閆 琳，李 瑩，楊舒然，李 寧，楊大進(jìn)

廣州管圓線蟲是一種重要的食源性寄生蟲，成蟲寄生于鼠類肺部血管，幼蟲可侵入人體中樞神經(jīng)系統(tǒng)引起嗜酸性粒細(xì)胞增多性腦膜腦炎或腦膜炎，稱為廣州管圓線蟲病[1]。褐云瑪瑙螺和福壽螺等螺類是廣州管圓線蟲的重要的中間宿主，當(dāng)人食入了生的或未煮熟的帶蟲中間宿主可導(dǎo)致感染。1945年在中國臺灣發(fā)現(xiàn)首例人體廣州管圓線蟲病[2]，此后在東南亞和太平洋各島嶼有病例發(fā)現(xiàn)，目前全球范圍內(nèi)已有30多個國家報道過該病例，主要集中在熱帶和亞熱帶地區(qū)[3]。近年來，隨著人們飲食結(jié)構(gòu)的變化和食物的多樣化，各種生、鮮螺類越來越多地被人們食用，罹患廣州管圓線蟲病的風(fēng)險也在不斷增加，我國各地報告病例逐漸增多，特別是幾次疾病的暴發(fā)，引起廣泛的社會關(guān)注，如1997年浙江溫州市和2006年北京發(fā)生因生食半生食福壽螺導(dǎo)致的廣州管圓線蟲病暴發(fā)流行，一次暴發(fā)患病人數(shù)分別高達(dá)60人和160人[4-5]。2006-2007年在我國首次開展了廣州管圓線蟲的全國調(diào)查[6]，為開展廣州管圓線蟲病的防治提供了依據(jù)，現(xiàn)在已過去10年之久，而近期對該寄生蟲的調(diào)查多局限于個別地區(qū)。為了解目前我國鮮活螺中廣州管圓線蟲的感染情況和特點，了解其變化情況和趨勢，2017年在8個省份開展調(diào)查研究。

1 材料與方法

1.1樣品采集 根據(jù)文獻(xiàn)報道的廣州管圓線蟲的自然疫源地和可能的流行區(qū)，選擇江蘇、福建、江西、廣東、廣西、海南、重慶、云南8省開展調(diào)查，采用分層隨機(jī)抽樣，每個省份選擇數(shù)個地市級進(jìn)行采樣。螺的種類選擇福壽螺、褐云瑪瑙螺、環(huán)棱螺3種廣州管圓線蟲的主要中間宿主，此外還包括消費量大的圓田螺等其他螺類。樣品采自流通環(huán)節(jié)(主要為農(nóng)貿(mào)市場)、餐飲環(huán)節(jié)、養(yǎng)殖環(huán)節(jié)和自然環(huán)境(公園、水塘等)。采樣時間為4-10月。

1.2檢驗方法 采用消化法。將螺用石臼輕敲碎、剔殼、洗凈，將軟體剪成小塊放入攪拌機(jī)或均質(zhì)器內(nèi)，加入少量清水，低速攪拌15～20 s，然后按1∶25比例加入人工消化液(每10 g樣品加消化液250 mL)，充分?jǐn)嚢?，?7 ℃溫箱1.5～2 h，使樣品充分消化。將消化后的樣品用篩網(wǎng)過濾，靜置沉淀，傾去上清，取沉渣置于培養(yǎng)皿中，在解剖鏡檢查廣州管圓線蟲3期幼蟲。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 22.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，利用χ2檢驗對不同種類、不同采樣地點等螺中的廣州管圓線蟲的感染情況進(jìn)行比較，以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)。

2 結(jié) 果

2.1螺類感染情況 共采集螺1 517只，廣州管圓線蟲的平均感染率為9.62%(146/1 517)。其中褐云瑪瑙螺的感染率最高，達(dá)16.78%(24/143)，其次為福壽螺13.91%(79/568)，環(huán)棱螺和圓田螺中的感染率在6%左右，其他螺類未檢出。不同種類螺的感染率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=41.204，P<0.05)。各種螺類的感染情況見表1。

表1 不同種類螺類中廣州管圓線蟲的感染情況

Tab.1Angiostrongyluscantonensisprevalence in different kinds of snails

螺的種類檢查數(shù)感染數(shù) 感染率(%)95%CI(%)褐云瑪瑙螺1432416.78(10.66,22.91)福壽螺5687913.91(11.06,16.75)圓田螺514316.03(3.97,8.09)環(huán)棱螺192126.25(2.83,9.67)其他螺類10000.00(0.00,0.00)合計1 5171469.62(8.14,11.11)

2.2不同月份的感染情況 樣品采自4-10月，感染率從4月起逐漸上升，至7月達(dá)到最高，為14.02%(23/164)，然后逐漸下降。6-9月采集的螺中廣州管圓線蟲的感染率在10.11%～14.02%，顯著高于4月、5月、10月的感染率(4.24%～6.22%)，不同月份的感染情況差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=19.031，P=0.004<0.05)，具體見圖1。

圖1 不同月份螺類中廣州管圓線蟲的感染情況Fig.1 Angiostrongylus cantonensis prevalence in different sampled months

2.3不同地區(qū)的感染情況 不同地區(qū)廣州管圓線蟲感染率差異較大，福建和廣西的感染率分別高達(dá)34.09%和33.50%，其次為云南(14.54%)，江蘇、海南和廣東的感染率在0.51%～5.91%，江西、重慶未發(fā)現(xiàn)陽性樣品，不同地區(qū)的感染情況見表2。對3個高感染地區(qū)福建、廣西和云南細(xì)化地區(qū)和螺的種類進(jìn)行分析，具體見表3。

2.4不同采樣地點的感染情況 樣品采自流通環(huán)節(jié)(主要為農(nóng)貿(mào)市場)、餐飲環(huán)節(jié)、養(yǎng)殖環(huán)節(jié)和自然環(huán)境(公園、水塘等)，自然環(huán)境螺類中廣州管圓線蟲的感染率最高，達(dá)22.28%(43/193)，其次是流通環(huán)節(jié)和餐飲環(huán)節(jié)，感染率分別為8.11%(97/1 196)和6.19%(6/97)，養(yǎng)殖環(huán)節(jié)采集31只螺，均未發(fā)現(xiàn)廣州管圓線蟲幼蟲，結(jié)果見圖2，不同采樣地點的感染情況差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=41.204，P=0.000<0.05)。

表2 不同地區(qū)螺類中廣州管圓線蟲的感染情況

Tab.2Angiostrongyluscantonensisprevalence in different provinces

圖2 不同采樣地點螺中廣州管圓線蟲的感染情況Fig.2 Angiostrongylus cantonensis prevalence in different sampled places

表3 高感染地區(qū)各種螺類中廣州管圓線蟲的感染情況

Tab.3Angiostrongyluscantonensisprevalence in high infection provinces

地區(qū)褐云瑪瑙螺福壽螺圓田螺環(huán)棱螺檢查數(shù)感染數(shù)感染率(%)檢查數(shù)感染數(shù)感染率(%)檢查數(shù)感染數(shù)感染率(%)檢查數(shù)感染數(shù)感染率(%)福建00—592949.152100.008112.50 福州00—32—2000.008112.50 廈門00—562748.2110—00—廣西50—823036.59882730.68241041.67 百色00—2042000—00— 崇左50—155—00—00— 桂林00—2094500—00— 河池00—00—341029.4150— 賀州00—00—20840.0000— 來賓00—74—60—72— 柳州00—00—84—128— 南寧00—2084000—00— 梧州00—00—205—00—云南321856.25871112.644336.986511.54 大理00—132—00—2900.00 德宏10—203—00—00— 紅河261350.0080—4336.9830— 昆明00—2414.1700—80— 西雙版納55—22522.7300—2514.00合計371848.652287030.71523019.74971212.37

注：檢查數(shù)<20的未計算感染率，用“—”表示。

其他螺類僅廣西采集1只，未發(fā)現(xiàn)感染，故未列在表中。

3 討 論

本研究鮮活螺樣品采集自我國8個省份，廣州管圓線蟲的平均感染率為9.62%(146/1517)，其中廣西和福建的感染率最高(分別為34.09%和33.50%)，其次為云南(14.54%)，其他5個地區(qū)感染率較低或者未檢出，說明廣西、福建和云南為我國廣州管圓線蟲的重要疫源地。這3個地區(qū)氣候潮濕多雨，適宜廣州管圓線蟲的生存，也適宜其中間宿主螺類的繁殖。既往研究顯示上述地區(qū)螺類中持續(xù)存在廣州管圓線蟲的感染，并且出現(xiàn)多起疾病的暴發(fā)流行。2006-2007年在我國19個省的調(diào)查也顯示廣西和福建是廣州管圓線蟲的流行地區(qū)，是感染福壽螺的聚集地，廣西和福建福壽螺的感染率分別高達(dá)19.28%和28.40%[6]。2009-2012年李莉莎等[7]采集福建省福州、廈門兩地福壽螺，其廣州管圓線蟲的感染率在8.4%～16.7%，呈逐年增高的趨勢。2007-2014年汪麗波等[8]對云南省25個縣進(jìn)行調(diào)查，18個縣有福壽螺分布，平均感染率9.7%(56/5 124)，不同縣集貿(mào)市場感染率在2.00%～19.56%。本次調(diào)查顯示：2017年廣西、福建和云南福壽螺的感染率分別為36.59%(30/82)、49.15%(29/59)和12.64%(11/87)，高于既往數(shù)據(jù)。1968-2017年全國廣州管圓線蟲病確診病例521例，其中云南143例，福建36例[9]，與這兩個地區(qū)高感染率是一致的，但廣西僅確診1例，與其高感染率不符，可能與當(dāng)?shù)剌^少生食有關(guān)，具體原因還有待進(jìn)一步調(diào)查。

鼠類是廣州管圓線蟲的終宿主，螺類是廣州管圓線蟲的主要中間宿主，也是各種鼠類喜吃的食物，鼠類一旦吃進(jìn)感染該蟲的螺類即成終宿主，且不斷排出含有幼蟲的糞便，而螺類又喜吃各種老鼠的糞便，因此造成廣州管圓線蟲在螺、鼠之間不斷的循環(huán)傳播[10]。研究顯示廣州管圓線蟲在中間宿主螺和終宿主鼠感染情況呈顯著的相關(guān)性[9]。

各種螺類中，褐云瑪瑙螺中廣州管圓線蟲的感染率最高，達(dá)16.78%(24/143)，其次為福壽螺13.91%(79/568)，環(huán)棱螺和圓田螺中的感染率在6%左右。不同螺類中廣州管圓線蟲的感染率差異大，推測與螺的生活習(xí)性有關(guān)。褐云瑪瑙螺為陸生螺，在陸地上易覓食到鼠糞，感染機(jī)會多，據(jù)國內(nèi)外文獻(xiàn)報道，其廣州管圓線蟲的感染率在15.38%～78.70%[11-13]。福壽螺為水陸兩棲螺，對環(huán)境的適應(yīng)性強(qiáng)，分布廣，可在陸地和水體中接觸鼠糞，故感染廣州管圓線蟲機(jī)會較多[14]，各地感染率在8.40%～27.14%[15-17]。圓田螺、環(huán)棱螺和其他采集的螺類均為水生螺，只有老鼠糞便直接排入水中才有機(jī)會感染，因此感染率相對低。

2006-2007年的全國調(diào)查顯示褐云瑪瑙螺和福壽螺是我國廣州管圓線蟲的主要中間宿主，感染率分別為13.4%和6.8%，其他螺類僅0.05%～0.3%[6]。本次調(diào)查結(jié)果顯示褐云瑪瑙螺和福壽螺依然是我國廣州管圓線蟲最主要的宿主螺類，且兩種螺的總體感染率較10年前有所增加，特別是廣西、福建地區(qū)。福壽螺的市場銷售量大，食用人數(shù)多，其外觀與田螺相似，由于其價格低廉，部分黑心商家用福壽螺來冒充田螺，故福壽螺對人群健康的風(fēng)險相對最高，流行病學(xué)意義更重要。據(jù)福建省調(diào)查顯示，食用福壽螺、褐云瑪瑙螺感染者分別占廣州管圓線蟲病病例的56.90%和22.41%[18]。說明在預(yù)防控制廣州管圓線蟲病時，需要重點關(guān)注這兩種螺，特別是福壽螺。此外環(huán)棱螺和圓田螺的感染率比10年前明顯增加，既往對這兩種螺類關(guān)注較少，近幾年研究顯示未檢出蟲體或僅個別檢出[7-8]，可能與采樣點局限在個別地區(qū)且樣品量較少有關(guān)，考慮到兩種螺類的人群消費量及本次調(diào)查的感染率，環(huán)棱螺和圓田螺中廣州管圓線蟲的感染情況也需引起重視。

不同類型采樣地點螺中廣州管圓線蟲的感染率存在差異，自然環(huán)境的感染率高，為22.28%(43/193)，這與自然環(huán)境選擇流行地區(qū)采樣相關(guān)，某研究在廣西南寧市7個公共綠地調(diào)查發(fā)現(xiàn)褐云瑪瑙螺中廣州管圓線蟲平均感染率為61.38%(348/567)，最高達(dá)98.84%(85/86)[19]。流通環(huán)節(jié)和餐飲環(huán)節(jié)的感染率低于自然環(huán)境，這與流通環(huán)節(jié)和餐飲環(huán)節(jié)的樣品來源復(fù)雜，分布廣有關(guān)。

本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，4-10月螺中廣州管圓線蟲的感染率呈先逐漸增加再下降的趨勢，其中6-9月的感染率顯著高于其他月份的結(jié)果。某研究表明，低于15 ℃時廣州管圓線中的幼蟲在螺體內(nèi)不發(fā)育[20]。冬季過后，隨著溫度的升高，原本深藏洞穴和泥土冬眠的螺類開始爬出活動并發(fā)育繁殖，5-8月是螺的繁殖盛期，螺的數(shù)量逐漸增加，同時鼠類的活動范圍也明顯增加，廣州管圓線蟲通過螺鼠間循環(huán)傳播，導(dǎo)致螺中的感染率不斷增加[21]。10月后溫度下降，螺的繁殖變慢且活動范圍縮小逐步轉(zhuǎn)入地下，與鼠類接觸減少，故感染率降低。

不當(dāng)?shù)募庸し绞胶筒糠值貐^(qū)傳統(tǒng)的飲食習(xí)慣增加了廣州管圓線蟲感染的風(fēng)險。人感染廣州管圓線蟲主要是通過生食或半生食螺類引起，占廣州管圓線蟲病總病例數(shù)的92.36%[9]。螺肉全熟后變得又老又硬，不脆難咬，故飯店多炒至半熟，甚至將螺片置冰塊上供食客生食，極易感染。在我國部分地區(qū)有生食螺肉的習(xí)慣，如云南省大理州白族地區(qū)，當(dāng)?shù)厥吃葱约纳x感染時有發(fā)生。2008年大理出現(xiàn)33人廣州管圓線蟲病暴發(fā)事件，之后雖然采取了宣傳教育措施，但在2011年又發(fā)生由于生食螺肉導(dǎo)致集體感染事件，且2010-2016年該地區(qū)共計60例廣州管圓線蟲病例，均有生食螺肉史，認(rèn)知調(diào)查顯示90%以上的病人此前并不知道食用涼拌螺或半生螺類可能罹患廣州管圓線蟲病[22-23]。高風(fēng)險地區(qū)的食品安全操作及宣傳教育還有待于進(jìn)一步加強(qiáng)。

本研究顯示我國南方部分地區(qū)鮮活螺中存在廣州管圓線蟲的感染，具有潛在的食品安全風(fēng)險。目前全球已累計報告廣州管圓線蟲病例多達(dá)2 800多例[22]，我國是主要的發(fā)病國家之一，該病病情復(fù)雜，易誤診誤治，給百姓健康和生活帶來沉重負(fù)擔(dān)。廣州管圓線蟲在螺、鼠之間不斷的循環(huán)傳播，因此滅鼠對控制廣州管圓線蟲病的流行起著重要作用。建議相關(guān)部門在流行區(qū)域大力開展滅鼠工作，減少傳染源。加大市售螺類的監(jiān)督管理，提高食品從業(yè)人員的衛(wèi)生知識和安全意識，做到生熟分開，防止交叉污染。此外，廣州管圓線蟲病經(jīng)口傳播，應(yīng)加大宣傳教育，讓消費者認(rèn)識到螺類中存在寄生蟲及可能導(dǎo)致的危害，把好“病從口入”關(guān)，引導(dǎo)百姓建立良好的飲食習(xí)慣和衛(wèi)生習(xí)慣，不食用生螺或未熟的螺肉，減少疾病的發(fā)生。

(致謝：參與此次調(diào)查研究的江蘇、福建、江西、廣東、廣西、海南、重慶、云南省疾病預(yù)防控制中心的老師們!)

利益沖突：無