王浩驊

【關(guān)鍵詞】完帶湯顆粒;提取;成型;工藝

【中圖分類號(hào)】R271.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1002-8714（2020）06-0004-02

完帶湯已入選國(guó)家中醫(yī)藥管理局公布的第一批100種古代經(jīng)典名方目錄，是清代名醫(yī)傅山在《傅青主女科》中為治療白帶所設(shè)的名方，“婦人有終年累月下流白物，如涕如唾，不能禁止，甚則臭穢者，所謂白帶也?！畏ㄒ舜笱a(bǔ)脾胃之氣，稍佐以舒肝之品，使風(fēng)木不閉塞于地中，則地氣自升騰于天上，脾氣健而濕氣消，自無(wú)白帶之患矣。方用完帶湯”[1]。組方為白術(shù)一兩（土炒），山藥一兩（炒），人參二錢，白芍五錢（酒炒），車前子三錢（酒炒），蒼術(shù)三錢（制），甘草一錢，陳皮五分，黑芥穗五分，柴胡六分，水煎服[2]。據(jù)現(xiàn)代學(xué)者文獻(xiàn)考證，清代1兩約合如今的37.3g[3-5]，每處方折合一日飲片為132.8g，日服用劑量較大，宜制成顆粒劑。至今未見(jiàn)有關(guān)完帶湯顆粒工藝方面的報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)對(duì)完帶湯顆粒的提取和成型進(jìn)行了優(yōu)化，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與材料

1.1 儀器與試劑

HS-337電子分析天平（邢臺(tái)慧思科技有限公司），CAV313C電子分析天平（上海皆準(zhǔn)儀器設(shè)備有限公司），島津LC-20高效液相色譜儀（日本島津），UC-120D超聲波清洗器（寧波市雙嘉儀器有限公司），DHG型鼓風(fēng)干燥箱（鄭州宏華儀器有限公司）;N-1300Sh-W旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海助乘實(shí)業(yè)有限公司）。

乙腈、磷酸為色譜純，水為重蒸水，其余試劑為分析純。

1.2 試藥

芍藥苷對(duì)照品（20mg，110736-201842，純度為97.4%）購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院，白術(shù)等藥材飲片均購(gòu)自濟(jì)南市建聯(lián)中藥有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取樣品的制備

按處方比例分別稱取白術(shù)（土炒）224g，山藥（炒）224g，人參45g，白芍（酒炒）112g，車前子（酒炒）67g，蒼術(shù)（制）67，甘草22g，陳皮13g，黑芥穗13g，柴胡16g，共9份，每份共計(jì)802g，加水浸泡40min，提取，各提取液過(guò)濾后合并，精密吸取5mL，水浴蒸干，用70%甲醇轉(zhuǎn)移至10mL量瓶中，超聲處理30分鐘，冷卻至室溫，用70%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.2 干膏率的測(cè)定

分別精密量取各提取液70mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸至近干后100℃干燥至恒重，放至室溫，稱重，計(jì)算。

2.3 芍藥苷含量測(cè)定

2.3.1 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)? 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-0.1%磷酸（15：85）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)230nm[6]。

2.3.2 對(duì)照品溶液制備? 取取芍藥苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含60?g的溶液，即得。

2.3.3 供試品溶液制備? 取裝量差異項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取約5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇100mL，按“2.1”項(xiàng)下制備方法，自“水浴蒸干”起制備，即得。

2.3.4 陰性樣品溶液制備? 按完帶湯顆粒提取方法制備不含白芍的陰性樣品，方法同“2.1”，即得。

2.3.5 線性與范圍? 精密稱取芍藥苷對(duì)照品10.28mg（純度97.4%）置50mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，作為對(duì)照品貯備液;分別精密量取貯備液2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0mL、7.0mL置10mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為芍藥苷對(duì)照品線性溶液。分別吸取上述對(duì)照品線性溶液注入高效液相色譜儀，并記錄色譜圖，以濃度C為橫坐標(biāo)，峰面積A為縱坐標(biāo)，繪制線性圖，回歸方程為A=281835C+289201，R2=0.9995;結(jié)果芍藥苷對(duì)照品在40.1～140.2?g/mL濃度范圍內(nèi)，峰面積與濃度線性關(guān)系良好。

2.3.6 精密度試驗(yàn)? 取芍藥苷對(duì)照品溶液（65.69?g/mL）注入高效液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6次，峰面積RSD為1.56%，精密度良好。

2.3.7 重復(fù)性試驗(yàn)? 取同一批完帶湯顆粒樣品6份，按“2.3.3”項(xiàng)制備，重復(fù)測(cè)定6次，結(jié)果芍藥苷含量的RSD為0.43%，含量測(cè)定方法重復(fù)性良好。

2.3.8 穩(wěn)定性試驗(yàn)? 取同一完帶湯顆粒供試品溶液分別于0h、2h、4h、6h、8h、12h和18h分別進(jìn)樣，記錄峰面積，結(jié)果芍藥苷峰面積RSD為0.52%，完帶湯顆粒供試品溶液在18h內(nèi)穩(wěn)定。

2.4 水提部分正交試驗(yàn)[7-10]

2.4.1 水提工藝正交試驗(yàn)

按“2.1”項(xiàng)下分別稱取完帶湯顆粒處方中白術(shù)（土炒）等飲片共9份，每份共計(jì)802g，參考相關(guān)文獻(xiàn)，按表1進(jìn)行正交試驗(yàn)，以干膏率和提取液中芍藥苷含量為指標(biāo)進(jìn)行優(yōu)選，因素水平等見(jiàn)下表。

表1? ?因素水平表

表2? ?正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

表3? ?出干膏率方差分析

表4? ?芍藥苷含量方差分析

從直觀及方差分析可知，以提取液中出干膏率為指標(biāo)時(shí)因素A2與A3、C2與C3無(wú)區(qū)別，可任意選擇，B3>B2，應(yīng)選B3;以提取液中芍藥苷含量為指標(biāo)時(shí)A3>A3>A1，B3>B2與B1，C3與C2>C1，C3與C2無(wú)區(qū)別，可任意選擇;從可操作和生產(chǎn)成本等方面綜合考慮，最終確定提取工藝A3B3C2（即處方中飲片加8倍量水提取3次，每次50分鐘）。

2.4.2 提取驗(yàn)證試驗(yàn)

按“2.1”項(xiàng)下分別稱取白術(shù)（土炒）等飲片3份，每份共計(jì)802g，分別按A3B3C2提取，測(cè)定干膏率和芍藥苷含量，對(duì)提取工藝進(jìn)行驗(yàn)證。

表5? ?提取工藝驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表

結(jié)果表明，完帶湯的提取工藝（加8倍量水提取3次，每次50分鐘）穩(wěn)定。

2.5 成型工藝研究

2.5.1 潤(rùn)濕劑的選擇

本品以水提取，日服劑量處方出干膏較多，在預(yù)試驗(yàn)中稠膏制粒時(shí)，軟材粘性較大，不易制粒，需加入較多的賦形劑，故以干膏粉與賦形劑混合后制粒，分別按完帶湯顆粒處方稱取白術(shù)（土炒）飲片共5份，每份共計(jì)802g，加8倍量水提取3次，每次50分鐘，合并濾液，濾過(guò)，濾液濃縮成清膏后干燥，粉碎成細(xì)粉，平均分成5份與輔料混勻，以不同濃度的乙醇為潤(rùn)濕劑制軟材，尼龍篩網(wǎng)制粒，75℃干燥，整粒，結(jié)果見(jiàn)下表。

表6? ?潤(rùn)濕劑選擇結(jié)果

由上表可知，干膏粉與賦形劑混勻后以50%乙醇作潤(rùn)濕劑時(shí)，顆粒成型率高，可操作性強(qiáng)，故選擇以50%乙醇作潤(rùn)濕劑。

2.5.2 賦形劑的選擇：

分別稱取白術(shù)（土炒）飲片共5份，每份共計(jì)802g（6日劑量），制備5份完帶湯顆粒干膏粉樣品，混勻后平均分成5份，與輔料混勻，制50%乙醇制粒，干燥，整粒。以顆粒的成型率、制?？刹僮餍詾樵u(píng)價(jià)指標(biāo)，結(jié)果見(jiàn)下表。

表7? ?賦形劑選擇結(jié)果

結(jié)果：以可溶性淀粉：糊精=4：5為賦形劑時(shí)，與干膏粉混合后制粒，可操作性強(qiáng)，顆粒成型率最佳。

2.6 顆粒中試工藝驗(yàn)證

按完帶湯顆粒處方稱取白術(shù)（土炒）、山藥（炒）、人參、白芍（酒炒）、車前子（酒炒）、蒼術(shù)（制）、甘草、陳皮、黑芥穗和柴胡按優(yōu)選的工藝進(jìn)行了3批中試驗(yàn)證，結(jié)果見(jiàn)表8。

表8? ?完帶湯顆粒中試表

由上表可知，經(jīng)3批中試驗(yàn)證，完帶湯顆粒的生產(chǎn)工藝穩(wěn)定。

3 討論

3.1 根據(jù)古代經(jīng)典名方中藥復(fù)方制劑簡(jiǎn)化注冊(cè)審批管理規(guī)定第六條：古代經(jīng)典名方制備方法除成型工藝外，其余制備方法應(yīng)當(dāng)與古代醫(yī)籍記載基本一致，宜用水煎提取[11]，完帶湯顆粒以水煎煮、濃縮，干燥粉碎成細(xì)粉后制成顆粒劑，既有經(jīng)典名方的特色也保證了完帶湯顆粒的療效。

3.2 完帶湯每日飲片劑量約133g，原方只寫明水煎服，經(jīng)試驗(yàn)，藥材加水提取后得干膏率約22.5%，出干膏較多（每劑約出干膏30g），日服用3次，每次服用10g干膏，按顆粒劑的單劑量包裝為15g，每次服用2袋g，為減少日服用量故將清膏干燥后與可溶性淀粉、糊精等濕法制成無(wú)糖顆粒。

3.3 參照優(yōu)選的顆粒劑制備工藝，按完帶湯顆粒每日處方量的750倍投料，進(jìn)行了3批中試生產(chǎn)，清膏濃縮干燥后粉碎成細(xì)粉與輔料混勻后，以50%乙醇制軟材，16目尼龍篩制粒，75℃減壓干燥，結(jié)果完帶湯顆粒劑的生產(chǎn)工藝穩(wěn)定，適用于生產(chǎn)。

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