常正義 農(nóng)雪娟 曾永龍 許桂丹 羅宏成 胡仁統(tǒng) 王俊利 羅斌

【摘要】目的分析桂西地區(qū)女性宮頸上皮細(xì)胞感染人乳頭狀瘤病毒（HPV）的狀況與基因分布情況，為該地區(qū)預(yù)防HPV感染和宮頸癌診治提供科學(xué)依據(jù)。

方法收集2012年1月～2016年3月桂西地區(qū)接受HPV分型檢查宮頸標(biāo)本5534例。采用PCR反向點(diǎn)雜交法（PCRRBD）對(duì)宮頸上皮細(xì)胞標(biāo)本進(jìn)行18種高危HPV和5種低危HPV基因型檢測(cè)，分析女性宮頸HPV感染狀況，同時(shí)與中國(guó)其他地區(qū)研究的女性宮頸上皮細(xì)胞感染HPV的基因分布情況比較。

結(jié)果5534例女性宮頸上皮細(xì)胞標(biāo)本HPV總陽(yáng)性率為34.64%，高危HPV型別前4位的分別是16、52、58和18;單型感染陽(yáng)性率為24.77%，多重感染陽(yáng)性率為9.87%，且以16型為主的多重感染陽(yáng)性率為26.56%，以52型為主的多重感染陽(yáng)性率為31.14%，與文獻(xiàn)報(bào)道的中國(guó)其他地區(qū)HPV感染狀況和基因分布有差異。

結(jié)論我國(guó)不同地區(qū)HPV感染型別分布不同，桂西地區(qū)女性23種基因型HPV陽(yáng)性率為34.64%，高危HPV型別前4位的分別是16、52、58和18型。

【關(guān)鍵詞】人乳頭狀瘤病毒;基因分型

中圖分類號(hào)：R737.33文獻(xiàn)標(biāo)志碼：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2020.06.007

【Abstract】ObjectiveTo analyze human papillomavirus（HPV） infection status and genotype distribution in female epithelial cells of cervix in western region of Guangxi，so as to provide evidence for the prevention of HPV infection and the diagnosis and treatment of cervical cancer in this region.

MethodsFrom January 2012 to March 2016，a total of 5534 cervical specimens were collected from participants who accepted HPV typing inspection.The genotypes of 18 highrisk types and 5 lowrisk types of HPV were genotyped by dot blot hybridization reversegene chip，and the infection status of women with cervical HPV were analyzed，then the results were compared with genotype distribution of HPV infection women in the other areas of China reported by literature.

ResultsThe total positive rate of HPV infection among 5534 cases of cervical epithelial cell specimens was 34.64%.The four tops of highrisk HPV type were 16，52，58 and 18.The infection rate of single genotype was 24.77%，and the infection rate of multiple genotype was 9.87%.In addition，the infection rate of multiple genotype with mainly HPV 16 subtype was 26.56%，and the infection rate of multiple genotype with mainly HPV 52 subtype was 31.14%，which were significantly different from results reported in the other areas in China.

ConclusionThe distribution of HPV genotypes in different regions in China is varies.The positive rate of 23 genotypes HPV women in western Guangxi is 34.64%，and the top 4 risk HPV types are 16，52，58 and 18.

【Key words】HPV;genotyping

人乳頭狀瘤病毒（HPV）是已知最小的DNA病毒，可引起人類機(jī)體皮膚黏膜鱗狀上皮增殖的球形DNA病毒[1]。HPV具有高度特異性，經(jīng)常性接觸引起一過性感染，機(jī)體不能清除的少數(shù)病毒核酸持續(xù)性感染整合到宿主細(xì)胞內(nèi)，使宿主細(xì)胞發(fā)生突變，發(fā)展為癌。HPV為公認(rèn)的宮頸癌主要致病因子，根據(jù)致癌潛能其型別分為高危型和低危型，高危型HPV的感染過程更容易呈持續(xù)性，且清除率較低。而關(guān)于HPV多重感染是否更易促進(jìn)宮頸病變的發(fā)生發(fā)展，目前意見不一。本研究對(duì)來自桂西地區(qū)女性的宮頸癌組織進(jìn)行HPV基因分型檢測(cè)，探討HPV的基因多態(tài)性與宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的相關(guān)性，希望能對(duì)不同地區(qū)宮頸癌篩查與防治策略提供科學(xué)依據(jù)，為疫苗研制奠定基礎(chǔ)。

1對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象

收集2012年1月～2016年3月桂西地區(qū)（戶籍為百色、河池的常住居民）到我院接受HPV分型檢查宮頸標(biāo)本，共計(jì)5534例。患者年齡16～85歲，平均（36.68±9.09）歲。

1.2HPV基因分型檢測(cè)

采集宮頸脫落細(xì)胞，提取HPV DNA，通過擴(kuò)增其 L1 區(qū)目標(biāo)序列，PCR反向點(diǎn)雜交法（PCRRBD）判斷是否存在HPV并明確具體型別，該方法檢測(cè)5種低危型HPV（81、43、42、11和6）和18種高危型HPV（Cp8304、83、82、73、68、66、59、58、53、52、51、45、39、35、33、31、18和16）。

1.3觀察項(xiàng)目

觀察HPV感染情況，HPV感染亞型分布，多重感染含主要HPV亞型分布，比較中國(guó)不同地區(qū)間的HPV感染率。

2結(jié)果

2.1HPV感染情況

5534例女性宮頸上皮細(xì)胞標(biāo)本中陽(yáng)性1917例，總陽(yáng)性率為34.64%。單一型別的HPV感染者1371例，多重型別的HPV感染者546例。HPV感染情況見表1。

2.2HPV感染亞型分布

高危型HPV型別前4位的分別是16、52、58和18。低危型HPV 11型70例、HPV 43型55例、HPV 6型47例、HPV 42型43例、HPV 81型16例。多重型別的HPV感染者546例，多重型別感染率9.87%，其中四重型別的HPV感染者17例、三重型別的HPV感染者132例、雙重型別的HPV感染者384例、四重型別以上的HPV感染者13例。見表2。

2.3多重感染含主要HPV亞型分布

多重型別的HPV感染者546例，以16、52、58、18占絕大多數(shù)，分布情況見表3。

2.4不同地區(qū)間HPV感染率比較

各地區(qū)HPV感染率不同，北京市HPV感染率最低，遼寧省HPV感染率最高;大部分地區(qū)型別分布存在差異，高危型前四位HPV亞型也不同。見表4。

3討論

在女性群體惡性腫瘤中宮頸癌發(fā)病率排名第二，其中有近80.08%病例發(fā)生在落后國(guó)家和地區(qū)，我國(guó)每年新發(fā)病例約有11萬，而死亡病例達(dá)2.3萬[9～10]。宮頸癌的發(fā)病是一個(gè)復(fù)雜的，多因素、多階段的長(zhǎng)期漸進(jìn)的過程。過早和或過度性行為往往導(dǎo)致女性陰道黏膜輕度損傷，HPV有機(jī)可乘，可能感染并潛伏于暴露的基底細(xì)胞層，獨(dú)立的外源染色體HPV DNA游離于細(xì)胞核內(nèi)，伺機(jī)整合到宿主細(xì)胞內(nèi)并使其發(fā)生突變。HPV感染往往呈一過性，病灶自愈。少數(shù)宮頸癌持續(xù)者HPV基因線性化并與宮頸鱗狀上皮細(xì)胞基因整合，為宮頸癌的最終生成提供必要條件。16、52、58、18等HPV高危型的感染清除率低，感染后易呈持續(xù)性，大大增加了癌變的危險(xiǎn)性。2005年，國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)研究進(jìn)一步證實(shí)，高危型HPV在機(jī)體的持續(xù)感染是癌前病變及宮頸癌的直接病因[11]。目前，已報(bào)道200多種HPV亞型，根據(jù)其致癌潛能分為低危型和高危型。已明確可檢測(cè)5種低危型HPV（81、43、42、11和6）和18種高危型HPV（Cp8304、83、82、73、68、66、59、58、53、52、51、45、39、35、33、31、18和16）。由于不同HPV亞型外殼蛋白差異大，導(dǎo)致機(jī)體幾乎不存在交叉保護(hù)性抗體，故極易發(fā)生不同HPV亞型多重感染或反復(fù)感染，加上不合理用藥會(huì)導(dǎo)致自身免疫系統(tǒng)的超負(fù)荷，使部分HPV亞型很難及時(shí)清除，因而加速宮頸疾病的進(jìn)程[12～13]。

本研究5534例女性宮頸上皮細(xì)胞標(biāo)本中檢測(cè)出23種HPV基因型別，HPV陽(yáng)性感染者1917例，陰性者為3617例，總陽(yáng)性率為34.64%，單一型別的HPV感染者1371例，單一型別的HPV感染率24.77%，高危型HPV 16 型322例、HPV 52 型236例、HPV 58型149例、HPV 18 型74例、HPV 33型48例、HPV 68型45例、HPV 66型42例、HPV 31型40例、HPV 82型38例、HPV 53 型32例、HPV 51型27例、HPV 59型30例、HPV 39型13例、HPV 35型18例、HPV 83型10例、HPV 45型9例、HPV 73型6例、HPV Cp8304型1例，高危HPV型別前4位的分別是16、52、58和18。低危型HPV 11型70例、HPV 43型55例、HPV 6型47例、HPV 42型43例、HPV 81型16例。多重型別的HPV感染者546例，多重型別的HPV感染率9.87%，其中四重型別的HPV感染者17例、三重型別的HPV感染者132例、雙重型別的HPV感染者384例、四重型別以上的HPV感染者13例，表明隨多重感染數(shù)目增加感染率明顯下降。多重感染陽(yáng)性率為9.87%，且以16型為主的多重感染陽(yáng)性率為26.56%，以52型為主的多重感染陽(yáng)性率為31.14%。綜合我國(guó)部分地區(qū)研究文獻(xiàn)，我們認(rèn)為：①各地區(qū)HPV感染率不同，北京市HPV感染率最低，僅6.68%，而遼寧省HPV感染率最高達(dá)45.60%[8～13];②大部分地區(qū)型別分布存在差異，高危型前四位HPV亞型也不同。本研究桂西地區(qū)女性23種基因型HPV陽(yáng)性率為34.64%，在全國(guó)處于較高水平;高危HPV型別前4位的分別是16、52、58和18型，與其他地區(qū)存在差異，仍是以 HPV 52、16為主要感染型別，這是一致的。

總之，HPV感染是可以預(yù)防的，Merck公司研制由HPV 16、18、6、11組成的Gardasil 四價(jià)疫苗與GSK公司研制由HPV 16和HPV 18組成的Cervarix二價(jià)疫苗在國(guó)外已應(yīng)用。HPV發(fā)病因素、致病機(jī)理基本明確。由于HPV所致的宮頸癌與遺傳易感性、生物學(xué)因素及行為因素相關(guān)，所以明確本地區(qū)的主要感染型別，即可為宮頸癌的早期診斷、早期治療及隨訪監(jiān)測(cè)提供準(zhǔn)確的科學(xué)的依據(jù)，同時(shí)對(duì)治療性疫苗的研發(fā)十分有必要。

參考文獻(xiàn)

[1] ANDREASSEN T，HANSEN B T，ENGESAETER B，et al.Psychological effect of cervical cancer screening when changing primary screening method from cytology to highrisk human Papilloma virus testing[J].Int J Cancer，2019，145（1）：2939.

[2] 趙蓉，張為遠(yuǎn)，張淞文，等.2006—2008年北京地區(qū)25～54歲育齡婦女HPV亞型感染狀況的調(diào)查[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2011，46（3）：184187.

[3] 管建花，張蓉，侯文靜，等.上海奉賢地區(qū)部分婦女宮頸HPV陽(yáng)性感染特征分析[J].山東醫(yī)藥，2012，52（37）：3941.

[4] 鄒媛，郭興中，陳婕，等.浙江地區(qū)婦女生殖道人乳頭瘤病毒感染亞型的檢測(cè)及流行病學(xué)分析[J].中華流行病學(xué)雜志，2010，31（3）：353354.

[5] 王詩(shī)卓，王寧，魏恒，等.遼寧地區(qū)人乳頭瘤病毒的感染狀態(tài)及其高?；蛐偷姆植记闆r[J].中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，41（2）：146147.

[6] 張達(dá)衡，陳紅玲，楊春媚，等.宮頸組織病變與檢測(cè)HPV基因分型的意義[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（13）：16641665.

[7] 岳耀斐，楊麗娟，陳俊英，等.云南省3000例婦女宮頸人乳頭瘤病毒的檢測(cè)與基因分型[J].中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志（電子版），2012，8（5）：568572.

[8] 沈紅，程濤，王芳，等.滇東北地區(qū)4682例女性人乳頭瘤病毒感染及其亞型分型分布調(diào)查[J].昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，36（3）：2325.

[9] BRUSSELAERS N，SHRESTHA S，VAN DE WIJGERT J，et al.Vaginal dysbiosis and the risk of human papillomavirus and cervical cancer：systematic review and metaanalysis[J].Am J Obstet Gynecol，2019，221（1）：918.e8.

[10] ZHOU H，CHEN Z B，ZHANG W M，et al.Middle ear squamous papilloma：a report of four cases analyzed by HPV and EBV in situ hybridization[J].Oncol Lett，2014，7（1）：4146.

[11] 單瑋，張濤，張鐵軍，等.我國(guó)女性人乳頭瘤病毒（HPV）感染的流行病學(xué)現(xiàn)狀[J].中華疾病控制雜志，2017，21（1）：8993.

[12] LUDMIR E B，STEPHENS S J，PALTA M，et al.Human papillomavirus tumor infection in esophageal squamous cell carcinoma[J].J Gastrointest Oncol，2015，6（3）：287295.

[13] ZHAI K，DING J，SHI H Z.HPV and lung cancer risk：a metaanalysis[J].J Clin Virol，2015，63：8490.

（收稿日期：2019-07-08修回日期：2020-03-30）