武莉芳，康劍云，楊敬芳

(1.河北北方學(xué)院附屬第二醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 張家口 075100；2.河北北方學(xué)院附屬第二醫(yī)院呼吸科，河北 張家口 075100)

人巨細(xì)胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)感染臨床較為常見(jiàn)，在成年人群中HCMV感染率可達(dá)82%以上，在免疫功能正常狀態(tài)下，感染者多無(wú)癥狀，病毒呈長(zhǎng)時(shí)間潛伏狀態(tài)，如機(jī)體免疫功能下降，病毒即可激活感染，引發(fā)疾病[1-2]。HCMV感染人體時(shí)，可對(duì)機(jī)體多系統(tǒng)造成影響，表現(xiàn)為血尿、呼吸道感染、貧血等，且易被誤診[3-4]。及早確診、治療HCMV感染，對(duì)改善患者預(yù)后意義重大。目前臨床檢測(cè)HCMV感染的手段主要有免疫球蛋白M(immunoglobulin M，IgM)檢測(cè)、HCMV-PP65及人巨細(xì)胞病毒核酸(HCMV-DNA)檢測(cè)法[5]。IgM檢測(cè)普及率較高，操作方便、快捷，但該方法非針對(duì)性的直接檢測(cè)方法，還可能受到免疫反應(yīng)特異性及靈敏度的限制[6]。我們探討了聯(lián)合檢測(cè)HCMV-DNA及IgM在急性肺炎診療中的意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017-07—2019-10月河北北方學(xué)院附屬第二醫(yī)院收治的216例急性肺炎患者為觀察對(duì)象，其中男126例，女90例；年齡22～58歲，平均(37.4±2.9)歲。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

根據(jù)HCMV-DNA及IgM檢測(cè)要求，同一患者需同時(shí)抽取2管血液標(biāo)本進(jìn)行平行檢測(cè)。熒光定量PCR法檢測(cè)HCMV-DNA，DA7600實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀及HCMV-DNA熒光定量檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司；使用酶聯(lián)免疫法測(cè)定人巨細(xì)胞病毒IgM(HCMV-IgM)，HCMV-IgM測(cè)定試劑盒購(gòu)自濰坊康華生物工程有限公司，自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī)型號(hào)為DEM-III型，酶標(biāo)儀型號(hào)為StatFax-2100，操作均嚴(yán)格依據(jù)儀器及試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo)

檢測(cè)HCMV-DNA和HCMV-IgM的陽(yáng)性率，并對(duì)符合率進(jìn)行比較分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 21.0軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用n(%)表示，采取χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

HCMV-DNA檢測(cè)陽(yáng)性率為22.22%(48/216)，HCMV-IgM檢測(cè)陽(yáng)性率為26.85%(58/216)；58例HCMV-IgM陽(yáng)性樣本中共有40例HCMV-DNA陽(yáng)性，符合率為68.97%；158例HCMV-IgM陰性標(biāo)本中共有150例HCMV-DNA陰性，符合率為94.94%，2種檢測(cè)結(jié)果差異無(wú)顯著性(χ2=0.6251，P=0.4292)(表1)。

表1 HCMV-DNA和HCMV-IgM檢測(cè)結(jié)果比較

3 討 論

HCMV感染臨床較為常見(jiàn)，對(duì)免疫缺陷者及嬰幼兒危害性較大，但早期HCMV感染臨床上常無(wú)特異性體征及癥狀，大部分感染者為隱形感染，因此，常需借助實(shí)驗(yàn)室檢查篩查HCMV感染患者[7-8]。

熒光定量PCR檢測(cè)技術(shù)是HCMV感染較為敏感的診斷方式[9-10]。當(dāng)機(jī)體受到HCMV感染后，會(huì)產(chǎn)生IgA、IgE、IgG、IgM特異性抗體，通過(guò)檢測(cè)IgG、IgM抗體在血清中的含量，可間接證實(shí)HCMV感染。在HCMV原發(fā)性感染后10～15 d或潛伏期，可通過(guò)對(duì)IgM進(jìn)行檢測(cè)檢出，其中6～8周為高峰時(shí)期，12～16周則消失[11]。血清IgM陽(yáng)性表明潛伏HCMV將被激活或近期有HCMV活動(dòng)性感染，因此，可將IgM作為HCMV活動(dòng)性感染的指標(biāo)。雖然IgM檢測(cè)具有費(fèi)用低、方便、快速的優(yōu)點(diǎn)，但皰疹及其他病毒感染所產(chǎn)生的抗體與HCMV-IgM具有交叉反應(yīng)，易被誤診為陽(yáng)性[12]；且IgM產(chǎn)生具有滯后性，一般需在HCMV感染2周后才能達(dá)到檢出水平；機(jī)體免疫狀態(tài)、檢測(cè)時(shí)間窗等眾多因素均會(huì)對(duì)IgM檢測(cè)結(jié)果造成影響，致使檢測(cè)結(jié)果表現(xiàn)為假陰性，延誤最佳治療時(shí)機(jī)[13-14]，臨床上不能僅依據(jù)血清IgM檢測(cè)結(jié)果判斷HCMV感染與否。我們對(duì)216例急性肺炎患者采取2種方法聯(lián)合檢測(cè)HCMV，其中HCMV-DNA檢測(cè)陽(yáng)性率為22.22%，HCMV-IgM檢測(cè)陽(yáng)性率為26.85%，HCMV-DNA陽(yáng)性率略高于文獻(xiàn)報(bào)道[15]。48例HCMV-DNA陽(yáng)性標(biāo)本中有8例為HCMV-IgM陰性，2周后重新取樣檢測(cè)HCMV-IgM為陽(yáng)性，表明HCMV感染早期階段，HCMV-IgM檢測(cè)靈敏度低于HCMV-DNA檢測(cè)，但本研究結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能與樣本量較小有關(guān)，待收集大樣本資料繼續(xù)觀察分析。58例HCMV-IgM陽(yáng)性患者中有18例HCMV-DNA陰性，可能為HCMV-IgM假陽(yáng)性，或HCMV感染恢復(fù)后IgM檢測(cè)依然為陽(yáng)性。本研究結(jié)果表明，盡管DNA檢測(cè)和IgM檢測(cè)HCMV的陽(yáng)性率差異無(wú)顯著性，兩種方法檢測(cè)結(jié)果具有較高的符合性，但各有優(yōu)勢(shì)，IgM抗體檢測(cè)方法成本較低，易于操作，是較為成熟的一種檢測(cè)方法，易于在各級(jí)醫(yī)院中推廣使用，屬高性價(jià)比篩查方法；DNA檢測(cè)能對(duì)早期HCMV感染做出診斷，其靈敏度更高。

綜上，對(duì)于HCMV-IgM檢測(cè)陰性但疑似HCMV感染的急性肺炎患者，應(yīng)予以HCMV-DNA檢測(cè)，可提高HCMV感染診斷的準(zhǔn)確性，有利于及時(shí)診療，改善預(yù)后。