李麗群

泉州市第一醫(yī)院輸血科，福建 泉州 362000

新生兒溶血病(HDN)為新生兒時期的特有疾病，屬于溶血性疾病，發(fā)病原因是母嬰血型不合，之后母體對應(yīng)血型抗體經(jīng)過胎盤傳輸給胎兒，會發(fā)生紅細(xì)胞被嚴(yán)重破壞的情況，導(dǎo)致新生兒患有溶血病，其中ABO血型不合發(fā)生率高；臨床癥狀主要為黃疸、手足部徐動、貧血、水腫、腹水等，部分患兒若病情嚴(yán)重，易出現(xiàn)智力與運動障礙，嚴(yán)重的情況下會致使新生兒死亡，該疾病的臨床治愈難度較大，預(yù)后效果不佳，所以需要孕產(chǎn)婦與其配偶在孕期及時進(jìn)行血型系統(tǒng)(ABO與Rh等)檢查，預(yù)防該疾病，如果新生兒已經(jīng)檢出溶血病，則需要積極配合醫(yī)生進(jìn)行退黃、并發(fā)癥預(yù)防的治療，以期取得理想的預(yù)后結(jié)果[1]。研究現(xiàn)階段新生兒HDN的臨床檢查情況，發(fā)現(xiàn)血清學(xué)檢查效果，通過多項試驗檢測陽性反應(yīng)，可提示新生兒是否患有HDN，以此為后續(xù)醫(yī)生制定行之有效的治療方案提供依據(jù)，有效減輕該疾病給患兒與家長帶來的諸多痛苦與壓力。基于此本研究選取120例疑似母嬰ABO血型不合新生兒HDN患者，進(jìn)行了實驗室血清學(xué)檢測，依據(jù)三項試驗陽性結(jié)果探究了檢測新生兒HDN時血液標(biāo)本采樣的最佳時機與疾病陽性確診的重要標(biāo)準(zhǔn)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取我院在2018年1月—2019年1月接收的新生兒HDN患兒120例作為研究對象來研究，這些患兒均于我院娩出，出生時間不超過10天，經(jīng)過臨床醫(yī)生初步癥狀(黃疸)檢查確定為母嬰ABO血型不合的新生兒HDN疑似患兒，為了進(jìn)一步明確病情，我院對120例疑似新生兒HDN患兒進(jìn)行了實驗室血清試驗檢測；患兒中男多于女，人數(shù)分別為70例、50例。

1.2方法 采集120例患兒抗凝血各2ml，母嬰血型分別通過產(chǎn)婦問病史記錄、微柱凝膠卡檢測獲得，其中患兒直接抗人球蛋白試驗也通過黛安娜新生兒HDN微柱凝膠卡檢測得出，游離試驗、抗體釋放試驗通過酸放散試劑得出檢測結(jié)果。準(zhǔn)備ABO各型血液標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞、抗A或B標(biāo)準(zhǔn)血清、抗人球蛋白卡(戴安娜公司生產(chǎn)，DGGel Coombs卡)、離心機、酸放散試劑(包括放散液A、放散液B和中和液)、生理鹽水、孵育箱(恒溫37℃)等。①直接抗人球蛋白試驗：通過黛安娜新生兒HDN微柱凝膠卡上機檢測可得出。 ②游離抗體試驗：取ABO各型血液標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞各50μl依次加入抗人球蛋白卡片，將患兒血液標(biāo)本離心，取上清液，分別取50μl加入放有ABO各型血液標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞的卡片中，放置孵育箱孵育15 min，離心，觀察結(jié)果。 ③抗體釋放試驗：將患兒血液標(biāo)本用生理鹽水洗滌，次數(shù)為3次，取500μl紅細(xì)胞壓積于試管中，同時加入500μl放散混合液(A400μl+B100μl)，混勻，并離心，取離心后的上清液400μl、放入試管中，于試管中加入中和液3滴，再次離心后取上清液待用，取ABO各型血液標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞各50μl，依次加入抗人球蛋白卡片，依次加入再次離心后的上清液50μl，放孵育箱孵育15分鐘，離心，觀察結(jié)果。

1.3觀察指標(biāo) ①試驗的陽性判斷標(biāo)準(zhǔn),陽性：紅細(xì)胞出現(xiàn)凝聚且位于凝膠柱的中上層，與相應(yīng)的抗體發(fā)生凝集；陰性：紅細(xì)胞出現(xiàn)凝聚且位于柱的底層，未與相應(yīng)的抗體發(fā)生凝集。②與③試驗檢測陽性標(biāo)準(zhǔn)為檢出了能夠與患兒紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)的抗體?；純貉貉褰?jīng)過實驗室溶血三項試驗檢測后，均顯示為陽性，提示患兒患有HDN(陽性)，單一進(jìn)行抗體釋放試驗，結(jié)果呈陽性判斷患兒HDN陽性，其他兩項試驗單一檢測陽性提示患兒疑似HDN陽性，這兩項試驗檢測陽性結(jié)果分別聯(lián)合③試驗檢出陽性結(jié)果與臨床癥狀后可判斷患兒疾病陽性。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS.15軟件統(tǒng)計學(xué)分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料[n(%)]表示、χ2檢驗，P≤0.05為數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

采樣時機：120例疑似新生兒HDN的患兒檢查后，可知103例疑似患兒最終確診，檢出率為85.83%，患兒血液標(biāo)本采集時間設(shè)計為2個時間段，即剛出生至出生2 d、3～6 d，各個時間段標(biāo)本采集例數(shù)各為60例，通過血清三項試驗陽性檢測后，這2個時間段檢出新生兒HDN患兒例數(shù)合計103例，分別為97例(94.17%)、6例(5.83%)，檢出患兒例數(shù)進(jìn)行不同時間段的數(shù)據(jù)比較后P<0.05，有統(tǒng)計學(xué)意義，其中新生兒出生2天內(nèi)采集樣本檢出疾病率高，6 d左右時檢出疾病人數(shù)少，說明新生兒HDN檢出率與疑似患兒出生后血液標(biāo)本采集時間呈正相關(guān)關(guān)系，標(biāo)本采集時間愈早，血清三項試驗檢測后的陽性率愈高；血清檢測結(jié)果：103例ABO血型不合新生兒HDN患兒可分為母O、O、A、B、B與嬰A、B、AB、AB、A的情況，患兒例數(shù)分別有75例、25例、1例、1例、1例，①、②、③項試驗單一檢出陽性患兒例數(shù)分別為37例(35.92%)、62例(60.19%)、101例(98.06%)，其中在①試驗中僅檢出母嬰O-A、O-B血型不合的新生兒HDN病例，②試驗中未檢出B-A血型不合疾病患兒，③試驗中5類ABO血型不合疾病患兒均檢出，以上檢出患兒例數(shù)比較后存在統(tǒng)計學(xué)意義的差異P<0.05；血清陽性檢測結(jié)果(數(shù)據(jù)見表一)：出生后～2 d采集血樣檢測新生兒HDN疾病的陽性率高，隨著時間的增加，陽性率下降， 總體來看②+③試驗檢測陽性率高于其他試驗項單一檢測或組合方式檢出率，如果條件允許盡量選擇三項或兩項試驗聯(lián)合方式檢測陽性率，其中③為判斷患兒患病的主要依據(jù)，為重點測試項目。

表1 患兒新生兒HDN疾病檢測陽性率分析

3 討 論

母嬰ABO血型不合的新生兒HDN疾病的常見類型為ABO血型系統(tǒng)，一般在新生兒早期或者在胎兒階段發(fā)生，患病患兒大多數(shù)情況下與身體健康的新生兒沒有什么區(qū)別，但是娩出后～48 h左右時，會出現(xiàn)黃疸癥狀，之后隨著新生兒日齡的增加，機體皮膚黃染情況會愈加嚴(yán)重，此時患兒會出現(xiàn)貧血、核黃疸等癥狀，甚至死亡，所以新生兒該疾病的早發(fā)現(xiàn)與早治療非常重要，本研究便對新生兒HDN的臨床診斷情況進(jìn)行了詳細(xì)探究，重點分析了血清學(xué)檢驗對于疾病診斷確診的價值[2-3]。血清學(xué)三項檢驗為目前檢查診斷新生兒HDN的有效方法，通過直接抗球蛋白、游離抗體、抗體釋放試驗可以將新生兒的患病情況較為精確的檢查出，而且檢測安全性高，在新生兒的該種免疫疾病確診中可以多進(jìn)行應(yīng)用與推廣[4]。本研究期間選擇的120例疑似新生兒HDN均接受了血清三項試驗檢測，其中在血樣采集方面，分為了2個時間進(jìn)行采樣，結(jié)合研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)血液標(biāo)本采集時間與試驗檢測結(jié)果存在關(guān)聯(lián)，尤其是在新生兒剛娩出時，不超過48 h檢測，可以第一時間檢出疾病，超過該時間采血檢測，雖然也能檢出新生兒的疾病，但是檢出率會逐漸降低，嚴(yán)重影響新生兒疾病的有效治療與康復(fù)，提示新生兒HDN疾病診斷時應(yīng)在出生后盡快進(jìn)行血清學(xué)檢測，以便醫(yī)生可以抓住疾病治療的最佳時機控制疾?。煌瑫r在檢測期間，要注意三項試驗盡量都要檢測，其中抗體釋放試驗的檢測結(jié)果具有較高的疾病確診參考價值，需要醫(yī)生對該陽性結(jié)果進(jìn)行準(zhǔn)確分析，如果為其他兩項試驗單一進(jìn)行，則需要結(jié)合第三項試驗結(jié)果及疑似患兒臨床病癥表現(xiàn)，綜合多方資料數(shù)據(jù)，得出疾病的最終確診結(jié)果，研究期間的部分?jǐn)?shù)據(jù)進(jìn)行比較后，存在著較大差異與統(tǒng)計學(xué)意義P<0.05。

綜上所述，臨床開展母嬰ABO血型不合新生兒HDN疾病檢測期間，需要對血清三項試驗涉及的內(nèi)容加強研究，之后參考新生兒娩出后的情況，及早采集血樣進(jìn)行試驗檢測，促使疾病疑似患兒能夠盡快確診治療，早日康復(fù)出院[5-6]。