崔小榮，陳志林，黃梅，師曉杰，陳興榮，梁振華，陳斌燦，嚴廣寬

（溫氏食品集團股份有限公司，國家生豬種業(yè)工程技術(shù)研究中心，廣東 云浮 527400）

精液的常規(guī)檢測是評價公豬精液質(zhì)量的一項基本檢查。近年來，養(yǎng)豬行業(yè)逐漸出現(xiàn)一些新的自動檢測技術(shù)應(yīng)用在精液的常規(guī)分析檢測中，如CASA(Computer-aided sperm analysis)分析系統(tǒng)、EasyCyte分析儀、Magapor GESIPOR 分析系統(tǒng)等。然而這些精液分析儀配套的精子計數(shù)板存在價格高、不便清洗等缺點[1]。此試驗主要以精子計數(shù)板為研究對象，研究國產(chǎn)的精子計數(shù)板產(chǎn)品代替進口的精子計數(shù)板產(chǎn)品的可行性，以期為豬的精液檢測節(jié)省費用并提供參考與借鑒。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

試驗動物來自溫氏食品集團股份有限公司山東聊城地區(qū)種豬場，共計81 頭長白溫系公豬，公豬不同生理階段飼糧營養(yǎng)水平依據(jù)中國《豬飼養(yǎng)標(biāo)準》（NY/T 65—2004）。試驗數(shù)據(jù)采集于2019 年6 月至2019年10 月，試驗過程主要對公豬的耳號、精液采集時間及采精量、精子密度、精子活力、正常及異常精子數(shù)量等指標(biāo)進行記錄。

1.2 試驗主要材料

豬精液的質(zhì)量分析采用進口的自動檢測系統(tǒng)（如圖1），其中進口的精液自動檢測系統(tǒng)、進口的精子計數(shù)板、移液槍等采購于西班牙某公司；國產(chǎn)的精子計數(shù)板則由廣州某公司提供，國產(chǎn)精子計數(shù)池的深度設(shè)計為10 μm。

1.3 試驗方法

公豬站采精人員每天上下午各采精1次，具體操作時間如表1所示。采精完成后，精液檢測步驟如以下：1）對原精進行稱重，并記錄參數(shù)；2）打開自動檢測系統(tǒng)GESIPOR3.0，在頁面中的相應(yīng)位置輸入公豬耳號，并打開采精檢測頁面；3）點擊公豬、采精員，并錄入相應(yīng)信息；4）把原精輕輕地攪拌，使其均質(zhì)，再取100 ul 原精和900 ul 稀釋液在等溫37 ℃下稀釋混合；5）混合均質(zhì)后取3.5 ul 滴到相應(yīng)的精子計數(shù)板上；6）用10 倍物鏡和10X 光圈檢測活力、對屏幕視野進行拍照分析，隨機分析3 個不同視野，然后再點擊活力、密度和正常形態(tài)等分析，同時在采精頁面讀取檢測結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計方法

試驗數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2010 進行整理篩選，精子數(shù)、精子密度、精子活力等指標(biāo)使用SPSS 19.0 軟件的單因素方差分析LSD 法進行差異顯著性檢驗，結(jié)果均使用平均值±標(biāo)準誤的形式表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同精子計數(shù)板對長白公豬精液參數(shù)的影響

由表2 可知，不同的精子計數(shù)板對長白公豬精液的精子密度、精子活力、正常精子比例等參數(shù)沒有產(chǎn)生顯著差異性。進口組精子計數(shù)板測得的隨機3 個視野平均精子數(shù)、精子密度、精子活力、正常精子比例分別為566.06個、249.56×106/ml、92.65%、71.52%；國產(chǎn)組則對應(yīng)測得為577.02 個、252.68×106/ml、91.32%、72.65%，以上兩組的同一指標(biāo)相比均差異不顯著。綜合以上，相比進口的精子計數(shù)板，國產(chǎn)的精子計數(shù)板在長白公豬精液的各項參數(shù)間無統(tǒng)計學(xué)差異；國產(chǎn)的精子計數(shù)板替代進口的精子計數(shù)板是可行的。

表1 公豬站采精時間

表2 不同精子計數(shù)板對長白公豬精液參數(shù)的影響

3 討論

精子計數(shù)板作為精液常規(guī)分析的必備工具已在養(yǎng)豬生產(chǎn)上廣泛使用。不論是傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡分析還是新的自動檢測系統(tǒng)分析，精液必須滴入精子計數(shù)池后才能進行分析[2]。而不同廠家配套的精子計數(shù)池其深度一般不統(tǒng)一，以10 μm和20 μm 深度的計數(shù)池最為常見。此試驗的國產(chǎn)精子計數(shù)池深度為10 μm，用以分析精液的精子密度、精子活力、正常精子比例等參數(shù)，探討其代替進口的不可重復(fù)使用的精子計數(shù)板產(chǎn)品的可行性。試驗結(jié)果表明，與進口的精子計數(shù)板產(chǎn)品相比，國產(chǎn)的精子計數(shù)板產(chǎn)品在長白公豬精液的各項參數(shù)間無統(tǒng)計學(xué)差異；國產(chǎn)的精子計數(shù)板產(chǎn)品可替代進口的精子計數(shù)板產(chǎn)品在養(yǎng)豬生產(chǎn)中應(yīng)用。

此外，國產(chǎn)計數(shù)板產(chǎn)品對于降低使用成本上也有一定優(yōu)勢。當(dāng)前，精液自動分析儀配套的進口精子計數(shù)板產(chǎn)品一般存在價格高、不可重復(fù)使用等問題，其一般市場售價為5 ～6 元/腔，25 ～30 元/板；而此試驗的國產(chǎn)計數(shù)板產(chǎn)品的市場價格 一 般 在2 ～3 元/腔，10 ～15元/板，且可重復(fù)使用2 ～3 次。因此，使用國產(chǎn)計數(shù)板產(chǎn)品更加經(jīng)濟適用，有利于降低公豬精液的檢測成本。