寧素云 孫笑宇 杜建紅

山西藥科職業(yè)學(xué)院，山西 太原 030031

清熱解毒類中成藥所占市場份額較大。而在生產(chǎn)的過程中，部分藥物廠家為了提升藥物的臨床治療效果，向制得的中成藥內(nèi)添加化學(xué)成分。由于在添加的過程中并不遵從藥典，向配方內(nèi)添加其他化學(xué)成分，最終患者在進(jìn)行藥物治療的過程中，難免攝入其他化學(xué)藥物成分，對患者的身體帶來不可預(yù)知的危害。雖然隨著HPLC及GC-MS等分析方法的大量應(yīng)用，臨床對于上述成分的分析已趨簡便。但是，應(yīng)用簡便、快捷及有效的方法，對上述的成分進(jìn)行鑒定，不論是在臨床還是生成中，都有著巨大的潛力?；诖?，本研究應(yīng)用薄層法建立了中成藥中，快速鑒定8種化學(xué)成分的方法。經(jīng)過20種(批)中成藥的使用，獲得較好的效果，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1儀器 快速混勻器(XK96-B，上海壘固)、離心機(jī)(80-1，鄭州亞榮)；暗箱式三用紫外分析儀(WFH-203B，上海馳唐)、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(101-A1，上海捷呈)、電子精密天平(BJ1200C，瑞士Precisa)、數(shù)控超聲波清洗機(jī)(KQ-50DB昆山昆超)；

1.2試藥 硅膠GF254、羧甲基纖維素鈉、甲醇、無水乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮、氨水等試劑，均為分析純，采購自國藥集團(tuán)。清熱中成藥為市售，共計(jì)20種(批)。包含：×顆粒劑、感冒清熱顆粒(3批次/廠家)、抗病毒顆粒、羚羊感冒膠囊(2批次/廠家)、清熱消炎寧膠囊、三黃片、牛黃解毒片(2批次/廠家)、黃連上清丸、羚翹解毒丸、清咽片(2批次/廠家)、清熱解毒口服液、銀黃口服液、穿心蓮片、板藍(lán)根顆粒(2批次/廠家)。選定8種常見的化學(xué)藥作為檢驗(yàn)對象，分別為乙酰氨基酚、磺胺甲噁唑、甲氧芐啶、氨基比林、頭孢氨芐、芬布芬、雙氯芬酸鈉和布洛芬，上述化學(xué)藥物成分標(biāo)準(zhǔn)品購自中國食品藥品檢定研究院。

1.3試樣制備

1.3.1對照品溶液的制備 根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道的情況[2]，本研究將標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用甲醇溶解，對精密稱取的8種對照品進(jìn)行稀釋，并制備成兩種對照品溶液體系。具體如表1所示。

表1 8種化學(xué)藥物成分對照品構(gòu)成情況(mg/ml)

1.3.2供試品溶液的制備 將收集的藥物膠囊劑及片劑分別進(jìn)行研磨處理(膠囊劑帶殼研，片劑帶糖衣研)，溶液直接使用；依據(jù)藥品說明書稱取單次使用的劑量，將上述的藥物分別置于100 ml小燒杯中。①系列1中，加甲醇少量，攪拌均勻，超聲10min。將獲得的甲醇溶液定容至25 ml量瓶中，離心10 min(4000轉(zhuǎn)/min)，取上清液，備用；②系列2中，則直接向小燒杯中準(zhǔn)確加入20 ml甲醇，攪拌均勻，超聲10min，濾過，取濾液蒸干溶劑，殘?jiān)? ml甲醇，渦旋混合，備用。

1.4薄層板的制備 硅膠GF254和0.4%CMC-Na按1∶3的比例制成面積為10 cm×20 cm薄層板。待薄層板晾干之后放入110 ℃烘箱活化30 min備用。

1.5鑒別方法

全部兩個(gè)系列方法均依據(jù)(《中國藥典》2015年版(四部)0502[1])進(jìn)行。 將5μl標(biāo)準(zhǔn)品及供試品分別點(diǎn)于同一薄層板上，每板8個(gè)點(diǎn)。其中，4個(gè)點(diǎn)為標(biāo)準(zhǔn)品，4個(gè)點(diǎn)為供試品。重復(fù)制備2個(gè)系列共計(jì)10塊待測薄層板。其中，系列1以乙酸乙酯-無水乙醇-氨水(15:1.5:0.2)為展開劑，系列2以正丁醇-丙酮-無水乙醇-氨水(8∶3∶1∶1.5)為展開劑。兩塊板分別展開后，晾干，在254nm紫外燈下檢視各組成分的斑點(diǎn)情況。

2 結(jié) 果

2.1供試樣品的薄層色譜

應(yīng)用薄層色譜分別檢測了上述20批次藥物。具體結(jié)果如圖1(系列1)及圖2(系列2)所示。

圖1 對乙酰氨基酚、磺胺甲噁唑、甲氧芐啶、氨基比林的薄層色譜圖注：1.對乙酰氨基酚；2. 磺胺甲噁唑；3. 甲氧芐啶；4. 氨基比林；5～8供試品

圖2 頭孢氨芐、芬布芬、雙氯芬酸鈉、布洛芬的薄層色譜圖注：1. 頭孢氨芐；2. 芬布芬；3. 雙氯芬酸鈉；4. 布洛芬；5～8供試品

2.2不同批次中成藥的化學(xué)成分添加情況

根據(jù)結(jié)果可知，×顆粒劑中出現(xiàn)了與對乙酰氨基酚Rf值相同的斑點(diǎn)(見圖1)，結(jié)果提示，該藥物內(nèi)未嚴(yán)格按照藥典標(biāo)準(zhǔn)，向其中添加了對乙酰氨基酚。而在其他19種(批)中成藥內(nèi)，則無上述8種化學(xué)藥物成分檢出。

3 討 論

根據(jù)日常的檢測經(jīng)驗(yàn)可知，中成藥內(nèi)化學(xué)藥物成分添加量過小時(shí)，經(jīng)過薄層色譜無法有效檢出。如前文所述，由于不同的化學(xué)藥成分的常用添加劑量不同[2]，以相同濃度設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，則會大幅降低檢測結(jié)果的敏感度，因此，需要依據(jù)不同藥物常見添加情況，設(shè)定檢測范圍。為了滿足需要，本研究則設(shè)計(jì)了一次劑量中成藥添加十分之一劑量化學(xué)藥品的檢測方法。

在實(shí)際操作中，由于雙氯芬酸鈉和布洛芬的實(shí)際添加濃度往往較小，因此，需要在檢測完其他6種成分后，再仔細(xì)檢查上述兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品Rf值位置上的斑點(diǎn)情況。必要時(shí)可用電吹風(fēng)吹干或在105 ℃烘箱中快速烘干，否則會使上述兩個(gè)斑點(diǎn)顯示不清。而根據(jù)本研究的經(jīng)驗(yàn)可知，在系列1及系列2的色譜條件下展開，與對照品比較，在圖1相同的Rf值的位置上，顯示清晰的斑點(diǎn)。表明該方法可以靈敏地檢出中成藥中摻入的上述化學(xué)藥品，而中成藥中的其它成分則不會影響待測成分的分離。本研究的結(jié)果顯示，應(yīng)用薄層色譜法可快速的分析出清熱解毒中成藥內(nèi)其他化學(xué)成分的添加，且不受藥物本身有效成分的干擾，可廣泛的應(yīng)用于中成藥實(shí)際生產(chǎn)中的分析與品控。