高偉霞 秦小菀 張靖 朱永杰

[摘要] 目的 探討白細(xì)胞介素35（IL35）、高遷移率蛋白1（HMGB1）和CD5抗原樣蛋白（CD5L）對(duì)兒童哮喘病情及預(yù)后的評(píng)估價(jià)值。方法 選取我院2016年5月—2018年4月收治的90例哮喘病兒作為觀察對(duì)象，依據(jù)病情嚴(yán)重程度分為輕度組（n=29）、中度組（n=30）和重度組（n=31），另取30例同期健康體檢者作為對(duì)照組，均行血清IL35、HMGB1和CD5L水平檢測(cè)。比較觀察組（輕度組、中度組、重度組）與對(duì)照組各血清指標(biāo)水平，以及其與哮喘病情和預(yù)后相關(guān)性。結(jié)果 觀察組IL35、CD5L水平低于對(duì)照組，血清HMGB1水平高于對(duì)照組（t=3.524～23.700，P<0.05）。各組間血清IL35、HMGB1和CD5L水平比較，差異有顯著性（F=8.416～200.766，P<0.05）;且重度組、中度組及輕度組血清IL35、CD5L水平低于對(duì)照組，血清HMGB1水平高于對(duì)照組（P<0.05）;重度組及中度組血清IL35、CD5L水平低于輕度組，血清HMGB1水平高于輕度組（P<0.05）;重度組血清IL35、CD5L水平低于中度組，血清HMGB1水平高于中度組（P<0.05）。血清IL35、CD5L水平與哮喘病情呈負(fù)相關(guān)（r=-0.719、-0.706，P<0.05）;血清HMGB1水平與哮喘病情呈正相關(guān)（r=0.699，P<0.05）。經(jīng)Logistic回歸分析，血清HMGB1、CD5L及IL35均為病兒預(yù)后影響因素（OR=0.546～1.867，95%CI=0.371～2.841，P<0.05）。結(jié)論 相比于健康小兒，哮喘病兒血清HMGB1水平較高、血清IL35與CD5L水平較低，經(jīng)對(duì)癥治療后其水平有相應(yīng)改變，可用來評(píng)估病兒病情及預(yù)后。

[關(guān)鍵詞] 哮喘;兒童;白細(xì)胞介素-35;HMGB1蛋白質(zhì);CD5抗原

[中圖分類號(hào)] R562.25 ?[文獻(xiàn)標(biāo)志碼] A ?[文章編號(hào)] 2096-5532（2020）02-0233-04

doi：10.11712/jms.2096-5532.2020.56.039 [開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）]

[網(wǎng)絡(luò)出版] http：//kns.cnki.net/kcms/detail/37.1517.R.20200320.1506.002.html;2020-03-23 11：59：13

[ABSTRACT] Objective To investigate the value of interleukin-35 （IL-35）， high-mobility group box 1 （HMGB1）， and CD5 antigen-like protein （CD5L） in evaluating the condition and prognosis of children with asthma. ?Methods A total of 90 children with asthma who were admitted to our hospital from May 2016 to April 2018 were enrolled as subjects， and according to di-sease severity， they were divided into mild group with 29 children， moderate group with 30 children， and severe group with 31 children. A total of 30 children who underwent physical examination were enrolled as control group. Serum levels of IL-35， HMGB1， and CD5L were measured for both groups. Serum indices were compared between the observation group （the mild group， the mo-derate group， and the severe group） and the control group， and their correlation with the condition and prognosis of asthma was analyzed. ?Results Compared with the control group， the observation group had significantly lower levels of IL-35 and CD5L and a significantly higher level of HMGB1 （t=3.524-23.700，P<0.05）. There were significant differences in the serum levels of IL-35， HMGB1， and CD5L between groups （F=8.416-200.766，P<0.05）， and compared with the control group， the severe， mode-rate， and mild groups had significantly lower levels of IL-35 and CD5L and a significantly higher level of HMGB1 （P<0.05）; compared with the mild group， the severe and moderate groups had significantly lower levels of IL-35 and CD5L and a significantly higher level of HMGB1 （P<0.05）; the severe group had significantly lower levels of IL-35 and CD5L and a significantly higher le-vel of HMGB1 than the moderate group （P<0.05）. The serum levels of IL-35 and CD5L were negatively correlated with the condition of asthma （r=-0.719，-0.706;P<0.05）， and the serum level of HMGB1 was positively correlated with the condition of asthma （r=0.699，P<0.05）. The logistic regression analysis showed that serum HMGB1， CD5L， and IL-35 were influencing factors for the prognosis of children with asthma （OR=0.546-1.867，95%CI：0.371-2.841，P<0.05）. ?Conclusion Compared with healthy children， children with asthma have a higher serum level of HMGB1 and lower serum levels of IL35 and CD5L， which tend to change after symptomatic treatment and can thus be used to assess the condition and prognosis of children with asthma.

[KEY WORDS] asthma; child; interleukin-35; HMGB1 protein; CD5 antigen

哮喘為小兒常見多發(fā)慢性呼吸系統(tǒng)疾患，相關(guān)報(bào)道顯示全球范圍內(nèi)哮喘病人高達(dá)3億人之多，預(yù)測(cè)至2025年將升至4億人，且每年約有25萬(wàn)人因哮喘而死亡，約有1 500萬(wàn)人因哮喘致傷殘[1-5]。生物學(xué)標(biāo)志物CD5抗原樣蛋白（CD5L）是一種反映機(jī)體所處生物學(xué)進(jìn)程的、可供客觀評(píng)價(jià)及測(cè)定的血清標(biāo)志物，有學(xué)者指出其水平與哮喘等呼吸道疾病病人的病情嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)，為評(píng)估病情進(jìn)展的有效指標(biāo)[6-7]。此外，有學(xué)者指出哮喘發(fā)作時(shí)白細(xì)胞介素35（IL35）、高遷移率蛋白1（HMGB1）等細(xì)胞因子調(diào)節(jié)失衡，亦在一定程度上促進(jìn)了病情進(jìn)展[8-11]。基于此本研究選取我院90例哮喘病兒及30例健康小兒，首次探討了血清HMGB1、CD5L及IL35水平變化對(duì)兒童哮喘病情及預(yù)后的評(píng)估價(jià)值。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取我院2016年5月—2018年4月收治的90例哮喘病兒作為觀察對(duì)象（觀察組），依據(jù)朱碧君等[12]報(bào)道的病情嚴(yán)重程度分為3個(gè)亞組。輕度組29例，男17例，女12例;年齡2～12歲，平均年齡（6.50±2.10）歲;病程6～24個(gè)月，平均病程為（17.20±5.40）個(gè)月。中度組30例，男18例，女12例;年齡3～12歲，平均年齡為（6.90±2.05）歲;病程5～24個(gè)月，平均病程（18.02±5.60）個(gè)月。重度組31例，男19例，女12例;年齡2～12歲，平均年齡為（7.01±2.40）歲;病程6～25個(gè)月，平均病程為（17.12±5.10）個(gè)月。另取30例同期健康體檢者作為對(duì)照組，男17例，女13例;年齡3～12歲，平均年齡（6.49±2.17）歲。各組基線資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審查批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①觀察組均符合《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南》中哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)[13];②所有受檢者年齡范圍均為2～12歲;③病兒或家屬知曉本研究并自愿簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①近期出現(xiàn)呼吸道感染者;②合并其他呼吸系統(tǒng)疾患;③心、腎、肝等重要臟器衰竭者;④先天畸形病兒;⑤病例之間存在血緣關(guān)系者;⑥近期使用免疫調(diào)節(jié)劑或糖皮質(zhì)激素治療者;⑦復(fù)發(fā)哮喘病兒;⑧伴有嚴(yán)重精神疾患或其他因素所致難以配合完成本研究者。

1.2 研究方法

1.2.1 檢測(cè)指標(biāo)及方法 所有受檢者均采集4 mL空腹靜脈血，以3 000 r/min離心15 min（離心半徑為5.5 cm），分離血清置于-80 ℃冰箱中保存待檢。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法分別測(cè)定各組血清IL35、HMGB1及CD5L水平，檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自日本東京Shino-Test公司，所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.2.2 治療方法 對(duì)病兒病情進(jìn)行評(píng)估后，采用吸入性糖皮質(zhì)激素、白三烯受體拮抗劑或二者聯(lián)合治療。治療3個(gè)月評(píng)估病兒病情控制情況，若未控制進(jìn)行強(qiáng)化升級(jí)治療（高劑量吸入性糖皮質(zhì)激素、白三烯受體拮抗劑），若部分控制則進(jìn)行升級(jí)治療（中等劑量吸入性糖皮質(zhì)激素、白三烯受體拮抗劑），若控制良好則降級(jí)治療直至最低維持劑量。治療3個(gè)月后對(duì)其進(jìn)行預(yù)后評(píng)估。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)量資料以±s表示，觀察組與對(duì)照組比較使用t檢驗(yàn);多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn);以Spearman相關(guān)分析法進(jìn)行相關(guān)性分析;采用Logistic回歸分析預(yù)后的影響因素。以P<0.05為差異有顯著性。

2 結(jié) ?果

2.1 觀察組與對(duì)照組血清指標(biāo)比較

觀察組IL35、CD5L水平均明顯低于對(duì)照組，血清HMGB1水平則明顯高于對(duì)照組，差異均有顯著性（t=3.524～23.700，P<0.05）。見表1。

2.2 不同病情組血清指標(biāo)的比較

各組間血清IL35、HMGB1、CD5L水平比較，差異有顯著性（F=8.416～200.766，P<0.001）。其中重度組、中度組及輕度組血清IL35、CD5L水平均較對(duì)照組低，而血清HMGB1水平較對(duì)照組高（P<0.05）;重度組及中度組病兒血清IL35、CD5L水平均較輕度組低，血清HMGB1水平較輕度組高（t=10.876～41.529，P<0.05）;重度組血清IL35、CD5L水平均較中度組低，而血清HMGB1水平較中度組高（t=7.867～40.291，P<0.05）。見表2。

2.3 血清指標(biāo)與病情嚴(yán)重程度相關(guān)性

經(jīng)Spearman相關(guān)分析表明，血清IL35、CD5L水平與哮喘病情呈負(fù)相關(guān)（r=-0.719、-0.706，P<0.05）;血清HMGB1水平與哮喘病情呈正相關(guān)（r=0.699，P<0.05）。

2.4 不同預(yù)后病兒血清指標(biāo)水平比較

參照《哮喘病藥物治療學(xué)》的療效標(biāo)準(zhǔn)[14]，本文90例哮喘病兒治療2周后，治療結(jié)果分為預(yù)后優(yōu)良（n=80）及預(yù)后一般（n=10）。與預(yù)后一般病兒比較，預(yù)后優(yōu)良病兒血清CD5L及IL35水平較高，血清HMGB1水平較低（t=2.004～3.752，P<0.05）。經(jīng)Logistic回歸分析顯示，血清HMGB1、CD5L及IL35的水平均為哮喘病兒預(yù)后的影響因素（OR=0.546～1.867，95%CI=0.371～2.841，P<0.05）。見表3、4。

3 討 ?論

哮喘反復(fù)發(fā)作不僅影響小兒正常的生長(zhǎng)發(fā)育，且影響其日常生活及學(xué)習(xí)，加重病兒家庭及社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。有報(bào)道顯示，哮喘占全球疾病負(fù)擔(dān)的1%，需對(duì)其病情做出準(zhǔn)確評(píng)估，并進(jìn)行針對(duì)性治療[14-18]。

生物靶標(biāo)是具有某種特征、能夠反映機(jī)體生物學(xué)狀態(tài)，可用于輔助疾病鑒別診斷、進(jìn)行病情監(jiān)測(cè)及療效評(píng)估的一類指標(biāo)[2，19]。CD5L是適用于哮喘病變的生物靶標(biāo)之一，可在脂肪細(xì)胞內(nèi)吞作用下與胞漿脂肪酸合成酶結(jié)合，調(diào)控脂質(zhì)合成，能夠維持組織穩(wěn)態(tài)，抵御細(xì)胞外病原體入侵，參與哮喘的發(fā)生、發(fā)展過程[20-21]。本研究結(jié)果顯示，觀察組及其不同病情亞組（重度組、中度組、輕度組）病兒血清CD5L水平低于對(duì)照組，重度組及中度組水平低于輕度組;血清IL35、CD5L水平與病情呈負(fù)相關(guān);血清HMGB1水平與病情呈正相關(guān)，且重度組低于中度組、預(yù)后優(yōu)良病兒高于預(yù)后一般病兒。說明血清CD5L水平與哮喘病兒病情嚴(yán)重程度及預(yù)后效果關(guān)系緊密，可以作為臨床評(píng)估病兒病情及預(yù)后的有效指標(biāo)。梁然等[22]研究顯示，哮喘病兒血清IL35水平明顯較健康小兒低，指出其參與了哮喘的發(fā)生發(fā)展。IL35是由調(diào)節(jié)性T細(xì)胞分泌、由EBI3及P35兩個(gè)亞基構(gòu)成的新型抗炎細(xì)胞因子，對(duì)細(xì)胞免疫穩(wěn)態(tài)具有調(diào)控作用，當(dāng)機(jī)體發(fā)生炎癥反應(yīng)時(shí)，其免疫功能受損，致使調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量減少，進(jìn)而降低血清IL35水平[23-24]。本研究結(jié)果也顯示，重度組、中度組及輕度組血清IL35水平均低于對(duì)照組，重度組及中度組水平低于輕度組，且重度組低于中度組，可見哮喘病兒血清IL35水平隨病情加重不斷降低，與病情進(jìn)展關(guān)系密切。而經(jīng)治療后預(yù)后優(yōu)良病兒血清IL35水平高于預(yù)后一般病兒，這可能與經(jīng)藥物或機(jī)械通氣等相關(guān)治療后，病兒機(jī)體炎癥反應(yīng)減輕，機(jī)體免疫功能增強(qiáng)，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞增加有關(guān)。這與楊振朋等[25]研究結(jié)果相符。近年來也有臨床研究指出，HMGB1在肺癌、慢性阻塞性肺疾病、肺炎等多種呼吸道疾病中過表達(dá)，其可能參與了呼吸系統(tǒng)疾病的病理生理過程[26-28]。戴貞照等[29]研究指出，HMGB1在支氣管哮喘小兒淋巴細(xì)胞及外周血血漿中呈高表達(dá)狀態(tài)，且隨病情加重逐漸升高。本文結(jié)果表明，哮喘病兒血清中HMGB1水平較健康小兒高，且隨病情加重不斷升高。經(jīng)Logistic回歸分析，血清HMGB1、CD5L及IL35均為病兒預(yù)后影響因素，推測(cè)其不僅具有誘導(dǎo)小兒哮喘發(fā)作的作用，且參與了哮喘的病情進(jìn)展過程。

綜上所述，哮喘病兒血清IL35、CD5L水平較健康小兒低，隨病情加重不斷降低，與病情呈負(fù)相關(guān)，對(duì)癥治療后會(huì)有所升高;血清HMGB1水平較健康小兒高，且隨病情進(jìn)展不斷升高，與病情呈正相關(guān)，經(jīng)治療其水平會(huì)有所下調(diào)。上述指標(biāo)可作為兒童哮喘病情監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)估的有效指標(biāo)，可以在臨床上推廣應(yīng)用。

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