■張秀江 王品勝 丁 松 高正龍 向凌云 方玉美 胡 虹* 呂文竹

(1.河南省科學(xué)院生物研究所有限責(zé)任公司，河南鄭州450008；2.河南省高新技術(shù)實(shí)業(yè)有限公司，河南鄭州450008；3.信陽(yáng)市畜牧工作站，河南信陽(yáng)464000）

構(gòu)樹(shù)（Broussonetia papyrifera）屬桑科構(gòu)屬多年生落葉喬木或亞喬木，在我國(guó)大部分地區(qū)廣泛分布，自然條件下常見(jiàn)于溝谷、村旁、緩坡和丘陵以及山澗石縫中生長(zhǎng)[1]。構(gòu)樹(shù)作為我國(guó)的鄉(xiāng)土樹(shù)種，因其營(yíng)養(yǎng)豐富、蛋白質(zhì)含量高、速生性強(qiáng)等特點(diǎn)，作為蛋白飼料倍受到關(guān)注[2]。構(gòu)樹(shù)飼料蛋白質(zhì)含量高，是一種潛在的的優(yōu)質(zhì)植物蛋白質(zhì)飼料原料，但因其復(fù)雜的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，在單胃動(dòng)物胃腸道內(nèi)不易降解，很難被消化吸收,不能充分利用。構(gòu)樹(shù)飼料較高的粗纖維含量對(duì)單胃動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收也有一定的影響[3]。另外，構(gòu)樹(shù)葉中還含有抗?fàn)I養(yǎng)因子單寧和木質(zhì)素。單寧主要是與飼料中的其他營(yíng)養(yǎng)成分結(jié)合，影響動(dòng)物對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，造成營(yíng)養(yǎng)成分利用不充分，降低飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，單寧含量過(guò)高，還影響飼料的適口性，導(dǎo)致動(dòng)物采食量下降。木質(zhì)素結(jié)構(gòu)復(fù)雜，難以被畜禽消化利用，是直接導(dǎo)致構(gòu)樹(shù)飼料消化利用率低的主要原因。如何提高構(gòu)樹(shù)飼料中粗蛋白的含量，特別是容易被動(dòng)物消化吸收的酸溶蛋白含量，降低粗纖維、木質(zhì)素和單寧等抗?fàn)I養(yǎng)因子的含量，開(kāi)發(fā)出優(yōu)質(zhì)高效的構(gòu)樹(shù)蛋白飼料，增加構(gòu)樹(shù)飼料在動(dòng)物基礎(chǔ)日糧中的添加比例和使用效果是目前急需解決的技術(shù)問(wèn)題。本試驗(yàn)利用復(fù)合益生菌固體發(fā)酵構(gòu)樹(shù)飼料，通過(guò)正交試驗(yàn)優(yōu)化發(fā)酵技術(shù)參數(shù)，明確發(fā)酵條件對(duì)構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的影響，旨在探討優(yōu)質(zhì)高效的構(gòu)樹(shù)蛋白飼料開(kāi)發(fā)路徑，為構(gòu)樹(shù)飼料更加廣泛的應(yīng)用提供技術(shù)參考。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 菌種

試驗(yàn)用菌種為復(fù)合益生菌固體粉劑，含枯草芽孢桿菌≥2.5×108個(gè)/g，嗜酸乳桿菌≥2.0×108個(gè)/g，釀酒酵母菌≥1.0×108個(gè)/g。

1.1.2 原料

構(gòu)樹(shù)飼料采用構(gòu)樹(shù)全葉試驗(yàn)，采于7 月中旬信陽(yáng)羅山縣莽張鎮(zhèn)。葉片選擇1～1.5 m 高當(dāng)年生的構(gòu)樹(shù)，高、中、低部位隨機(jī)摘取，自然條件下曬至含水量10%以下，粉碎過(guò)30 目分析篩，裝袋備用。玉米粉、麩皮、稻糠為市售產(chǎn)品,糖蜜主要成分為蔗糖，紅褐色黏稠液體，干物質(zhì)含量為48.98%，水溶性糖含量為64.8%。

1.1.3 培養(yǎng)基

試驗(yàn)發(fā)酵培養(yǎng)基（1 kg）：構(gòu)樹(shù)粉700 g、玉米粉100 g、麩皮50 g、稻糠50 g、糖蜜100 g。

1.1.4 儀器

樣品粉碎機(jī)（ⅩI-A），江蘇金壇迅生儀器廠；凱氏定氮儀（KDN-04D），北京新諾立華儀器有限公司；電阻爐（SX2-12），武漢格萊莫檢測(cè)設(shè)備有限公司；離心機(jī)（Multifuge X1R），德國(guó)Thermo 公司；電熱恒溫培養(yǎng)箱（DRP-9052型），上海森信；全波長(zhǎng)掃描式多功能讀數(shù)儀（Varioskan Flash），美國(guó)THERMO；電子天平（ME204E），上海梅特勒-托利多；立式壓力蒸汽滅菌鍋（SX-500），日本TOMY。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)發(fā)酵培養(yǎng)基無(wú)需滅菌，用1 000 ml三角瓶裝入發(fā)酵培養(yǎng)基，在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，以粗蛋白質(zhì)的含量為考察指標(biāo)，對(duì)菌種接種量、培養(yǎng)基裝料量、培養(yǎng)基初始含水量、發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間進(jìn)行優(yōu)化。按正交試驗(yàn)優(yōu)化的條件發(fā)酵構(gòu)樹(shù)飼料，比較發(fā)酵前后構(gòu)樹(shù)飼料營(yíng)養(yǎng)成分含量的變化。

1.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.2.1 菌種接種量的優(yōu)化

將試驗(yàn)發(fā)酵培養(yǎng)基裝入1 000 ml的三角瓶中，其他發(fā)酵條件一致，分別接入2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%的菌種進(jìn)行固體發(fā)酵，48 h 后通過(guò)測(cè)定發(fā)酵培養(yǎng)物中粗蛋白的含量來(lái)確定最佳的菌種接種量。

1.2.2.2 培養(yǎng)基裝料量的優(yōu)化

在1 000 ml 的三角瓶中分別裝入試驗(yàn)發(fā)酵培養(yǎng)基100、200、300、400、500、600、700、800、900 g，其他發(fā)酵條件一致，進(jìn)行固體發(fā)酵，48 h 后通過(guò)測(cè)定發(fā)酵培養(yǎng)物中粗蛋白的含量來(lái)確定最佳的培養(yǎng)基裝料量。

1.2.2.3 培養(yǎng)基初始含水量的優(yōu)化

將試驗(yàn)發(fā)酵培養(yǎng)基裝入1 000 ml的三角瓶中，其他發(fā)酵條件一致，分別調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的初始含水量為48%、51%、54%、57%、60%、63%、66%、69%、72%，發(fā)酵48 h 后通過(guò)測(cè)定發(fā)酵培養(yǎng)物中粗蛋白的含量來(lái)確定最佳的培養(yǎng)基初始含水量。

1.2.2.4 發(fā)酵溫度的優(yōu)化

將試驗(yàn)發(fā)酵培養(yǎng)基裝入1 000 ml的三角瓶中，其他發(fā)酵條件一致，分別在溫度為24、26、28、30、32、34、36、38、40 ℃進(jìn)行固體發(fā)酵，48 h后通過(guò)測(cè)定發(fā)酵培養(yǎng)物中粗蛋白的含量來(lái)確定最佳的發(fā)酵溫度。

1.2.2.5 發(fā)酵時(shí)間的優(yōu)化

將試驗(yàn)發(fā)酵培養(yǎng)基裝入1 000 ml的三角瓶中，其他發(fā)酵條件一致，在發(fā)酵過(guò)程中在12、18、24、30、36、42、48、54、60 h分別測(cè)定發(fā)酵培養(yǎng)物中粗蛋白的含量來(lái)確定最佳的發(fā)酵時(shí)間。

1.2.2.6 正交試驗(yàn)

以單因素發(fā)酵條件優(yōu)化結(jié)果為基礎(chǔ)，設(shè)計(jì)4因素3 水平的正交試驗(yàn)，確定構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料最佳的工藝參數(shù)。

1.2.2.7 構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的效果

將試驗(yàn)發(fā)酵培養(yǎng)基裝入1 000 ml的三角瓶中，按正交試驗(yàn)確定的構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料最佳工藝參數(shù)發(fā)酵構(gòu)樹(shù)飼料，測(cè)定發(fā)酵前后構(gòu)樹(shù)飼料粗蛋白、酸溶蛋白、粗脂肪、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、酸性洗滌木質(zhì)素和單寧的含量，比較發(fā)酵前后構(gòu)樹(shù)飼料成分含量的變化。

“栽植黃芪溝深要達(dá)到10—15厘米，溝距是30厘米，苗一定要朝著一個(gè)方向平栽在溝內(nèi)?！?月19日，一八三團(tuán)住阿克恰普帕村訪惠聚工作隊(duì)將北屯市農(nóng)科所專業(yè)技術(shù)人員請(qǐng)到村里的黃芪種植示范田，現(xiàn)場(chǎng)為種植戶進(jìn)行科技培訓(xùn)，村民孫學(xué)海邊學(xué)邊做，不懂就問(wèn)，很快掌握了黃芪栽植技術(shù)?！肮ぷ麝?duì)為我們村民送致富門(mén)路，送科技知識(shí)，讓我們致富的信心更足了?！睂O學(xué)海說(shuō)。

1.2.3 測(cè)定方法

1.2.3.1 構(gòu)樹(shù)飼料成分的測(cè)定

飼料中的粗蛋白、粗脂肪和單寧的含量分別按GB/T 6432—1994、GB/T 6433—2006、GB/T 27985—2011的方法進(jìn)行。中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）、酸性洗滌木質(zhì)素（ADL）參照Van Soest 等[4]方法進(jìn)行測(cè)定。

1.2.3.2 酸溶蛋白質(zhì)含量的測(cè)定

在酸性條件下高分子蛋白質(zhì)易被沉淀，可被水解的較低分子量的蛋白質(zhì)即為酸溶蛋白質(zhì)。酸溶蛋白質(zhì)主要包括肽和游離氨基酸。測(cè)定方法：利用三氯醋酸作蛋白質(zhì)沉淀劑，將樣品中的蛋白質(zhì)和肽鏈較長(zhǎng)的肽沉淀，并將其中短鏈的肽和游離氨基酸用酸溶解出來(lái)，經(jīng)離心、過(guò)濾、消化、蒸餾，測(cè)定其蛋白質(zhì)含量[5]。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用dps 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素的方差分析。

2 結(jié)果

2.1 菌種接種量對(duì)構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的影響

按不同接種量分別接入試驗(yàn)發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)物中粗蛋白含量的結(jié)果如圖1?？莶菅挎邨U菌為好氧菌，釀酒酵母為兼性厭氧菌，嗜酸乳桿菌為厭氧菌。發(fā)酵前期枯草芽孢桿菌和釀酒酵母利用培養(yǎng)基中的氧氣快速生長(zhǎng)，當(dāng)氧氣耗盡嗜酸乳桿菌開(kāi)始生長(zhǎng)，產(chǎn)生大量的乳酸使發(fā)酵培養(yǎng)基的pH 值下降，限制枯草芽孢桿菌和釀酒酵母的生長(zhǎng)繁殖。隨著菌種接種量的加大，發(fā)酵反應(yīng)起步更快，單位時(shí)間內(nèi)發(fā)酵反應(yīng)進(jìn)行更充分，發(fā)酵培養(yǎng)物粗蛋白含量不斷增高。但菌種接種量達(dá)到一定比例后，由于大量微生物的快速生長(zhǎng)繁殖，過(guò)度消耗構(gòu)樹(shù)發(fā)酵飼料中的營(yíng)養(yǎng)成分，導(dǎo)致發(fā)酵培養(yǎng)物粗蛋白含量降低。由圖1 可以看出，接種量為8%時(shí)，構(gòu)樹(shù)發(fā)酵飼料粗蛋白含量最高。因此確定正交試驗(yàn)的接種量為7%、8%、9%。

圖1 菌種接種量對(duì)構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的影響

2.2 裝料量對(duì)構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的影響

圖2 裝料量對(duì)構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的影響

2.3 培養(yǎng)基初始含水量對(duì)構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的影響（見(jiàn)圖3）

圖3 培養(yǎng)基初始含水量對(duì)構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的影響

構(gòu)樹(shù)試驗(yàn)發(fā)酵培養(yǎng)基的初始含水量，直接影響發(fā)酵培養(yǎng)物中粗蛋白的含量。含水量過(guò)低，降低了發(fā)酵培養(yǎng)基的膨脹度，抑制菌體生長(zhǎng)。含水量過(guò)高，培養(yǎng)基的透氣性變差，抑制枯草芽孢桿菌和釀酒酵母的生長(zhǎng)，影響發(fā)酵效果。圖3 表明，構(gòu)樹(shù)發(fā)酵培養(yǎng)基的初始含水量為57%時(shí)，發(fā)酵培養(yǎng)物中粗蛋白含量最高。因此確定正交試驗(yàn)的培養(yǎng)基初始含水量為54%、57%、60%。

2.4 發(fā)酵溫度對(duì)構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的影響（見(jiàn)圖4）

從圖4 可見(jiàn)，隨著發(fā)酵溫度的提升，構(gòu)樹(shù)發(fā)酵培養(yǎng)物中粗蛋白的含量逐漸提高，但當(dāng)溫度超過(guò)34 ℃以后，構(gòu)樹(shù)發(fā)酵培養(yǎng)物中粗蛋白含量有逐漸降低的趨勢(shì)。因此可以確定34 ℃是構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的最適溫度。正交試驗(yàn)發(fā)酵培養(yǎng)溫度設(shè)為32、34、36 ℃。

圖4 溫度對(duì)構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的影響

2.5 發(fā)酵時(shí)間對(duì)構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的影響（見(jiàn)圖5）

由圖5 可以看出，隨著發(fā)酵時(shí)間的增加，發(fā)酵培養(yǎng)基中粗蛋白的含量在開(kāi)始的12 h內(nèi)提高速度緩慢，12～36 h 迅速提高，36～48 h 提高速度趨于平緩，發(fā)酵到48 h，發(fā)酵培養(yǎng)基中粗蛋白的含量最高達(dá)23.9%。隨著時(shí)間的繼續(xù)延長(zhǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)基中粗蛋白的含量逐漸下降，為了縮短發(fā)酵周期，減少被雜菌感染的機(jī)會(huì)，降低發(fā)酵成本，發(fā)酵最佳時(shí)間為48 h。

圖5 發(fā)酵時(shí)間對(duì)構(gòu)樹(shù)發(fā)酵蛋白飼料的影響

2.6 正交試驗(yàn)優(yōu)化復(fù)合菌發(fā)酵構(gòu)樹(shù)生產(chǎn)蛋白飼料的工藝參數(shù)

本試驗(yàn)設(shè)計(jì)L9(34)正交試驗(yàn)，以構(gòu)樹(shù)發(fā)酵培養(yǎng)物中粗蛋白為考察指標(biāo)，確定接種量、培養(yǎng)基裝料量、培養(yǎng)基初始含水量和發(fā)酵溫度對(duì)構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的影響，因素和水平、正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1～表2。

表1 正交試驗(yàn)的因素和水平

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果

由表2可知，從R值來(lái)看，以粗蛋白為考察指標(biāo)，構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的影響程度順序?yàn)锳＞C＞D＞B，即接種量＞培養(yǎng)基初始含水量＞溫度＞培養(yǎng)基裝料量，其中接種量影響顯著。最優(yōu)組合為A3C2D2B2，即最優(yōu)發(fā)酵條件參數(shù)：接種量9%、培養(yǎng)基初始含水量57%、溫度34 ℃、培養(yǎng)基裝料量400 g。

2.7 構(gòu)樹(shù)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料的效果

構(gòu)樹(shù)發(fā)酵試驗(yàn)培養(yǎng)基按正交試驗(yàn)優(yōu)化的發(fā)酵條件進(jìn)行培養(yǎng)，測(cè)定發(fā)酵前后構(gòu)樹(shù)飼料成分含量的變化，結(jié)果見(jiàn)表3。表3 表明構(gòu)樹(shù)飼料發(fā)酵前后粗蛋白和酸溶蛋白的含量分別提高35.23%和70.88%，差異顯著(P＜0.05)，酸溶蛋白占粗蛋白的比由40.27%提高到50.89%；粗脂肪含量變化不明顯(P＞0.05)；中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、酸性洗滌木質(zhì)素、單寧的含量分別降低25.00%、34.59%、18.53%、85.95%，差異顯著(P＜0.05)。

表3 構(gòu)樹(shù)發(fā)酵蛋白飼料的效果

3 討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，本試驗(yàn)選用的含3種益生菌的復(fù)合菌劑發(fā)酵構(gòu)樹(shù)飼料，在發(fā)酵過(guò)程中3種益生菌彼此之間有一定的協(xié)同作用，作用與功能互補(bǔ)。發(fā)酵前期枯草芽孢桿菌和釀酒酵母生長(zhǎng)繁殖，消耗氧氣，隨著構(gòu)樹(shù)發(fā)酵培養(yǎng)基中氧氣的減少，嗜酸乳桿菌開(kāi)始生長(zhǎng)繁殖，產(chǎn)生乳酸及一些抑制雜菌感染的物質(zhì)，發(fā)酵培養(yǎng)物的pH 值逐漸降低，且有效地控制其他雜菌的感染。發(fā)酵過(guò)程中還會(huì)不斷產(chǎn)生積累一些醇、醛等芳香類物質(zhì)和多種生物酶類及未知生長(zhǎng)因子，這些生物發(fā)酵產(chǎn)物可以顯著提高構(gòu)樹(shù)發(fā)酵飼料的適口性，增加構(gòu)樹(shù)飼料的消化吸收率，這與國(guó)內(nèi)多數(shù)學(xué)者的研究結(jié)果一致[6-8]。

構(gòu)樹(shù)飼料蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，畜禽消化吸收困難，豐富的蛋白質(zhì)資源沒(méi)有被充分的開(kāi)發(fā)利用，造成嚴(yán)重的資源浪費(fèi)。用發(fā)酵技術(shù)處理構(gòu)樹(shù)飼料不僅能降解構(gòu)樹(shù)飼料大分子復(fù)雜結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，還能使粗蛋白和游離氨基酸的含量增加，提高動(dòng)物對(duì)構(gòu)樹(shù)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收和構(gòu)樹(shù)飼料蛋白質(zhì)的利用價(jià)值[9]。何國(guó)英[10]研究表明，通過(guò)酶工程技術(shù)和生物工程技術(shù)對(duì)構(gòu)樹(shù)飼料進(jìn)行微生物發(fā)酵處理，能夠?qū)?gòu)樹(shù)飼料中結(jié)構(gòu)復(fù)雜的大分子蛋白質(zhì)降解，提高粗蛋白和游離氨基酸的含量。楊青春等[11]用米酒曲發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉片后，生長(zhǎng)豬對(duì)構(gòu)樹(shù)葉飼料粗蛋白、粗纖維、干物質(zhì)、無(wú)氮浸出物、磷以及總能的表觀消化率均有不同程度的提高。李海新[12]利用生物工程技術(shù)、酶工程技術(shù)對(duì)構(gòu)樹(shù)葉進(jìn)行發(fā)酵處理，使構(gòu)樹(shù)蛋白質(zhì)消化的吸收率達(dá)80%以上。熊羅英等[13]利用枯草芽孢桿菌發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉,與未發(fā)酵相比，肉仔雞對(duì)發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉的粗蛋白和粗纖維的消化率顯著提高。熊羅英等[14]報(bào)道，采用外源酶發(fā)酵構(gòu)樹(shù)飼料具有提高游離氨基酸含量，降解粗纖維的效果，可以提高三黃雞對(duì)構(gòu)樹(shù)粗蛋白、粗纖維等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化。李海新[12]用米酒曲發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉粗蛋白含量增加5.29%。本試驗(yàn)發(fā)酵后構(gòu)樹(shù)飼料中的粗蛋白含量提高了35.23%，與前述學(xué)者研究的結(jié)果一致。飼料中酸溶蛋白主要包括肽和游離氨基酸，最容易被畜禽消化吸收利用，酸溶蛋白含量的高低可作為評(píng)價(jià)飼料中粗蛋白質(zhì)量好壞的主要指標(biāo)，酸溶蛋白在構(gòu)樹(shù)飼料發(fā)酵蛋白方面的研究少見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)構(gòu)樹(shù)飼料經(jīng)發(fā)酵酸溶蛋白的含量提高了70.88%，表明復(fù)合菌發(fā)酵構(gòu)樹(shù)飼料不僅提高了粗蛋白的含量，還能夠大幅度的提高畜禽對(duì)構(gòu)樹(shù)飼料蛋白的消化吸收率。

構(gòu)樹(shù)飼料中單寧、粗纖維等抗?fàn)I養(yǎng)因子影響構(gòu)樹(shù)飼料的適口性和畜禽對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化和利用。構(gòu)樹(shù)的適口性差在于構(gòu)樹(shù)本身的粗纖維和單寧含量高[15]。發(fā)酵和青貯技術(shù)對(duì)木質(zhì)素和植物纖維具有軟化作用，對(duì)提高飼料的適口性有很大的幫助[11]。熊羅英等[16]通過(guò)發(fā)酵處理，構(gòu)樹(shù)葉的單寧含量顯著下降，從發(fā)酵前的1.69%降到發(fā)酵后的0.061%，下降了96.39%。本試驗(yàn)發(fā)酵后構(gòu)樹(shù)飼料單寧含量降低了85.95%，與前述學(xué)者研究的研究結(jié)果一致。構(gòu)樹(shù)葉粗纖維含量高，粗纖維主要由纖維素、半纖維素和木質(zhì)素組成，單胃動(dòng)物難以消化纖維素、半纖維素，木質(zhì)素對(duì)全部畜禽均不能消化利用，通過(guò)微生物發(fā)酵可以降解粗纖維，降低其含量，提高飼料消化利用率。本試驗(yàn)對(duì)構(gòu)樹(shù)飼料中中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、酸性洗滌木質(zhì)素的含量進(jìn)行試驗(yàn)研究，更能準(zhǔn)確反映構(gòu)樹(shù)飼料中纖維素、半纖維素，木質(zhì)素的含量。張益民等[17]用啤酒酵母和米曲霉發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉，粗纖維含量降低15.3%。李海新[12]發(fā)酵處理構(gòu)樹(shù)葉粗纖維降低21.76%。熊羅英[18]采用篩選的菌株發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉，粗纖維含量降低11.68%～14.96%。本試驗(yàn)構(gòu)樹(shù)飼料發(fā)酵后中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、酸性洗滌木質(zhì)素的含量分別降低25.00%、34.59%、18.53%，與前述學(xué)者研究一致。

4 結(jié)論

采用含枯草芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌和釀酒酵母的復(fù)合菌固體發(fā)酵構(gòu)樹(shù)飼料，以粗蛋白含量為考察指標(biāo)，通過(guò)L9(34)正交試驗(yàn)確定構(gòu)樹(shù)飼料發(fā)酵最佳工藝參數(shù)為接種量9%、培養(yǎng)基初始含水量57%、溫度34 ℃、培養(yǎng)基裝料量400 g、發(fā)酵時(shí)間48 h。構(gòu)樹(shù)飼料經(jīng)發(fā)酵粗蛋白和酸溶蛋白的含量分別提高35.23%和70.88%，酸溶蛋白占粗蛋白的比由40.27%提高到50.89%；粗脂肪含量變化不明顯；中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、酸性洗滌木質(zhì)素、單寧的含量分別降低25.00%、34.59%、18.53%、85.95%。