馬丹倩 ，楊夢(mèng)瑤，崔亞壘,2,3，朱曉艷,2,3，付 彤，張黎杰，杜利紅，王成章,2,3，李德鋒,2,3*

（1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院，河南鄭州 450002；2.河南省草地資源創(chuàng)新與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南鄭州 450002；3.河南省牧草工程技術(shù)研究中心，河南鄭州 450002）

紫花苜蓿（Medicago sativaL.）能提高家禽生產(chǎn)性能、改善健康，在蛋雞養(yǎng)殖中應(yīng)用效果明顯。苜蓿中含有皂苷、黃酮和多糖等多種活性因子，其中的皂苷可顯著降低蛋黃膽固醇含量，提高蛋品質(zhì)[1]。硒是動(dòng)物必需的微量元素，一旦缺乏會(huì)影響動(dòng)物的生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖以及動(dòng)物產(chǎn)品的品質(zhì)[2]。目前，飼料中補(bǔ)硒主要是通過(guò)在飼料中直接添加無(wú)機(jī)硒，但其生產(chǎn)應(yīng)用時(shí)安全性較差。富硒苜蓿可將噴施的65% 以上無(wú)機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒，利用富硒苜?？梢赃_(dá)到安全、高效補(bǔ)硒的目的[3]。多不飽和脂肪酸（PUFA）是動(dòng)物體內(nèi)不能合成的必需脂肪酸，能有效改善人體糖脂代謝，對(duì)防治心血管、肥胖、炎癥等慢性疾病有顯著效果[4]。但動(dòng)植物農(nóng)產(chǎn)品中PUFA含量較低，目前通過(guò)營(yíng)養(yǎng)調(diào)控來(lái)生產(chǎn)富含PUFA的畜產(chǎn)品是研究熱點(diǎn)之一。PUFA在雞蛋中的富集效果比肉類要好，因此雞蛋可以作為PUFA的良好來(lái)源。苜蓿PUFA含量顯著高于其他飼草[5]。理論上苜蓿適合用于生產(chǎn)出符合人們脂肪酸健康需求的雞蛋。盧氏雞是河南省三大地方良種雞之一，其具有體形小、染病少和產(chǎn)蛋多等優(yōu)點(diǎn)，且有獨(dú)特的產(chǎn)綠殼蛋的性狀。本試驗(yàn)旨在研究日糧中添加苜蓿和富硒苜蓿對(duì)盧氏雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)，尤其是膽固醇和脂肪酸含量的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 本試驗(yàn)所用苜蓿由河南省新鄉(xiāng)市河南農(nóng)業(yè)大學(xué)原陽(yáng)科教試驗(yàn)園區(qū)牧草基地提供。富硒苜蓿是參照Hu等[3]的方法在紫花苜蓿株高20 cm時(shí)噴施750 kg/hm2（濃度50 mg/kg）的亞硒酸鈉溶液，收割前7 d再噴施1次。普通苜蓿和富硒苜蓿收獲干燥后打成草粉，制成草顆粒備用。以干物質(zhì)基礎(chǔ)實(shí)測(cè)，普通苜蓿硒含量為0.08 mg/kg，富硒苜蓿硒含量為0.92 mg/kg。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)選取健康狀況良好的38周齡盧氏綠殼蛋雞150只，隨機(jī)分為3個(gè)組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，2個(gè)試驗(yàn)組分別用5% 普通苜蓿和5% 富硒苜蓿替換基礎(chǔ)日糧中5%小麥麩，預(yù)試期7 d，正試期47 d。

基礎(chǔ)日糧以玉米、豆粕為主要原料，參考NRC（1994）推薦的蛋雞營(yíng)養(yǎng)需要量確定營(yíng)養(yǎng)水平，各處理日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見表1，日糧中硒來(lái)源于預(yù)混料與飼料原料所含硒。

1.3 飼養(yǎng)管理 飼養(yǎng)試驗(yàn)于2018年7月4日—2018年8月28日在河南農(nóng)業(yè)大學(xué)許昌科研教學(xué)基地進(jìn)行。試驗(yàn)蛋雞采用3層層疊式籠養(yǎng)，每籠2只雞。每天在08:30和16:00進(jìn)行飼喂，自由采食和飲水，每天16 h光照，并觀察雞只有無(wú)異常行為，每天16:00揀蛋并稱重，定期打掃圈舍衛(wèi)生。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法 每天分別記錄每個(gè)重復(fù)的雞只數(shù)、產(chǎn)蛋數(shù)及總蛋重，同時(shí)每周以重復(fù)為單位記錄蛋雞耗料量，并計(jì)算第1～2、3～5、6～7周各組雞只的產(chǎn)蛋率、蛋重、平均日采食量及料蛋比等生產(chǎn)性能指標(biāo)。

試驗(yàn)第4周和第7周，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取5枚雞蛋測(cè)定蛋重、蛋黃重、蛋殼強(qiáng)度、哈氏單位、蛋黃顏色、蛋白高度，并計(jì)算蛋黃比率、蛋形指數(shù)等常規(guī)蛋品質(zhì)指標(biāo)。每組隨機(jī)選取3個(gè)重復(fù)的蛋黃，采用HP-7890氣相色譜儀（USA）測(cè)定脂肪酸、維生素含量，電感耦合等離子質(zhì)譜儀（X series 2，USA）測(cè)定鋅（Zn）、鐵（Fe）、硒（Se）、鈣（Ca），用試劑盒測(cè)蛋黃膽固醇含量。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 所有數(shù)據(jù)使用 Excel 2010進(jìn)行整理，用 SPSS 24.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，差異顯著時(shí)做Duncan′s多重比較，數(shù)據(jù)用平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差表示。P＞0.05表示差異不顯著，P＜0.05表示差異顯著。

表1 各處理日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

2 結(jié)果與分析

2.1 富硒苜蓿對(duì)盧氏雞生產(chǎn)性能的影響 由表2可知，與對(duì)照組相比，5% 普通苜蓿組與5% 富硒苜蓿組第1～2、3～5、6～7周的產(chǎn)蛋率、蛋重、平均采食量和料蛋比差異均不顯著。

2.2 富硒苜蓿對(duì)常規(guī)蛋品質(zhì)的影響 由表3可知，5%普通苜蓿組第4周的蛋白相對(duì)高度顯著高于對(duì)照組，第4周和第7周的其他常規(guī)蛋品質(zhì)指標(biāo)各組間均無(wú)顯著差異。

2.3 富硒苜蓿對(duì)蛋黃維生素、微量元素及膽固醇含量的影響 由表4可知，5%普通苜蓿組第4周的維生素D含量顯著高于其他2個(gè)組，5%富硒苜蓿組膽固醇含量顯著低于其他2個(gè)組。與第4周相比，第7周各試驗(yàn)組膽固醇含量下降，且2個(gè)試驗(yàn)組膽固醇含量顯著低于對(duì)照組。

2.4 富硒苜蓿對(duì)蛋黃脂肪酸含量的影響 由表5可知，5% 富硒苜蓿組第4周的蛋黃中亞油酸（C18:2n6）和十七烷酸（C17:0）含量顯著高于對(duì)照組。第7周，2個(gè)試驗(yàn)組反油酸、油酸含量顯著低于對(duì)照組；5%富硒苜蓿組蛋黃中亞油酸（C18:2n6）含量顯著高于對(duì)照組。2個(gè)試驗(yàn)組α-亞麻酸（C18:3n3）和二十二碳六烯酸（C22:6n3，DHA）含量在第4、7周均顯著高于對(duì)照組。

表2 富硒苜蓿對(duì)盧氏雞生產(chǎn)性能的影響

表3 富硒苜蓿對(duì)常規(guī)蛋品質(zhì)的影響

表4 富硒苜蓿對(duì)蛋黃維生素、微量元素及膽固醇含量的影響

3 討論

3.1 富硒苜蓿對(duì)盧氏雞生產(chǎn)性能和常規(guī)蛋品質(zhì)的影響雞是單胃動(dòng)物，消化道較短，在飼糧中苜蓿的添加水平較高時(shí)，纖維含量較高會(huì)造成飼糧能量不足，同時(shí)會(huì)加快腸道的蠕動(dòng)，使得食物在腸道滯留的時(shí)間變短，降低日糧的利用率，從而造成蛋雞的產(chǎn)蛋率下降。苜蓿富含多種氨基酸、維生素，在一定程度上可以改善飼糧品質(zhì)，所以用苜蓿少量替換小麥麩可以小幅提高產(chǎn)蛋量[6]。一般認(rèn)為，在產(chǎn)蛋雞日糧中加入5%的苜蓿草粉對(duì)產(chǎn)蛋性能及蛋殼質(zhì)量無(wú)影響[7-10]。本研究結(jié)果同樣表明，添加5% 普通苜蓿及5% 富硒苜蓿對(duì)盧氏雞產(chǎn)蛋率、蛋重、平均采食量和料蛋比無(wú)顯著影響。硒對(duì)蛋雞的生產(chǎn)水平和蛋品質(zhì)的影響有限[11-13]。本試驗(yàn)各組日糧中硒含量差別不大，日糧中添加5%普通苜蓿和5%富硒苜蓿對(duì)盧氏雞蛋品質(zhì)亦無(wú)顯著影響。

表5 富硒苜蓿對(duì)蛋黃脂肪酸含量的影響 mg/g

蛋黃顏色的深淺主要受遺傳因素和飼糧中著色物質(zhì)的影響。苜蓿中含有大量家禽自身不能合成的類胡蘿卜素和葉黃素，可以提高蛋黃顏色[14]。已有研究表明[8,15]，蛋雞日糧中添加苜蓿草粉對(duì)蛋黃著色有極顯著的促進(jìn)作用，但對(duì)蛋殼品質(zhì)無(wú)顯著影響。本試驗(yàn)中，日糧中添加5%普通苜蓿和5%富硒苜蓿對(duì)盧氏雞常規(guī)蛋品質(zhì)指標(biāo)均無(wú)顯著影響。蛋黃顏色無(wú)顯著變化可能是受遺傳因素影響，海蘭褐蛋雞、文昌雞、蕭山雞等蛋雞的蛋黃顏色多為7～8級(jí)，盧氏雞蛋黃顏色多在10級(jí)左右，較其他品種的蛋雞蛋黃顏色深，故富硒苜蓿對(duì)蛋黃顏色的提升作用未能體現(xiàn)。

3.2 富硒苜蓿對(duì)蛋黃維生素、微量元素及膽固醇含量的影響 研究發(fā)現(xiàn)，苜蓿草粉可以降低蛋黃膽固醇含量[9,16]。蛋雞每天合成約300 mg膽固醇，其中除了一部分發(fā)生轉(zhuǎn)化，另有小部分排入腸外，約有2/3的膽固醇沉積在蛋中。劉婷等[17]研究發(fā)現(xiàn)，苜蓿皂苷對(duì)海蘭褐蛋雞蛋黃膽固醇含量有降低趨勢(shì)。紫花苜蓿中含有多種具有生理活性的苷類（皂苷、黃酮苷、香豆素苷等），可促進(jìn)膽固醇降解成膽酸排出，并能與膽固醇結(jié)合生成不溶于水的復(fù)合物，抑制內(nèi)、外源性膽固醇在腸中吸收，從而降低血漿中膽固醇含量。同時(shí)，苜蓿中含有的纖維能束縛腸道內(nèi)膽固醇，纖維促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，縮短其通過(guò)腸道的時(shí)間，減少膽固醇的重吸收，增加糞中膽固醇排出量，從而降低膽固醇的吸收量，進(jìn)一步降低雞蛋中的膽固醇沉積量[18]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中添加苜?？娠@著降低蛋黃膽固醇含量，富硒苜蓿效果優(yōu)于普通苜蓿。硒是飼料中需添加的常規(guī)成分。Leeson等[19]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加硒能顯著提高蛋硒含量。肖穎等[20]用3種不同硒飼料飼喂雞60 d后雞蛋中硒含量（0.32～0.47 mg/kg）均上升，達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。本試驗(yàn)中，由于各組日糧預(yù)混料中均已添加0.2 mg/kg硒，根據(jù)NRC（1994）標(biāo)準(zhǔn)[18]，已滿足盧氏雞對(duì)日糧硒的需要量。由于本試驗(yàn)樣本量較小，且各組日糧中硒含量差別細(xì)微，富硒苜蓿并未促進(jìn)蛋黃硒含量增加，后期應(yīng)加大樣本量進(jìn)一步研究富硒苜蓿對(duì)蛋黃硒含量的影響。

3.3 富硒苜蓿對(duì)蛋黃脂肪酸的影響 日糧脂肪酸組成影響蛋黃中脂肪酸的沉積，且呈正相關(guān)，目前多是通過(guò)添加富含PUFA的原料調(diào)控蛋黃中脂肪酸。Ehr等[21]通過(guò)在日糧添加亞麻籽油使得蛋黃中ω-3 PUFA含量顯著提高，且飼喂2周即可穩(wěn)定沉淀；Qi等[22]通過(guò)添加共軛亞油酸可改變蛋黃脂肪酸組成，使得單不飽和脂肪酸（MUFA）含量顯著降低；Cachaldora等[23]通過(guò)添加富含EPA和DHA的兩種魚油，生產(chǎn)出主要含有DHA，伴隨著少量EPA的雞蛋。紫花苜蓿中α-亞麻酸占其脂肪酸組成的20.4%，亞油酸次之，油酸含量最低，其組成有利于提高蛋黃中PUFA含量，降低飽和脂肪酸含量。本試驗(yàn)中，添加5%普通苜蓿和5%富硒苜蓿均能顯著提高蛋黃中亞油酸、α-亞麻酸和DHA含量，表明苜蓿中的PUFA在雞蛋中得到富集。這與Cherian等[24]的研究結(jié)果基本一致。與對(duì)照組相比，添加5%富硒苜蓿組蛋黃中的亞油酸含量顯著升高，蛋黃中沉積的量高于苜?？商峁┑牧浚赡茉蚴擒俎８缓w維，腸道中的微生物菌群利用其合成了一部分的亞油酸[25]。本試驗(yàn)中試驗(yàn)組蛋黃的DHA含量顯著升高，但試驗(yàn)用的苜蓿并未檢出DHA，推測(cè)蛋黃中的DHA是由盧氏雞吸收的α-亞麻酸轉(zhuǎn)化而來(lái)，但α-亞麻酸轉(zhuǎn)化DHA轉(zhuǎn)化率很低，一般不超過(guò)0.4%，按此比例計(jì)算，苜蓿中的α-亞麻酸不足以轉(zhuǎn)化成蛋黃中DHA增加的量，推測(cè)苜蓿所含的共軛亞油酸在促進(jìn)ω-3 PUFA合成方面起了一定作用。本試驗(yàn)中，第7周蛋黃中α-亞麻酸和DHA含量較第4周均有下降，可能是隨飼料放置時(shí)間增加，ω-3 PUFA較易被氧化含量減少[26]，所以苜?；蚱渌暳喜灰舜娣胚^(guò)久。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中添加5% 普通苜蓿、5%富硒苜蓿對(duì)盧氏綠殼蛋雞生產(chǎn)性能沒有影響，但能顯著降低蛋黃膽固醇含量，顯著提高蛋黃中亞油酸、α-亞麻酸和DHA的含量。