王穎嫻 陳媛媛 趙帆

（西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西西安，710061）

梅毒是一種對(duì)人體健康有嚴(yán)重傷害的性傳播性疾病，該病癥從根本上來說是蒼白螺旋體（Treponemapallidum）感染所導(dǎo)致的，基于其傳播途徑，可分為先天性和后天性兩種。其中，前者就是傳播途徑就是胎盤傳播，所以胎兒分娩后就體內(nèi)就具有此病毒；后者的傳播途徑則是因?yàn)椴粷嵭孕袨椤㈤g接接觸等[1]。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)表明，梅毒近年來在我國的發(fā)病率有所上升，在萬分之三到萬分之四之間。梅毒是一種全年齡段均可感染發(fā)病的疾病，實(shí)際患者主要集中在20-40 歲群體中[2]。梅毒如果沒有得到有效控制，會(huì)造成患者多器官功能障礙，具有很高的致死率。所以要盡量做到早檢查、早治療。當(dāng)前，檢測(cè)梅毒采用的主要方法是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。然而該方法使用以來，有一定概率會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果。為了進(jìn)一步分析酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)梅毒抗體假陽性的原因，我院展開此次臨床研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以我院2018 年1 月至2019 年12 月期間11238 例接受梅毒抗體檢測(cè)的血清標(biāo)本為對(duì)象展開分析。全部血清標(biāo)本來自于6055 例男性和5183 例女性，年齡最小者僅有1 歲，最大者95歲，平均年齡為（55.4±2.1）歲。全部參與測(cè)試的研究對(duì)象（家屬）均對(duì)本次研究知情同意，并且其中不包括惡性腫瘤疾病患者和嚴(yán)重臟器功能衰竭患者。

1.2 方法

所有參與研究的受試者，均為空腹?fàn)顟B(tài)下接受采血。共采集靜脈血5ml 并均分為兩份，分別實(shí)施酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)（ELISA）和梅毒特異性抗體檢測(cè)（TPPA）檢測(cè)。本次研究中，所使用的酶標(biāo)儀由深圳雷度生命科技公司提供，相關(guān)檢測(cè)試劑來自于上?？迫A生物。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比兩組方法得出的陽性率和陰性率，并就酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)得出的假陽性樣本展開進(jìn)一步分析，找出造成假陽性的主要原因。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS20.0 對(duì)研究中兩組患者的相關(guān)指標(biāo)展開統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量數(shù)據(jù)運(yùn)用t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)運(yùn)用χ2 檢驗(yàn)，以P＜0.05作為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 兩種方法的檢測(cè)結(jié)果

如下表1 中數(shù)據(jù)所示，相比于梅毒特異性抗體檢測(cè)的結(jié)果，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)的陽性率0.58%略高，但兩種方式的陽性率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＞0.05。

表1 兩種方法的檢測(cè)結(jié)果對(duì)比

2.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)假陽性原因分析

經(jīng)過分析，本次檢驗(yàn)中采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)11238例血液樣本，共出現(xiàn)了65 例陽性結(jié)果，其中21 例為假陽性結(jié)果。

通過對(duì)假陽性結(jié)果展開深入分析，總結(jié)其原因有如下幾點(diǎn)：11例（0.098%）假陽性是由于年齡因素影響,所占比例最高；5 例（0.046%）假陽性是由于樣本因素影響，3 例（0.027%）假陽性是由于疾病因素影響，2 例（0.018%）假陽性是由于螺旋體共生因素影響，占比最少。

3 討論

3.1 梅毒病毒及酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

就當(dāng)前對(duì)于梅毒的相關(guān)研究來看，梅毒螺旋體具有非常規(guī)律的生長(zhǎng)發(fā)育周期，通常會(huì)經(jīng)歷三個(gè)使其，分別為顆粒期、球形體期和螺旋體期；并且梅毒病毒有非常強(qiáng)的繁殖能力，30 個(gè)小時(shí)即可有一倍的增長(zhǎng)量。梅毒病毒的不同發(fā)育周期，直接決定了其處于潛伏還是發(fā)作狀態(tài)，以及其癥狀表現(xiàn)、危害性等等。研究結(jié)果表明，梅毒螺旋體是一種典型的厭氧菌，所以在外界生活的能力非常弱，特別是對(duì)各種化學(xué)藥品有極高的敏感性，在體外環(huán)境幾乎無法存活；而且梅毒病毒在光照環(huán)境、干燥環(huán)境均會(huì)快速死亡，這也導(dǎo)致此病毒難以通過器形傳播[3]。但是，梅毒病毒是一種潛伏期非常長(zhǎng)的病毒，這也是其危害性較高的重要原因，研究表明，沒梅毒病毒感染兩年后，其依然可以通過胎盤傳播。所以強(qiáng)化梅毒病毒檢測(cè)，對(duì)于一直其蔓延有非常重要的意義。當(dāng)前，我國已經(jīng)將梅毒螺旋體作為孕前保健、獻(xiàn)血的重要檢測(cè)項(xiàng)目，就是為了有效抑制其傳播。

當(dāng)前，我國在實(shí)施梅毒檢測(cè)的過程中，絕大部分地區(qū)的衛(wèi)生機(jī)構(gòu)，使用的方法都是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，通過酶聯(lián)免疫吸附和雙抗原夾心法來實(shí)施檢測(cè)，從而對(duì)患者是否受梅毒感染作出判斷[4]。這種方法降壓相對(duì)簡(jiǎn)單，所以受到了廣泛的應(yīng)用。本次實(shí)驗(yàn)中，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)的陽性率0.58%略高于梅毒特異性抗體檢測(cè)的0.39%，但兩種方式的陽性率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＞0.05。這充分體現(xiàn)了該方法所具有的價(jià)值。但是，隨著該方法大范圍展開應(yīng)用，逐漸發(fā)現(xiàn)存在這一定比例的假陽性結(jié)果，本次研究結(jié)果中也體現(xiàn)出了這一點(diǎn)。這也迅速引起了臨床上的高度重視，檢測(cè)的假陽性結(jié)果容易造成不良的效應(yīng)，尤其是當(dāng)前我國梅毒發(fā)病率逐漸提升的背景下，檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確率對(duì)于控制梅毒有非常重要的影響。所以，針對(duì)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)假陽性結(jié)果展開原因分析，具有非常重要的顯示意義。

3.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)假陽性原因分析

本次檢驗(yàn)中采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)11238 例血液樣本，共出現(xiàn)了65 例陽性結(jié)果，其中21 例為假陽性結(jié)果。這也充分證明了酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)梅毒抗體的確有一定的概率會(huì)得到假陽性結(jié)果。就導(dǎo)致酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)梅毒抗體假陽性的原因來看，年齡因素、樣本因素、疾病因素和螺旋體共生因素，分別有11 例、5 例、3 例和2 例。

（1）年齡因素。本次研究中，11 例患者因?yàn)槟挲g因素而出現(xiàn)假陽性?；颊呒拔幢憩F(xiàn)出相關(guān)癥狀，也沒有發(fā)病史與接觸史，但是檢驗(yàn)結(jié)果卻呈現(xiàn)出陽性。這樣的結(jié)果的原因就是因?yàn)槟挲g造成的。人體機(jī)能會(huì)隨著年齡的增加而逐漸衰退，各器官都會(huì)逐漸表現(xiàn)出衰退跡象，免疫功能也會(huì)出現(xiàn)明顯的跡象，這種情況下人體就會(huì)易產(chǎn)生一些針對(duì)連接用的白蛋白的抗體或一些異常蛋白質(zhì)，這就會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響[5]。因?yàn)槊嘎?lián)免疫吸附試驗(yàn)，就是通過檢測(cè)特異性蛋白抗來作出判斷的，所以對(duì)于老年受檢者來說，會(huì)由于本身的白蛋白抗體、異常蛋白質(zhì)，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽性。

（2）樣本因素。樣本因素同樣是導(dǎo)致假陽性的重要因素，本次研究中11 例假陽性結(jié)果是樣本因素引發(fā)的。在采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)過程中，如果對(duì)樣本沒有實(shí)施有效的處理，就有可能使得血液樣本中纖維蛋白為完全析出；而在樣本中遺留下來的纖維蛋白原，會(huì)附著在板孔成為薄膜層，或者呈絮狀存在，這樣也會(huì)導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果呈假陽性。研究表明，因?yàn)槔w維蛋白原殘留而造成的假陽性，二者之間有密切的正相關(guān)性。并且完全有效吸出纖維蛋白原幾乎是不可能實(shí)現(xiàn)的，即使提高離心強(qiáng)度，也無法真正實(shí)現(xiàn)這一效果。

（3）疾病因素。在造成酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)假陽性的因素中，疾病也是較為重要的因素。特別是諸如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等疾病，會(huì)造成致多克隆B 細(xì)胞活化，進(jìn)而在體內(nèi)分泌出一過性抗磷脂抗體，進(jìn)而使得酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果表現(xiàn)為陽性。

（4）螺旋體共生因素。在本次研究中，有2 例假陽性是因?yàn)槁菪w共生因素所導(dǎo)致的。本次研究中涉及的研究對(duì)象有極大的年齡跨度，從1 歲的嬰兒到95 歲的高齡者，所以患者體內(nèi)難免會(huì)存在螺旋體共存的狀況，諸如倡導(dǎo)螺旋體、口腔螺旋體等等；這些螺旋體的存在與檢測(cè)抗原發(fā)生反應(yīng)，從而使得結(jié)果表現(xiàn)為假陽性。

（5）其他原因。雖然本次研究結(jié)果中的假陽性原因分析僅限于上述四大類，但事實(shí)上，在檢測(cè)過程中還有其他的一些原因，有可能會(huì)對(duì)結(jié)果造成影響，從而表現(xiàn)出假陽性。比如，標(biāo)本保存問題，采集的血液樣本保存不當(dāng)受到細(xì)菌污染，特別是帶有有內(nèi)源性辣根過氧化物酶的細(xì)菌提，會(huì)對(duì)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果造成影響，出現(xiàn)弱的假陽性；比如檢測(cè)儀器問題，檢測(cè)過程中使用的酶標(biāo)儀，當(dāng)其反應(yīng)板底部有污染后，會(huì)造成吸光度值升高，進(jìn)而使得檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽性。

所以，在采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)梅毒的過程中，如果出現(xiàn)可疑陽性標(biāo)本，務(wù)必要認(rèn)真查找干擾因素，并在此抽血復(fù)雜，而不能草率作出決定。

3.3 結(jié)論

綜上所述，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)檢測(cè)梅毒抗體會(huì)有一定概率出現(xiàn)假陽性結(jié)果，所以在臨床上檢驗(yàn)的過程中要針對(duì)造成假陽性的相關(guān)敏感因素有充分了解，以有效降低檢測(cè)差錯(cuò)。