龐曉霞　石鳳　覃莉　凌燕蘭　陳興鴻　韋敬錫　李秀霞　羅小瓊　王俊利

【摘要】 目的 分析廣西壯族多囊卵巢綜合征（PCOS）患者及亞組的臨床特征和黃體生成素——人絨毛膜促性腺激素受體（LHCGR）的表達(dá)情況。

方法 選擇2018年5月～10月在右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心就診的壯族PCOS患者166例為病例組，并按不同標(biāo)準(zhǔn)分為亞組，選擇年齡相匹配的同期就診的172例壯族不孕患者作為對照組，免疫發(fā)光法測定所有研究對象的內(nèi)分泌指標(biāo)，用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測血清中LHCGR的含量。

結(jié)果 PCOS組的BMI、LH、LH/FSH、E2、T、AMH、INS和HOMA-IR均高于對照組（P<0.05）。在PCOS患者中，肥胖組的BMI、INS和HOMA-IR高于非肥胖組，而LH和LH/FSH低于非肥胖組（P<0.05）;高雄激素組的LH、LH/FSH、E2、T較雄激素正常組的高（P<0.05）;胰島素抵抗組的Glu、INS和HOMA-IR均比非胰島素抵抗組的高（P<0.05）;相對于LH/FSH<2組，LH/FSH≥2組的LH、LH/FSH、E2、T和AMH升高，而BMI和FSH降低（P<0.05）。PCOS組和對照組以及PCOS患者不同分組間血清LHCGR的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

結(jié)論 壯族PCOS的臨床表現(xiàn)多樣，不同亞組的臨床特征、生化特點差異較大;血清LHCGR的表達(dá)在PCOS及其亞組中未發(fā)現(xiàn)明顯的作用。

【關(guān)鍵詞】 壯族;多囊卵巢綜合征;亞組;臨床特征;LHCGR

中圖分類號：R711.75 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2019.11.004

Analysis of clinical characteristics and expression of serum LHCGR in PCOS patients and its subgroups in Guangxi Zhuang nationality

PANG Xiaoxia，SHI Feng，QIN Li，LING Yanlan，CHEN Xinghong，WEI Jingxi，LI Xiuxia，LUO Xiaoqiong，WANG Junli

（Reproductive Medicine Center of Affiliated Hospital，Youjiang Medical University for Nationalities，Baise 533000，China ）

【Abstract】 Objective To analyze the clinical characteristics and serum expression of LHCGR in patients with polycystic ovary syndrome and its subgroups in Guangxi Zhuang nationality.

Methods From May 2018 to October 2018，166 Zhuang PCOS patients who were treated in the Reproductive Medicine Center of Youjiang Medical College for Nationalities were selected as the case group and divided into subgroups according to different criteria，and the 172 infertile patients of Zhuang nationality who were treated at the same time were selected as the control group.The endocrine indexes of all subjects were determined by immunoluminescence method，and the concentration of LHCGR in serum was detected by enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）.

Results BMI，LH，LH/FSH，E2，T，AMH，INS and HOMA-IR in PCOS group were significantly higher than those in control group（P<0.05）.In PCOS patients，BMI，INS and HOMA-IR in obese group were significantly higher than those in non-obese group，while LH and LH/FSH in obese group were significantly lower than those in non-obese group（P<0.05）.The LH，LH/FSH，E2，T of high androgen group was higher than that of normal androgen group（P<0.05）.Glu，INS and HOMA-IR in insulin resistance group were significantly higher than those in non insulin resistance group（P<0.05）.Compared with LH/FSH<2 group，LH，LH/FSH，E2，T and AMH increased，while BMI and FSH decreased in LH/FSH ≥ 2 group（P<0.05）.There was no significant difference of serum LHCGR between PCOS group and control group，even between subgroup（P>0.05）.

Conclusion The clinical manifestations of PCOS are various，and the clinical and biochemical characteristics of different subgroups are quite different.The significant role for LHCGR in PCOS and its subgroups have not found in our study.

【Key words】 Zhuang nationality;polycystic ovary syndrome;subgroup;clinical characteristics;LHCGR

多囊卵巢綜合征（PCOS）是常見于青春期及育齡婦女的一種生殖內(nèi)分泌疾病，在育齡期婦女中，具有5%～10%的群體發(fā)病率[1]，并且在無排卵婦女中就有70%為PCOS 患者，可見其對育齡婦女身心健康的危害。PCOS臨床表現(xiàn)多樣，以稀發(fā)排卵或不排卵、卵巢多囊樣變和高雄激素血癥為主要特征。其病因復(fù)雜，大部分研究認(rèn)為遺傳因素是除環(huán)境、飲食、生活習(xí)慣外的主要因素。研究表明PCOS與多種基因相關(guān)聯(lián)，黃體生成素——人絨毛膜促性腺激素受體（LHCGR）是其中關(guān)聯(lián)性較強的基因[2]，而LHCGR由LHCGR基因編碼，它在卵泡發(fā)育和激素合成中起關(guān)鍵作用。研究發(fā)現(xiàn)PCOS患者顆粒細(xì)胞的LHCGR表達(dá)升高[3]并與PCOS的病理生理過程有關(guān)，而LHCGR在PCOS患者血清中的表達(dá)情況未見有相關(guān)研究，因此，本文除了分析PCOS患者及亞組的臨床特征外，同時也檢測LHCGR在PCOS患者血清中的表達(dá)并比較亞組間的表達(dá)差異，探討其在PCOS及其亞組中可能的作用。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2018年5月～10月在右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心就診的壯族PCOS患者166例，入選依據(jù)2003年鹿特丹標(biāo)準(zhǔn)[4]，患者抽血前未使用過影響激素、血糖、胰島素的藥物，亦未實施減肥，排除其他高雄激素疾?。ㄏ忍煨阅I上腺皮質(zhì)增生、柯興氏綜合征、分泌雄激素的腫瘤等）、高催乳素血癥、甲狀腺相關(guān)疾病等。選擇同一時期就診的年齡相匹配、月經(jīng)規(guī)律、血清睪酮正常且無高雄激素體征、卵巢大小和形態(tài)正常的壯族不孕患者（不孕年限1年以上）172例作為對照組。

1.2 研究方法

1.2.1 血清LHCGR的檢測

用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測血清中LHCGR的含量，試劑由海聯(lián)生物生產(chǎn)，檢測儀器為RT-6000酶標(biāo)儀。

1.2.2 臨床生化指標(biāo)檢測

卵泡刺激素（FSH）、抗苗勒管激素（AMH）、空腹胰島素（INS）等激素用發(fā)光免疫分析儀（973100：UniCleTM Dxl 800 Access，貝克曼）檢測，F(xiàn)SH、促黃體生成素（LH）、雌二醇（E2）、催乳素（PRL）、睪酮（T）等性激素于月經(jīng)2～4天測定，空腹血糖（氧化酶法）用全自動生化分析儀（Cobas 8000 C702）檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

用SPSS 17.0對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，用“One-Sample Kolmogorov-Smirnoy Test”方法對每組變量作正態(tài)性檢驗，符合正態(tài)分布的兩組計量資料間的比較用t檢驗，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，不符合正態(tài)分布的用秩和檢驗，用中位數(shù)表示。檢驗水準(zhǔn)：α=0.05，雙側(cè)檢驗。

2 結(jié)果

2.1 PCOS組與對照組各臨床指標(biāo)和血清LHCGR含量的比較

PCOS患者與對照組比較，BMI、LH、LH/FSH、E2、T、AMH、INS、HOMA-IR的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而FSH、PRL、Glu和LHCGR的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.2 PCOS患者不同亞組各臨床指標(biāo)和血清LHCGR含量的比較

分別根據(jù)BMI、T、HOMA-IR和LH/FSH把PCOS患者進(jìn)行分組：BMI≥25 kg/m2為肥胖組，BMI<25 kg/m2為非肥胖組;T≥0.7 μg/L為高雄組，T<0.7 μg/L為雄激素正常組;HOMA-IR≥2.14為胰島素抵抗組（IR組），HOMA-IR<2.14為非胰島素抵抗組（NIR組）;以LH/FSH比值=2為界值，把PCOS分為LH/FSH≥2組和LH/FSH<2組，比較各組間的臨床指標(biāo)和LHCGR的血清含量。結(jié)果顯示，LH、LH/FSH、INS和HOMA-IR在肥胖組和非肥胖組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2;高雄組的LH、LH/FSH、E2、T水平高于雄激素正常組（P<0.05），見表3;與非胰島素抵抗組相比，胰島素抵抗組Glu、INS和HOMA-IR升高（P<0.05），見表4;LH/FSH≥2組和LH/FSH<2組兩組間的年齡、BMI、FSH、LH、LH/FSH、E2、T和AMH差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表5。

3 討論

多囊卵巢綜合征臨床表現(xiàn)多樣，胰島素抵抗和雄激素升高是PCOS患者的兩大特征， 其血清睪酮、胰島素和胰島素抵抗指數(shù)均明顯高于健康對照女性。研究已經(jīng)證實，增高的胰島素是導(dǎo)致PCOS患者排卵障礙和月經(jīng)失調(diào)的關(guān)鍵影響因素，胰島素抵抗促進(jìn)了PCOS的發(fā)生發(fā)展[5]，而胰島素抵抗與BMI相關(guān)，肥胖的PCOS患者胰島素抵抗更嚴(yán)重[6]。本研究肥胖組的HOMA-IR明顯高于非肥胖組這一結(jié)果充分詮釋了以上結(jié)論，進(jìn)一步表明了肥胖是PCOS患病危險因素之一[7]。有研究[8]認(rèn)為高雄激素與肥胖有一定的關(guān)系，我們比較PCOS患者肥胖組和非肥胖組的睪酮，發(fā)現(xiàn)兩組間的差異并無統(tǒng)計學(xué)意義，由此說明PCOS患者的雄激素升高，但患者雄激素水平的高低不再因是否肥胖而有所差別。此外，我們的結(jié)果顯示，LH/FSH≥2組的T高于LH/FSH<2組，與寧夏回族人的睪酮水平相似[9]，提示了LH/FSH≥2患者表現(xiàn)為HPOA軸功能紊亂，相反，高雄組的LH和LH/FSH高于雄激素正常組，這與LH參與T合成有關(guān)。除胰島素抵抗和雄激素升高以外，高黃體生成素也是PCOS的一大重要體現(xiàn)，進(jìn)一步的研究還發(fā)現(xiàn)，非肥胖組的LH比肥胖組的高，高雄組的LH高于雄激素正常組，LH/FSH≥2組LH表達(dá)高于LH/FSH<2組，與哈靈俠[9]對漢族和（或）回族PCOS患者LH表達(dá)水平的研究結(jié)果一致。AMH作為卵泡發(fā)育的調(diào)控因子，參與卵泡周期和卵泡募集。PCOS患者AMH水平明顯高于對照組，說明AMH在PCOS疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了重要作用，這可能與升高的AMH能夠使卵泡對雌激素的敏感性受到抑制，導(dǎo)致性激素對卵泡的調(diào)控作用受限而使卵泡成熟障礙，最終導(dǎo)致排卵障礙[10]有關(guān)。亞組分析發(fā)現(xiàn)，LH/FSH≥2組的AMH水平明顯高于LH/FSH<2組，由于AMH主要由卵巢的竇前卵泡和小竇狀卵泡的顆粒細(xì)胞分泌，且直徑越小的竇前卵泡或小竇狀卵泡分泌AMH越多[11]，是否LH/FSH≥2組患者的竇卵泡數(shù)目比LH/FSH<2組的高，目前我們還欠缺患者竇卵泡具體數(shù)目的數(shù)據(jù)而無法進(jìn)一步驗證，這也將為我們下一步的研究提供了方向。值得注意的是AMH分泌過剩導(dǎo)致血清中高T，因此LH/FSH≥2組高AMH亦高T。至于患者的E2水平，在現(xiàn)有研究中有升高[12]，亦有變化不明顯[13]，目前尚未有統(tǒng)一的結(jié)論，亞組分析還發(fā)現(xiàn)高雄患者的E2比雄激素正常的患者高，LH/FSH≥2組的E2高于LH/FSH<2組，目前文獻(xiàn)暫未見有關(guān)報道。由于LH作用于卵泡膜細(xì)胞，參與雄激素（睪酮）的合成，合成的雄激素一部分釋放入血，一部分進(jìn)入顆粒細(xì)胞用于合成雌激素（雌二醇），因此，高LH導(dǎo)致高雄激素，雄激素升高繼而E2升高。

血液中可溶性LHCGR（sLHCGR）可增強和抑制LH/HCG的功能，有關(guān)LHCGR與PCOS的研究認(rèn)為LHCGR低甲基化是PCOS的潛在致病機制[14]，另有研究認(rèn)為miRNA-592可能是以LHCGR作為靶點在PCOS中發(fā)揮作用[12]，可見LHCGR在PCOS發(fā)生發(fā)展中具有舉足輕重的地位。由此，本文試圖通過檢測血清中LHCGR的含量以探索其在PCOS中的可能作用。LHCGR屬于G蛋白偶聯(lián)受體超家族，其與LH和（或）人絨毛膜促性腺激素（HCG）兩種配體結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，它主要在性腺上表達(dá)，如女性的卵泡膜細(xì)胞、顆粒細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞、黃體以及男性的睪丸間質(zhì)細(xì)胞等。人類生殖功能的正常進(jìn)行依賴于LHCGR，在女性方面，參與卵泡成熟、促進(jìn)排卵和黃體形成，另外，LHCGR在孕早期調(diào)節(jié)孕激素的水平。Kanamarlapudi等[3]報道，PCOS患者顆粒細(xì)胞的LHCGR表達(dá)升高與PCOS的病理生理過程有關(guān)，但他們對調(diào)節(jié)LHCGR表達(dá)的因素尚未有進(jìn)一步的研究，而先前的一項動物實驗證明胰島素的增加能夠上調(diào)小鼠顆粒細(xì)胞中LHCGR的表達(dá)[15]。在本研究中，PCOS患者的LHCGR血清水平并沒有升高，這可能跟我們選擇的標(biāo)本類型和檢測方法有關(guān)，Kanamarlapudi等人采用的是免疫印跡法檢測性腺上顆粒細(xì)胞的LHCGR，而顆粒細(xì)胞正是表達(dá)LHCGR的主要細(xì)胞。另一方面，人體內(nèi)激素的調(diào)節(jié)本身就是一個復(fù)雜的過程，有文獻(xiàn)報道顆粒細(xì)胞LHCGR的表達(dá)受FSH和E2的影響[16]，我們猜測可能PCOS患者血清的LHCGR水平本質(zhì)上是表達(dá)升高的，但由于其他激素的正、負(fù)反饋調(diào)節(jié)而使本來升高的LHCGR又下降了。我們用不同標(biāo)準(zhǔn)對PCOS患者進(jìn)行分組，結(jié)果亦未發(fā)現(xiàn)LHCGR的表達(dá)在不同亞組間具有差異。

綜上所述，PCOS的臨床表現(xiàn)多樣，不同亞組的臨床特征、生化特點差異較大，此外，本研究暫未發(fā)現(xiàn)LHCGR血清水平與PCOS有直接的關(guān)系，亞組間也沒有明顯的表達(dá)差異，LHCGR可能在PCOS中未起到關(guān)鍵作用，亦不能作為鑒別亞組的重要指標(biāo)。

參 考 文 獻(xiàn)

[1]韓曦，王寶玲，羅莉，等.多囊卵巢綜合征患者代謝綜合征的發(fā)病情況[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志，2015，44（2）：170-172.

[2]Almawi WY，Hubail B，Arekat DZ，et al.Leutinizing hormone/choriogonadotropin receptor and follicle stimulating hormone receptor gene variants in polycystic ovary syndrome[J].J Assist Reprod Genet，2015，32（4）：607-614.

[3]Kanamarlapudi V，Gordon UD，Lopez Bernal A.Luteinizing hormone/chorionic gonadotrophin receptor overexpressed in granulosa cells from polycystic ovary syndrome ovaries is functionally active[J].Reprod Biomed Online，2016，32（6）： 635-641.

[4]Bachanek M，Abdalla N，Cendrowski K，et al.Value of ultrasonography in the diagnosis of polycystic ovary syndrome-literature review[J].J Ultrason，2015，15（63）：410-422.

[5]邵揮戈，黃干.多囊卵巢綜合征患者血清IL-1Ra、IL-1β和IL-18水平的變化[J].實用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2010，17（3）：463-465.

[6]林佳，蔣琪，石玉華.多囊卵巢綜合征診斷分型及臨床意義[J].中國實用婦科與產(chǎn)科雜志，2019，35（3）：267-271.

[7]鄧燕鋒，林韶華.多囊卵巢綜合征患病危險因素的病例對照研究[J].右江醫(yī)學(xué)，2016，44（3）：318-321.

[8]The Rotterdam ESHRE/ASRM-sposored PCOS consensus workshop group.Revised 2003 consensus on diagnostic criteria and long-term health risks related to polycystic ovary syndrome（PCOS）[J].Hum Reprod，2004，19（1）： 41-47.

[9]哈靈俠.寧夏地區(qū)回族多囊卵巢綜合征糖脂代謝分析及相關(guān)基因的研究[D].濟南：山東大學(xué)，2015.

[10]湯艷，王映霞，靳曉丹，等.多囊卵巢綜合征患者經(jīng)陰道超聲檢查參數(shù)、抗苗勒氏管激素水平及臨床意義[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2018，15（35）：90-93.

[11]Weenen C，Laven JS，Von Bergh AR，et al.Anti-Mullerian hormone expression pattern in the human ovary：potential implications for initial and cyclic follicle recruitment[J].Mol Hum Reprod，2004，10（2）：77-83.

[12]Song J，Luo S，Li SW.miRNA-592 is downregulated and may target LHCGR in polycystic ovary syndrome patients[J].Reprod Biol，2015，15（4）：229-237.

[13]邵文，王克芳.抗苗勒管激素與多囊卵巢綜合征的相關(guān)性研究[J].中國醫(yī)藥，2018，13（5）：747-750.

[14]王鵬.DNA甲基化異常與多囊卵巢綜合征的關(guān)系及機制研究[D].濟南：山東大學(xué)，2014.

[15]Eppig JJ，OBrien MJ，Pendola FL，et al.Factors affecting the developmental competence of mouse oocytes grown in vitro：follicle-stimulating hormone and insulin[J].Biol Reprod，1998，59（6）：1445-1453.

[16]Lindeberg M，Carlstrom K，Ritvos O，et al.Gonadotrophin stimulation of non-luteinized granulosa cells increases steroid production and the expression of enzymes involved in estrogen and progesterone synthesis[J].Hum Reprod，2007，22（2）：401-406.

（收稿日期：2019-07-19 修回日期：2019-09-27）

（編輯：梁明佩）

基金項目：百色市科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計劃項目（百科20182508）

作者簡介：龐曉霞，女，檢驗技師，醫(yī)學(xué)學(xué)士，在讀碩士研究生，研究方向：不孕不育的分子遺傳學(xué)。E-mail：564628657@qq.com

通信作者：羅小瓊。E-mail：nongbb@126.com

王俊利。E-mail：baisewangjunli@163.com

[本文引用格式]龐曉霞，石鳳，覃莉，等.廣西壯族PCOS患者及其亞組的臨床特征分析和血清LHCGR的表達(dá)研究[J].右江醫(yī)學(xué)，2019，47（11）：815-820.