。沙門氏菌乳糖發(fā)酵陽性的可能在1%左右,為了降低漏檢的可能性,一般使用不依賴乳糖的培養(yǎng)基。
(三)血清鑒定
血清鑒定是沙門氏菌檢驗中的常用鑒定方式,其主要內(nèi)容為菌體抗原鑒定。實際檢驗過程一般以生化實驗結(jié)果為主,在生化實驗的基礎(chǔ)上進行血清判定。血清鑒定的原理是抗原抗體結(jié)合,非沙門氏菌的微生物也有可能帶有沙門氏菌的類似抗原。
沙門氏菌對人體健康和生命安全有較大威脅,科學(xué)的檢測方式是生命安全的基礎(chǔ)保障。檢測人員在檢測過程中不僅要按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格執(zhí)行,而且在提升檢測技術(shù)的同時,要通過預(yù)防知識的普及來降低沙門氏菌導(dǎo)致食物中毒等不良事件的發(fā)生,從根本上降低沙門氏菌對人們身體健康的威脅。
(作者單位:道孚縣疾病預(yù)防控制中心)