袁文悅

(上海市農(nóng)藥研究所有限公司，上海 201702)

化學(xué)殺蟲劑因高效、便捷和經(jīng)濟(jì)等特點(diǎn)而被廣泛用于害蟲的治理。然而，化學(xué)殺蟲劑的長(zhǎng)期大量使用不僅破壞了害蟲種群的自然調(diào)控，而且也造成了對(duì)人類健康和環(huán)境有益生物的不利影響。寄生性和捕食性昆蟲與殺蟲劑的靶標(biāo)害蟲常共棲息于同一環(huán)境，并通過(guò)不同途徑直接或間接暴露于各種殺蟲劑中。因此，殺蟲劑對(duì)害蟲天敵的潛在影響已經(jīng)受到公眾和科學(xué)家的高度關(guān)注。

七星瓢蟲(Coccinella septempunctata)屬鞘翅目瓢蟲科的捕食性天敵昆蟲，可捕食危害各種農(nóng)作物及果樹的蚜蟲，在我國(guó)各省均有分布[1]。目前關(guān)于殺蟲劑對(duì)七星瓢蟲的急性毒性效應(yīng)，大多數(shù)集中于對(duì)傳統(tǒng)殺蟲劑，例如有機(jī)磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥等的研究，而對(duì)近年來(lái)新上市的殺蟲劑的研究相對(duì)較少[2-4]?；诖?，本文選擇阿維菌素(abamectin)、高效氯氟氰菊酯(lambda-cyhalothrin)和除蟲菊素(pyrethrins II)為對(duì)象，在室內(nèi)條件下，開展了七星瓢蟲毒性評(píng)價(jià)，以期為這些藥劑的生態(tài)毒理風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)提供依據(jù)。

1 材料及方法

1.1 供試儀器與藥劑

1.1.1 試驗(yàn)儀器

AUY 220型電子分析天平(日本島津公司)、超聲波清洗器、BIC-300型人工氣候箱(上海博迅)、RTS-6型溫濕度計(jì)(深圳瑞特斯)、DY型滾動(dòng)式烤香腸機(jī)(浙江瑞安東銀)、TES-1334A型照度計(jì)(臺(tái)灣泰仕)、移液管、移液器、容量瓶、指形管(直徑2.5 cm，長(zhǎng)度8.0 cm，內(nèi)表面積53.4 cm2)等。

1.1.2 供試藥劑

10%高效氯氟氰菊酯微囊懸浮劑和 5%阿維菌素微囊懸浮劑，均系江蘇明德立達(dá)作物科技有限公司提供；5%除蟲菊素水乳劑，系浙江威爾達(dá)化工有限公司生產(chǎn)；5%阿維菌素水乳劑及乳油，系河北興柏農(nóng)業(yè)科技有限公司產(chǎn)品；98.6%樂果原藥，是上海市農(nóng)藥研究所有限公司實(shí)驗(yàn)室自存。

1.2 供試靶標(biāo)

七星瓢蟲(Coccinella septempunctata)，是上海市農(nóng)藥研究所有限公司實(shí)驗(yàn)室用蚜蟲飼養(yǎng)的品系。選取孵化3～4 d的2齡幼蟲供試驗(yàn)用，孵化環(huán)境條件與毒性試驗(yàn)條件均為室溫：23～27 ℃，相對(duì)濕度 60%～90%，光暗比16 h∶8 h，光照強(qiáng)度不低于1 000 lx。

1.3 試驗(yàn)方法

采用NY/T 3088-2017《化學(xué)農(nóng)藥 天敵(瓢蟲)急性接觸毒性試驗(yàn)準(zhǔn)則》推薦的方法進(jìn)行。

1.3.1 供試藥液配制

稱取一定質(zhì)量被試物，以丙酮溶解，超聲溶解15 min后定容得母液，用丙酮逐級(jí)稀釋，從各藥劑最高濃度向下以2倍的級(jí)差間距共設(shè)置5～6個(gè)梯度濃度。同時(shí)用丙酮配制濃度為500 mg/L的樂果母液，并稀釋10 000倍后得到參比試驗(yàn)用樂果濃度(0.2 g a.i /hm2)，并設(shè)空白對(duì)照和丙酮助溶劑對(duì)照，具體濃度設(shè)計(jì)見表1。

1.3.2 試驗(yàn)過(guò)程

首先取相應(yīng)濃度的試驗(yàn)藥液2 mL于指形管中，傾斜放置于烤香腸機(jī)上緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)，待丙酮藥液揮發(fā)后制成均勻藥膜管，注意傾斜放置時(shí)避免藥液灑落。然后，選擇大小一致的2齡瓢蟲幼蟲單頭接入藥膜管中，每個(gè)指形管放入1頭，飼喂足量的活蚜蟲，并以紗布、皮筋封緊管口，置于人工氣候箱內(nèi)培養(yǎng)，注意指形管應(yīng)平放，保證瓢蟲能夠自由爬行，減少重力對(duì)其不利影響。每個(gè)處理組設(shè)3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)不少于10頭2齡瓢蟲幼蟲。每天觀察記錄藥膜管中瓢蟲的中毒癥狀和死亡數(shù)。

在試驗(yàn)中，為了驗(yàn)證瓢蟲的敏感性，采用樂果作為參比物質(zhì)。當(dāng)樂果在0.20 g/hm2劑量時(shí)，瓢蟲幼蟲死亡率在40%～80%時(shí)，該種群可進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)期間，每天觀察記錄藥膜管中瓢蟲的中毒癥狀和死亡數(shù)，并清除殘?jiān)?，加入足量的蚜蟲飼喂，將死亡的幼蟲、蛹與行為異常的瓢蟲一起記錄(如活動(dòng)不靈活的、抽搐的)直至化蛹?；己?，蛹繼續(xù)保持在藥膜管內(nèi)觀察至成蟲羽化，計(jì)算成蟲羽化率，未羽化成蟲均計(jì)為死亡蟲。當(dāng)幼蟲或蛹的減少是由于操作失誤(例如，幼蟲逃走或再飼養(yǎng)、清潔過(guò)程中被殺 死)，受試瓢蟲幼蟲初始數(shù)量應(yīng)減去減少的幼蟲數(shù)量。

表1 供試藥液梯度濃度

限度試驗(yàn)的上限劑量設(shè)置為被試物田間最大推薦有效劑量乘以多次施藥因子(MAF，一般選取默認(rèn)值3)。當(dāng)受試瓢蟲在被試物達(dá)到上限劑量時(shí)未出現(xiàn)死亡，則無(wú)需繼續(xù)試驗(yàn)。當(dāng)被試物在水中或其他有機(jī)溶劑中的溶解度小于田間最大推薦有效劑量時(shí)，則采用其最大溶解度作為上限劑量進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)期間對(duì)照組死亡率不超過(guò)20%[5]。

1.4 數(shù)據(jù)處理與計(jì)算公式

LR50的計(jì)算可采用機(jī)率值法估算，也可應(yīng)用有關(guān)毒性數(shù)據(jù)計(jì)算軟件進(jìn)行分析和計(jì)算。使用寇氏法可用于計(jì)算瓢蟲在不同觀察周期的LR50及95%置信限。當(dāng)對(duì)照組受試生物出現(xiàn)死亡時(shí)，各處理組的死亡率計(jì)算應(yīng)根據(jù)對(duì)照組死亡率用Abbott公式進(jìn)行修正。

LR50的計(jì)算公式如下：

式中：Xm為最高濃度的對(duì)數(shù)；j為相鄰濃度比值的對(duì)數(shù)；ΣP為各組死亡率的總和(以小數(shù)表示)。

95%置信限的計(jì)算公式：

95%置信限=logLR50±1.96SlogLR50

標(biāo)準(zhǔn)誤差S的計(jì)算公式：

式中：P為1個(gè)組的死亡率(%)；N為各濃度組瓢蟲的數(shù)量(頭)。

限度試驗(yàn)中施藥因子MAF按以下公式計(jì)算，當(dāng)缺少任何數(shù)據(jù)時(shí)，MAF可選取默認(rèn)值3。

式中：k為農(nóng)藥在植株表面的降解速率常數(shù)；n為施藥次數(shù)(次)；i為施藥間隔(d)。

降解速率常數(shù)k的計(jì)算公式：

式中：DT50為農(nóng)藥在植株表面的降解半衰期(d)。當(dāng)缺少DT50的實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)時(shí)，采用默認(rèn)值10 d。

2 結(jié)果與分析

幾種殺蟲劑及不同劑型對(duì)七星瓢蟲的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果見表2。由表2可見，3種殺蟲劑及3種不同劑型的同含量阿維菌素對(duì)孵化3～4 d的2齡七星瓢蟲幼蟲均具有一定的殺傷力，且死亡率隨給藥濃度的升高而增大。

采用寇氏法計(jì)算了3種不同殺蟲劑及3種不同劑型的同含量阿維菌素農(nóng)藥對(duì)七星瓢蟲的急性毒性值，結(jié)果見表3?？梢姡?種不同殺蟲劑中，以高效氯氟氰菊酯對(duì)3～4 d的2齡七星瓢蟲幼蟲的毒性最高，阿維菌素其次，除蟲菊素最安全。阿維菌素對(duì)七星瓢蟲的毒性大小因劑型不同而表現(xiàn)出顯著不同，其中以微囊懸浮劑對(duì)2齡七星瓢蟲幼蟲的毒性最高，而水乳劑最安全，乳油介于兩者之間。

表2 幾種殺蟲劑及不同劑型對(duì)七星瓢蟲的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

表3 3種殺蟲劑及3種不同劑型的同含量阿維菌素對(duì)七星瓢蟲的急性毒性

3 結(jié) 論

本試驗(yàn)研究初步證實(shí)3種殺蟲劑對(duì)七星瓢蟲的急性毒性因殺蟲劑種類和劑型而顯示出明顯差異，其毒性大小順序?yàn)楦咝确杈挣ィ景⒕S菌素＞除蟲菊素，而3種不同劑型的阿維菌素對(duì)七星瓢蟲幼蟲的毒性大小順序?yàn)?5%阿維菌素微囊懸浮劑＞5%阿維菌素乳油＞5%阿維菌素水乳劑。

本文結(jié)論僅是室內(nèi)急性毒性試驗(yàn)的結(jié)果，而實(shí)際田間施藥過(guò)程中還會(huì)受田間用量、施用方法、現(xiàn)場(chǎng)氣候、環(huán)境條件等復(fù)雜因素影響，其田間毒性風(fēng)險(xiǎn)情況尚有待于進(jìn)一步研究。