陳虞超1， 郭生虎1， 關(guān)雅靜1， 朱永興1， 安 鈺， 劉 華， 李 明

(1.寧夏農(nóng)林科學(xué)院農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究中心， 銀川 750002；2.寧夏農(nóng)林科學(xué)院荒漠化治理研究所， 銀川 750002)

金蓮花(TrolliuschinensisBunge.)為毛茛科(Ranunculaceae)金蓮花屬(TrolliusL.)多年生宿根草本植物，以干燥花入藥[1]，可治療口瘡、喉腫、浮熱牙宣、耳疼、目痛、明目、解嵐瘴等癥[2-3]，在呼吸道感染、咽炎、扁桃體炎、支氣管炎等方面具有較好的療效[4-5]。金蓮花屬臨床最常用的中藥材之一，原材料主要來源于野生資源。長期以來，掠奪式的采摘不僅導(dǎo)致金蓮花野生資源日漸稀少，而且對生態(tài)環(huán)境造成巨大破壞[6]。目前，金蓮花野生資源的采摘已無法滿足急劇增長的市場需求，開展人工種植勢在必行，其中，種苗繁育尤為關(guān)鍵。金蓮花種苗主要依靠種子進行繁殖，其種子極小，且存在生理休眠現(xiàn)象，自然條件下萌發(fā)率不足10%[7-9]。傳統(tǒng)育苗主要采用大田直播法和溫室平床育苗法，但由于金蓮花種子小，萌發(fā)率低，采用大田直播法，存在播種不均、出苗緩慢、出苗率低、出苗不齊等問題[10]；采用溫室平床育苗法，則存在種子用量大、易倒苗、移栽成活率低等問題。因此，亟待探索出一種新的育苗技術(shù)。

穴盤育苗技術(shù)在蔬菜、苗木的種苗繁育中應(yīng)用較廣泛[11-13]，近年來在中藥材種苗繁育中也得到借鑒，已被成功應(yīng)用到杜仲[14]、甘草[15]、瑪咖[16]等中藥材上，且表現(xiàn)出顯著優(yōu)勢。鑒于此，本研究將穴盤技術(shù)借鑒到金蓮花的種苗繁育中，主要對種子萌發(fā)誘導(dǎo)技術(shù)、育苗基質(zhì)配比、播種時間進行篩選研究，旨在建立金蓮花高效的穴盤育苗技術(shù)體系，為其標準化、規(guī)模化種植提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材 料

金蓮花種子采自河北圍場縣人工種植的金蓮花植株，GA3購自Sigma公司，玻璃纖維濾紙購自Whatman公司，泥炭土購自Pindstrup公司，蛭石購自河北博翔礦產(chǎn)公司，其他試劑為國產(chǎn)分析純。試驗地點位于寧夏農(nóng)林科學(xué)院園藝研究所日光溫室(38°53′79″N，106°08′38″E)。

1.2 方 法

1.2.1GA3濃度的篩選

金蓮花種子經(jīng)蒸餾水浸泡24 h后，用70%乙醇消毒30 s，無菌水沖洗3次，再用0.1% NaClO消毒15 min，無菌水沖洗5次。選取消毒后的種子100粒，置于1.5 mL的離心管中，分別加入1 mL濃度為5、10、20、40、80 mmol·L-1的GA3水溶液，浸泡處理48 h，然后將種子擺放在鋪有濕潤玻璃纖維濾紙的無菌培養(yǎng)皿(規(guī)格Φ 9 cm)中，在25 ℃、濕度80%、無光照條件下培養(yǎng)，研究GA3濃度對金蓮花種子萌發(fā)的影響。

1.2.2GA3處理時間的篩選

選擇24，48，72，96 h共4個不同處理時間，分別開展金蓮花種子萌發(fā)誘導(dǎo)試驗，研究處理時間對金蓮花種子萌發(fā)的影響。

1.2.3育苗基質(zhì)的篩選

在日光溫室，于4月上旬，將泥炭土和蛭石分別按體積比1∶0、2∶1、1∶1混合，配制成不同的育苗基質(zhì)，然后將基質(zhì)分別裝入穴盤(PE材質(zhì)，50孔)中，壓實。在基質(zhì)中間打直徑1 cm、深度1 cm的種植孔，每孔播5粒經(jīng)GA3處理后的金蓮花種子，然后覆蓋1～2 mm厚度的基質(zhì)，抹平，澆透水。以后，每周利用微噴澆水1次。研究不同育苗基質(zhì)對金蓮花出苗及幼苗生長的影響。

1.2.4播種時間篩選

在日光溫室，選擇4月上旬、5月上旬、6月上旬，3個不同時間段，分別開展金蓮花穴盤育苗的播種，研究不同播種時間對金蓮花出苗及幼苗生長情況的影響。

1.2.5實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計

種子萌發(fā)試驗每個處理10皿，每皿100粒種子，重復(fù)3次。育苗試驗每個處理為10片穴盤，每片50穴，重復(fù)3 次。種子萌發(fā)試驗每隔12 h觀察1次，記錄初始萌發(fā)時間(皿中萌發(fā)種子的粒數(shù)大于5)，待各處理萌發(fā)的種子數(shù)不再增加時(10 d后)視為萌發(fā)完全，統(tǒng)計每個處理的萌發(fā)率，萌發(fā)率(%)=(同一處理每個平皿的萌發(fā)率之和/30)×100%。育苗試驗每24 h觀察1次，記錄初始出苗時間(單片穴盤中出苗的穴數(shù)大于5)，待各處理出苗數(shù)不再增加時(15 d后)視出苗完全，統(tǒng)計每個處理的出苗率，出苗率(%)=(同一處理每片穴盤的出苗率之和/30)×100%。幼苗生長情況調(diào)查：待出苗后，每7 d觀察1次，調(diào)查幼苗的苗高和根長度，每個處理每次調(diào)查10株，重復(fù)3次。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度GA3處理對金蓮花種子萌發(fā)的影響

以蒸餾水處理為對照，利用不同濃度的GA3處理金蓮花種子，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對照組初始萌發(fā)時間為144 h，萌發(fā)率為27.5%。GA3處理可顯著縮短初始萌發(fā)時間，但其濃度高低對初始萌發(fā)時間無顯著影響，均為處理后96 h；GA3處理可顯著提高萌發(fā)率，且萌發(fā)率隨處理濃度升高而升高，濃度為20 mmol·L-1時，萌發(fā)率到達最高，為78.1%；但當濃度超過40 mmol·L-1時，萌發(fā)率反而降低(見表1)。

表1 不同濃度GA3對金蓮花種子萌發(fā)的影響

GA3濃度/(mmol·L-1)初始萌發(fā)時間/h萌發(fā)率/%0144a27.5e596b 49.3d1096b 66.2c2096b 78.1a4096b73.7b8096b66.1c

注：同列數(shù)據(jù)不同小寫字母表示差異顯著(p<0.05)。下同。

2.2 GA3不同處理時間對金蓮花種子萌發(fā)的影響

利用20 mmol·L-1GA3處理金蓮花種子，處理時間分別為24、48、72、96 h，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，處理時間對初始萌發(fā)時間無顯著影響，但對萌發(fā)率存在顯著影響，萌發(fā)率隨處理時間延長而升高，處理72 h，萌發(fā)率達到最高，為96.9%，但處理96 h時，萌發(fā)率又有所降低(見表2)。

表2 GA3不同處理時間對金蓮花種子萌發(fā)的影響

誘導(dǎo)時間/h初始萌發(fā)時間/h萌發(fā)率/%2496a53.4d4896a77.5c7296a96.9a9696a91.3b

2.3 不同基質(zhì)對金蓮花出苗及幼苗生長的影響

分別以1∶0、2∶1、1∶1(體積比配比編號1、2、3)的泥炭土、蛭石混合配制育苗基質(zhì)，開展育苗試驗。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同基質(zhì)的初始出苗時間無顯著差異，均為播種后9 d，但出苗率存在顯著差異，配比2的出苗率最高，達到98.6%(見表3)。不同基質(zhì)的幼苗生長情況不一，苗高、根長存在顯著差異，配比2的幼苗苗高最高，達到14.3 cm(出苗70 d后)，根最長，達到9.13 cm(出苗42 d后)(見圖1、圖2)。

表3 不同基質(zhì)對金蓮花出苗的影響

配比編號初始出苗時間/d出苗率/%19a83.4c29a98.6a39a92.5b

2.4 不同播種時間對金蓮花出苗及幼苗生長的影響

分別在4月上旬、5月上旬、6月上旬，3個不同時間段，開展金蓮花穴盤育苗試驗。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，較4月上旬、5月上旬而言，6月上旬初始出苗時間顯著縮短，為播種后6 d。但不同播種時間，金蓮花的出苗率無顯著差異(見表4)。在育苗后期(出苗后56～70 d)，不同播種時間的幼苗苗高存在顯著差異，4月上旬播種的金蓮花幼苗苗高最高，達到14.6 cm(出苗70 d后)(見圖3)。

圖1 不同基質(zhì)對金蓮花幼苗苗高的影響

圖2 不同基質(zhì)對金蓮花根長度的影響

表4 不同播種時間對金蓮花出苗的影響

播種時間初始出苗時間/d出苗率/%4上旬9a98.9a5上旬9a98.8a6上旬6b99.1a

圖3 不同播種時間對金蓮花幼苗苗高的影響

3 討論與結(jié)論

金蓮花種子存在休眠現(xiàn)象，萌發(fā)率很低，是制約其育苗技術(shù)發(fā)展的主要因素[17]。本研究發(fā)現(xiàn)，GA3處理可顯著縮短金蓮花種子初始萌發(fā)時間，提高萌發(fā)率，而且隨著GA3濃度的升高以及處理時間的延長，金蓮花種子萌發(fā)率呈現(xiàn)逐漸升高的變化趨勢，但當GA3濃度過高(達到40 mmol·L-1)或處理時間過長(達到96 h)時，金蓮花種子萌發(fā)率又呈現(xiàn)降低的趨勢，這與顧增輝等[8]、李娜等[9]的研究報道相一致。

基質(zhì)是穴盤育苗技術(shù)的關(guān)鍵，直接影響種苗的生長發(fā)育[18]。在蔬菜穴盤育苗中，單一基質(zhì)往往不能滿足需要，常常將多種基質(zhì)混合后應(yīng)用，這對穴盤苗的生長更為有利[19]。在穴盤育苗生產(chǎn)實踐中，多使用泥炭土、蛭石等按不同配比混合后作為育苗基質(zhì)，取得了較好的效果[20]。本研究發(fā)現(xiàn)，以泥炭土、蛭石按體積比2∶1混合后作為金蓮花穴盤育苗基質(zhì)，出苗率最高，幼苗生長最好，這與劉行等[21]的研究報道一致。范翠麗等[17]研究發(fā)現(xiàn)，純泥炭土更加適宜作為金蓮花穴盤育苗的基質(zhì)，但其出苗時間為18 d，較本研究延長了1倍，這可能是由于溫度等其他培養(yǎng)條件不一致造成的。本研究以穴盤作為育苗容器，具有成本低、移栽便捷等優(yōu)點，但是，由于穴孔深度(10 cm)的影響，金蓮花幼苗根系生長受到一定抑制，而且在育苗后期(出苗49 d后)，根的生長受限較為明顯，其長度難以準確測量，不同處理條件下的表現(xiàn)趨于一致。

播種時間也是穴盤育苗技術(shù)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，播種時間的確定，首先要考慮育苗周期內(nèi)氣溫、光照等環(huán)境條件對育苗效果的影響，其次是育苗周期與實際生產(chǎn)周期、生產(chǎn)條件的銜接。本研究發(fā)現(xiàn)，6月上旬播種，出苗時間縮短了1/3，但后期(出苗后42 d)過高的氣溫導(dǎo)致金蓮花幼苗的生長受到較大抑制。在寧夏境內(nèi)，適宜金蓮花種植的區(qū)域為六盤山地區(qū)，5—8月份，該地區(qū)氣溫較穩(wěn)定、降雨量較集中，適宜開展金蓮花穴盤苗的移栽，金蓮花育苗周期一般在3個月左右，在4月上旬開展金蓮花穴盤育苗，既能保證金蓮花幼苗正常生長，又能與移栽等實際生產(chǎn)較好的銜接。因此，金蓮花穴盤育苗的最佳播種時間為4月上旬。

隨著中藥材人工種植規(guī)模的不斷擴大，藥材種苗缺口問題日趨嚴重。穴盤育苗技術(shù)具有較大優(yōu)勢，在中藥材育苗上的應(yīng)用尚處在起步階段，很可能是今后需要突破的重要領(lǐng)域。本研究建立了金蓮花的高效穴盤育苗技術(shù)體系，對推動寧夏及周邊適宜地區(qū)金蓮花人工種植的發(fā)展提供了技術(shù)支撐，具有較重要的意義。