李崢，楊佳雯，陳冶秋，史小杰，吳天真，陳峰，陳鵬

（1.南京醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院法醫(yī)學(xué)系，江蘇 南京 211166；2.南京市公安局法醫(yī)中心，江蘇 南京 210012）

1 案 例

1.1 簡(jiǎn)要案情

某年6月25日上午，某街道一河道中發(fā)現(xiàn)一具未知名女童尸體。該女童衣著完整，身上背一雙肩包，主袋拉鏈閉合，內(nèi)裝有兩塊水泥磚。現(xiàn)場(chǎng)未見(jiàn)明顯打斗痕跡。

1.2 尸體檢驗(yàn)

尸表檢查：尸長(zhǎng)131cm，體表未見(jiàn)明顯損傷。

尸體解剖：水性肺氣腫，肺膜下見(jiàn)點(diǎn)狀出血，支氣管腔內(nèi)見(jiàn)泥沙，余未見(jiàn)明顯異常，可排除因機(jī)械性損傷死亡。

毒（藥）物檢驗(yàn)：提取心血、胃內(nèi)容物、部分肝組織進(jìn)行理化檢驗(yàn)，未檢出常見(jiàn)毒（藥）物成分，可排除因常見(jiàn)毒（藥）物中毒死亡。

1.3 硅藻檢驗(yàn)

提取死者肺組織2g，肝和腎組織各10g，進(jìn)行硅藻檢驗(yàn)。對(duì)發(fā)現(xiàn)死者的河道分段采取水樣，每個(gè)采樣點(diǎn)取水樣4mL進(jìn)行硅藻檢驗(yàn)。比較死者肺組織與各采樣點(diǎn)水樣中硅藻種屬的差異。

1.3.1 采樣點(diǎn)的選擇

本案在選取采樣點(diǎn)時(shí)，結(jié)合當(dāng)時(shí)河道的水流速度，確定尸體的漂流范圍約為上游距現(xiàn)場(chǎng)10 km處?？紤]若采樣點(diǎn)相隔太近，硅藻的種類分布可能沒(méi)有明顯差別，故采樣點(diǎn)間隔設(shè)置為5km。同時(shí)，由于上游距現(xiàn)場(chǎng)4 km處有另一條河流匯入，此處的水文環(huán)境可能存在較大差異，故該河流交匯處也作為采樣點(diǎn)。最后，對(duì)下游距現(xiàn)場(chǎng)4km處也采集水樣，原因?yàn)椋海?）尸體可能被船舶拖帶發(fā)生逆流；（2）作為陰性對(duì)照，在不發(fā)生逆流的情況下，下游水樣的硅藻種屬構(gòu)成應(yīng)與尸體內(nèi)部不同，但若下游水樣與現(xiàn)場(chǎng)水樣的硅藻種屬構(gòu)成無(wú)明顯差異，則無(wú)法排除現(xiàn)場(chǎng)下游落水的可能。因此，選取現(xiàn)場(chǎng)、上游距現(xiàn)場(chǎng)10km處、上游距現(xiàn)場(chǎng)5km處、上游河流交匯處、下游距現(xiàn)場(chǎng)4km處5個(gè)位置采集水樣進(jìn)行硅藻檢驗(yàn)，用于落水地點(diǎn)的推測(cè)。

1.3.2 器官組織的硅藻檢驗(yàn)

采用微波消解法消解器官組織。消解完成后，將純水與消解液按5∶1的體積比混合加至消解罐，稀釋消解液。將稀釋后的消解液合并倒入尼龍膜濾杯中抽濾；加50mL純水繼續(xù)抽濾，使濾膜表面接近中性；再加10 mL無(wú)水乙醇繼續(xù)抽濾，去除濾膜內(nèi)水分；取出濾膜，烘干。用Phenom XL臺(tái)式掃描電子顯微鏡（荷蘭飛納公司）對(duì)濾膜進(jìn)行觀察，參照硅藻圖譜等相關(guān)資料，記錄檢出硅藻的種類及每種硅藻的數(shù)量用于后續(xù)比對(duì)分析。

1.3.3 水樣的硅藻檢驗(yàn)

取水樣10mL加入消解罐中，其余操作同器官組織的硅藻檢驗(yàn)。涂片抽濾富集后，在電鏡下掃描并記錄結(jié)果。

1.3.4 結(jié)果比對(duì)

實(shí)驗(yàn)完成后，計(jì)算肺組織中優(yōu)勢(shì)硅藻群落與5處水樣中硅藻群落的Sprensen相似系數(shù)[1]和平方弦距離（squared-chord distance，SCD）[2]，分析肺組織與周邊水體中硅藻種屬構(gòu)成的相似性。

1.4 硅藻檢驗(yàn)結(jié)果及溺亡位置推斷

死者肺、肝、腎組織中均檢出硅藻（圖1），結(jié)合尸體檢驗(yàn)所見(jiàn)，分析認(rèn)為該女童符合溺死，且肺組織中檢出的硅藻形態(tài)、種類與現(xiàn)場(chǎng)水樣中硅藻相同。

根據(jù)每種硅藻在所有檢出硅藻中的數(shù)量占比，得到肺組織及5處水樣的硅藻種屬構(gòu)成（表1）。分別計(jì)算5處水樣和肺組織中硅藻種屬構(gòu)成之間的Sprensen相似系數(shù)和SCD，結(jié)果見(jiàn)表2，發(fā)現(xiàn)尸體現(xiàn)場(chǎng)的水樣和肺組織中硅藻種屬構(gòu)成的SCD遠(yuǎn)小于其他幾個(gè)采樣點(diǎn)，且Sprensen相似系數(shù)最大，因此推測(cè)該女童的入水位置在該現(xiàn)場(chǎng)附近。

1.5 鑒定意見(jiàn)

綜合分析認(rèn)為，該女童符合溺死，且推斷落水點(diǎn)為發(fā)現(xiàn)尸體現(xiàn)場(chǎng)附近。

圖1 組織及現(xiàn)場(chǎng)水樣的硅藻檢驗(yàn)結(jié)果Fig.1 Diatom test results of tissues and water samples collected at the scene

表1 肺組織與各采樣點(diǎn)的硅藻種屬構(gòu)成Tab.1 The diatom species composition of lung tissue and water samples of different sampling points （%）

表2 肺組織與各采樣點(diǎn)硅藻種屬構(gòu)成間的Sprensen相似系數(shù)及SCDTab.2 The Sprensen coefficient and SCD of diatom species composition between lung tissue and water samples of different sampling points

2 討 論

硅藻是一種廣泛存在于水域中的單細(xì)胞浮游植物，種類多，抗外界環(huán)境干擾能力強(qiáng)，一直以來(lái)，硅藻檢驗(yàn)是業(yè)內(nèi)判斷生前溺水或死后拋尸的重要依據(jù)之一[3]。硅藻對(duì)環(huán)境敏感，其分布具有明顯的區(qū)域性特征，在確定溺死的情況下，通過(guò)分析比較水中尸體組織器官和可疑落水點(diǎn)水樣的硅藻種屬構(gòu)成，可輔助推測(cè)落水溺亡位置[3-10]。在統(tǒng)計(jì)學(xué)中，Sprensen相似系數(shù)是用于比較兩樣本種屬構(gòu)成相似程度的常用指標(biāo)[1]，而SCD則是判斷差異程度敏感的距離測(cè)量指標(biāo)[2]。根據(jù)Sprensen相似系數(shù)和SCD的大小，可推斷兩樣本間的相似程度，即Sprensen值越大或SCD值越小，則兩樣本間相似度越高。

本例根據(jù)死者肺組織與案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)附近5處水樣（現(xiàn)場(chǎng)、上游距現(xiàn)場(chǎng)10 km處、上游距現(xiàn)場(chǎng)5 km處、上游河流交匯處、下游距現(xiàn)場(chǎng)4km處）的硅藻種類及頻率分布計(jì)算Sprensen相似系數(shù)和SCD，發(fā)現(xiàn)尸體現(xiàn)場(chǎng)處水樣的硅藻種屬構(gòu)成與死者肺組織最為接近，因而推測(cè)死者的實(shí)際落水點(diǎn)位于該現(xiàn)場(chǎng)附近。案件偵破后證實(shí)，該女童8歲，是在發(fā)現(xiàn)尸體現(xiàn)場(chǎng)附近被犯罪嫌疑人推入河中溺亡。本案采用微波消解-真空抽濾-電鏡掃描的方法進(jìn)行硅藻形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)，相較于傳統(tǒng)硅藻檢驗(yàn)方法，該法硅藻檢出率更高，能對(duì)硅藻種類和數(shù)量進(jìn)行更為精確的統(tǒng)計(jì)，因此更適合落水點(diǎn)推斷[11-12]。本案提示，對(duì)于類似案例，在硅藻檢驗(yàn)的基礎(chǔ)上，可計(jì)算案發(fā)附近水樣和尸體肺組織硅藻種屬構(gòu)成的相似程度，有助于推測(cè)實(shí)際落水點(diǎn)，尋找第一案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)。