陳真永,吳 鵬,高小秦,徐海成*
(1.長安大學(xué),陜西 西安 710064;2.云南省高原特色農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)研究院,云南 昆明 650201;3.云南大學(xué),云南 昆明 650091)
【研究意義】食用玫瑰為薔薇科(Rosaceae)薔薇屬(Rosa)叢生落葉灌木,高約1~2 m,莖直立,有皮刺和刺毛,小枝密生絨毛,葉為奇數(shù)羽狀復(fù)葉,小葉5~9片,葉脈深陷,形成明顯折皺[1]。在全球范圍內(nèi)種植很廣泛,但多數(shù)分布在北半球,以保加利亞、土耳其、摩洛哥和法國等國家為主,國內(nèi)食用玫瑰栽植成規(guī)模的地方有甘肅永登、山東平陰、云南安寧、北京妙峰山、陜西渭南和新疆和田等地[2]。【前人研究進(jìn)展】研究報(bào)道食用玫瑰花含有上百種化學(xué)成分,不僅富含蛋白質(zhì)、氨基酸和維生素C和膳食纖維等多種營養(yǎng)成分,而且還含有天然的抗氧化物質(zhì)、多酚類、黃酮類等多種化學(xué)成分,具有抗氧化、抗增殖、免疫調(diào)節(jié)、抗菌、改善內(nèi)分泌失調(diào)、美容養(yǎng)顏、降血脂和預(yù)防心血管疾病等多種功效[3-8]。同時(shí)也是世界馳名的天然香精原料[9-10]。以食用玫瑰花瓣為基礎(chǔ)原料,被廣泛應(yīng)用于食品、保健品、化妝品、醫(yī)藥、茶飲、化工及其他領(lǐng)域,具有較大的開發(fā)利用價(jià)值[11-12]。植物自身的遺傳特性和它的產(chǎn)地生態(tài)環(huán)境因子對多酚和酶等次生代謝產(chǎn)物的含量具有顯著影響[13-14]。許多研究表明,抗氧化能力與丙二醛(MDA) 含量呈負(fù)相關(guān),與抗氧化酶如超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、過氧化物酶(peroxidase,POD)活性、過氧化氫酶(catalase,CAT)活性和抗氧化劑(VE、VC、肌肽、谷胱甘肽等)呈正相關(guān)[15-16]?!颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】云南種植的食用玫瑰品種主要有八街玫瑰、墨紅玫瑰、金邊玫瑰和大馬士革玫瑰等,“八街玫瑰”(又稱“滇紅玫瑰”,滇紅玫瑰的稱呼不被專家學(xué)者認(rèn)可,該稱呼2019年底還未到相關(guān)部門備案)是云南種植面積最大的食用玫瑰品種,它最大的特點(diǎn)是玫瑰花朵艷麗,花瓣厚、花香濃郁,種源在昆明來源不詳,有3種傳說,一是由飛虎隊(duì)員帶入昆明,二是由法國傳教士帶入,三是從四川引種到昆明?!緮M解決的關(guān)鍵問題】本研究以八街玫瑰、墨紅玫瑰和金邊玫瑰的玫瑰花蕾為研究對象,通過比較不同品種及不同產(chǎn)地食用玫瑰花蕾的多酚含量和它抗氧化能力,為選擇種植抗氧化能力強(qiáng)的食用玫瑰品種提供依據(jù)和參考。
2019年7月分別從曲靖馬龍、昆明安寧、楚雄武定采取3個(gè)種新鮮食用玫瑰花蕾,按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)依次編號為1~9,以大馬士革玫瑰為對照,編號為10(表1)。尋找并選取新鮮、飽滿、開放程度基本一致的花蕾(毛筆尖形),然后放入冰袋帶回實(shí)驗(yàn)室云南農(nóng)業(yè)大學(xué)工程中心實(shí)驗(yàn)室,-40 ℃保存。需檢測的新鮮花蕾先以80 ℃殺青15 min,放置于60 ℃干燥箱干燥48 h。然后取出干花蕾冰浴研磨粉碎,每次稱取1.0 g粉末,轉(zhuǎn)入到15 mL試管中,隨之加入10 mL蒸餾水,混勻后沸水浴提取30 min(期間振蕩2~4次),然后過濾得到水提液待用。
主要儀器設(shè)備:AL204 分析天平、ΜL 2000紫外可見分光光度計(jì),Z233MK-2高速冷凍離心機(jī),SANYO MLR-351H培養(yǎng)箱,E-36L培養(yǎng)箱,SANYO MDF-382E超低溫冰箱,上海京科雷磁DDSL-308電導(dǎo)儀,分析天平,PB-10型pH計(jì)等。
主要試劑:沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品、10 %(W/V)三氯乙酸(TCA,準(zhǔn)確稱取50 g三氯乙酸,溶解于蒸餾水中,并定容至500 mL)。0.6 %硫代巴比妥酸:準(zhǔn)確稱取硫代巴比妥酸0.6 g,先加少量的氫氧化鈉(1 mol·L-1)溶解,再用10 %的三氯乙酸定容至100 mL。
(1)總抗氧化能力的測定,采用南京建成生物工程研究所總抗氧化能力測定方法,在37 ℃時(shí),以每分鐘每毫升水提液使反應(yīng)體系的吸光度(OD)值每增加0.01為1個(gè)總抗氧化活力單位(TARU)。
(2)不同品種花蕾多酚含量的測定,分別采用三氯化鋁法和酒石酸鐵法[17]。
(3) 不同品種花蕾丙二醛(MDA)含量測定采用硫代巴比妥酸法[18],超氧化物歧化酶(SOD)活性測定采用氮藍(lán)四唑法[18],過氧化物酶(POD)活性測定采用愈創(chuàng)木酚(二甲氧基酚)法[19],過氧化氫酶(CAT)活性測定采用李合生所用方法[19]。
取樣及測定均重復(fù)3次,試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2003繪制圖表,然后計(jì)算SC50值,收集整理所有檢測數(shù)據(jù)后采用SPSS 20.0數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行聚類分析及差異顯著性分析。
由表1可知,不同食用玫瑰品種間花蕾的多酚含量和總抗氧化活力差異顯著,多酚含量及總抗氧化活力高低順序依次為八街玫瑰>墨紅玫瑰>金邊玫瑰>大馬士革玫瑰。其中,昆明安寧產(chǎn)八街玫瑰花蕾多酚含量和總抗氧化活力最高其多酚含量為(182.31 ±2.23)mg·g-1,是大馬士革玫瑰(98.67±1.48)mg·g-1的1.84倍。在9個(gè)檢測樣品中,多酚的平均含量為(148.51±2.23)mg·g-1,八街玫瑰品種花蕾多酚高于平均含量,金邊玫瑰品種的多酚含量在平均水平之下,且明顯低于八街玫瑰。在10個(gè)檢測樣品中,總抗氧化活力的平均含量為(20.64±2.05)U·mg-1,八街玫瑰品種總抗氧化活力都高于平均含量,金邊玫瑰品種花蕾的多酚含量在平均水平之下,且明顯低于八街玫瑰。
表1 不同產(chǎn)地玫瑰花蕾的多酚含量和總抗氧化活力
由表2得知,不同玫瑰品種花蕾的MDA含量和SOD活性差異顯著,SOD活性高低順序依次為八街玫瑰>墨紅玫瑰>金邊玫瑰>大馬士革玫瑰,MDA含量高低順序剛好與SOD活性高低順序相反。在檢測的10個(gè)樣品中,相同品種在不同的地區(qū),SOD活性在昆明安寧最高,在曲靖馬龍最低;不同玫瑰品種在相同的地區(qū),八街玫瑰花蕾SOD活性最高,金邊玫瑰最低。其中,曲靖馬龍產(chǎn)金邊玫瑰MDA含量最高,是大馬士革玫瑰的1.92倍,昆明安寧產(chǎn)八街玫瑰SOD活性最高,是大馬士革玫瑰的1.95倍。
表2 不同產(chǎn)地玫瑰花蕾的MDA含量和SOD活性
由表3得知,不同品種玫瑰花蕾的POD活性CAT活性差異顯著,花蕾POD活性及CAT活性高低順序依次為八街玫瑰>墨紅玫瑰>金邊玫瑰>大馬士革玫瑰。其中,八街玫瑰花蕾POD活性及CAT活性在檢測的10個(gè)樣品中活性最高,分別為(39.86±0.34)、(102.65±5.03)U·mg-1,分別是大馬士革玫瑰POD活性CAT活性的3.87、2.55倍。POD活性的平均值為(32.52±2.22)U·mg-1,CAT活性的平均值為(85.96±3.31)U·mg-1,在10個(gè)檢測樣品中,八街玫瑰品種花蕾POD活性和CAT活性高于平均水平,且都明顯高于墨紅玫瑰和金邊玫瑰。
表3 不同產(chǎn)地玫瑰花蕾的POD活性和CAT活性
由表4得知,年均日照時(shí)數(shù)昆明安寧最長達(dá)2327.5 h,楚雄武定次之2312.4 h,曲靖馬龍年均日照時(shí)數(shù)最短1985.0 h。研究顯示同一玫瑰品種多酚含量和總抗氧化活力昆明安寧>楚雄武定>楚雄武定(表1),SOD活性(表2)、POD活性CAT活性也顯示昆明安寧>楚雄武定>楚雄武定(表3)。表明年均日照時(shí)數(shù)與玫瑰花抗氧化能力呈正相關(guān)。
表4 不同產(chǎn)地玫瑰品種及氣候環(huán)境因子
研究發(fā)現(xiàn),同一品種在3個(gè)不同地方玫瑰花蕾的多酚含量、總抗氧化活力,超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、抗壞血酸過氧化物酶(APX)和過氧化物酶(POD)的活性都是安寧的玫瑰品種較高,表明安寧產(chǎn)地的玫瑰花蕾抗氧化性較強(qiáng)。在同一產(chǎn)地的3個(gè)玫瑰品種都是八街玫瑰品種的抗氧化性較強(qiáng),表明遺傳因素是影響不同品種玫瑰多酚含量和抗氧化能力的主要因素,產(chǎn)地環(huán)境因子對多酚含量、抗氧化系統(tǒng)酶活性和抗氧化能力也有較大的影響。另外,年均日照時(shí)數(shù)也是影響玫瑰花抗氧化能力的主要因素,年均日照時(shí)數(shù)越高,玫瑰花抗氧化能力越強(qiáng)。