王玉英 李 茹 高買波 李枝林 黃興龍 李葉芳 李國昌③
(1 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)園林園藝學(xué)院 云南昆明650201;2 石林縣經(jīng)濟(jì)作物站 云南石林652200)
人參果(Solanum muricatumAiton)又稱香瓜茄、南美香瓜茄、長壽果、艷果等,原產(chǎn)于南美洲,屬茄科類多年生雙子葉草本植物[1];果實(shí)成熟時(shí)果皮呈金黃色,外形像人的心臟,不僅可以作為水果,還能作為蔬菜。人參果不僅能補(bǔ)充營養(yǎng),還具有營養(yǎng)保健功效;果肉味道與眾不同、又脆又酥,口感鮮美多汁、不酸不澀,是一種受歡迎的水果。人參果具有低糖、低脂肪等特點(diǎn),同時(shí)富含蛋白質(zhì)、維生素與礦物元素、氨基酸以及微量元素,對(duì)防治糖尿病、心臟病,調(diào)節(jié)血脂等具有很好的輔助功能[2-3]。LED 是一種固態(tài)的半導(dǎo)體器件,它可以直接把電轉(zhuǎn)化為光,發(fā)出紅、綠、青、橙、黃、紫、白、藍(lán)色的光,又叫發(fā)光二極管[4]。隨著科學(xué)社會(huì)的發(fā)展,LED 光源也逐漸走進(jìn)人們的視野,為人熟知并被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn),主要應(yīng)用于植物的補(bǔ)光照明,如何有效而又快速地進(jìn)行光環(huán)境調(diào)控已經(jīng)成為了一個(gè)研究的大熱點(diǎn)[5]。
光照對(duì)植物生長起著至關(guān)重要的作用,在眾多外界環(huán)境中,對(duì)植物生長發(fā)育有重要的影響。光照不僅是植物整個(gè)生長代謝過程中的重要條件,而且在植物形態(tài)建成上也發(fā)揮重要作用[6-7]。光能促進(jìn)植物生長發(fā)育,作為環(huán)境信號(hào)作用于植物,其中光強(qiáng)、光周期和光質(zhì)是光環(huán)境的重要衡量指標(biāo)。光質(zhì)能調(diào)節(jié)植物生長,植物也不是全波段的光都能吸收,而是有選擇性的。少量紫外光對(duì)植物的后期移栽、抑制雜菌有特殊作用[8],唐菖蒲的組培苗根系在藍(lán)光處理下長得好,而在紅光處理下長得不好[9],藍(lán)光處理下對(duì)黃酮,多糖的合成作用明顯[10-12]。越來越多的科學(xué)家對(duì)光質(zhì)應(yīng)用開展研究,光質(zhì)具有很高研究價(jià)值和應(yīng)用前景。近年來,不同LED光質(zhì)對(duì)植物生長的影響一直是國內(nèi)外研 究的 熱點(diǎn)[13-15],前 人以紅 掌[16]、鐵 皮石斛[17]等為試驗(yàn)材料,研究LED 光質(zhì)對(duì)其生長發(fā)育的影響;然而,LED 光質(zhì)對(duì)人參果組培苗生長發(fā)育的影響至今尚未見報(bào)道。
本試驗(yàn)以人參果無根組培苗為試材,研究6種不同光質(zhì)的LED對(duì)人參果組培苗生長和生理指標(biāo)的影響,以期篩選出最適合人參果生長的光質(zhì),為人參果高效和低能耗產(chǎn)業(yè)化的種苗生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。
圓果型人參果組培苗,由云南農(nóng)業(yè)大學(xué)園林園藝學(xué)院花卉研究所提供。
1.2.1 LED光源及其控制系統(tǒng)
試驗(yàn)設(shè)置6 種不同光質(zhì)的LED 光源,分別為綠光(G)、黃光(Y)、紅光(R)、藍(lán)光(B)、紅藍(lán)復(fù)合光(RB)和紅藍(lán)綠復(fù)合光(RGB),并以熒光作為對(duì)照(CK)。LED 光源控制系統(tǒng)由廈門通秴科技有限公司提供。各處理光質(zhì)參數(shù)如表1所示。
表1 LED光源控制系統(tǒng)
1.2.2 試驗(yàn)方法
在無菌條件下,挑選生長健壯的人參果無根組培苗,切成約1.5 cm的莖段,保留1片葉,將其接 種 于MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.05 mg/L+KT 1.0 mg/L+糖30 g/L+瓊脂7 g/L(pH 5.8)的增殖培養(yǎng)基上,每瓶5棵。把瓶苗先置于普通熒光燈下預(yù)培養(yǎng)5 d,然后將材料隨機(jī)分組,再轉(zhuǎn)入LED 光照室內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。每個(gè)處理5 瓶,重復(fù)3 次。培養(yǎng)條件:相對(duì)濕度(75±5)%,溫度(22±2)℃,光照周期14 h/d 。培養(yǎng)30 d 后測定組培苗的各項(xiàng)生理和形態(tài)指標(biāo)。
1.2.3 指標(biāo)測定
用直尺測量幼苗的株高、葉片長度和寬度,用游標(biāo)卡尺測量莖粗,用電子天平稱量鮮重。將幼苗洗凈,剪碎,混勻,然后采用蒽酮硫酸法來測定可溶性糖含量[18],采用考馬斯亮藍(lán)G-250 法進(jìn)行可溶性蛋白含量的測定[18],采用分光光度法測定葉綠素含量[19]。
1.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與處理
采用Microsoft Excel 2003 進(jìn)行數(shù)據(jù)整理,SPSS 23.0 進(jìn)行方差分析,Duncan’s 進(jìn)行多重比較,p<0.05,n=3。
由表2可知,人參果組培苗在不同的光質(zhì)處理下株高差異顯著,其中R和RB 處理株高最高;其次是CK、B和RGB處理,Y和G處理株高最矮。幼苗的葉片寬度,除了RB 處理較小外,其他處理間沒有顯著差異。幼苗的鮮重,除了R和G 處理較小外,其他處理間差異不顯著。對(duì)于幼苗的葉片數(shù)、葉片長度和莖粗,各處理間均無顯著差異。
表2 不同光照處理對(duì)人參果植株形態(tài)指標(biāo)的影響
由圖1-A可知,在不同的光質(zhì)處理下,人參果組培苗可溶性糖含量差異顯著,其中RGB處理含量最高,其次是R 處理,CK 處理次之,RB 處理小于CK 處理,Y、B和G 處理下可溶性糖含量最低,三者之間差異不顯著。
由圖1-B可知,在不同的光質(zhì)處理下,人參果組培苗可溶性蛋白含量差異顯著,其中G處理下可溶性蛋白含量最高;B和RB處理下次之,二者差異不顯著??扇苄缘鞍缀看笮∨判?yàn)椋篏>B=RB>RGB>R>CK>Y。說明R和RGB 處理均有利于人參果組培苗可溶性糖的積累,而Y,G和B 處理都抑制了可溶性糖的合成;G 處理更有利于人參果組培苗可溶性蛋白含量的積累,Y 處理抑制了可溶性蛋白的合成。
由圖2 可知,在不同光質(zhì)處理下葉綠素a 差異顯著,其中B 處理含量最高,G 處理次之;在RGB處理下葉綠素a 含量最低。各處理間葉綠素b 含量差異不大,其中Y、G和B 處理含量達(dá)到最高,RGB處理含量最低,其他處理下差異不大。在不同光質(zhì)處理下類胡蘿卜素含量的變化差異不顯著,其中G處理下含量最高,在CK、RBG和RB處理下含量最低。葉綠素總量的大小順序?yàn)椋築>G>Y>R>RB>CK>RGB。說明B和G 光質(zhì)有利于光合色素的合成;RGB復(fù)合光不利于光合色素的合成。
1955年Luigi[20]第一次引進(jìn)了光因子,并將其應(yīng)用于向日葵等組織培養(yǎng)中,此后,越來越多的學(xué)者和科研工作者開始重視光因子,并研究不同光質(zhì)對(duì)植物生長發(fā)育和誘導(dǎo)分化的影響。
Wu 等[21]以豌豆幼苗為研究材料的結(jié)果表明,紅光照射下豌豆苗的高度明顯增高;藍(lán)光增加了豌豆的鮮重。Le 等[22]研究結(jié)果表明,在組織培養(yǎng)中,紅藍(lán)光比為3∶1 時(shí),有助于蘭花的生長。Li等[23]研究表明,相對(duì)于白光,紅藍(lán)混合光和單色紅光可顯著提高番茄幼苗的株高。本試驗(yàn)結(jié)果表明,R和RB 處理有利于增加人參果植株株高,另外,B和RB處理對(duì)植株鮮重的增加也有明顯的促進(jìn)作用,與前人研究結(jié)果一致。不同的光質(zhì)、不同的配比及不同的光照強(qiáng)度對(duì)植株各方面生長的作用也不盡相同。
糖也叫碳水化合物,在維持植物生命活動(dòng)中起著重要作用,是主要的能量來源。劉建福等[24]研究發(fā)現(xiàn),紅光有利于姜黃可溶性糖的合成。林碧英等[25]以豇豆為試驗(yàn)材料,結(jié)果發(fā)現(xiàn),紅光有利于豇豆可溶性糖含量的提高。王麗娟等[26]研究結(jié)果表明,相對(duì)于紅光來說,紅藍(lán)復(fù)合光有利于草莓葉片中可溶性糖的合成,并且紅光比例越高,可溶性糖含量就越高。李晗等[27]用菘藍(lán)愈傷組織作為試驗(yàn)材料,結(jié)果表明,紅藍(lán)復(fù)合光相對(duì)于紅藍(lán)單色光來說,更有利于可溶性糖含量的積累。本研究結(jié)果表明:R 處理下人參果組培苗可溶性糖含量高于CK,與劉建福,林碧英研究結(jié)果一致。而RB 處理下的可溶性糖含量明顯低于CK,說明RB光質(zhì)抑制了可溶性糖的合成,這與王麗娟等[26]和李晗等[27]的研究結(jié)果均不一致。本試驗(yàn)結(jié)果還發(fā)現(xiàn),相對(duì)于R、B和RB 光質(zhì),RGB 處理下人參果組培苗可溶性糖含量達(dá)最大,說明在紅藍(lán)光中添加一定比例的綠光有利于可溶性糖含量的積累,可能是由于光源組合中光質(zhì)的比例、光照強(qiáng)度、光照時(shí)間和不同植物對(duì)光的耐受程度不同所導(dǎo)致的。
蛋白質(zhì)是由多種氨基酸組成的生物大分子化合物,是植物體內(nèi)各組分的基本組成成分,是生物細(xì)胞最基本的組成物質(zhì)。從倪文[28]的研究結(jié)果可知,藍(lán)光對(duì)含氮化合物的合成具有促進(jìn)作用。多數(shù)試驗(yàn)表明,藍(lán)光可以有效促進(jìn)氮代謝[29-30]。本研究結(jié)果表明,G 處理下可溶性蛋白含量最高,同時(shí),B 處理下植株的可溶性蛋白含量也明顯高于CK 處理。由此可見,B和G 光質(zhì)有助于蛋白質(zhì)的合成,這與寧宇等[31]以韭菜作為試驗(yàn)材料的研究結(jié)果一致,劉建福等[24]試驗(yàn)也表明,藍(lán)光和綠光有利于可溶性蛋白的合成。
植物體內(nèi)含有各種不同的色素成分,而不同的LED光源對(duì)組織培養(yǎng)中植株光合作用的影響是不同光質(zhì)對(duì)光合作用的影響,不同光質(zhì)與相關(guān)激素之間相互作用從而影響植物體內(nèi)的激素平衡,進(jìn)而引起植物體生理生化變化。葉綠素是進(jìn)行光合作用的主要色素,包含很多種類,在植物生理生化過程中起核心作用。本試驗(yàn)主要研究葉綠素a、b和類胡蘿卜素。劉建福等[24]研究表明,藍(lán)光和綠光有利于提高姜黃類胡蘿卜素的含量。Wu 等[21]以豌豆的幼苗為實(shí)驗(yàn)材料,結(jié)果表明,藍(lán)光輻射增加了葉片內(nèi)葉綠素的含量。本研究結(jié)果表明,B處理下葉綠素a 的含量最高,葉綠素b和類胡蘿卜素的含量次之;而在G 處理下葉綠素b和類胡蘿卜素的含量均達(dá)最高,葉綠素a含量位居第二。因此B 處理下葉綠素總量達(dá)最大,而G 處理下則次之,與前人試驗(yàn)結(jié)果一致。藍(lán)光還對(duì)植物的向光性和氣孔開閉起著至關(guān)重要的作用,且更加有利于植物的光合作用[32-33]。在RGB處理下葉綠素總量為最低值,所以RGB處理下不利于葉綠素的合成,不利于光合作用的發(fā)生。
在LED 不同光質(zhì)處理下,B和R 處理能夠促進(jìn)人參果組培苗的生長,還有助于碳氮化合物的積累;并且B處理促進(jìn)光合色素的合成,有利于光合作用的發(fā)生。因此,B 光質(zhì)有利于人參果組培苗的生長和發(fā)育。