陸賽麗 李 慧
(河南工業(yè)大學(xué) 河南鄭州 450000)
小麥?zhǔn)俏覈用竦闹魇持籟1],也是各種糧食加工品的主要原料。然而,新收獲的小麥大部分被儲存于糧庫和農(nóng)戶家中。據(jù)我國有關(guān)部門調(diào)查數(shù)據(jù)顯示,國家糧庫的糧食每年由于儲存損失0.2%,農(nóng)戶的糧食損失6%~9%[2],損失主要由儲糧害蟲引起。
赤擬谷盜是一種世界性危害的儲糧害蟲。在我國,糧食存儲時間長達(dá)2~3年或3~5年,甚至更長時間[3],因此,赤擬谷盜是糧食儲藏的主要管理防治對象。
赤擬谷盜,屬于小麥次要害蟲,其危害性主要體現(xiàn)如下:食源多樣,生存寄主多,取食量大,危害期長;生存能力強,生長繁殖速度快,壽命長;體內(nèi)臭腺的分泌物質(zhì)苯醌會污染面粉,使其結(jié)塊等,失去食用價值,甚至帶來衛(wèi)生安全隱患;危害范圍廣,可以危害糧食、油料、干果等100余種食品[4]。
早在18世紀(jì),就有學(xué)者對赤擬谷盜在外部形態(tài)學(xué)、生物學(xué)、害蟲的管理防治,以及遺傳應(yīng)用等方面進(jìn)行了科學(xué)研究[5-11]。完整小麥被不同程度地磨損后,會被赤擬谷盜不同程度地感染,被感染后的稻谷揮發(fā)物中包含苯醌,Hodges[12]發(fā)現(xiàn)苯醌含量會隨稻谷感染時間的延長而增加。
目前,無論國內(nèi)外,都有關(guān)于揮發(fā)性氣味物質(zhì)的研究。Jezussek[13]用3種不同的亞洲糙米煮熟后,測定熟米飯的香氣成分,首次鑒定出了水稻中未被探知的香味物質(zhì)2-氨基苯乙酮。2010年,Yinzhe Jin[14]用液相微萃取和蒸餾法對剛剛砍伐的高山紅景天進(jìn)行檢測,2種方法分別測出68種和75種物質(zhì),主要為單萜和烯醇。
糧食被害蟲侵害,其品質(zhì)必將發(fā)生變化,通過測定小麥氣味物質(zhì)變化得到其品質(zhì)變化規(guī)律,可以在其品質(zhì)即將變化前,及時采取措施,減少損失。
小麥品系:鄭州滎陽矮抗58。小麥處理:將小麥洗凈、烘干、殺蟲,調(diào)節(jié)水分至14%±2%,用干凈塑料袋密封裝好,置于冰箱冷凍層(至少一晝夜)備用。
試蟲:赤擬谷盜成蟲為河南工業(yè)大學(xué)實驗室擴大培養(yǎng)數(shù)次代所得。
飼料的制取、配制方法:粉碎機粉碎備用小麥,過 60目篩,與(粗粉、細(xì)粉)酵母粉以 19∶1(質(zhì)量比)比例混勻。(注:酵母選干酵母,奶粉為脫脂奶粉),用干凈塑料袋密封置于冰箱冷凍層,使用時須平衡至室溫。
培養(yǎng)器具的殺蟲、消毒處理:所有培養(yǎng)器具(如白瓷盤、谷物分選篩、玻璃培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿等)洗凈、擦干,加熱、殺蟲0.5 h左右,放至室溫。
擴大培養(yǎng)方法:將飼料和成蟲放入塑料篩中,晃動分離,將成蟲和細(xì)粉置于新的培養(yǎng)瓶中(洗凈、烘干)繼續(xù)飼養(yǎng),在瓶身貼上標(biāo)簽(寫有蟲種、品系、日期、姓名等),蟲卵篩下物與粗粉放回原瓶繼續(xù)飼養(yǎng)。
氣-質(zhì)聯(lián)用儀:GCMS-QP2010 Ultra/SE系列(日本島津技術(shù)公司);全自動新型生化培養(yǎng)箱:ZSDA1430型(上海智誠分析儀器制造有限公司);電熱鼓風(fēng)干燥箱:101-E型、101-3ES型(北京市永光明醫(yī)療儀器廠);雙目立體顯微鏡:SZX7系列(寧波舜寧儀器有限公司);電腦水分測量儀:HC-818型(臺州機械華昌糧油有限公司);自動進(jìn)樣器:AOC-5000(島津公司);DT系列電子微量天平:DT500A型;粉碎機:JFSD-100型。
2.3.1 儀器分析條件
揮發(fā)性化合物的鑒定使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,色譜柱為 DB-5MS(30 mm×0.32 mm,柱膜厚度25μm)。用自動進(jìn)樣器注射樣品,進(jìn)樣口溫度為250℃。升溫程序:起始80℃,保溫0.5 min,之后以5℃/min升溫至 140℃;再以 3℃/min升至 200℃;再以 5℃/min升至250℃,保持3 min。在250℃臨界溫度下,將質(zhì)譜儀與氣相層析系統(tǒng)結(jié)合。載氣:氦氣(3.0 mL/min)。離子源溫度200℃。
2.3.2 試樣
本試驗采用赤擬谷盜感染、破碎率為7%的小麥。棉布包取備用小麥砸碎,過孔徑1.0 mm選篩,取篩下物與備用小麥按比例稱取200g(備用小麥186g,篩下物14 g,平衡水分至12.5%),混勻待用。
2.3.3 試蟲接入
將128對赤擬谷盜雌雄蟲置入試樣瓶中,設(shè)立1組空白對照,3組重復(fù)平行試驗。玻璃瓶瓶蓋鉆2個孔(較大孔用濾紙封住,較小孔用硅膠墊封口),便于取樣。
2.3.4 小麥揮發(fā)性物質(zhì)測定
將接入試蟲的培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)(29℃±1℃、70%),分別在培養(yǎng) 5、10、15、20、25 d 時用氣-質(zhì)聯(lián)用儀測定培養(yǎng)瓶中氣體揮發(fā)性氣味物質(zhì)。
試驗測得未知揮發(fā)性氣味物質(zhì)的定性、定量分析由計算機檢索與NIST標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜庫相結(jié)合匹配求得,統(tǒng)計記錄左右匹配度大于70的物質(zhì),采用峰面積歸一化法定量分析。
接入 128 對成蟲 5、10、15、20、25 d 測定的揮發(fā)性成分,試驗結(jié)果數(shù)據(jù)處理如下:
感染5d揮發(fā)性氣味物質(zhì)測定結(jié)果詳見表1,主要保留時間在17.100min區(qū)域內(nèi)的烷烴類和28.000min區(qū)域內(nèi)酸酯類物質(zhì),烷烴類占總含量的73.244%。
感染10 d揮發(fā)性氣味物質(zhì)試驗結(jié)果詳見表2,與5 d相比,烷烴類含量增加至97.396%,酸酯類降至1%以下,此外,檢測到0.241%的醇類物質(zhì)存在。
感染15 d揮發(fā)性氣味物質(zhì)試驗結(jié)果詳見表3,數(shù)據(jù)顯示有61.59%的十五烷,同時,出現(xiàn)新物質(zhì)醛類和酮類,醛類百分含量為25.984%。
感染20 d揮發(fā)性氣味物質(zhì)的測定結(jié)果分析詳見表4,主要包括醛類、烷烴類、烯烴類、酰胺類、醇類、酸、酯類、膽固醇和乙型生育酚。其中,烷烴類占71.631%,膽固醇占14.321%和醛類占8.670%;酸、酯類含量最少,為0.091%。隨著試蟲蟲口密度不斷增加,膽固醇和乙型生育酚以及其他新物質(zhì)隨之出現(xiàn)。
表1 赤擬谷盜侵染小麥5d時揮發(fā)性氣味物質(zhì)成分
表2 赤擬谷盜侵染小麥10d時揮發(fā)性氣味物質(zhì)成分
表3 赤擬谷盜侵染小麥15 d時揮發(fā)性氣味物質(zhì)成分
表4 赤擬谷盜侵染小麥20 d時揮發(fā)性氣味物質(zhì)成分
續(xù)表4
感染25 d測定揮發(fā)性氣味物質(zhì)的試驗結(jié)果詳見表5,揮發(fā)性物質(zhì)百分含量:十六烷57.348%,十一醛27.638%,十二烷14.186%。
128對/200 g赤擬谷盜蟲口密度下,不同感染天數(shù)測定小麥試樣中主要的6種揮發(fā)性氣味物質(zhì)在物質(zhì)中所占百分比詳見圖1。
表5 赤擬谷盜侵染小麥25 d時揮發(fā)性氣味物質(zhì)成分
圖1 赤擬谷盜128對侵染小麥不同時期揮發(fā)性成分含量變化
數(shù)據(jù)顯示說明,試樣中均檢測到烷烴類物質(zhì),且含量在60%以上,是一種重要的揮發(fā)性化合物;醛類物質(zhì)在15 d時出現(xiàn),其含量所占百分比隨著感染時間的延長,先降低,后有回升趨勢;酸酯類物質(zhì)含量在5 d時最多,高達(dá)26.765%,之后均降低在5%以下;醇類物質(zhì)含量隨小麥試樣感染時間增長先增加,后減少;酮類物質(zhì)則只有在赤擬谷盜感染小麥時出現(xiàn),且含量不高。試驗中具有代表性的總離子色譜圖詳見圖2。
圖2 赤擬谷盜128/200 g感染小麥的總離子色譜圖
本次試驗研究的是小麥被赤擬谷盜不同程度感染氣味揮發(fā)性物質(zhì)的成分及其含量,通過設(shè)置128對/200 g赤擬谷盜感染小麥試樣,在5個不同時間段5、10、15、20、25 d 利用氣-質(zhì)聯(lián)用儀測定小麥的揮發(fā)性氣味物質(zhì)。
試驗中得到的研究結(jié)論為:(1)根據(jù)試驗數(shù)據(jù)分析,整個小麥揮發(fā)性氣味物質(zhì)測定的試驗過程中共鑒定出74種化合物。(2)128對/200 g不同感染時期5、10、15、20、25 d 下,測得小麥揮發(fā)性物質(zhì)主要是烷烴、酸酯、醛類物質(zhì);5、10 d時主要物質(zhì)是烷烴和酸酯類,且百分含量烷烴>酸酯類;15 d時有新物質(zhì)酮類出現(xiàn),含量為0.098%;20、25 d時主要物質(zhì)含量烷烴>醛類>酸酯類。