常麗梅，朱明，張輝，陳瀛

(1.海南省藥品審核認(rèn)證管理中心，海南 ?？?570216； 2.先聲藥業(yè)(海南)有限公司，海南 ?？?570216)

苯磺酸氨氯地平是臨床常用的二氫吡啶類(lèi)鈣通道阻滯劑，有左旋和右旋2種對(duì)映異構(gòu)體。苯磺酸左氨氯地平是經(jīng)拆分得到的新一代鈣通道阻滯藥，臨床上廣泛用于高血壓、心絞痛的治療，由于去除了苯磺酸氨氯地平的右旋體，從而大大降低了不良反應(yīng)，并因作用穩(wěn)定、持久，已廣泛應(yīng)用于臨床，成為最常用的降壓藥物之一[1-2]。苯磺酸左氨氯地平為苯磺酸氨氯地平的左旋異構(gòu)體，除比旋度不同之外，其他理化性質(zhì)和制劑相關(guān)特性與苯磺酸氨氯地平基本保持一致。右旋氨氯地平在臨床使用中基本無(wú)療效，因此，等量的左旋氨氯地平的療效是氨氯地平本身的2倍[3]。

苯磺酸氨氯地平片原研廠家為美國(guó)輝瑞制藥公司，商品名為Norvasc，中文名為絡(luò)活喜，而左旋氨氯地平制劑目前在國(guó)外尚無(wú)批準(zhǔn)上市信息。苯磺酸左氨氯地平是國(guó)內(nèi)首例通過(guò)手性拆分的光學(xué)純藥物，經(jīng)查詢(xún)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局?jǐn)?shù)據(jù)，苯磺酸左氨氯地平片國(guó)內(nèi)獲批15個(gè)文號(hào)，施慧達(dá)藥業(yè)集團(tuán)(吉林)有限公司研制的苯磺酸左氨氯地平片(2.5 mg)于1999年首家上市。目前國(guó)內(nèi)外藥典均未收錄該品種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，其消旋體苯磺酸氨氯地平及制劑則已收載于2015年版《中國(guó)藥典》。

由于藥物的溶出對(duì)吸收有重要影響，因此藥物體外溶出度試驗(yàn)可能會(huì)與體內(nèi)行為具有一定關(guān)聯(lián)性。在多種pH溶出介質(zhì)中溶出曲線的測(cè)定是現(xiàn)行國(guó)家藥物審評(píng)機(jī)構(gòu)評(píng)價(jià)口服固體制劑內(nèi)在質(zhì)量的一種重要手段。本文選擇已上市2個(gè)廠家的苯磺酸左氨氯地平片(規(guī)格：2.5 mg)，參考苯磺酸左氨氯地平國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)[4]，采用2015年版《中國(guó)藥典》四部通則0931第二法進(jìn)行溶出度測(cè)定，同時(shí)參照該方法進(jìn)行溶出曲線考察，并與原研藥品(絡(luò)活喜，規(guī)格：5 mg)的溶出曲線比較，進(jìn)行體外溶出度研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 1260 高效液相色譜儀(美國(guó) Agilent公司)；BS2010S型電子天平(賽多利斯)；BT25S型電子天平(賽多利斯)；ZRS-12G型智能溶出度儀(天津天大天發(fā)科技有限公司)。

1.2 試劑與試藥

Na2HPO4、KH2PO4、HCl、NaOH、醋酸鈉、冰醋酸(分析純)、純化水(自制)；苯磺酸左氨氯地平對(duì)照品(中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：100546-201504；質(zhì)量分?jǐn)?shù)：93.4%)；苯磺酸左氨氯地平片樣品信息見(jiàn)表1。

表1 苯磺酸左氨氯地平片樣品信息Table 1 The information of Levamlodipine besylate tablets

2 方法與結(jié)果

2.1 溶出介質(zhì)

參照《普通口服固體制劑溶出度試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》[5]對(duì)溶出介質(zhì)的要求，選擇pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液和水為溶出介質(zhì)，考察不同廠家藥品的溶出曲線。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取苯磺酸左氨氯地平對(duì)照品適量，加甲醇適量使溶解后，用溶出介質(zhì)稀釋制成每1 mL中約含苯磺酸左氨氯地平5 μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取上述試驗(yàn)用樣品，每批樣品12片，加入溶出介質(zhì)進(jìn)行試驗(yàn)，分別在10、15、30、45、60、90、120、180 min取溶出液，用0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液檢測(cè)。

2.4 色譜條件

色譜柱：Waters Novapak C18柱(3.9 mm×4.9 mm)；流動(dòng)相：甲醇-乙腈-0.7%三乙胺溶液(磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0，體積比35∶15∶50)；檢測(cè)波長(zhǎng)：237 nm；流速：1.0 mL/min。

2.5 溶出度測(cè)定

取樣品，照2015年版《中國(guó)藥典》四部通則0931第二法的溶出度與釋放度測(cè)定法，采用槳法，分別以4種溶劑(pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液、水)500 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為75 r/min，在(37±0.5)℃下，分別于10、15、30、45、60、90、120、180 min取溶出液適量，取續(xù)濾液，照2015年版《中國(guó)藥典》四部通則0512“高效液相色譜法”測(cè)定含量，計(jì)算每片的溶出量，樣品在4種溶出介質(zhì)中的體外溶出度測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖1。

1201008060402002040600溶出度/%1201008060402002040600溶出度/%100806040200溶出度/%100806040200溶出度/%501001502000501001502000t/minCBA1A2A3pH6.8磷酸鹽緩沖液pH1.2鹽酸溶液pH4.5醋酸鹽緩沖液水

圖1不同廠家苯磺酸左氨氯地平在4種溶出介質(zhì)的溶出曲線

Figure1The dissolution curves of Levamlodipine besylate tablets in four different dissolution media

依據(jù)《國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)》，苯磺酸左氨氯地平片的溶出度限度(Q)為80%，參考《普通口服固體制劑溶出度試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》：相似因子 f2值高于50，可認(rèn)為2條曲線具有相似性，即溶出行為一致。本文采用f2評(píng)價(jià)國(guó)內(nèi)上市苯磺酸左氨氯地平片與原研藥品絡(luò)活喜在pH6.8磷酸鹽緩沖液和水中體外溶出的一致性，結(jié)果見(jiàn)表2。

以上結(jié)果可見(jiàn)，國(guó)內(nèi)上市品與原研藥品在pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液中，15 min的溶出量均達(dá)到85%以上，表明國(guó)內(nèi)2家企業(yè)藥品在以上2種溶出介質(zhì)中的溶出行為與原研藥品絡(luò)活喜相似；而在pH6.8磷酸鹽緩沖液和水2種溶出介質(zhì)中的溶出行為卻與原研藥品絡(luò)活喜不一致。

表2 不同廠家苯磺酸左氨氯地平在pH 6.8磷酸鹽緩沖液及水中的f2值

Table2The f2similarity factor of Levamlodipine besylate tablets in pH 6.8 phosphate buffer solution and water

樣品編號(hào)pH 6.8磷酸鹽緩沖液水C和A132.433.6C和A232.333.5C和A332.533.6C 和B31.734.5B和A185.986.6B和A285.086.7B和A384.086.3

2.6 飽和溶解度的測(cè)定

從表3苯磺酸氨氯地平與苯磺酸左氨氯地平在不同溶出介質(zhì)(37 ℃)中的飽和溶解度對(duì)比結(jié)果可知，苯磺酸左氨氯地平在各介質(zhì)中溶解度較苯磺酸氨氯地平高，且兩者在pH 6.8磷酸鹽緩沖液中的溶解度較pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液和水中偏低。

表3 苯磺酸氨氯地平與苯磺酸左氨氯地平在不同溶出介質(zhì)中的飽和溶解度

Table3Saturated solubility of amlodipine besylate and L-amlodipine besylate in different dissolution mediaρ/(mg·mL-1)

溶出介質(zhì)苯磺酸氨氯地平苯磺酸左氨氯地平pH 1.2鹽酸溶液3.34.4pH 4.5醋酸鹽緩沖液3.39.7pH 6.8磷酸鹽緩沖液1.02.1水3.53.9

3 討論

溶出曲線可以直觀反映藥物的體外釋放速度和程度，體外溶出度對(duì)比研究有利于指導(dǎo)仿制藥一致性評(píng)價(jià)過(guò)程中建立更科學(xué)的溶出試驗(yàn)條件，對(duì)藥品生產(chǎn)處方工藝的差異及內(nèi)在質(zhì)量評(píng)價(jià)研究具有一定的參考意義。

國(guó)內(nèi)上市的苯磺酸左氨氯地平片和原研藥品絡(luò)活喜在處方輔料組成及制備工藝上都有所區(qū)別，原研藥品絡(luò)活喜輔料為微晶纖維素、無(wú)水磷酸氫鈣、羥甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂，采用粉末直接壓片制得[6]；而國(guó)內(nèi)上市苯磺酸左氨氯地平片的輔料組成主要為微晶纖維素、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂等，其工藝為將稀釋劑和崩解劑加入黏合劑后，采用濕法混合制粒、干燥、整粒、外加輔料、混合、壓片。

本文選擇采用pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽溶液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液、水作為溶出介質(zhì)，對(duì)國(guó)內(nèi)不同廠家苯磺酸左氨氯地平片與原研藥品溶出度進(jìn)行對(duì)比研究，結(jié)果顯示：苯磺酸左氨氯地平片在pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽溶液中的溶出速度高于在水和pH 6.8磷酸鹽緩沖液中的溶出速度，這與苯磺酸左氨氯地平在4種溶出介質(zhì)中的飽和溶解度有一定相關(guān)性，如表3所示，苯磺酸左氨氯地平在以上介質(zhì)中的溶解度大小為pH 4.5醋酸鹽溶液>pH 1.2鹽酸溶液>水>pH 6.8磷酸鹽緩沖液，原因是苯磺酸左氨氯地平的pKa為8.85，相對(duì)偏堿性，其在偏酸性溶液中溶解度較大，溶出速率較快。

藥物的溶出速率可以用Noyes-Whitney方程解釋?zhuān)幬锏娜艹雒娣e、溶解速度常數(shù)以及藥物本身的溶解度都對(duì)溶出度有影響，這些因素跟原料藥的晶形、顆粒大小等都相關(guān)。溶解度在一定程度上可以反映溶出度的情況，但對(duì)于溶解度都較大的溶出介質(zhì)，藥物制劑的溶出速率都較快，這些介質(zhì)并不能區(qū)分出藥物因制劑的輔料或處方工藝的不同所帶來(lái)的差異。如苯磺酸氨氯地平和苯磺酸左氨氯地平在酸性介質(zhì)中溶解度較大，溶出速率較快，所以國(guó)內(nèi)上市苯磺酸左氨氯地平片在2種酸性介質(zhì)中顯示與原研藥品絡(luò)活喜體外溶出行為一致，而pH 6.8磷酸鹽緩沖液這種溶出速率較慢的介質(zhì)則可以很好的區(qū)分2種制劑處方工藝的差異。

苯磺酸左氨氯地平片由于不同企業(yè)處方工藝不同，其產(chǎn)品的溶出行為會(huì)有一定差距。采用多條溶出曲線來(lái)指導(dǎo)制劑處方工藝開(kāi)發(fā)是很有必要的，特別是選擇具有區(qū)分性的溶出介質(zhì)，乃至區(qū)分性的溶出條件，只有在區(qū)分性介質(zhì)中的溶出曲線相似，才能說(shuō)明體外溶出的一致性。在實(shí)際處方開(kāi)發(fā)中，要結(jié)合原料藥及制劑的具體情況，采用適宜的溶出方法評(píng)價(jià)，掌握適度評(píng)價(jià)原則，才能有效發(fā)揮體外溶出評(píng)價(jià)在藥物生物等效性試驗(yàn)中的指導(dǎo)作用。