茆春國 鄧波

癌癥是人類健康的一大威脅，其發(fā)病率和死亡率在全球范圍內(nèi)迅速增長，2018年全世界新增1,810萬新發(fā)病例和960萬癌癥死亡病例，而肺癌的發(fā)病率及死亡率居各種癌癥之首[1]。肺癌作為第一大癌癥殺手，發(fā)病隱匿、診斷不及時(shí)、易轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)。1869年澳大利亞醫(yī)師Ashworth首次提出循環(huán)腫瘤細(xì)胞（circulating tumor cell, CTC）的概念，即：CTC是指原發(fā)腫瘤或轉(zhuǎn)移灶脫落后釋放入外周血中隨血液循環(huán)的腫瘤細(xì)胞。隨著檢測手段和技術(shù)方法的不斷進(jìn)步，CTC檢測與研究逐漸成為當(dāng)前腫瘤研究的熱點(diǎn)和焦點(diǎn)。理論上，外周血中CTC的出現(xiàn)是腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的前提，是形成轉(zhuǎn)移灶的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[2]。因此，CTC檢測對肺癌的早期診斷、臨床分期、治療及預(yù)后評估具有重要的臨床意義[2]。肺癌CTC如何脫落產(chǎn)生、進(jìn)入循環(huán)、發(fā)生免疫逃避及避免凋亡，并在新的微環(huán)境下成瘤？本文擬對上述焦點(diǎn)問題進(jìn)行綜述。

1 CTC的產(chǎn)生機(jī)制

1.1 CTC從腫瘤組織中脫落的機(jī)制 CTC從腫瘤組織中脫落與腫瘤上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）有關(guān)[3]。腫瘤細(xì)胞在EMT過程中，下調(diào)表達(dá)上皮標(biāo)志物（如上皮細(xì)胞黏附分子、細(xì)胞角蛋白和E-鈣黏蛋白），上調(diào)表達(dá)間質(zhì)標(biāo)志物（如波形蛋白、N-鈣黏蛋白等），從而獲得某些干細(xì)胞特征并增強(qiáng)自身侵襲力[4]。所以，肺癌患者血液中不僅存在上皮細(xì)胞表型的CTC，還存在間質(zhì)細(xì)胞表型及上皮間質(zhì)混合表型的CTC[5]。此外，EMT還與腫瘤微環(huán)境有關(guān)，EMT后基質(zhì)金屬蛋白酶在細(xì)胞外基質(zhì)中表達(dá)上調(diào)可引起基質(zhì)降解，從而使腫瘤細(xì)胞易于從腫瘤組織中脫落下來，形成CTC，導(dǎo)致腫瘤的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)[6]。

1.2 CTC進(jìn)入外周毛細(xì)血管（破壁）機(jī)制 CTC進(jìn)入外周毛細(xì)血管的機(jī)制復(fù)雜，腫瘤自身分泌細(xì)胞因子在調(diào)控其血管內(nèi)滲特別是形成侵襲性偽足方面發(fā)揮重要作用。例如Wiskott-Aldrich綜合征蛋白家族WAS-like蛋白對肌動蛋白細(xì)胞骨架重塑的調(diào)節(jié)有助于腫瘤細(xì)胞的血管內(nèi)滲[7]。腫瘤微環(huán)境及腫瘤血管生成亦有助于CTC的產(chǎn)生。腫瘤細(xì)胞可誘導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)成分的改變從而幫助其向血管滲入[8]。轉(zhuǎn)化生長因子β（transforming growth factor-beta, TGF-β）可通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞EMT使腫瘤細(xì)胞滲入血管內(nèi)，而阻斷TGF-β可抑制腫瘤細(xì)胞的存活、遷移和轉(zhuǎn)移。另外，TGF-β還可激活激酶TAK1，調(diào)控血管內(nèi)皮細(xì)胞壞死凋亡，從而幫助腫瘤細(xì)胞進(jìn)入血管[9]。

1.3 CTC在外周血中避免失巢凋亡、避免免疫殺傷的機(jī)制當(dāng)腫瘤細(xì)胞進(jìn)入外周血液中后，其受到機(jī)體免疫細(xì)胞的攻擊、血液流體剪切力的影響以及失去細(xì)胞外基質(zhì)的營養(yǎng)和黏附作用，最終導(dǎo)致CTC大量凋亡。鑒于CTC抗失巢凋亡能力較弱，因此CTC“抱團(tuán)”形成CTC簇，有助于幫助其逃避失巢凋亡，研究[10]證實(shí)，CTC簇的形成及集體遷移還可提高腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。在抗腫瘤免疫應(yīng)答中，細(xì)胞程序性死亡配體1（programmed cell death 1 ligand 1, PD-L1）在腫瘤細(xì)胞的表達(dá)使得T淋巴細(xì)胞不能有效殺傷CTC而發(fā)生免疫逃逸[11]；腫瘤細(xì)胞表達(dá)PD-L1，低表達(dá)或不表達(dá)CD80和CD86這類活化T淋巴細(xì)胞的共刺激分子，使其不能為T細(xì)胞的活化提供第二信號，腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生免疫耐受。此外，腫瘤患者血液中不同細(xì)胞成分在促進(jìn)CTC的免疫逃逸方面也起重要作用。血小板與腫瘤細(xì)胞之間的相互作用在腫瘤細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視上發(fā)揮著重要的作用，血小板附著于CTC表面，以致腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞不能有效殺滅CTC[12]。腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞與髓源性抑制細(xì)胞也具有免疫抑制作用，是免疫治療的主要障礙[13]。因此，深入研究CTC有助于促進(jìn)腫瘤免疫治療的深入變革，引領(lǐng)腫瘤治療的新策略。

1.4 CTC促進(jìn)腫瘤新生血管生成的機(jī)制 腫瘤新生血管生成是CTC生長和轉(zhuǎn)移形成的必要條件[11]。其中，血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）是腫瘤血管生成的最重要的刺激因子。有研究[14]顯示VEGF與CTC均升高的患者其生存期明顯縮短。而血管生成素（angiopoietin）在促進(jìn)腫瘤血管生成上也發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用，血管生成素2與VEGF結(jié)合，可促進(jìn)新血管形成[15]。此外，基質(zhì)金屬蛋白酶高表達(dá)可調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)從而促進(jìn)腫瘤新生血管生成[16]。進(jìn)一步的研究[17]證實(shí)，CTC還可發(fā)生腫瘤原位播種，通過電子數(shù)字成像技術(shù)對動物模型的染色血管成像顯示，侵襲性的CTC能促進(jìn)腫瘤血管的生成，腫瘤血管的平均長度及分支增加。

2 CTC的捕獲方法

目前，CTC的捕獲方法主要分為兩類：基于CTC本身的物理特性，即CTC的大小、密度、比重、電荷、離心力等，例如，經(jīng)典的濾過膜法、蛋白電泳、密度梯度法和微流芯片法；基于CTC免疫學(xué)特性，即腫瘤細(xì)胞表面的特異性抗原表達(dá)（陽性富集）或正常血細(xì)胞標(biāo)志物（陰性富集）。

2.1 基于物理特性的捕獲方法

2.1.1 膜過濾法 利用CTC與正常血細(xì)胞的體積差異（CTC較正常血細(xì)胞體積大），通過濾過膜將CTC與血細(xì)胞分離。優(yōu)點(diǎn)：不依賴CTC的分子標(biāo)志物，可分離不同表型的CTC并進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)、免疫細(xì)胞學(xué)及遺傳學(xué)檢測；缺點(diǎn)：體積小的腫瘤細(xì)胞可能被過濾而逃脫分離。但有研究[17]使用此法進(jìn)行CTC捕獲，證實(shí)91%的乳腺癌CTC可被捕獲，分離效率令人滿意。

2.1.2 電泳法 電泳法是利用細(xì)胞極性的一種捕獲方法。利用腫瘤細(xì)胞的固有特性，無需標(biāo)記腫瘤細(xì)胞，且此方法還可提供未經(jīng)修飾的、活腫瘤細(xì)胞用于培養(yǎng)以及后續(xù)分析。有研究[18]將雙向蛋白電泳與阻抗測量相結(jié)合的技術(shù)對CTC進(jìn)行捕獲與檢測，這種簡單、快速、無標(biāo)簽、低成本的方法可能為開發(fā)未來應(yīng)用的細(xì)胞診斷系統(tǒng)提供新方法。

2.1.3 密度梯度離心法 根據(jù)腫瘤細(xì)胞與血細(xì)胞的不同密度的物理特性，通過密度梯度離心進(jìn)行細(xì)胞的分離，從而富集出所需CTC。一項(xiàng)研究[19]顯示，此方法可在每毫升血液中檢出6個(gè)-10個(gè)CTC。另外，有研究[20]將離心微流裝置與新型的流體輔助技術(shù)相結(jié)合用于CTC的檢測，其敏感性與特異性分別高達(dá)85.3%、90.3%。

2.2 基于免疫學(xué)特性的捕獲方法 利用CTC分子抗原與免疫磁珠抗體結(jié)合再進(jìn)行磁性分離。該法優(yōu)點(diǎn)：特異性、選擇性、靈敏性高，不影響細(xì)胞活性等；缺點(diǎn)：利用單一免疫方法容易出現(xiàn)漏檢，不能獲得全部CTC信息。隨著科技進(jìn)步，新的技術(shù)正逐步被開發(fā)利用。例如，將抗上皮細(xì)胞黏附分子抗體修飾在磁性納米簇上直接對CTC進(jìn)行分選就是一種高效能陽性捕獲方法，此方法不僅對CTC的結(jié)合表現(xiàn)出良好的親和性，而且還能有效地富集CTC[21]。此外，亦有依靠上皮其他分子標(biāo)志物如細(xì)胞角蛋白或波形蛋白的捕獲方法[22]。

3 CTC的鑒別方法

由于CTC在外周血循環(huán)中的數(shù)量極少，我們在捕獲這些細(xì)胞的同時(shí)，更要對這些細(xì)胞進(jìn)行鑒別分選，證實(shí)確為CTC，然后才能進(jìn)一步對其研究分析。

公式（2）中σ0表示截距，σ1表示虛擬變量系數(shù)，σ2表示穩(wěn)健性對“好消息”的反應(yīng)速度，γ3表示內(nèi)部控制評價(jià)主體的系數(shù)，σ4表示穩(wěn)健性對“壞消息”的反應(yīng)速度，σ7表示σ4與γ2的差值，DRt表示虛擬變量，Rt表示公司在t會計(jì)年度的股票回報(bào)率，ε表示隨機(jī)擾動項(xiàng)。

3.1 CTC的分子標(biāo)志物

3.1.1 上皮細(xì)胞分子標(biāo)志物 如上皮細(xì)胞黏附分子（epithelial cell adhesion molecule, Ep-CAM）等較早應(yīng)用于CTC鑒定。例如，Cell Search?、MACS、CTC芯片等方法均通過富集表達(dá)Ep-CAM的細(xì)胞，來捕獲CTC[23]。但往往需要結(jié)合間質(zhì)型標(biāo)志物或其他分子標(biāo)志物。

3.1.1.1 Ep-CAM Ep-CAM是一種跨膜糖蛋白，在上皮來源的腫瘤中普遍表達(dá)，與細(xì)胞黏附、遷移、增殖以及腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。但僅依靠單一上皮細(xì)胞分子標(biāo)志物對CTC進(jìn)行鑒定不全面。EMT過程會導(dǎo)致CTC出現(xiàn)不同表型的亞群：即上皮細(xì)胞型、間質(zhì)型以及兩者兼有的混合型。基于Ep-CAM研發(fā)的CellSearch檢測系統(tǒng)對CTC的檢測靈敏性僅為32%-70%。因此，需對CTC的分子標(biāo)志物特征進(jìn)行多方面的研究，以便得到更精確的結(jié)論。

3.1.1.2 細(xì)胞角蛋白（cytokeratin, CK） CK主要分布于上皮細(xì)胞，是主要的細(xì)胞骨架蛋白，具有維持上皮組織的完整性及連續(xù)性等重要功能，并與上皮細(xì)胞的增殖分化密切有關(guān)?，F(xiàn)已成為常用的腫瘤免疫組織化學(xué)標(biāo)記物，并用于癌癥的診斷、治療及預(yù)后評價(jià)[24]。一項(xiàng)基于66例小細(xì)胞肺癌患者的研究[25]采用抗CK、抗CD45以及抗波形蛋白的抗體相結(jié)合的方法對CTC進(jìn)行富集分選，發(fā)現(xiàn)CTCs在小細(xì)胞肺癌患者中具有重要的表型異質(zhì)性。另有研究[26]證實(shí)，在162個(gè)乳腺癌轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)樣本中155例可表達(dá)CK，推斷可依據(jù)CK分析治療前后前哨淋巴結(jié)的腫瘤浸潤情況。

3.1.1.3 E-鈣黏蛋白（E-cadherin） E-cadherin是鈣黏蛋白家族中的一類成員，主要在上皮組織中表達(dá)。E-cadherin缺失與EMT發(fā)生及癌癥的發(fā)生與轉(zhuǎn)移有關(guān)。E-cadherin可幫助癌細(xì)胞穿過細(xì)胞基底膜侵入周圍組織。E-cadherin亦可作為CTC輔助分子標(biāo)志物。有研究[27]表明，EMT過程導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞丟失E-cadherin，這也是一線化療耐藥的重要原因。而且，亦有研究[28]將E-cadherin與Ep-CAM、CK等聯(lián)合作為CTC的分子標(biāo)志物。

3.1.2 間質(zhì)細(xì)胞分子標(biāo)志物 相比僅有上皮表型的CTC，具有間質(zhì)表型的CTC由于發(fā)生過EMT，具有更高的侵襲轉(zhuǎn)移能力。因此，同時(shí)利用上皮及間質(zhì)細(xì)胞分子標(biāo)志物對CTC進(jìn)行分類及鑒定有助于分辨出高侵襲性CTC亞群[22]。

3.1.2.1 波形蛋白（Vimentin） Vimentin為中間絲蛋白，主要在間充質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)，具有維持細(xì)胞完整性的重要作用。在惡性腫瘤患者化療效果評價(jià)中，Vimentin與Ep-CAM可作為上皮型與間質(zhì)型CTC的分類依據(jù)[29]，研究[30]證實(shí)，使用CellSearch技術(shù)聯(lián)合檢測細(xì)胞表面Vimentin陽性CTC有助于評估化療反應(yīng)并為乳腺癌患者的個(gè)體化治療提供新思路。監(jiān)測Vimentin陽性CTC可應(yīng)用于腫瘤患者的復(fù)發(fā)預(yù)警與生存評估。在胰腺癌復(fù)發(fā)患者中，Vimentin陽性和細(xì)胞角蛋白表達(dá)CTCs的患者比沒有CTCs的患者的中位復(fù)發(fā)時(shí)間減少[31]。

3.1.2.2 N-鈣黏蛋白（N-cadherin） N-cadherin是一種鈣依賴跨膜糖蛋白，參與調(diào)節(jié)鈣介導(dǎo)的細(xì)胞黏附、遷移與維持細(xì)胞形態(tài)。癌細(xì)胞通過EMT過程，高表達(dá)N-cadherin，與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)，并與腫瘤治療獲得性耐藥相關(guān)[32]。通過聯(lián)合檢測Ep-CAM與N-cadherin可以提高卵巢癌CTC的檢出率[33]。另外，一項(xiàng)meta分析[34]顯示，N-鈣黏蛋白表達(dá)上調(diào)與上皮性實(shí)體瘤預(yù)后不良有關(guān)。

3.1.2.3 其他新興分子標(biāo)志物

3.1.2.3.1 乳腺癌抗雌激素耐藥蛋白1（breast cancer antiestrogen resistance protein 1, BCAR1） BCAR1又名p130cas，相對分子質(zhì)量為130 kDa，能與包括Crk、src和FAK在內(nèi)的多種蛋白質(zhì)結(jié)合并發(fā)生相互作用。研究[35,36]表明，BCAR1與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移、增殖、分化、存活等密切相關(guān)，有望成為新的CTC標(biāo)志物，監(jiān)測BCAR1陽性CTC有助于預(yù)測早期肺腺癌復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移[37]。

3.1.2.3.2 PD-L1 PD-L1是在腫瘤中表達(dá)的，大小為40 kDa的I型跨膜蛋白，其與T細(xì)胞表面的PD-1結(jié)合，可以幫助腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫逃避。研究[38]表明，PD-L1表達(dá)可以作為Pembrolizumab治療晚期非小細(xì)胞肺癌的療效預(yù)測生物標(biāo)志物，一項(xiàng)關(guān)于肺癌CTC的研究[39]發(fā)現(xiàn)，CTC中PD-L1陽性表達(dá)為50.5%-67.0%，并與癌組織中PD-L1表達(dá)密切相關(guān)。而CTC中PD-L1的高表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后不良有關(guān)[40]。推測PD-L1陽性CTC可能通過誘導(dǎo)免疫逃避，導(dǎo)致腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移[41]。

3.1.2.3.3 葉酸受體（folate receptor, FR） FR是一種糖基化磷脂酰肌醇偶聯(lián)蛋白，對其天然配體葉酸有著較高的親和力和內(nèi)吞轉(zhuǎn)運(yùn)能力，它是一種細(xì)胞表面蛋白，已被證實(shí)是一個(gè)理想的腫瘤標(biāo)示物。在部分肺癌患者中，F(xiàn)R高表達(dá)，而在正常組織低表達(dá)或不表達(dá)[42]。研究表明，F(xiàn)R陽性的CTC不僅可作為非小細(xì)胞肺癌新的診斷標(biāo)志物[43]，而且還可以用于小細(xì)胞肺癌患者一線化療的預(yù)后評估[44]。FR陽性CTC被證實(shí)是一個(gè)有效的老年人群癌癥的早期診斷標(biāo)志物[45]。

3.2 鑒定方法

3.2.1 免疫組織化學(xué)法 該方法通過抗原抗體免疫反應(yīng)，并與組織化學(xué)技術(shù)相結(jié)合，通常需與其他方法聯(lián)合應(yīng)用才能滿足鑒定需要。而且，在基礎(chǔ)研究中，可利用該法進(jìn)行單個(gè)細(xì)胞的形態(tài)驗(yàn)證。例如，利用濾膜捕獲細(xì)胞后，可通過該法進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)分析，以進(jìn)行表型鑒定和分類[46,47]。

3.2.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測法 該法依賴細(xì)胞的光散射特性，利用抗原-抗體結(jié)合的原理，將熒光物質(zhì)與腫瘤細(xì)胞單抗相結(jié)合并使其染色，然后通過熒光抗原抗體檢測技術(shù)對細(xì)胞表面抗原分析，進(jìn)行細(xì)胞分類和亞群分析。研究[48]表明，成像流式細(xì)胞術(shù)可在體內(nèi)可視化觀察血液循環(huán)中CTC和樹突狀細(xì)胞的相互作用，利用這一技術(shù)，單個(gè)CTC和CTC簇的形態(tài)很容易被區(qū)分。而且，體內(nèi)熒光流式細(xì)胞術(shù)可應(yīng)用于凋亡CTC的檢測[49]。隨著技術(shù)的發(fā)展，流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用越來越廣泛，而且提供了一種方便快捷的檢測方法。

3.2.3 聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction, PCR）以及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR） 包括對DNA進(jìn)行PCR以及對mRNA進(jìn)行RT-PCR兩種方法。有研究[43]指出，利用PCR檢測技術(shù)對FR陽性CTC的檢測可作為非小細(xì)胞肺癌的診斷標(biāo)志物。但一般來說，RT-PCR在CTC的檢測上更常用，即將CTC中特異mRNA序列逆轉(zhuǎn)錄為DNA片段并擴(kuò)增，在外周血中檢測到特異mRNA序列就提示CTC的存在。該方法的敏感度高、可重復(fù)操作，是目前檢測CTC最有效的方法。例如，利用RT-PCR可以實(shí)時(shí)定量檢測乳腺癌患者外周血中的細(xì)胞CK蛋白等標(biāo)志物，從而鑒定CTC[50]。亦有相關(guān)研究[51]通過對CK-19進(jìn)行實(shí)時(shí)逆RT-PCR檢測，可以進(jìn)行乳腺癌患者外周血CTC的定量，還可評價(jià)CTC的預(yù)后。

3.2.4 CTC單細(xì)胞測序 單細(xì)胞測序是對單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行全基因組或轉(zhuǎn)錄組的檢測，以確定其基因表達(dá)情況。眾所周知，同一患者中癌細(xì)胞存在異質(zhì)性。因此，對CTC進(jìn)行單細(xì)胞測序能鑒定單個(gè)細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)和基因表達(dá)狀態(tài)，反映CTC細(xì)胞間的異質(zhì)性。最新針對非小細(xì)胞肺癌間變性淋巴瘤激酶（anaplasticlymphoma kinase,ALK）重排耐藥機(jī)制的研究[52]正是應(yīng)用單細(xì)胞測序技術(shù)對CTC進(jìn)行檢測，從而闡明ALK重排耐藥的原因。亦有研究[53]使用CellSearch技術(shù)捕獲CTC，再通過單細(xì)胞測序技術(shù)監(jiān)測CTC突變與拷貝數(shù)變化來推斷小細(xì)胞肺癌的演變與進(jìn)展，其不同臨床亞型拷貝數(shù)變化陽性預(yù)測與陰性預(yù)測分別為80.0%、93.7%。

4 CTC在肺癌領(lǐng)域的臨床應(yīng)用

目前，在肺癌診療中，檢測CTC的臨床價(jià)值成為研究熱點(diǎn)，CTC計(jì)數(shù)與表型分析在肺癌早期診斷、療效評價(jià)、預(yù)后預(yù)測以及個(gè)體化治療等方面有重要價(jià)值，潛在的臨床應(yīng)用前景十分可觀。

4.1 CTC與肺癌的早期診斷 CTC在肺癌早期診斷方面有較大的應(yīng)用潛力。研究[54]顯示，CTC可作為包括肺癌在內(nèi)的多種癌癥的診斷標(biāo)志物。CTC的檢測可作為監(jiān)測孤立性肺結(jié)節(jié)和診斷篩查早期肺癌的生物標(biāo)志物，聯(lián)合檢測CTC和CEA可顯著提高肺腺癌的早期檢出率（靈敏度為70.2%、敏感度為79.3%），有助于肺腺癌的早期診斷[55]。

4.2 CTC與肺癌的療效評價(jià) 監(jiān)測CTC目前被應(yīng)用于肺癌患者的療效評價(jià)，并獲得了初步的結(jié)果。一項(xiàng)前瞻隊(duì)列研究[56]顯示，CTC檢測可作為非小細(xì)胞肺癌患者放療后的療效評價(jià)手段：放療后外周血CTC陰性的患者腫瘤無復(fù)發(fā)或進(jìn)展，而外周血CTC陽性的患者出現(xiàn)腫瘤的進(jìn)展且中位生存期顯著縮短。而且，CTC檢測可有效監(jiān)測早期肺腺癌術(shù)后的復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，并可作為術(shù)后輔助治療療效評價(jià)的重要手段[57]。

4.3 CTC與肺癌的預(yù)后預(yù)測 CTC亦有望成為腫瘤的預(yù)后預(yù)測的重要標(biāo)志物。研究[58]顯示，小細(xì)胞肺癌在放化療過程，外周血CTC中PD-L1高表達(dá)提示預(yù)后不良。而一項(xiàng)93例非小細(xì)胞肺癌單中心前瞻性研究[59]表明，術(shù)前CTC檢出數(shù)目少的患者較CTC檢出數(shù)目多的患者生存時(shí)間更長，無進(jìn)展時(shí)間更長。我們可以推測，某些治療前CTC處于較高基線的患者，可判定為復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移高危人群，而加強(qiáng)治療后有望改善該人群的預(yù)后。

在個(gè)體化治療與精準(zhǔn)醫(yī)療的背景下，腫瘤具有異質(zhì)性且需動態(tài)實(shí)時(shí)監(jiān)控，以便更好地指導(dǎo)治療及預(yù)測預(yù)后。CTC研究方興未艾，具有廣闊的應(yīng)用前景，有望為制定肺癌個(gè)體化精準(zhǔn)治療策略提供理論依據(jù)。當(dāng)然，CTC研究領(lǐng)域尚有不少問題函待解決，如CTC免疫逃避機(jī)制研究，捕獲方法改良優(yōu)化，鑒定手段及表面特異性標(biāo)志物，尚待進(jìn)一步深入研究。