王洪波　賈海健　楊勇

摘要? ? 對(duì)山東濰坊濱海鹽堿土基礎(chǔ)性狀進(jìn)行初步研究。結(jié)果表明，濰坊濱海鹽堿土地被植物種類為白茅草、砂引草、白蒿，土壤的pH值為7.96，可溶性鹽的含量為0.332%。濰坊濱海鹽堿土細(xì)菌數(shù)量為3.1×105 CFU/g，放線菌數(shù)量為1.03×104 CFU/g，真菌數(shù)量為1×103 CFU/g。

關(guān)鍵詞? ? 濱海鹽堿土;地被植物;pH值;可溶性鹽;微生物;山東濰坊

中圖分類號(hào)? ? S154? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼? ? A

文章編號(hào)? ?1007-5739（2020）02-0172-02? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）

Abstract? ? Basic characters of saline-alkali soil in Weifang coastal area of Shandong Province was studied.The results showed the main ground cover plants were identified as Cogongrass，Messerschmidia sibirica and Artemisia.Soil pH value was 7.96 and soluble salt content was 0.332%.The number of bacteria，actinomycetes and fungi in Weifang coastal saline-alkali soil was 3.1×105 CFU/g，1.03×104 CFU/g and 1×103 CFU/g respectively.

Key words? ? coastal saline-alkali soil;ground cover plants;pH value;soluble salt;microorganism;Weifang Shandong

濰坊濱海經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)位于濰坊北部，地下鹵水埋藏淺，陸地土壤多為鹽堿土或?yàn)┩客粒侵匾漠a(chǎn)鹽基地，每年產(chǎn)鹽量逾1 000萬t。長時(shí)間的鹽業(yè)生產(chǎn)和鹵水資源使得濰坊濱海土壤成為典型的鹽堿土。

在我國新疆塔里木[1]、青海[2]等地對(duì)鹽堿土都有廣泛的研究，并分離到一些有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的嗜鹽堿微生物，具有良好的應(yīng)用前景。因此，對(duì)濰坊濱海鹽堿土進(jìn)行一些基礎(chǔ)研究，對(duì)于該區(qū)域內(nèi)綠化、經(jīng)濟(jì)作物種植、篩選有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的菌株、環(huán)境保護(hù)等方面有非常重要的意義。

1? ? 材料與方法

1.1? ? 試驗(yàn)材料

樣品：濰坊濱海典型鹽堿土;無CO2的蒸餾水：濰坊職業(yè)學(xué)院水廠的蒸餾水，煮沸15 min得到，現(xiàn)用現(xiàn)配;pH值6.87的緩沖液：市售成品藥品，按照說明加H2O配制而成;pH值9.18的緩沖液：市售成品藥品，按照說明加H2O配制而成;牛肉膏：北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司，500 g/瓶，生物試劑;蛋白胨：北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司，250 g/瓶，生物試劑;瓊脂：北京金博藍(lán)河科技有限公司，1 kg/瓶;可溶性淀粉：天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，500 g/瓶，AR;KNO3：華東師范大學(xué)化工廠，500 g/瓶，AR;FeSO4·7H2O：江蘇金壇縣試劑廠，500 g/瓶，化學(xué)純;MgSO4·7H2O：山東萊陽經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)精細(xì)化工廠，500 g/瓶，AR;K2HPO4：華東師范大學(xué)化工廠，500 g/瓶，AR;蔗糖：北京化工廠，500 g/瓶，化學(xué)純;KCl：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，500 g/瓶，GR（優(yōu)級(jí)純）;馬鈴薯：市售新鮮，當(dāng)年生馬鈴薯;NaOH：山東萊陽經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)精細(xì)化工廠，500 g/瓶，AR;搖床：太倉市華美生化儀器廠，HZQ-F280;抽濾機(jī)：天津奧特賽恩斯儀器有限公司，AP-01P;烘箱：上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠，GZX-9140MBE;水浴鍋：常州市瑞華儀器制造有限公司，DK-8D;pH計(jì)：梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司，F(xiàn)E20K;超凈工作臺(tái)：鄭州宏郎儀器設(shè)備有限公司，SW-CJ-2FD;培養(yǎng)箱：上海一恒科學(xué)儀器有限公司，LRH-70F。

1.2? ? 濱海鹽堿土基本性狀測(cè)定

1.2.1? ? 取樣。選中具有典型濱海鹽堿土特征的地塊，采用統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法設(shè)置5個(gè)取樣點(diǎn)，挖出1 m3取樣坑，取表層土以下15～25 cm土樣，每個(gè)取樣點(diǎn)取3份土樣，每份土樣200 g，無菌取樣，取好的樣品，放入事先滅過菌的取樣袋內(nèi)，填寫好取樣單，盡快送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行測(cè)定。同時(shí)對(duì)取樣點(diǎn)周邊環(huán)境、地被植物進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，詳細(xì)描述植物的特征，并加以記錄。

1.2.2? ? 鹽度測(cè)定。土壤中鹽度的測(cè)定以土壤可溶性鹽分含量為指標(biāo)，測(cè)定時(shí)采用殘?jiān)娓煞?。具體操作如下：將樣品于38 ℃條件下風(fēng)干，過18號(hào)篩（1 mm篩孔），取篩下物作為測(cè)定樣品。設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)稱取樣品100 g（精確到0.1 g），加入500 mL無CO2的蒸餾水，振蕩頻率200 r/min，振蕩8 min。振蕩后立即抽氣過濾，抽濾壓力約0.04 Mpa，中速定量202號(hào)濾紙，直徑6 cm，取濾液備用。吸取待測(cè)清液50 mL，移入瓷蒸發(fā)皿，水浴80 ℃蒸干，后105 ℃烘干至恒重，得烘干殘?jiān)?。在烘干殘?jiān)屑?5%H2O2溶液約5 mL（殘?jiān)鼭櫇窦纯桑?0 ℃蒸干，后再經(jīng)105 ℃烘干至恒重，記錄可溶性鹽分總量。計(jì)算3個(gè)重復(fù)的平均數(shù)，得到濰坊濱海鹽堿土樣品的可溶性鹽分含量。

1.2.3? ? pH值測(cè)定。土壤樣品pH值的測(cè)定采用NY/T 1377-2007標(biāo)準(zhǔn)中的土壤pH值的測(cè)定方法。具體操作如下：將樣品于38 ℃條件下風(fēng)干，過18號(hào)篩（1 mm篩孔），取篩下物作為測(cè)定樣品。設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)稱取10.0 g（精確到0.1 g），加入25 mL無CO2的蒸餾水，振蕩頻率200 r/min，振蕩5 min，后靜置30 min，取浸提上清液作為樣品液備用。以pH值6.87、pH值9.18的2種緩沖液對(duì)pH計(jì)進(jìn)行校正，后測(cè)定樣品液pH值。計(jì)算3個(gè)重復(fù)的平均數(shù)，即得到濰坊濱海典型鹽堿土樣品的pH值。

1.3? ? 濱海鹽堿土微生物菌株的分離、菌株歸類分析

1.3.1? ? 取樣。方法同1.2.1。分離微生物需用新鮮的土樣進(jìn)行。

1.3.2? ? 菌株分離。常規(guī)稀釋分離法進(jìn)行分離，培養(yǎng)溫度為25 ℃，每天觀察1次，記錄菌落特征、拍照、并統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)。分離培養(yǎng)基配方如下：①細(xì)菌分離培養(yǎng)基（NA）：牛肉膏3 g，蛋白胨10 g，NaCl 5 g，瓊脂20 g，H2O 1 000 mL，pH值8.0;②放線菌分離培養(yǎng)基（高氏1號(hào)）：可溶性淀粉20 g，KNO3 1 g，F(xiàn)eSO4·7H2O 0.01 g，MgSO4·7H2O 0.5 g，K2HPO4 0.5 g，瓊脂20 g，H2O 1 000 mL，pH值8.0;③真菌分離培養(yǎng)基（PDA）：馬鈴薯200 g，蔗糖20 g，KCl 2.5 g，MgSO4·7H2O 1.7 g，瓊脂20 g，H2O 1 000 mL，pH值8.0;將所取的土樣在無菌條件下進(jìn)行集中、均樣，按照四分法取10 g新鮮土樣，放入100 mL無菌水三角瓶中，得到菌懸液原液。上述3種培養(yǎng)基，設(shè)定10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6 6個(gè)梯度處理，每個(gè)梯度取對(duì)應(yīng)的稀釋液0.1 mL進(jìn)行涂布，每個(gè)梯度重復(fù)3次。

1.3.3? ? 菌株初步鑒定、歸類分析。主要依據(jù)微生物的形態(tài)學(xué)對(duì)分離平板上的微生物進(jìn)行簡單分類，按照細(xì)菌、放線菌、真菌來統(tǒng)計(jì)各類微生物的數(shù)量，進(jìn)而計(jì)算出濰坊濱海鹽堿土中的含菌數(shù)。

2? ? 結(jié)果與分析

2.1? ? 濰坊濱海鹽堿土地被植物種類

通過對(duì)5個(gè)取樣點(diǎn)周邊環(huán)境和植被的觀察，并按照植物分類的方法，確定了主要的地被植物為白茅草、砂引草、白蒿。白茅草：禾本科植物，屬于雜草的一種，葉子鋸齒狀。砂引草：紫草科紫丹屬，多年生草本，高10 cm左右，根狀莖細(xì);長，多數(shù)為叢生莖，直立或斜立，有分枝，糙伏毛密生。葉披針形，長1～5 cm，寬6～10 mm，先端鈍，白花。白蒿：屬于菊科蒿屬，二年生草本，高50～80 cm，主根單一，狹紡錘形，莖下部稍木質(zhì)化，縱棱明顯，多分枝，莖、枝有類白色微柔毛。

2.2? ? 濰坊濱海鹽堿土可溶性鹽含量

試樣、空白樣品的測(cè)定結(jié)果表明，試樣各平行重復(fù)性好，空白樣品中可溶性鹽的含量極低，說明操作過程中未引入新的雜質(zhì)，結(jié)果可靠。具體測(cè)定結(jié)果如表1所示?？梢钥闯?，濰坊濱海鹽堿土可溶性鹽的平均含量為0.332%。

2.3? ? 濰坊濱海鹽堿土pH值

pH計(jì)經(jīng)過兩點(diǎn)校正，且校正系數(shù)在98%～102%之間。3個(gè)試樣的pH值分別為7.92、7.97、7.98，平均為7.96，因而濰坊濱海鹽堿土pH值為7.96。

2.4? ? 濰坊濱海鹽堿土微生物的分離結(jié)果

由表2可知，在NA培養(yǎng)基分離，培養(yǎng)4 d，細(xì)菌菌落數(shù)不再增加，選擇適合計(jì)數(shù)的10-2平板進(jìn)行細(xì)菌菌落觀察、統(tǒng)計(jì)，結(jié)果顯示，濰坊濱海鹽堿土細(xì)菌數(shù)量為3.1×105 CFU/g。

在高氏1號(hào)培養(yǎng)基分離，培養(yǎng)4 d，放線菌菌落數(shù)不再增加，選擇適合計(jì)數(shù)的10-1平板進(jìn)行放線菌菌落觀察、統(tǒng)計(jì)，結(jié)果顯示，濰坊濱海鹽堿土放線菌數(shù)量為1.03×104 CFU/g。

在PDA培養(yǎng)基分離，培養(yǎng)5 d，真菌菌落數(shù)不再增加，選擇適合計(jì)數(shù)的10-1平板進(jìn)行真菌菌落觀察、統(tǒng)計(jì)，結(jié)果顯示，濰坊濱海鹽堿土真菌數(shù)量為1×103 CFU/g。

3? ? 結(jié)論與討論

該試驗(yàn)結(jié)果表明，濰坊濱海鹽堿土地被植物主要以白茅草、砂引草、白蒿為主。土壤的pH值為7.96，可溶性鹽含量為0.332%。通過NA、高氏1號(hào)、PDA 3種培養(yǎng)基進(jìn)行分離，測(cè)定出濰坊濱海鹽堿土細(xì)菌數(shù)量為3.1×105 CFU/g，放線菌數(shù)量為1.03×104 CFU/g，真菌數(shù)量為1×103 CFU/g。

通過以上的研究結(jié)果，可以看出，濰坊濱海鹽堿土的可溶性鹽含量達(dá)到了鹽土標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)孫在金等[3]和俞仁培[4]報(bào)道，可溶性鹽在土壤表層或亞表層達(dá)到0.1%～0.2%時(shí)，土壤就達(dá)到了鹽土的標(biāo)準(zhǔn)，濰坊濱海鹽堿土表層10 cm以下的樣品測(cè)定結(jié)果達(dá)到0.3%，而越靠近表層，含鹽量越大，因而可以判定濰坊濱海鹽堿土屬于中度鹽土。根據(jù)孫在金等[3]和俞仁培[4]報(bào)道，土壤表層和亞表層的pH值達(dá)到8.0，就達(dá)到了堿土的標(biāo)準(zhǔn)，而濰坊濱海鹽堿土表層10 cm以下的樣品pH值測(cè)定結(jié)果達(dá)到7.96，且越靠近表層，堿度越高，因而濰坊濱海鹽堿土達(dá)到了低度堿土的標(biāo)準(zhǔn)。

根據(jù)濰坊濱海鹽堿土地被植物的調(diào)查結(jié)果，與王震宇等[5]研究黃河三角洲退化濕地上的地被植物基本一致，可以在該土壤上馴化、種植白蒿（茵陳）類中藥經(jīng)濟(jì)類作物，在適當(dāng)?shù)臈l件下，可以通過政策引導(dǎo)、招商引資，建立茵陳GAP中藥生產(chǎn)基地，促進(jìn)當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)發(fā)展。

通過濰坊濱海鹽堿土微生物數(shù)量測(cè)定結(jié)果可以看出，濱海鹽堿土中微生物的數(shù)量遠(yuǎn)低于正常土壤中微生物的數(shù)量。與王震宇等[5]報(bào)道的黃河三角洲退化濕地微生物數(shù)量進(jìn)行對(duì)比，濰坊濱海鹽堿土的含菌量相對(duì)較少。這可能與濰坊濱海地下鹵水水位淺、鹽業(yè)發(fā)達(dá)有關(guān)[6]。

濰坊濱海鹽堿土中的微生物以細(xì)菌數(shù)量最多，其次是放線菌，真菌含量最少，可對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步研究，篩選有利用價(jià)值的代謝產(chǎn)物。

4? ? 參考文獻(xiàn)

[1] 王建明，羅曉霞，賀江舟，等.塔里木盆地荒漠鹽堿生境嗜鹽堿細(xì)菌的初步研究[J].微生物學(xué)雜志，2009，29（1）：79-85.

[2] 王小英，劉國紅，劉波，等.青海茶卡鹽湖嗜鹽堿芽胞桿菌資源分析[J].福州大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2017，45（5）：761-769.

[3] 孫在金.脫硫石膏與腐植酸改良濱海鹽堿土的效應(yīng)及機(jī)理研究[D].北京：中國礦業(yè)大學(xué)，2013.

[4] 俞仁培.對(duì)鹽漬土資源開發(fā)利用的思考[J].土壤通報(bào)，2001（增刊1）：138-140.

[5] 王震宇，辛遠(yuǎn)征，李鋒民，等.黃河三角洲退化濕地微生物特性的研究[J].中國海洋大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2009，39（5）：1005-1012.

[6] 俞冰倩，朱琳，魏巍.我國鹽堿土土壤微生物研究及其展望[J].土壤與作物，2019，8（1）：60-69.