黃全勇 林文耀/金宇保靈生物藥品有限公司 010030
余鋒 周細(xì)練 劉勁超 曹登博/江西省南昌市智弘牧業(yè)有限公司 330000
疾病是制約現(xiàn)代化養(yǎng)豬業(yè)的重大因素之一,特別是口蹄疫、豬瘟、偽狂犬和藍(lán)耳病等烈性傳染病,給養(yǎng)殖業(yè)帶來了嚴(yán)重的困擾。近年來,隨著非洲豬瘟在中國的蔓延以及多方面的原因,中國的生豬產(chǎn)業(yè)面臨著嚴(yán)峻考驗。在防治疾病方面,免疫預(yù)防依然是豬場最常用的方式。影響免疫效果的因素有很多,而血清學(xué)抗體檢測就是檢驗豬場免疫效果的重要手段。通過血清學(xué)抗體檢測可以實時監(jiān)測群體免疫狀況,了解豬群免疫水平,及時發(fā)現(xiàn)問題及潛在風(fēng)險,從而能夠更好地指導(dǎo)豬場制定科學(xué)的疫病防控計劃。
本文對某規(guī)?;i場進(jìn)行了口蹄疫、豬瘟、偽狂犬以及藍(lán)耳病的血清學(xué)抗體檢測,現(xiàn)將結(jié)果和數(shù)據(jù)統(tǒng)計如下。
1.1 豬場背景該豬場現(xiàn)存欄母豬1000頭,采取一點式飼養(yǎng)模式,自繁自養(yǎng),全進(jìn)全出。仔豬21d斷奶,70日齡轉(zhuǎn)入育肥舍,保育豬后期出現(xiàn)豬群掉隊不好養(yǎng)現(xiàn)象。
1.2 疫苗免疫程序豬場口蹄疫使用的是豬口蹄疫O、A二價滅活疫苗(金OA)、豬瘟使用豬瘟活疫苗(傳代細(xì)胞源)、偽狂犬使用豬偽狂犬病耐熱保護(hù)劑活疫苗(C株)、藍(lán)耳病使用豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗(NVDC-JXA1株)。
豬瘟免疫程序:母豬、公豬3次/年;后備豬15周首免,24周二免;仔豬4周首免,8周二免,免疫劑量均為1頭份/次。
口蹄疫免疫程序:母豬、公豬3次/年;后備豬配種前30d加免一次;仔豬8周首免,12周二免,免疫劑量均為1頭份/次。
偽狂犬免疫程序:母豬、公豬3次/年;后備豬配種前免疫兩次;仔豬出生1~3天噴鼻,7周首免,13周二免,免疫劑量均為1頭份/次。
藍(lán)耳病免疫程序:母豬、公豬3次/年;后備豬配種前免疫兩次;仔豬3周免疫,免疫劑量均為1頭份/次。
1.3 樣品采集采樣按照隨機(jī)采樣原則,仔豬2周、4周、7周、10周、13周、16周、20周、24周各10份血樣;后備母豬10份血樣;1~2胎次母豬、3~4胎次、5-6胎次、6胎以上各9份血樣;公豬17份血樣。血樣采集完成,靜置分層后分離血清,送實驗室檢測。
1.4 檢測方法
1.4.1 樣品保存方法收到樣品后 48h內(nèi)檢測可存在于4℃,否則保存于-20℃冰箱。
1.4.2 檢驗過程應(yīng)用 ELISA 試劑盒方法檢測特定抗體或抗原。在酶標(biāo)儀上檢測各孔指定波長OD值,根據(jù)試劑盒相應(yīng)要求計算出對應(yīng)的檢測結(jié)果。
口蹄疫(FMD)抗體檢測試劑盒、藍(lán)耳病病毒(PRRSV)抗體檢測試劑盒、豬偽狂犬GE抗體試劑盒由金邁詩公司生產(chǎn);豬瘟病毒(CSFV)抗體檢測試劑盒由IDEXX 公司生產(chǎn);豬偽狂犬GB抗體試劑盒由biochek 生產(chǎn),操作方法以及結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)參照試劑盒說明書。
表1 口蹄疫抗體檢測結(jié)果
由表1可知,整個豬群O型> 1 ∶ 64抗體達(dá)到 90%以上,完全超過國家規(guī)定的O型1 ∶ 4抗體有70%的保護(hù)率的標(biāo)準(zhǔn)。對于A型來言,張永光研究員發(fā)現(xiàn),由于A型的免疫原型好1 ∶ 32抗體水平也有70%保護(hù)率,而本場A型1 ∶ 32以上的陽性率也遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過90%。由此說明口蹄疫疫苗免疫有效,能完全實現(xiàn)保護(hù),且保護(hù)效果很好。經(jīng)產(chǎn)母豬陽性率能達(dá)到100%,整齊度高,遠(yuǎn)超國家標(biāo)準(zhǔn)。
表2 豬瘟抗體檢測結(jié)果
由表2可知,種豬群抗體陽性率達(dá)到98%以上,高于國家制定的種豬群抗體陽性率達(dá)到90%的要求。商品豬群抗體陽性率達(dá)到76%以上,也符合國家制定的商品豬群抗體陽性率達(dá)到70%的要求。由免疫程序得知,豬瘟4周首免,8周二免,而7周抗體平均阻斷率較高,可能是批次間差異,或者是疫苗與母源抗體共同起作用的結(jié)果。從表2得知,13周陽性率較低,變異系數(shù)較大,可能是批次個體間差異或者藍(lán)耳病干擾導(dǎo)致。后備母豬有個別豬瘟免疫不合格,建議補(bǔ)免,豬瘟抗體合格后方可進(jìn)入生產(chǎn)群。6胎以上母豬群抗體數(shù)值下降,很有可能和體況健康狀態(tài)有關(guān),也有可能是因為免疫次數(shù)過多產(chǎn)生免疫麻痹。
表3 藍(lán)耳病抗體檢測結(jié)果
從免疫程序得知該豬場一年免疫3次藍(lán)耳病疫苗,而由表3可知,種豬抗體值普遍較低,種豬群處于非常危險的處境,得知疫苗免疫失敗,效果不理想。豬群在10周齡出現(xiàn)陽轉(zhuǎn),S/P均值大于2,抗體值較高,且一直持續(xù)到24周齡說明藍(lán)耳病壓力很大,此階段病毒血癥明顯。后續(xù)了解到該豬場20~40kg豬群出現(xiàn)死淘率較高等豬群不好養(yǎng)現(xiàn)象,更是印證該場藍(lán)耳病活躍的事實。PRRS是豬場危害較重的傳染病之一,多發(fā)于夏秋季節(jié)。對于本場藍(lán)耳病來說,除了用常規(guī)的替米考星等藥物防控,還是應(yīng)該以疫苗免疫為主,建議使用新型藍(lán)耳病嵌合病毒活疫苗(PC株),因為它不但解決了藍(lán)耳病疫苗交叉保護(hù)性差的缺點,更是利用反向遺傳技術(shù),將經(jīng)典株(SP株)的部分基因與變異株(GD株)的部分基因重組成嵌合病毒疫苗,免疫后既能防控經(jīng)典毒株的感染,也能防控變異毒株的感染。另外PC株還加入了一段鑒別基因,通過檢測能區(qū)分野毒和疫苗毒,可為豬場藍(lán)耳病病毒的控制與凈化增添新的手段。
表4 偽狂犬GE、GB抗體檢測結(jié)果
由表4可知,該豬場偽狂犬GE抗體陽性率為0,說明該場是偽狂犬陰性場,偽狂犬病毒不會對該場造成危害,種豬群GB抗體陽性率是100%,說明疫苗起到了有效的保護(hù)。由表4可知,從2周到10周GB抗體滴度持續(xù)下降,其主要原因是母源抗體隨時間在不斷降低。7周和10周GB抗體陽性率維持在90%以上,抗體滴度呈現(xiàn)下降趨勢,13周齡時,抗體滴度回升。結(jié)合該豬場7周齡首免偽狂犬疫苗,13周齡二免疫苗程序,建議偽狂犬一免疫時間向后推遲2周,二免時間可以維持不變。
規(guī)模養(yǎng)殖是時代發(fā)展的必然趨勢,面對當(dāng)前豬場疾病的復(fù)雜多變,很多臨床診斷也愈發(fā)困難,隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,血清學(xué)檢測更是成為了當(dāng)下規(guī)?;B(yǎng)殖場不可缺少的疾病監(jiān)測和診斷的手段。如何有效的利用疫苗免疫和血清學(xué)檢測來預(yù)防傳染性疾病就成為了養(yǎng)豬人一直思考的問題,定期對豬場進(jìn)行抽血采樣,檢測不同階段豬群的抗體水平,合理調(diào)整豬群的免疫程序,不乏是一種明知的手段。