雷宇杰，孟 瑾

（1 信陽農(nóng)林學院水產(chǎn)學院，河南 信陽464000；2 河南省漁業(yè)生物工程技術(shù)研究中心，河南 信陽464000）

斑點叉尾鮰（Ietalurus Punetaus），鯰形目，鮰科魚類，無鱗，能自然繁殖也可在每年5-8月份進行人工繁殖。原產(chǎn)于美國，是美國淡水水域主要魚類之一，產(chǎn)量超過美國淡水養(yǎng)殖魚類總量的60%以上[1]，斑點叉尾鮰喜群居，因此起捕率可達到95%以上。經(jīng)過二十多年的推廣，養(yǎng)殖范圍已發(fā)展到我國大部分省市，2016年以后斑點叉尾鮰養(yǎng)殖形成大規(guī)?；痆2]。對于養(yǎng)殖者來說，斑點叉尾鮰具有生長速度快，抗病能力強，適應性廣泛等優(yōu)點；對于食用者來說，斑點叉尾鮰具有肉質(zhì)鮮美，蛋白質(zhì)含量高的特點[3-6]。近年來養(yǎng)殖過程中易發(fā)生鮰魚套腸病，且一旦發(fā)現(xiàn)難以治療，給養(yǎng)殖戶帶來了較大損失。

隨著科學技術(shù)的不斷發(fā)展，醫(yī)學技術(shù)的不斷進步，在20世紀70年代初期醫(yī)學界推出了多普勒超聲診斷技術(shù)，并逐漸代替了A、D超[7]，多普勒超聲診斷技術(shù)的原理是根據(jù)不同密度、不同聲速等理化性的生物組織對外來的超聲波能量所反射出的強弱不同，從中提取出強弱信息，從而對生物組織的內(nèi)在特點進行觀察。在人類醫(yī)學上，多普勒超聲診斷因具有檢測效率高，檢測過程無痛苦，檢測結(jié)果精確等優(yōu)點被廣泛應用，對醫(yī)生來說減輕了視覺疲勞，同時增加了診斷信心。近年來，隨著集約化、規(guī)?；B(yǎng)殖的發(fā)展以及醫(yī)療水平的不斷提高，最初被應用在大型動物繁殖與產(chǎn)科上，為提高檢測效率，減少動物痛苦，多普勒超聲診斷技術(shù)在大型畜牧動物方面得應用越來越多[8-10]，但在水產(chǎn)領域應用卻很少。

國外的超聲診斷技術(shù)在水產(chǎn)養(yǎng)殖方面做了較多研究，證實了該項技術(shù)在水產(chǎn)領域的可行性，并且已經(jīng)應用到了水產(chǎn)養(yǎng)殖中，但在我國相關研究較少[11-13]，應用范圍較少，主要原因是聲波具有較特殊的物理性質(zhì)，在檢測時魚類鱗片會吸收部分超聲波，這就對超聲成像造成了直接的影響，易形成偽像，而大多數(shù)養(yǎng)殖魚類體表都富有鱗片，造成了研究種類的單一性，目前我國主要應用在鱘魚，鯰科魚類等無鱗魚，由此可見，多普勒超聲診斷技術(shù)在水產(chǎn)領域還需要更多基礎研究以便更好的發(fā)展應用。本文選用斑點叉尾鮰作為試驗對象，一是斑點叉尾鮰屬無鱗魚，二是斑點叉尾鮰屬大規(guī)格魚類，產(chǎn)卵量較大。采用多普勒超聲診斷儀觀測組織器官和性腺發(fā)育情況，與解剖后的器官組織和性腺發(fā)育成熟時肉眼觀察的生物學特性做對照，以求得到斑點叉尾鮰的組織超聲影像圖和性腺發(fā)育影像圖，為疾病診斷和孵化提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗器材

1.1.1 試驗設備

Mylab20plus超聲診斷儀（意大利ESAOTE S.P.A）。

1.1.2 試驗工具

解剖工具一套（解剖盤、手術(shù)刀、手術(shù)剪、解剖針），紗布，乳膠手套，TM-100醫(yī)用超聲耦合劑（天津市西苑寺制作所）。

1.1.3 試驗動物

斑點叉尾鮰9尾，購于信陽西亞超市。肉眼初辨雌雄，保證采購的試驗對象有雌有雄，后期根據(jù)多普勒超聲診斷和解剖進一步確定。

1.2 試驗方法

1.2.1 影像的采集及處理方法

影像的采集方法∶用大撈網(wǎng)將暫養(yǎng)池中的斑點叉尾鮰撈出放在解剖盤上，用布網(wǎng)兜包住整個魚體，并將魚體腹部朝上，僅露出腹部皮膚。首先通過觀察生殖孔確定其性別，然后一個人輕輕按著頭尾防止魚體亂動，另一個人在魚腹部涂上耦合劑，使用矩形探頭緊貼魚體腹部進行探測。根據(jù)魚體各器官位置分布，從肛門開始向上探測，找出各個器官切面的超聲影像，并進行多次探測，將所探測到的圖像進行標記、保存，最后選出具有代表性的圖像進行編輯整理。

1.2.2 解剖方法

將試驗對象斑點叉尾鮰放在解剖盤上，首先使用手術(shù)剪破壞魚脊髓，以免解剖過程中掙扎跳動，使用手術(shù)剪從生殖孔向上沿腹部中心剪開，觀察其內(nèi)臟形狀、色澤、大小以及分布位置并拍照記錄，將整理好的超聲影像與解剖圖對比，確定內(nèi)在器官位置分布、是否病變以及其發(fā)育狀況，建立參考數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果

2.1 斑點叉尾鮰肝臟組織超聲影像

使用矩形線性探頭探測魚體胸鰭下方腹部位置，通過超聲影像可清晰看到肝臟組織顯示如圖1中A1、A2區(qū)域、圖2中A3、A4區(qū)域所示。肝臟呈現(xiàn)出實質(zhì)性中等的均勻性回聲，邊框清晰可見，無病變，屬于正常的肝臟組織，在探測位置通過解剖后肉眼可觀察到，該位置肝臟組織左右兩葉均呈紅褐色，大小正常，無病變現(xiàn)象，與超聲波探測結(jié)果一致。

2.2 斑點叉尾鮰膽囊組織超聲影像

在試驗對象腹部涂抹耦合劑，使用矩形線性探頭在胸鰭下方位置腹部上進行探測，可看到膽囊輪廓清晰，膽囊區(qū)域沒有回聲，超聲圖像如圖3中B區(qū)、圖4中B1區(qū)域所示。因膽囊內(nèi)部為液體，在超聲探測時無回聲，由超聲影像可看出膽囊緊貼在肝臟組織下方，在該探測位置解剖后可看到膽囊緊貼肝臟組織，呈卵圓形，黃綠色，無病變，且膽囊大小與超聲圖像看到的大致相同。

2.3 斑點叉尾鮰精巢和卵巢組織超聲影像

在魚體腹部均勻涂抹耦合劑，從魚體泄殖腔開始向兩側(cè)進行探測，斑點叉尾鮰卵巢超聲影像如圖5所示，圖像中C1到C2為該斑點叉尾鮰卵巢長度，如圖6所示，C3到C4位置，為卵巢厚度切面圖，由超聲診斷圖像可看出，卵巢組織位于腎臟組織上方位置，呈現(xiàn)出質(zhì)地均勻的中等回聲，卵粒位置具有質(zhì)地均勻的點狀回聲，卵巢整體輪廓清晰可見，在腹部兩側(cè)均可探測到此現(xiàn)象，由圖可看出探測時測量到卵巢長度46 mm，厚度9.9 mm。

在探測位置解剖后，兩側(cè)均可看到卵巢中卵粒大小均勻，且呈現(xiàn)出健康有光澤的淡黃色，解剖結(jié)果與超聲影像相符合。

使用多普勒超聲診斷儀對肉眼所判定為雄性的斑點叉尾鮰腹部進行超聲探測，如圖7，C5區(qū)域所示，影像呈現(xiàn)出中等實質(zhì)性回聲為斑點叉尾鮰腹部脂肪，對其腹部兩側(cè)進行反復探測未見卵巢，進一步判定為雄魚，但脂肪層較厚未能探測出精巢組織。解剖后取出魚體腹部脂肪組織可清晰看到精巢組織呈乳白色帶狀但整體較小，位于腹部兩側(cè)。

2.4 斑點叉尾鮰骨骼組織超聲影像

在斑點叉尾鮰腹部位置涂抹耦合劑，由肛門位置開始自下而上進行探測，可看到斑點叉尾鮰骨骼組織多普勒超聲影像如圖8、圖9所示，從超聲切面圖可看出，骨骼呈現(xiàn)出條狀強回聲且整體骨骼輪廓清晰可見，無損傷，解剖后可看出骨骼發(fā)育完善，與超聲影像探測結(jié)果一致。

3 討論與結(jié)論

3.1 討論

通過使用多普勒超聲診斷儀對斑點叉尾鮰的研究，整理出較清晰的超聲影像與解剖結(jié)果相對比，選出具有代表性的超聲影像，形成較完整的影像資料，對今后多普勒超聲診斷在水產(chǎn)領域的應用起到一定的參考作用。多普勒超聲診斷可在不傷害魚體本身的前提下快速對魚體進行檢測，可及時觀察到卵巢、性腺發(fā)育情況以及各臟器管健康狀況，可有效避免活體解剖帶來的經(jīng)濟損失，在珍稀品種的保護和繁殖方面有很大的幫助。

超聲診斷多為水產(chǎn)動物的繁殖和診斷具有較深遠的意義，相信隨著科學的不斷進步，技術(shù)的不斷完善，多普勒超聲診斷在水產(chǎn)養(yǎng)殖上的應用將會逐漸普及，得到廣泛應用。

3.2 結(jié)論

本試驗選擇無鱗魚斑點叉尾鮰作為試驗對象，試驗過程中使用多普勒超聲診斷技術(shù)對斑點叉尾鮰的內(nèi)臟器官、性腺組織、肌肉組織進行多次探查。因斑點叉尾鮰體表粘液較多，試驗過程中有利于超聲儀探頭與魚體的接觸，為形成清晰影像提供了有利條件。本次試驗共探測9條斑點叉尾鮰，根據(jù)超聲影像圖可看出∶肝臟組織左右兩葉均呈現(xiàn)出中等實質(zhì)性回聲，輪廓清晰無病變現(xiàn)象；膽囊組織位于肝臟下方位置，膽囊大小、邊界清晰可見，膽囊內(nèi)部為液體呈現(xiàn)無回聲狀態(tài)；卵巢組織呈現(xiàn)出均勻的點狀回聲，且卵粒大小均勻，整體輪廓清晰，屬健康狀態(tài)；骨骼組織影像呈現(xiàn)條狀強回聲；探測雄性魚體因脂肪層較厚，影像顯示脂肪為均勻?qū)嵸|(zhì)性回聲，由于精巢組織較小，超聲未探測到性腺；通過超聲診斷結(jié)果與解剖結(jié)果進行對比，證明了多普勒超聲診斷技術(shù)能夠較清晰的探測出斑點叉尾鮰的各個組織器官的基本情況，與解剖結(jié)果對比均處于健康狀態(tài)。本文試驗對象斑點叉尾鮰選用的個體較大，通過多普勒超聲診斷儀可以準確辨別雌雄，且可以清楚的探測到卵粒的大小，為斑點叉尾鮰的人工繁育提供可參考的依據(jù)。