張楊秋蓉 馮靜云 張婕 楊靜雅 羅金金 林堉嬌 盛苗苗

昆明理工大學醫(yī)學院650500

張楊秋蓉與馮靜云對本文有同等貢獻

0 引 言

腫瘤是一種常見病、多發(fā)病，其中惡性腫瘤是目前危害人類健康最嚴重的一類疾病。從全世界看，惡性腫瘤有日益增加的趨勢。每年全球新發(fā)惡性腫瘤約1 409 萬例，惡性腫瘤死亡病例約820 萬例[1]。長期以來，人們錯誤地認為腫瘤是不治之癥。如今人們意識到，早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療可明顯改善腫瘤預后，甚至根治腫瘤。腫瘤的早發(fā)現(xiàn)有賴于定期健康查體、高危人群識別與風險評估（家族史、不良生活習慣、環(huán)境污染、職業(yè)危害等）以及有針對性的監(jiān)測檢查理念與技術方法的不斷提升。不同的腫瘤診斷是臨床查體、實驗室化驗、影像學觀測與病理檢查等多元診斷有效綜合的選擇[2]。近年來隨著影像學的發(fā)展，CT、MRI、正電子發(fā)射計算機斷層顯像（PET-CT）等檢查技術被越來越廣泛地運用于臨床腫瘤學的診斷。而腫瘤標志物的測定在腫瘤診斷過程中也越來越為臨床醫(yī)師所倚重。隨著分子病理學和分子免疫學的快速進展，特異性強、靈敏度高的分子和免疫診斷及預后指標不斷涌現(xiàn)。因此進一步從分子水平闡明惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展機制，尋求有效的生物治療靶標是改善惡性腫瘤預后的關鍵，也是提高國民健康、減少醫(yī)療支出的保障[3]。在各種內外致癌因素的長期作用下，細胞癌變始于單個細胞，其過程可以分為3 個階段，即啟動、促進和演進階段。癌變分子機制主要包括癌基因激活、過度表達，抑癌基因突變、丟失，DNA 修復相關基因突變導致功能減弱或缺失，細胞凋亡機制障礙，微衛(wèi)星不穩(wěn)定，端粒酶過度表達和信號傳導調控紊亂等。其中癌基因的激活和抑癌基因的失活在腫瘤發(fā)生發(fā)展中起著非常重要的作用。已在至少37 種腫瘤中發(fā)現(xiàn)了Ras 相關區(qū)域家族1A（Ras association domain family 1A，RASSF1A）基因甲基化，RASSF1A 基因可能是目前人類癌癥中描述最頻繁的甲基化基因[4]。本文介紹了RASSF1A 基因在不同惡性腫瘤中的異常甲基化，并綜述了近年來其在一系列惡性腫瘤中的相關作用及機制的研究進展，以期為惡性腫瘤的早期診斷、個體分子靶向治療及預后評估提供重要的指導依據。

1 RASSF1A 基因概述

Ras 相關區(qū)域家族（RASSF）由10 個成員組成（RASSF1～RASSF10），均包含一個特色的Ras 相關區(qū)域（RA 域）。RA 域分為兩類，一類位于C-末端（RASSF1～RASSF6），另一類位于N-末端（RASSF7～RASSF10）。RASSF1A 是RASSF 的成員，位于3 號染色體的短臂（3p21.3）上[5]。RASSF1A～RASSF1G 是因兩種啟動子的差異使用和可變剪接而產生的不同轉錄本。研究結果發(fā)現(xiàn)，RASSF1A 含340 個氨基酸的開放閱讀框，其氨基末端與富含半胱氨酸的甘油二酯或氟波酯結合區(qū)（C1 結構域）高度同源，故又稱蛋白激酶C 保守區(qū)；羧基末端與Ras 效應蛋白Nore1 和Maxp1 高度同源[6]。RASSF1A 基因編碼的蛋白類似于Ras 效應蛋白，可與DNA 修復蛋白XPA相互作用，還可抑制細胞周期蛋白D1 的積累，從而誘導細胞周期停滯。RASSF1A 基因缺失或表達異常與多種癌癥的發(fā)病機理有關，表明該基因具有腫瘤抑制功能[7]。

作為推定的腫瘤抑制基因，RASSF1A 在調節(jié)細胞周期、細胞凋亡和微管動力學以及維持基因組不穩(wěn)定性方面發(fā)揮作用，可通過多種途徑抑制細胞生長，促進細胞凋亡和衰老[8]。因此，RASSF1A 基因在控制一系列關鍵細胞功能的信號通路中十分重要。根據表達遺傳修飾機制，已知DNA 甲基化與人類癌癥的發(fā)生發(fā)展有關[9]。啟動子區(qū)域中胞嘧啶-磷酸-鳥嘌呤島（CpG 島）的異常甲基化可抑制相應基因的表達。RASSF1A 基因高甲基化可降低基因表達，并在功能上顯示類似于純合缺失或失活突變[10]。

2 RASSF1A 基因在呼吸系統(tǒng)高發(fā)腫瘤中的研究進展

2.1 鼻咽癌

鼻咽癌是一種罕見的惡性腫瘤，具有地理和種族分布特征。根據全球腫瘤流行病統(tǒng)計數(shù)據（GLOBOCAN）估計，2012 年全國約有86 700 例鼻咽癌新病例報告，導致死亡人數(shù)約50 800 人。東南亞每年鼻咽癌的發(fā)病率為0.015%～0.05%，而西方國家的發(fā)病率低于0.001%。遠處轉移是鼻咽癌患者死亡的主要原因。盡管CT 和MRI 是有效的，但均不能準確地為鼻咽癌患者提供預后或預測生物治療靶標的有效性。因此，尋找早期檢測鼻咽癌的新型非侵入性低成本生物標志物對于臨床實踐具有重要意義。

研究結果顯示，鼻咽癌患者鼻咽癌組織、鼻咽刷牙樣本和血液樣本中的RASSF1A 啟動子甲基化明顯高于非腫瘤組織[11]。因此，RASSF1A 啟動子甲基化可作為組織和刷洗樣本的生物標志物，用于鼻咽癌的臨床診斷。在未來，匹配良好的前瞻性研究對于確定鼻咽癌患者RASSF1A 啟動子甲基化的預后和診斷至關重要。

2.2 肺癌

肺癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一。在中國，肺癌是癌癥死亡的主要原因。研究結果表明，早期診斷可顯著提高肺癌患者的5 年生存率，但由于臨床表現(xiàn)和病理特征的異質性，目前尚無有效且廉價的方法可用于肺癌的早期檢測和篩查。對于疑似肺癌患者，早期通常進行纖維支氣管鏡檢查，通過支氣管肺泡灌洗可獲得細胞學檢查樣本，進而在第一時間獲得支氣管肺泡灌洗液。

相關研究結果顯示，早期肺癌患者的SHOX2和RASSF1A 甲基化水平均低于晚期肺癌患者[12]。最可能的解釋是由于早期腫瘤的侵襲性較低，使得進入支氣管系統(tǒng)的腫瘤細胞較少。作為評估肺病的重要方法，支氣管肺泡灌洗液的細胞學檢查已被廣泛使用，但其靈敏度較低（43%～48%），同時存在大量模棱兩可的病例。正如在上述研究中，對肺癌患者的支氣管肺泡灌洗液樣本進行細胞學檢查，其靈敏度僅為5.7%，有81.3%的樣本結果為陰性，同時有13.0%的樣本結果是模凌兩可的；而對肺泡灌洗液樣本進行SHOX2 和RASSF1A 甲基化聯(lián)合檢測可將靈敏度從5.7%提高至71.5%，對于細胞學上的可疑和陰性樣本，基因檢測陽性率分別達93.8%和66.0%[12]。與細胞學檢查相比，聯(lián)合檢測支氣管肺泡灌洗液樣本中SHOX2 和RASSF1A 甲基化可提高肺癌的檢出率，并具有較高的靈敏度和特異性，有助于肺癌的早期診斷。

3 RASSF1A 基因在消化系統(tǒng)高發(fā)腫瘤中的研究進展

3.1 食管癌

食管癌在大多數(shù)情況下病程發(fā)展迅速且預后不良，已成為世界上最嚴重的腫瘤疾病之一。食管癌具有兩種主要的組織學亞型：食管鱗狀細胞癌（esophageal squamous cancer, ESCC） 和食管腺癌。ESCC 是亞洲人群的主要亞型，而食管腺癌則在白種人群中更為常見。近年來，雖然早期診斷和多模式治療已取得了一定的進展，但食管癌的預后仍然很差。食管癌患者的總體5 年生存率＜20%，大多數(shù)患者在確診的第1 年內死亡[13]。

在ESCC 中已檢測到多個遺傳和遺傳外改變，但ESCC 的致癌性及進展的精確分子機制仍然未知。雜合性缺失分析結果顯示，3p21.3 是食管癌等癌癥中常見的一個區(qū)域。已在多種癌癥中觀察到基因在該區(qū)表達下調，這意味著不同腫瘤的正負調節(jié)[14]。腫瘤抑制基因啟動子區(qū)CpG 島甲基化導致轉錄沉默是公認的共同機制。RASSF1A 基因失活的最常見機制是其啟動子序列中CpG 島的高甲基化。RASSF1A 基因高甲基化與基因表達的缺失高度相關，而5-雜氮-2'-脫氧胞苷處理的去甲基化可使基因表達恢復，表明RASSF1A 基因高甲基化是其沉默的原因之一。RASSF1A 基因失活可刺激肺癌細胞的錨定依賴性生長，野生型RASSF1A 基因轉染高甲基化的肺癌可抑制腫瘤生長，提示RASSF1A 可用作腫瘤抑制基因。據文獻報道，RASSF1A 基因甲基化可能在ESCC 中起著重要作用。因此，研究RASSF1A 基因甲基化的功能后果及其在ESCC 中的致癌作用具有重要意義[15-16]。

3.2 胃癌

胃癌是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤，其癥狀與胃炎、胃潰瘍等胃慢性疾病癥狀相似。目前，我國胃癌的早期診斷率仍較低。胃癌發(fā)生是一個多步驟過程，不僅包括基因突變，還包括表觀遺傳改變。其中最重要的是DNA 甲基化，其不僅影響腫瘤抑制基因，還可能參與細胞周期調控、DNA 修復、致癌物質代謝、細胞與細胞相互作用、細胞凋亡和血管生成。作為癌細胞的重要標志，啟動子甲基化被認為是滅活癌癥相關基因的主要機制之一，伴隨著遺傳改變，最終導致胃癌的發(fā)生[17]。

目前已發(fā)現(xiàn)越來越多的癌癥相關基因，特別是腫瘤抑制基因在胃癌中被甲基化。隨著對RASSF1A基因研究的不斷深入，人們發(fā)現(xiàn)RASSF1A mRNA在胃癌組織中的表達水平明顯低于正常胃黏膜組織，這表明RASSF1A 基因參與了胃癌的發(fā)生。RASSF1A 基因啟動子高甲基化可能是導致其表達失活的重要原因，也是胃癌發(fā)生發(fā)展過程中的頻發(fā)分子事件，并與胃癌的進展演變相關。胃癌組織中RASSF1A mRNA 的表達水平隨分化程度的降低、臨床分期的增加而明顯降低，預示了胃癌的惡性程度高，臨床分期晚。因此檢測胃癌組織中RASSF1A 基因甲基化有助于評價胃癌的分級及判斷腫瘤是否存在轉移。此外，RASSF1A 基因失活廣泛存在于各種上皮細胞腫瘤中，且失活與其啟動子區(qū)高甲基化密切相關，故干預RASSF1A 基因的表達有可能在胃癌防治中起一定作用[18]。

3.3 膽管癌

膽管癌指源于肝外膽管包括肝門區(qū)至膽總管下端的一種高度惡性上皮腫瘤。膽管癌的遺傳改變包括p53、APC、c-erbB-2、K-Ras 和頻繁的p16INK4A改變。染色體3p21 的等位丟失在人類癌癥中較為常見，雖然在染色體3p21 上存在多種腫瘤抑制基因，但RASSF1A 被認為是該區(qū)的主要腫瘤抑制基因[19]。

RASSF1A 含有RA 域，其中具有蛋白質功能效應的Ras 還參與了正常細胞中的信號傳導。RASSF1A基因可能參與了膽管癌的發(fā)生發(fā)展及浸潤轉移過程，兩者存在一定的相關性。相關研究結果表明，RASSF1A 基因在肝外膽管癌組織中的轉錄表達缺失率明顯高于癌旁組織，且與肝外膽管癌的淋巴轉移及TNM 分期相關。甲基化特異性PCR 和DNA 測序結果也證實啟動子區(qū)CpG 島高甲基化是RASSF1A基因表達缺失的主要機制之一。RASSF1A 的腫瘤抑制功能表現(xiàn)為其在細胞系中外源性重新表達后，集落形成減少，抑制不依賴貼壁的生長和腫瘤形成。此外，啟動子高甲基化的膽管癌中提示RASSF1A 基因轉錄失活。因此，深入研究RASSF1A 基因可能對膽管癌預后具有重要意義。

3.4 肝癌

肝細胞癌是最常見的惡性腫瘤之一，也是全球癌癥相關死亡的主要原因之一。有充分證據表明，乙型和丙型肝炎病毒感染、黃曲霉毒素B 暴露和大量飲酒是肝細胞癌的重要危險因素。也有文獻描述了與肝細胞癌發(fā)展相關的許多遺傳異常。除遺傳改變外，基于DNA 甲基化的機制已被證明有助于腫瘤抑制基因的失活。異常甲基化基因可用作早期檢測、腫瘤分類和治療反應的生物標志物，例如靶向治療、表觀遺傳因子和傳統(tǒng)化療藥物。腫瘤患者外周血或組織中的甲基化信號是早期診斷、預測治療反應和預后的潛在生物標志物[20]。

Abd-Elfatah 和Gad-Allah[21]的研究結果顯示，RASSF1A 基因的啟動子區(qū)在75.9%的非腫瘤肝組織和82.8%的肝細胞癌組織中發(fā)生了甲基化，截止值為4%甲基化速率，表明RASSF1A 基因啟動子的甲基化頻率高；當使用顯著性更高的20%甲基化速率截止值時，僅有24.1%的非腫瘤肝組織和49.4%的肝細胞癌組織被認為存在RASSF1A 基因啟動子的甲基化。該結果表明，肝細胞癌的癌旁組織中存在RASSF1A 基因啟動子的中等甲基化。此外，與相應的非腫瘤肝組織相比，肝細胞癌組織中RASSF1A基因啟動子的甲基化速率顯著增加，表明這種表觀遺傳改變參與了肝癌的發(fā)生發(fā)展。

3.5 結直腸癌

結直腸癌是胃腸道中常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率和病死率在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中僅次于胃癌、食管癌和原發(fā)性肝癌。自2000 年以來，結直腸癌的發(fā)病率和死亡率均呈逐年上升趨勢。結直腸癌早期癥狀不明顯，多發(fā)于中年以上男性。

目前，已有許多關于結直腸癌相關基因甲基化狀態(tài)的報道。甲基化特異性PCR 檢測結果顯示，抑癌基因RASSF1A 在結直腸癌細胞系、各種類型的實體瘤及結直腸癌患者血清中均存在較高的啟動子甲基化。RASSF1A 可通過抑制JNK 途徑誘導G1期細胞周期停滯。早期對于RASSF1A 的研究結果顯示，微管穩(wěn)定性通過激活的K-Ras 而增強，因此RASSF1A 可通過多重途徑調節(jié)微管穩(wěn)定，參與微管蛋白的動力學?？傊私Y直腸癌發(fā)生中眾所周知的信號通路外，RASSF1A 甲基化可能是異常Ras信號傳導的替代機制。隨著對RASSF1A 基因研究的深入，將為結直腸癌的發(fā)生機制、分子水平監(jiān)測及基因治療提供新的參考依據[22]。

4 RASSF1A 基因在生殖泌尿系統(tǒng)高發(fā)腫瘤中的研究進展

4.1 子宮內膜癌

子宮內膜癌（endometrial cancer, EC）位列全球女性最常見癌癥第7 位，其發(fā)病率呈上升趨勢，故需更好地了解分子事件在癌癥發(fā)生中的作用。作為婦科惡性腫瘤，EC 具有由異常遺傳和表觀遺傳改變以及環(huán)境因素驅動的多因素特征。目前基因表達變異以及癌癥相關基因的突變或缺失可能無法完全解釋子宮內膜的癌變，其對染色質產生影響的同時卻未改變DNA 突變基因表達的表觀遺傳引起了人們的注意。研究結果發(fā)現(xiàn)，啟動子異常甲基化是子宮內膜腫瘤發(fā)生的早期和廣泛的改變。RASSF1A 基因是腫瘤抑制基因之一，其啟動子常在EC 中甲基化失活。RASSF1A 基因的這種表觀遺傳沉默表明其可能與EC 的發(fā)病機制有關。

人類RASSF1A 基因位于染色體3p21.3 上，含有8 個外顯子，可產生7 個轉錄本。RASSF1A 基因啟動子的異常甲基化已被確定為是RASSF1A 表達失活的主要原因，從而導致早期良性腫瘤向后期浸潤性癌的惡性轉化。RASSF1A 基因啟動子甲基化可能是EC 的發(fā)病機制之一，RASSF1A 蛋白表達減少或缺失對EC 的發(fā)生、發(fā)展具有重要作用。研究結果顯示，RASSF1A 是EC 的重要指標，具有高靈敏度（100%）和特異性（97.2%）。EC 中RASSF1A 基因啟動子的甲基化率明顯高于正常子宮內膜；EC 中RASSF1A 蛋白陽性表達率明顯低于正常子宮內膜[23]。因此，RASSF1A 基因啟動子甲基化可能與EC的發(fā)生和發(fā)展相關。RASSF1A 有望成為EC 的分子標志物，為EC 的早期診斷及生物靶向治療提供理論依據。

4.2 卵巢癌

卵巢癌是女性生殖器官常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌。卵巢癌中以上皮癌最為多見，其次是惡性生殖細胞瘤。其中卵巢上皮癌死亡率占婦科腫瘤首位，對女性生命造成了嚴重威脅，但對其分子發(fā)病機制仍知之甚少。有證據表明，遺傳和表觀遺傳事件在卵巢癌中均發(fā)揮作用，表觀遺傳變化發(fā)生于致癌過程的早期，其包括DNA 甲基化和組蛋白修飾。許多基因通過DNA 甲基化在卵巢癌中沉默，如RASSF1A 基因。

Bondurant 等[24]研究發(fā)現(xiàn)，卵巢良性腫瘤組織、卵巢癌患者血清以及健康志愿者血清中均未發(fā)生RASSF1A 基因甲基化；卵巢癌組織中RASSF1A 基因的甲基化狀況與血清中出現(xiàn)RASSF1A 基因甲基化關系密切；卵巢癌患者中的RASSF1A 基因甲基化改變與腫瘤的臨床分期、細胞分化程度、組織學類型無明顯相關性，但與淋巴結轉移密切相關[24]。因此，分析血清DNA 中RASSF1A 基因異常甲基化有可能成為輔助卵巢癌診斷的有效方法之一。

4.3 乳腺癌

自20 世紀70 年代末起, 我國乳腺癌的發(fā)病率一直呈上升趨勢，已成為我國女性發(fā)病率最高的一類癌癥。乳腺癌的發(fā)病機制非常復雜，對于RASSF1A 基因在乳腺癌中的研究，國外已有相關報道并正在進行深入探討。研究結果顯示，RASSF1A基因啟動子甲基化為乳腺癌中的頻發(fā)事件，其發(fā)生率隨年齡增長而升高，在乳腺癌發(fā)生中起重要作用。

RASSF1A 基因表達缺失可能參與了乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展過程，故RASSF1A 基因有可能成為乳腺癌患者預后的良好標志物之一。RASSF1A 基因幾乎在全身正常組織器官中均有表達，但在多種實體腫瘤中表達缺失。其主要通過穩(wěn)定微管、調控細胞周期以及增加細胞凋亡來抑制腫瘤細胞的生長。RASSF1A 基因甲基化發(fā)生在乳腺癌早期，與腫瘤的TNM 分期、侵襲性及預后有關。RASSF1A 在乳腺癌組織中低表達，而在癌旁組織中高表達。文獻報道RASSF1A 在癌旁組織中的表達陽性率明顯高于乳腺癌組織（86.7%比35.0%，P＜0.05）；RASSF1A 的表達與淋巴結轉移、組織學分級、脈管侵犯、人類表皮生長因子受體2 和Ki-67 表達有關，其高表達與臨床分期、淋巴結轉移、組織學分級和c-erbB-2 蛋白表達呈負相關[25]。RASSF1A 啟動子甲基化可為部分乳腺癌患者提供重要的預后信息，并在乳腺腫瘤的臨床行為中起重要作用。檢測基因的甲基化狀態(tài)有望成為一項具有可操作性的對乳腺癌預后生物標志物進行前瞻性評估的項目[26]。

4.4 前列腺癌

前列腺癌是發(fā)生于前列腺的上皮性惡性腫瘤。2012 年我國腫瘤登記地區(qū)前列腺癌的發(fā)病率為9.92/10 0000，位列男性惡性腫瘤發(fā)病率的第6 位。前列腺癌發(fā)病率隨著年齡的增長而增長，高峰年齡為70～80 歲。前列腺癌的病因在很大程度上仍未定義。然而，越來越清楚的是，各種腫瘤抑制基因的表觀遺傳失活可能在前列腺癌等多種癌癥發(fā)展中起關鍵作用。

腫瘤抑制因子RASSF1A 可能是目前人類癌癥中描述最頻繁的甲基化基因。RASSF1A 啟動子的甲基化率與前列腺癌發(fā)生風險顯著相關。RASSF1A 可抑制關鍵細胞周期調節(jié)劑細胞周期蛋白D1，最終抑制前列腺癌細胞的增殖及侵襲潛力[27]。另有研究結果顯示，RASSF1A 啟動子甲基化率與前列腺癌風險增加呈明顯正相關。此外，前列腺癌患者前列腺組織中RASSF1A 基因的甲基化率與前列腺癌患者的Gleason 評分、血清前列腺特異性抗原和腫瘤分期呈顯著正相關，表明RASSF1A 啟動子甲基化率可用于前列腺癌的早期診斷及疾病預后預測。

5 RASSF1A 基因在神經系統(tǒng)腫瘤中的研究進展

5.1 神經母細胞瘤

神經母細胞瘤是兒童中最常見的實體瘤，占兒童癌癥的8%～10%和兒童癌癥死亡的15%。雖然嬰兒局部成神經細胞瘤可自發(fā)消退或成熟，但兒童播散性腫瘤可抵抗多模式強化治療。

RASSF1A 基因甲基化常見于臨床診斷為神經母細胞瘤的嬰兒或兒童，而CASP8 和DCR2 基因甲基化僅在兒童腫瘤中常見。當根據腫瘤的倍性狀態(tài)分類時，發(fā)現(xiàn)RASSF1A 和PCDHB 基因甲基化僅與臨床診斷為二倍體腫瘤患兒的MYCN 擴增和MYCN 異常有關；此外還發(fā)現(xiàn)RASSF1A 和PCDHB基因甲基化分別與三倍體和二倍體腫瘤患兒的預后有關，且與二倍體腫瘤患兒的MYCN 擴增有關[28]。因此基于患者年齡和腫瘤倍性狀態(tài)，RASSF1A 甲基化可能具有兩種生物學作用。

5.2 顱內原始神經外胚層腫瘤

顱內原始神經外胚層腫瘤（primitive neuroectodermal tumor,PNET）是兒童中最常見的惡性胚胎腦腫瘤，成神經管細胞瘤（medulloblastoma, MB）為其主要亞型。MB 與幕上原始神經外胚層腫瘤（supertentorial primitive neuroectodermal tumor, SPNET）雖在組織學上相似，但兩者在其他方面仍有許多不同。臨床上MB 占兒科腦腫瘤的25%左右，而SPNET 僅占10%左右，但MB 患者的5 年生存率（50%～70%）優(yōu)于SPNET 患者（20%～30%）[29]。此外，MB 的遺傳組成似乎也與SPNET 不同。異染色體17q 是MB 的特征，而染色體14q 和19q 的丟失在SPNET 中更常見。DNA 微陣列分析結果進一步揭示了MB 與SPNET 之間基因表達譜的差異，意味著兩者是生物學上的不同實體。

MB 和SPNET 在組織學上類似于分布在大腦不同解剖部位的顱內PNET。有證據表明，啟動子CpG 島的高甲基化是多種人類癌癥中常見的表觀遺傳事件。Chang 等[30]采用甲基化特異性PCR 檢測了25 個原發(fā)性MB、9 個原發(fā)性SPNET、3 個MB 和2 個SPNET 細胞株中RASSF1A、FHIT 和sFRP1 啟動子區(qū)的甲基化狀態(tài)。結果顯示，在2 個正常小腦和5 個正常腦組織樣本中，均未檢測到上述3 種基因的啟動子高甲基化；相比之下，在100%的原發(fā)性MB、67%（6/9）的原發(fā)性SPNET 和所有SPNET 細胞株中均檢測到RASSF1A 的啟動子高甲基化，且SPNET 組的RASSF1A 啟動子高甲基化率顯著低于MB 組。此外，還在22%（2/9）和11%（1/9）的SPNET細胞株中分別檢測到FHIT 和sFRP1 的啟動子高甲基化，但在所研究的MB 中未檢出FHIT 和sFRP1 的啟動子高甲基化。由此可見，RASSF1A 的啟動子高甲基化是顱內PNET 的常見事件，而FHIT 和sFRP1在一小部分SPNET 中受表觀遺傳學影響。

6 結 語

RASSF1A 基因為RASSF 家族成員，其以三磷酸鳥苷依賴性方式結合Ras 繼而誘導由Ras 介導的凋亡。該基因的缺失或表達改變與多種癌癥的發(fā)病機理有關，表明該基因具有腫瘤抑制功能。作為腫瘤抑制基因，RASSF1A 在調節(jié)細胞周期、細胞凋亡和微管動力學以及維持基因組不穩(wěn)定性方面發(fā)揮作用，可通過多種途徑抑制細胞生長、促進細胞凋亡和衰老。由于腫瘤抑制基因的表觀遺傳失活在多種惡性腫瘤的發(fā)展中起關鍵作用，因此可通過對RASSF1A 基因的深入研究，為多種惡性腫瘤的治療研究提供方向和新的分子靶點，同時利用其相關關系對腫瘤治療的預后進行評定。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突