李珊，梁儉，馮彬，劉曉鳳，冼麗清

（1.桂西區(qū)域生態(tài)環(huán)境分析和污染控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，百色學(xué)院化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院，廣西百色533000；2.百色學(xué)院材料科學(xué)與工程學(xué)院，廣西百色533000）

山竹，著名的熱帶水果，以其果肉潔白豐腴、質(zhì)軟味甜、營(yíng)養(yǎng)全面且豐富而受到廣大消費(fèi)者的喜愛，被譽(yù)為“水果皇后”[1]。山竹在我國(guó)南方有少量種植，產(chǎn)量低，因而目前仍需大量進(jìn)口。山竹果皮是果實(shí)食用后的廢棄物，比重可達(dá)鮮果的50%以上，纖維含量大，直接舍棄易造成環(huán)境污染，同時(shí)也是一種資源的浪費(fèi)。現(xiàn)代生理學(xué)研究表明，山竹果皮中含有多種具有生物活性的化合物，常見的如果膠、黃酮、多酚、多糖等[2]。目前，關(guān)于山竹果皮中生物活性物質(zhì)的研究集中于黃酮[3]、多酚[4]等，而對(duì)多糖的提取及性質(zhì)研究較少涉及。

多糖是由單糖分子經(jīng)苷羥基脫水縮合而成的高分子化合物，是生命體中的能源物質(zhì)并且具有廣泛的生物活性[5]，普遍存在于動(dòng)植物體內(nèi)。水提法為提取多糖最常用的方法。試驗(yàn)者常將提取體系置于超聲波氛圍中，利用超聲波的機(jī)械作用破壞細(xì)胞組織以提高提取效率[6]。旨在通過(guò)超聲波輔助水提法從山竹果皮中提取多糖以深度優(yōu)化工藝條件，并采用體外測(cè)試的方法考察多糖的抗氧化活性，為加快山竹果實(shí)的綜合開發(fā)及產(chǎn)品應(yīng)用提供理論依據(jù)及數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

新鮮泰國(guó)山竹：果皮鮮亮無(wú)黑點(diǎn)無(wú)腐敗，百色市右江區(qū)水果指南學(xué)院店；三氯乙酸、連苯三酚、ABTS、DPPH、三羥基氨基甲烷、鐵氰化鉀、抗壞血酸（分析純）：北京華威銳科化工有限公司；乙醇、98%硫酸、苯酚及其它常用化學(xué)試劑（分析純）：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

高功率數(shù)控超聲波清洗器（KQ-400KDV）：上海蓮臣生物科技發(fā)展有限公司；紫外分光光度計(jì)（UV-2700）：島津企業(yè)管理（中國(guó)）有限公司；智能數(shù)顯電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（DHG-9030A）：上海坤天試驗(yàn)室儀器有限公司；恒溫水浴振蕩器（SHA-B）：浙江力辰儀器科技有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（RE-2000B）：鞏義市宇翔儀器有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

準(zhǔn)確移取0.600 0 mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0.00、1.00、3.00、5.00、7.00、9.00 mL，純水定容至 100 mL，配制濃度分別為 0.00、6.00、18.00、30.00、42.00、54.00 μg/mL葡萄糖待測(cè)液。分別移取1.00 mL上述各個(gè)濃度葡萄糖待測(cè)液至潔凈的試管中，隨后依次加入2.00 mL純水、1.50 mL 5.0%苯酚溶液，振蕩均勻。繼續(xù)加入6.00 mL 98%硫酸，35℃水浴恒溫30 min。冷卻至25℃，在296 nm下測(cè)定體系吸光度Q，擬合吸光度Q對(duì)葡萄糖濃度cg（μg/mL）的回歸方程：Q=2.113×10-3cg+3.583，R2=0.999 4。

1.2.2 山竹果皮粉末樣品的制備

取新鮮的泰國(guó)山竹果，取殼并切成1 cm×1 cm的碎塊，60℃干燥至恒重（前后兩次質(zhì)量差＜0.01 g）。打粉，過(guò)60目分樣篩獲取果皮粉末樣品。將果皮粉末樣品置于自封袋密封，于低溫（2℃～4℃）條件下保存并保證干燥，備用[7]。

1.2.3 山竹果皮多糖的提取及提取率測(cè)定

稱取一定質(zhì)量的山竹果皮粉末，與相應(yīng)比例的提取溶劑順序加入提取燒瓶中。隨后，將提取燒瓶置于超聲環(huán)境內(nèi)，在已設(shè)定的提取溫度、超聲時(shí)間、超聲功率等條件下反復(fù)提取3次。合并提取液，濃縮至50 mL，Sevag法除蛋白，過(guò)濾除去不溶性雜質(zhì)，加純水稀釋并定容至100 mL即得多糖提取液[8-9]。按照1.2.1所示流程測(cè)定多糖提取液的吸光度，計(jì)算多糖濃度和多糖提取率（%）：

多糖提取率/%=cpv/m×100

式中：cp為提取液多糖濃度，mg/mL；v為提取液體積，mL；m為山竹果皮粉末質(zhì)量，mg。

1.2.4 單因素試驗(yàn)研究

以1.000 g山竹果皮粉末為基準(zhǔn)，固定其它因素及相應(yīng)的水平，提取溫度45℃，超聲時(shí)間20 min，超聲功率 200 W，研究不同液料比20∶1、30∶1、40 ∶1、50 ∶1、60∶1（mL/g）對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響效果；固定其它因素及相應(yīng)的水平：液料比50∶1（mL/g），超聲時(shí)間20 min，超聲功率200 W，研究不同提取溫度35、45、55、65、75℃對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響效果；固定其它因素及相應(yīng)的水平，液料比50∶1（mL/g），提取溫度45℃，超聲功率200 W，研究不同超聲時(shí)間10、15、20、25、30 min對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響效果；固定其它因素及相應(yīng)的水平，液料比50∶1（mL/g）、提取溫度45℃、超聲時(shí)間25 min，研究不同超聲功率120、160、200、240、280 W 對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響效果[10-11]。

1.2.5 響應(yīng)面優(yōu)化設(shè)計(jì)

根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果了解所考察因素對(duì)多糖提取率的影響情況，確定其中具備顯著影響效果的因素及相關(guān)水平。多糖提取率設(shè)定為響應(yīng)值，相關(guān)因素設(shè)定為自變量，利用Design-Expert 8.0.6軟件中的Box-Behnken法設(shè)計(jì)并安排優(yōu)化試驗(yàn)方案[12-15]，如表1所示。

1.2.6 多糖純化

合并多批次多糖提取液并濃縮至100 mL，過(guò)濾并轉(zhuǎn)移至1.0 L錐形瓶中，混合4倍體積的95%乙醇，靜置于冰柜中低溫（4℃）醇沉。72 h后取出，抽濾，收集棕黑色固體，為粗多糖。稱取一定量的粗多糖，用盡可能少的純水溶解后轉(zhuǎn)移至纖維素柱內(nèi)，純水淋洗得無(wú)色透明的純多糖溶液[16-17]。測(cè)定多糖濃度，并配制系列濃度（0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/mL）的多糖待測(cè)液。

表1 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素水平表Table 1 Variables and levels in the response surface experiment design

1.2.7 多糖體外抗氧化活性測(cè)定

1.2.7.1 對(duì)·OH清除效果的測(cè)定

取5支潔凈試管，分別依次加入1.00 mL各個(gè)濃度的多糖待測(cè)液、2.00 mL 6.000 mmol/L硫酸亞鐵溶液、2.00 mL 6.000 mmol/L水楊酸-乙醇溶液、2.00 mL 6.000 mmol/L過(guò)氧化氫溶液，振蕩均勻，37℃水浴恒溫30 min，并在510 nm下測(cè)定體系吸光度Ex。固定上述試驗(yàn)流程及相應(yīng)條件，以蒸餾水取代過(guò)氧化氫溶液為對(duì)照體系，測(cè)定對(duì)照吸光度ET；以蒸餾水取代多糖待測(cè)液為空白體系，測(cè)定空白吸光度E0，按如下公式計(jì)算山竹果皮多糖對(duì)·OH的清除率[18-19]：

η/%=[E0-（Ex-ET）]/E0× 100

1.2.7.2 對(duì)·O2-清除效果的測(cè)定

取5支潔凈試管，分別依次加入1.00 mL各個(gè)濃度的多糖待測(cè)液、4.50 mL pH=8.2 Tris-HCl緩沖溶液、0.40 mL 2.500 mmol/L連苯三酚溶液，振蕩均勻，25℃水浴恒溫25 min，并在4 min內(nèi)每隔30 s在320 nm下測(cè)定一次體系的吸光度，獲取連苯三酚在多糖存在時(shí)的自氧化速率Kx。固定上述試驗(yàn)流程及相應(yīng)條件，以純水取代多糖溶液進(jìn)行試驗(yàn)，獲取連苯三酚在無(wú)多糖存在時(shí)的自氧化速率K0，并按如下公式計(jì)算山竹果皮多糖對(duì)·O2-的清除率[20-21]：

η/%=（K0-Kx）/K0× 100

1.2.7.3 對(duì)DPPH自由基清除效果的測(cè)定

取5支潔凈試管，分別依次加入1.00 mL各個(gè)濃度的多糖待測(cè)液、2.50 mL 0.200 0 mmol/L DPPH-乙醇溶液，振蕩均勻，25℃水浴避光恒溫30 min，測(cè)定體系吸光度Nx。固定上述試驗(yàn)流程及相應(yīng)條件，以95%乙醇取代DPPH乙醇溶液為對(duì)照體系，測(cè)定對(duì)照吸光度NT；以純水取代多糖待測(cè)液為空白體系，測(cè)定空白吸光度N0，按如下公式計(jì)算山竹果皮多糖對(duì)DPPH自由基的清除率[22-23]：

η/%=[N0-（Nx-NT）]/N0× 100

1.2.7.4 總還原力的測(cè)定

取5支潔凈試管，分別依次加入1.00 mL各個(gè)濃度的多糖待測(cè)液、3.00 mL pH=7.0磷酸緩沖溶液、3.00 mL 0.9%鐵氰化鉀溶液，振蕩均勻，65℃水浴恒溫30 min。冷卻至25℃，繼續(xù)向反應(yīng)體系中加入2.50 mL 10%三氯乙酸溶液，3 000 r/min離心10 min。取上清液，加入1.00 mL 1.0%三氯化鐵溶液，25℃反應(yīng)10 min，在719 nm下測(cè)定體系吸光度Sx。固定上述試驗(yàn)流程及相應(yīng)條件，以純水取代鐵氰化鉀溶液為對(duì)照體系，測(cè)定對(duì)照吸光度ST；以純水取代多糖待測(cè)液為空白體系，測(cè)定空白吸光度S0，按如下公式計(jì)算山竹果皮多糖的總還原力（總還原力與吸光度成正比）[24-25]：

η=Sx-ST-S0

1.3 數(shù)據(jù)處理

本課題中使用Origin 9.0作圖；采用Design-Expert 8.0.6軟件中的Box-Behnken法設(shè)計(jì)優(yōu)化試驗(yàn)方案并對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，獲取回歸模型及最佳提取工藝參數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗(yàn)解析

2.1.1 液料比變動(dòng)對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響趨勢(shì)液料比變動(dòng)對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響趨勢(shì)見圖1。

圖1 液料比變動(dòng)對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響趨勢(shì)Fig.1 The effect of liquid-material ration on extraction of polysaccharides

如圖1所示，當(dāng)溶劑添加量較少時(shí)，多糖提取率隨液料比的加大而升高。當(dāng)液料比升至50∶1（mL/g）時(shí)，多糖提取率升高至最高值6.60%。當(dāng)液料比繼續(xù)升高時(shí)，多糖提取率反而開始緩慢下降。隨著溶劑量的增加，增大的擴(kuò)散壓促使多糖分子盡可能多的游離到溶液中，多糖提取率隨之升高。但溶劑量過(guò)大，多糖分子被溶出的同時(shí)其它雜質(zhì)也被溶出。大量雜質(zhì)分子的存在會(huì)擠占多糖的溶出空間，導(dǎo)致其提取率不升反降。溶劑量的增大亦使后續(xù)工作量加大，綜合以上情況，液料比設(shè)定在50∶1（mL/g）比較合適。

2.1.2 提取溫度變動(dòng)對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響趨勢(shì)

提取溫度變動(dòng)對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響趨勢(shì)見圖2。

圖2 提取溫度變動(dòng)對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響趨勢(shì)Fig.2 The effect of temperature on extraction of polysaccharides

如圖2所示，提取溫度設(shè)定為35℃時(shí)，多糖提取率僅為4.95%。當(dāng)提取溫度升高至45℃時(shí)，多糖提取率升高至最高值6.48%。提取溫度若繼續(xù)升高，多糖提取率則開始迅速下降。多糖作為有機(jī)物質(zhì)對(duì)溫度變化十分敏感。在適度范圍內(nèi)，多糖分子的活性隨溫度升高而增加并加速溶出，提取率隨之上升。但是，多糖的分子結(jié)構(gòu)在高溫環(huán)境中易被破壞，導(dǎo)致其喪失生物活性并以絮狀沉淀的形式脫離體系，提取率下降。因而，提取溫度設(shè)定為45℃較為合適。

2.1.3 超聲時(shí)間變動(dòng)對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響趨勢(shì)

超聲時(shí)間變動(dòng)對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響趨勢(shì)見圖3。

圖3 超聲時(shí)間變動(dòng)對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響趨勢(shì)Fig.3 The effect of ultrasonic time on extraction of polysaccharides

如圖3所示，在一定時(shí)間范圍內(nèi)，多糖提取率隨超聲時(shí)間的延長(zhǎng)而升高，當(dāng)超聲時(shí)間設(shè)定為25 min時(shí)，多糖提取率升高至最高值6.38%。繼續(xù)延長(zhǎng)超聲時(shí)間則導(dǎo)致多糖提取率有一定程度的下降。超聲波主要通過(guò)機(jī)械作用破壞細(xì)胞壁，促進(jìn)多糖分子的溶出。隨著超聲時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞壁被充分破碎，多糖分子被充分溶出，提取率隨之上升。但時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，多糖分子的化學(xué)鍵積存過(guò)多的超聲能量易斷裂，導(dǎo)致多糖失活并析出，提取率下降。因而，超聲時(shí)間設(shè)置為25 min比較合適。

2.1.4 超聲功率變動(dòng)對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響趨勢(shì)

超聲功率變動(dòng)對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響趨勢(shì)見圖4。

圖4 超聲功率變動(dòng)對(duì)山竹果皮多糖提取率的影響趨勢(shì)Fig.4 The effect of ultrasonic power on extraction of polysaccharides

如圖4所示，當(dāng)超聲功率設(shè)定在200 W以下時(shí)，多糖提取率隨超聲功率的增加而升高。當(dāng)超聲功率設(shè)定在200 W～300 W時(shí)，多糖提取率波動(dòng)相對(duì)穩(wěn)定并在240 W時(shí)升高至最高值6.02%。若超聲功率進(jìn)一步增加，多糖提取率明顯下降。超聲功率增大，在促進(jìn)多糖分子溶出的同時(shí)加劇體系的空化作用，導(dǎo)致分子聚集并產(chǎn)生局部高溫。多糖分子受高溫影響容易失去活性并以沉淀形式析出，提取率下降。因而，超聲功率設(shè)置在240 W時(shí)比較合適。

2.2 響應(yīng)面法優(yōu)化提取工藝解析

2.2.1 響應(yīng)面法優(yōu)化試驗(yàn)設(shè)計(jì)與數(shù)據(jù)分析

分析山竹果皮多糖提取的單因素試驗(yàn)結(jié)果可知，超聲功率變動(dòng)對(duì)多糖提取率的影響效果較低，為考察因素中的次要因素。因此，多糖提取率設(shè)定為響應(yīng)值（Y），液料比（A）、提取溫度（B）、和超聲時(shí)間（C）設(shè)定為自變量，利用Design-Expert軟件中的Box-Behnken法對(duì)試驗(yàn)方案進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì)，安排并實(shí)施17個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)，試驗(yàn)點(diǎn)方案及相應(yīng)結(jié)果如表2所示。

表2 響應(yīng)面法優(yōu)化試驗(yàn)方案及相應(yīng)結(jié)果Table 2 Response surface optimized experiments design and results

2.2.2 回歸模型的方差分析及顯著性檢驗(yàn)

利用Design-Expert 8.0.6軟件對(duì)響應(yīng)面法優(yōu)化試驗(yàn)方案的結(jié)果進(jìn)行分析，獲得了多糖提取率（Y）對(duì)液料比（A）、提取溫度（B）、超聲時(shí)間（C）等因素的三元二次回歸方程：

Y=+1.031 44+0.140 75A+0.068 400B+0.043 000C+1.000 00×10-3AB+1.000 00×10-3AC-3.500 00×10-4BC-2.172 50×10-3A2-1.347 50×10-3B2-1.990 00×10-3C2

表3為回歸模型的方差分析表。

表3 回歸模型的方差分析表Table 3 Variance analysis of regression model

所得回歸模型p＜0.000 1，極顯著；失擬項(xiàng)p=0.117 8，說(shuō)明所得方程與試驗(yàn)過(guò)程具有極好的擬合度，可利用該方程分析及預(yù)測(cè)多糖提取率隨相關(guān)因素變化的波動(dòng)情況。

考察因素 A（p=0.000 1）、B（p=0.000 2）、C（p=0.001 0）及其二次項(xiàng)A2（p＜0.000 1）、B2（p＜0.000 1）、C2（p=0.004 0＜0.01）對(duì)多糖提取率的影響均極顯著，且顯著性順序?yàn)锳＞B＞C。同時(shí)，各因素之間存在交互作用，其中交互作用 AB（p＜0.000 1）、AC（p=0.004 4＜0.01）影響極顯著，BC（p=0.191 6＞0.05）影響不顯著。

2.2.3 交互作用分析

利用Design-Expert 8.0.6軟件做出相應(yīng)因素之間的交互作用分析圖，如圖5～圖7所示。

圖5 交互作用AB對(duì)多糖提取率的影響Fig.5 The effect of interactive AB on extraction of polysaccharides

圖6 交互作用AC對(duì)多糖提取率的影響Fig.6 The effect of interactive AC on extraction of polysaccharides

圖7 交互作用BC對(duì)多糖提取率的影響Fig.7 The effect of interactive BC on extractive of polysaccharides

交互作用影響多糖提取率的顯著性正比于響應(yīng)面的坡度，坡度越大說(shuō)明該交互作用的影響越顯著。交互作用AB的響應(yīng)面具有明顯的下滑坡面，交互作用AC下滑坡度略低于AB，而交互作用BC各面均平緩下滑，坡度不明顯，說(shuō)明交互作用AB、AC對(duì)多糖提取率影響極顯著，而交互作用BC影響不顯著。等高線的軸向密度越高，說(shuō)明該交互作用越顯著，交互作用AB的等高線密度最大，交互作用AC、BC的密度依次降低，說(shuō)明影響的顯著性順序?yàn)锳B＞AC＞BC，這與方差分析的結(jié)果一致。

2.2.4 最佳提取工藝參數(shù)的確定及試驗(yàn)驗(yàn)證

利用Design-Expert 8.0.6軟件對(duì)響應(yīng)面法優(yōu)化試驗(yàn)方案的結(jié)果進(jìn)行分析，確定了最佳工藝的參數(shù)：液料比 49.10∶1（mL/g）、提取溫度 46.17℃、超聲時(shí)間26.07 min，在此條件下，山竹果皮多糖提取率可達(dá)6.72%。為方便試驗(yàn)操作，調(diào)整工藝參數(shù)：液料比49 ∶1（mL/g）、提取溫度 46℃、超聲時(shí)間 26 min。在上述條件下，超聲功率設(shè)定為240 W，平行試驗(yàn)5次，山竹果皮多糖的實(shí)測(cè)平均提取率為（6.51±0.17）%，與回歸模型預(yù)測(cè)值6.72%相近（相對(duì)誤差<3.2%），說(shuō)明該工藝條件可行。

2.3 山竹果皮多糖體外抗氧化活性測(cè)試解析

2.3.1 山竹果皮多糖對(duì)·OH清除效果的測(cè)定

山竹果皮多糖對(duì)·OH的清除效果見圖8。

圖8 山竹果皮多糖對(duì)·OH清除效果的測(cè)定Fig.8 The scavenging effect of polysaccharides on·OH

羥基是生命體中最具氧化性能的自由基，若不能及時(shí)清除，將對(duì)機(jī)體腑臟器官產(chǎn)生極大的破壞。圖8顯示，山竹果皮多糖對(duì)·OH具有較好的清除效果，在所研究的濃度范圍內(nèi)，其清除效果隨多糖濃度的增加而增強(qiáng)。當(dāng)多糖濃度為1.0 mg/mL時(shí)，對(duì)·OH的清除率可達(dá)79.06%，但低于VC清除·OH的能力。

2.3.2 山竹果皮多糖對(duì)·O2-清除效果的測(cè)定

山竹果皮多糖對(duì)·O2-的清除效果見圖9。

圖9 山竹果皮多糖對(duì)·O2-清除效果的測(cè)定Fig.9 The scavenging effect of polysaccharides on·O2-

·O2-是生命體中含氧自由基的原始形態(tài)，反應(yīng)形式多樣。圖9顯示，山竹果皮多糖對(duì)·O2-具有極好的清除效果，在所研究的濃度范圍內(nèi)，其清除效果隨多糖濃度濃度的增加而增強(qiáng)，并且在高濃度條件下清除率的增速加快。當(dāng)多糖濃度為1.0 mg/mL時(shí)，對(duì)·O2-的清除率可達(dá)81.57%，明顯低于VC清除·O2-的能力。

2.3.3 山竹果皮多糖對(duì)DPPH自由基清除效果的測(cè)定

山竹果皮多糖對(duì)DPPH自由基的清除效果見圖10。

圖10 山竹果皮多糖對(duì)DPPH自由基清除效果的測(cè)定Fig.10 The scavenging effect of polysaccharides on DPPH radical

圖10顯示，山竹果皮多糖對(duì)DPPH自由基具有較強(qiáng)的清除能力，在所研究的濃度范圍內(nèi)，其清除效果隨多糖濃度的增加而增強(qiáng)，但在高濃度條件下清除率增速逐漸降低。當(dāng)多糖濃度為1.0 mg/mL時(shí)，對(duì)DPPH自由基的清除率可達(dá)79.23%，明顯低于VC清除DPPH自由基的能力。

2.3.4 山竹果皮多糖總還原力的測(cè)定

山竹果皮多糖的總還原力見圖11。

圖11 山竹果皮多糖總還原力的測(cè)定Fig.11 The investigation of polysaccharides’total reducing power

多糖分子中含有苷羥基，在一定條件下可以異變?yōu)轸驶Y(jié)構(gòu)，因而具有一定的還原性能。圖11顯示，山竹果皮多糖具有較好的還原性能，在所研究的濃度范圍內(nèi)，總還原力隨多糖濃度的增加而增強(qiáng)，但在高濃度條件下總還原力的增速減慢。當(dāng)多糖濃度為1.0 mg/mL時(shí)，其總還原力達(dá)到0.698，明顯低于VC的還原能力。

3 結(jié)論

采用超聲波輔助水提法從山竹果皮中提取多糖。單因素試驗(yàn)的研究結(jié)果明確了各因素影響多糖提取效果的顯著性順序，以此為基礎(chǔ)利用響應(yīng)面法對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，獲得了該工藝的回歸方程。方差分析表明，該回歸方程與提取試驗(yàn)具有極高的擬合度，可用于試驗(yàn)分析，并確定了該工藝的最佳參數(shù)：液料比49∶1（mL/g）、提取溫度 46℃、超聲時(shí)間 26 min、超聲功率240 W。在此條件下，多糖的實(shí)測(cè)平均提取率為（6.51±0.17）%，與模型預(yù)測(cè)值6.72%相近（相對(duì)誤差<3.2%），說(shuō)明該工藝條件可行。多糖的體外抗氧化活性測(cè)試結(jié)果表明，山竹果皮多糖對(duì)含氧、含氮自由基均具有較好的清除效果。當(dāng)多糖濃度為1.0 mg/mL時(shí)，對(duì)·OH、·O2-、DPPH自由基的清除率分別達(dá)到79.06%、81.57%、79.23%，總還原力達(dá)到0.698，并且其性能隨多糖濃度的增加而增加。本課題的研究為山竹果皮多糖的提取及山竹高附加值產(chǎn)品的開發(fā)提供數(shù)據(jù)支持。