王利霞

（河南省安陽(yáng)市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 安陽(yáng) 455000）

膀胱癌為泌尿系統(tǒng)多發(fā)惡性腫瘤疾病,且具備多發(fā)性、易復(fù)發(fā)及預(yù)后差等特征，研究指出，膀胱癌病灶處于膀胱黏膜，致病因素較復(fù)雜，且受生活方式、遺傳及環(huán)境等諸多因素影響，其發(fā)病率不斷增高，患者多伴有不同程度無(wú)痛性肉眼血尿、尿失禁、尿頻尿急等，對(duì)患者身心健康及生活質(zhì)量造成了巨大威脅[1,2]。參照膀胱癌浸潤(rùn)程度不同，臨床將其分為淺表性及浸潤(rùn)性膀胱癌類型,其中浸潤(rùn)性膀胱癌惡性程度較高，且手術(shù)治療難度較大，術(shù)后疾病復(fù)發(fā)率較高，預(yù)后不佳，故如何對(duì)疾病予以早期診斷成為研究熱點(diǎn),且對(duì)改善疾病整體治療效果與預(yù)后具有積極意義。血清指標(biāo)檢測(cè)為浸潤(rùn)性膀胱癌重要診斷措施,其中細(xì)胞角蛋白片段19抗原21-1（Cytokeratin fragment 19 antigen 21-1,CYFRA 21-1）較常用，其主要分布于上皮細(xì)胞，而膀胱癌發(fā)病后，CYFRA21-1表達(dá)水平增高，并持續(xù)釋放至外周血內(nèi)，故可用于疾病診斷[3]。此外，相關(guān)研究指出，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）可增加血管通透性，加速新生血管生長(zhǎng)，于多種惡性腫瘤中均呈高表達(dá)狀態(tài)，且和腫瘤生物學(xué)行為具有密切相關(guān)性,故在膀胱癌診斷中也具有一定診斷價(jià)值[4-6]。本研究選取我院83例不同臨床分期浸潤(rùn)性膀胱癌患者,探討CYFRA21-1、VEGF含量與臨床分期關(guān)聯(lián)性。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年11月-2018年9月我院83例不同臨床分期浸潤(rùn)性膀胱癌患者設(shè)為惡性組，另選取同期收治的83例膀胱良性腫瘤疾病患者設(shè)為良性組、83例健康體檢者設(shè)為健康組。惡性組男 51 例,女 32 例；年齡 43～81 歲,平均（62.18±10.09）歲；臨床分期：Ⅰ期11例、Ⅱ期28例、Ⅲ期31例、Ⅳ期13例；遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況：轉(zhuǎn)移26例，未轉(zhuǎn)移57例；組織分化程度：高中分化44例，低分化39例。良性組男49例，女34例；年齡41～83歲，平均（61.86±9.89）歲。 健康組男 47例，女 36例；年齡39～82 歲，平均（61.75±10.32）歲。 三組基線資料無(wú)顯著差異（P＞0.05），且本研究經(jīng)我院倫理協(xié)會(huì)審批通過(guò)。

1.2 方法

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ⑴惡性組經(jīng)病理檢查確診為浸潤(rùn)性膀胱癌；⑵既往均無(wú)膀胱手術(shù)治療史者；⑶所有受檢者均知曉本研究，簽署同意書(shū)。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ⑴納入研究前3個(gè)月內(nèi)采取放化療治療者；⑵合并其他泌尿系統(tǒng)病變者；⑶合并全身性重度感染性疾病者；⑷合并肝腎功能重度障礙者；⑸合并血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)重度病變者；⑹合并其他惡性腫瘤者；⑺長(zhǎng)期采取免疫抑制劑、激素藥物治療者。

1.3 方法 入院后第2d晨起時(shí)抽取各組空腹靜脈血 4 ml，離心（3000 r/min，10 min）處理，取上清液，置于-80℃環(huán)境中儲(chǔ)存待檢；以美國(guó)Bio-RAD公司Bio-RAD550型酶標(biāo)儀與配套試劑盒經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清VEGF水平；以美國(guó)雅培公司生產(chǎn)的AXSYM全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀與配套試劑盒以化學(xué)發(fā)光免疫法測(cè)定血清CYFRA21-1水平。

1.4 觀察指標(biāo) ⑴統(tǒng)計(jì)分析三組血清CYFRA21-1及VEGF水平。⑵統(tǒng)計(jì)分析惡性組不同遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移浸潤(rùn)性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平。⑶統(tǒng)計(jì)分析惡性組不同分化程度浸潤(rùn)性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平。⑷統(tǒng)計(jì)分析惡性組不同臨床分期患者血清CYFRA21-1及VEGF水平。⑸統(tǒng)計(jì)分析血清CYFRA21-1及VE GF水平與浸潤(rùn)性膀胱癌臨床分期間相關(guān)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 通過(guò)SPSS18.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用(x±s)表示，偏態(tài)分布采取秩和檢驗(yàn)，正態(tài)分布采取t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，多重比較采用LSD-t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料n（%）表示,χ2檢驗(yàn),血清CYFRA21-1及VEGF水平與浸潤(rùn)性膀胱癌臨床分期間相關(guān)性以Pearson予以分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組血清CYFRA21-1及VEGF水平 單因素方差檢驗(yàn)可知，三組血清CYFRA21-1及VEGF水平間存在顯著差異（P＜0.05）；多重比較，良性組血清CYFRA21-1及VEGF水平高于健康組（P＜0.05）；惡性組血清CYFRA21-1及VEGF水平高于良性組（P＜0.05）。 見(jiàn)表 1。

表1 三組血清CYFRA21-1及VEGF水平比較(x±s)

2.2 不同遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移浸潤(rùn)性膀胱癌血清指標(biāo)水平發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的浸潤(rùn)性膀胱癌患者血清CYFRA2 1-1及VEGF水平高于未發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的浸潤(rùn)性膀胱癌患者（P＜0.05）。 見(jiàn)表 2。

表2 不同遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移浸潤(rùn)性膀胱癌血清指標(biāo)水平比較(x±s)

2.3 不同分化程度浸潤(rùn)性膀胱癌血清指標(biāo)水平低分化浸潤(rùn)性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平高于高中分化浸潤(rùn)性膀胱癌患者 （P＜0.05）。 見(jiàn)表 3。

表3 不同分化程度浸潤(rùn)性膀胱癌血清指標(biāo)水平比較(x±s)

2.4 不同臨床分期浸潤(rùn)性膀胱癌患者血清指標(biāo)水平 單因素方差檢驗(yàn)可知，不同臨床分期浸潤(rùn)性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平間存在顯著差異（P＜0.05）；多重比較，Ⅳ期浸潤(rùn)性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平高于Ⅲ期患者 （P＜0.05）；Ⅲ期浸潤(rùn)性膀胱癌患者血清CYFR A21-1及 VEGF 水平高于Ⅰ+Ⅱ期者（P＜0.05）。 見(jiàn)表4。

表4 不同臨床分期浸潤(rùn)性膀胱癌患者血清指標(biāo)水平比較(x±s)

2.5 血清指標(biāo)水平與浸潤(rùn)性膀胱癌臨床分期間相關(guān)性 經(jīng)Pearson檢驗(yàn)可知,血清CYFRA21-1及VEGF水平與浸潤(rùn)性膀胱癌臨床分期間存在顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.05）。 見(jiàn)表 5。

表5 血清指標(biāo)水平與浸潤(rùn)性膀胱癌臨床分期間相關(guān)性分析（n=83）

3 討論

膀胱癌為泌尿系統(tǒng)多發(fā)惡性腫瘤,其中浸潤(rùn)性膀胱癌惡性程度較高，生物學(xué)特性較復(fù)雜，當(dāng)前臨床多采取組織活檢病理檢查及膀胱鏡檢對(duì)浸潤(rùn)性膀胱癌予以診斷，雖具有一定應(yīng)用價(jià)值，但其屬侵襲性檢查，且費(fèi)用較高，診斷過(guò)程中易增加患者不適感[7,8]。CT及超聲等影像學(xué)檢查措施在浸潤(rùn)性膀胱癌臨床診斷中也較常用，但針對(duì)早期患者，其敏感度及準(zhǔn)確度較低，漏診率與誤診率較高，易致使患者錯(cuò)失最佳治療時(shí)機(jī),而尿液內(nèi)脫落細(xì)胞學(xué)檢查敏感性也較低，假陰性率與假陽(yáng)性率較高[9]。同時(shí)，若浸潤(rùn)性膀胱癌患者未及時(shí)得到有效干預(yù),則易對(duì)疾病整體療效與預(yù)后效果產(chǎn)生不利影響,故如何對(duì)疾病及臨床分期予以準(zhǔn)確診斷、評(píng)估仍是研究熱點(diǎn)。

CYFRA21-1為新型上皮來(lái)源性質(zhì)腫瘤標(biāo)志物，其是CK-19全長(zhǎng)片段，為CK家族重要成員，CK為分布于所有上皮細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)蛋白類型,角蛋白水平能敏感反映細(xì)胞分化及腫瘤發(fā)生等[10,11]。相關(guān)研究表明,正常生理狀態(tài)下，CYFRA21-1主要以寡聚物形式存在，表達(dá)水平較低，而發(fā)生浸潤(rùn)性膀胱癌后，細(xì)胞死亡后，活化的蛋白酶可加快細(xì)胞降解，使可溶性CK-19片段大量釋放，進(jìn)而增加血液CYFRA21-1血清水平[12,13]。CK-19屬角蛋白亞基，其分子量約40 KD，CK-19可溶性片段上兩個(gè)抗原決定簇能特異性結(jié)合于兩個(gè)單克隆抗體KS19-1及BM19-21，即CYFRA21-1，并主要分布于單層上皮細(xì)胞及鱗狀上皮細(xì)胞。國(guó)外相關(guān)研究證實(shí)，肺癌、卵巢癌及膀胱癌等諸多惡性腫瘤患者血清CYFRA21-1表達(dá)水平均異常增高，故可用于浸潤(rùn)性膀胱癌臨床診斷，且在疾病發(fā)生及進(jìn)展、療效與預(yù)后評(píng)估中也具有一定應(yīng)用價(jià)值[14]。 本研究中,惡性組血清CYFRA21-1水平高于良性組及健康組,且發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者及低分化浸潤(rùn)性膀胱癌患者血清CYFRA21-1水平增高幅度更加顯著 （P＜0.05），與上述學(xué)者觀點(diǎn)具有一致性。

浸潤(rùn)性膀胱癌腫瘤病灶血管生成在腫瘤發(fā)生、進(jìn)展過(guò)程中極為重要，若無(wú)新生血管形成，則單個(gè)腫瘤克隆灶體積通?！? mm3，而VEGF為當(dāng)前臨床所發(fā)現(xiàn)的最重要血管生成因子,多將其作為腫瘤轉(zhuǎn)移、代謝等標(biāo)志物[15,16]。此外，微血管生成和腫瘤持續(xù)生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移、侵襲關(guān)系密切，受部分基質(zhì)水解酶影響,腫瘤細(xì)胞自身既可降解基底膜MMPs,還可活化VEGF等，間接促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生MMPs，并降解細(xì)胞外基質(zhì)、基底膜等，以此加快腫瘤新生血管形成。由本研究結(jié)果可知，惡性組血清VEGF水平高于良性組及健康組，且發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者及低分化浸潤(rùn)性膀胱癌患者血清VEGF水平高于未轉(zhuǎn)移及高中分化者（P＜0.05）。VEGF可結(jié)合于受體后特異性作用于血管內(nèi)皮，增加血管通透性，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，加快新生血管形成，研究指出,VEGF為功能較強(qiáng),同時(shí)能造成多種生物學(xué)效應(yīng)的一種細(xì)胞因子，為PDGF（血小板衍生生長(zhǎng)因子）家族重要成員，在腫瘤發(fā)生及轉(zhuǎn)移等中均具有重要作用[17,18]。此外，VEGF為二硫鍵交聯(lián)產(chǎn)生的一種同源二聚體糖蛋白，肺泡及氣道上皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、血管及氣道平滑肌細(xì)胞、間葉細(xì)胞樣細(xì)胞等均可生成VEGF，其具備多種生物學(xué)功能,如促進(jìn)血管生成及內(nèi)皮細(xì)胞增殖、血管維持、提高血管通透性等。另有相關(guān)研究指出,VEGF為多功能細(xì)胞因子,可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增生，促進(jìn)腫瘤內(nèi)新生血管生成，提高腫瘤血管通透性及癌細(xì)胞浸潤(rùn)能力,加速惡性腫瘤進(jìn)展與轉(zhuǎn)移[19,20]。鄭元振學(xué)者[21]研究結(jié)果表明，血清CYFRA21-1及VEGF水平動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)在浸潤(rùn)性膀胱癌病理特征與預(yù)后評(píng)估中具有重要作用。本研究結(jié)果顯示，不同臨床分期浸潤(rùn)性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平間存在顯著差異，且增高幅度隨臨床分期增高而增高,其血清含量與疾病臨床分期間存在明顯負(fù)相關(guān)系（P＜0.05），提示臨床可通過(guò)測(cè)定血清CYFRA21-1及VEGF水平評(píng)估浸潤(rùn)性膀胱癌臨床分期情況，以此為臨床制定、調(diào)整治療方案提供一定參考依據(jù),對(duì)改善疾病整體治療效果與預(yù)后具有重要作用。

綜上所述,浸潤(rùn)性膀胱癌患者VEGF及CYFR A21-1血清含量顯著增高,于發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及低分化者中增高幅度更加顯著,且其表達(dá)水平隨浸潤(rùn)性膀胱癌臨床分期增高而增高,兩者間存在顯著正相關(guān)系。