蘇瑩瑩 李春艷 李迪

摘?要?膜融合對于生物體的生命活動具有重要的調(diào)控作用。細(xì)胞內(nèi)的膜融合在生物體的整個生命周期中發(fā)揮了促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)的作用，病毒和細(xì)胞膜的融合可能標(biāo)志著生物體生命的終結(jié)。然而，由于活細(xì)胞的復(fù)雜性，對細(xì)胞內(nèi)膜融合過程的認(rèn)識僅局限于少數(shù)細(xì)胞膜上的蛋白結(jié)構(gòu)，如可溶性N-乙基馬來酰亞胺敏感性因子附著型的蛋白受體（Soluble N-ethyl maleimide sensitive factor attachment protein receptors，SNARE）及其在促進(jìn)膜融合中的作用。為更好地研究膜融合的機(jī)理，常用相關(guān)人工模型系統(tǒng)模擬生物膜融合。本文對SNARE促進(jìn)膜融合的機(jī)理、DNA及卷曲螺旋多肽介導(dǎo)的膜融合研究進(jìn)展，以及膜融合在藥物運(yùn)輸?shù)确矫娴膽?yīng)用進(jìn)行了概述。

關(guān)鍵詞?膜融合; N-乙基馬來酰亞胺敏感性因子附著型的蛋白受體; DNA; 評述

1?引 言

生物膜融合是一種常見的細(xì)胞生理現(xiàn)象，對調(diào)控生物分子的運(yùn)輸、攝取及釋放具有至關(guān)重要的作用[1]，如膜融合調(diào)控神經(jīng)元之間的信號傳導(dǎo)過程、細(xì)胞內(nèi)的胞吞和胞吐過程[2]、病毒轉(zhuǎn)染[3]和囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)過程。生物膜上的蛋白和其它生物大分子之間的靜電斥力使生物體內(nèi)生物膜之間的距離在10～20 nm之間。因此，膜融合的第一步是拉近生物膜之間距離至幾個納米。膜的緊密接觸伴隨著磷脂雙分子層結(jié)構(gòu)的局部破壞，導(dǎo)致柄狀結(jié)構(gòu)的形成。在莖的中間部分，距離較近的脂質(zhì)雙層膜的外膜首先發(fā)生融合。通常認(rèn)為，莖可擴(kuò)張成半融合隔膜，其內(nèi)層脂質(zhì)是分開的。在最終的脂質(zhì)重排過程中，半融合柄或者隔膜形成一個小孔，隨著融合的進(jìn)行，這兩個小孔逐漸增大，使最初的兩個脂室變成一個，并將各室所包含的物質(zhì)混合在一起，完成融合過程，如圖1A所示[4]。盡管細(xì)胞內(nèi)的膜融合和病毒融合的蛋白質(zhì)機(jī)制有很大的不同，但在融合過程中發(fā)生的脂質(zhì)雙層間的物理變化是相似的。一般認(rèn)為真核細(xì)胞中的膜融合是由可溶性N-乙基馬來酰亞胺敏感性因子附著型的蛋白受體（Soluble N-ethyl maleimide sensitive factor attachment protein receptors，SNARE）控制。膜融合的大部分?jǐn)?shù)據(jù)是基于SNARE蛋白研究獲取的[5，6]。膜融合過程發(fā)生之前，膜上的兩組蛋白分別由兩個卷曲螺旋區(qū)域組成，相互作用形成具有四螺旋結(jié)構(gòu)的SNARE復(fù)合物，如圖1B所示。SNARE蛋白在膜融合過程中所起作用可由兩種機(jī)理解釋：蛋白將兩個磷脂層拉在一起，促進(jìn)半融合及全融合過程，如圖1A（a）; 另一種，SNARE先分別在單邊的跨膜區(qū)域形成融合孔，當(dāng)融合孔擴(kuò)大后，跨膜區(qū)域會分開，磷脂參與融合孔中，繼而發(fā)生融合，如圖1A（b）。研究表明，SNARE復(fù)合物可將兩個分子膜拉近至2～3 nm[7]。

研究膜融合的主要方法有以下兩種： 第一種方法是使用已知的融合蛋白。這些蛋白可在體外進(jìn)行表達(dá)，也可用于體內(nèi)的融合系統(tǒng)。由于體內(nèi)系統(tǒng)中有很多蛋白參與此過程，所以在體內(nèi)很難將某種蛋白的影響進(jìn)行獨(dú)立研究。此外，由于生物體內(nèi)部組成的復(fù)雜性，體內(nèi)的脂質(zhì)重組研究也常會得到對立的結(jié)果。如生物體內(nèi)常存在密度不均勻的蛋白質(zhì)及大小不均勻的脂質(zhì)體等，這些都會導(dǎo)致不穩(wěn)定融合事件的發(fā)生。第二種方法通過合成觸發(fā)膜融合的類似物，深入了解蛋白質(zhì)誘導(dǎo)的膜融合的發(fā)生機(jī)制。常見的膜融合類似物包括源于自然蛋白的膜融合肽及利用互補(bǔ)的DNA鏈。在膜融合肽誘導(dǎo)的膜融合過程中，多肽在脂質(zhì)雙層中以螺旋結(jié)構(gòu)存在，導(dǎo)致脂質(zhì)膜不穩(wěn)定，促使其發(fā)生融合。如病毒和細(xì)胞的融合（圖1C）[4]，兩種融合膜之間沒有特異性識別分子，只是融合肽和磷脂膜之間的相互作用即可促進(jìn)膜的融合。而DNA鏈誘導(dǎo)的膜融合則是通過錨定在不同脂質(zhì)膜上的DNA堿基互補(bǔ)配對促進(jìn)膜融合。DNA分子鏈具有高度選擇性且易于合成的優(yōu)點(diǎn)，DNA納米技術(shù)具有可編程性，將膜融合和DNA相結(jié)合，拓寬了膜融合的研究領(lǐng)域。Hook等曾通過對DNA鏈進(jìn)行膽固醇功能化修飾，將DNA鏈輕易地嵌入磷脂雙分子層中，然后利用互補(bǔ)的DNA分子鏈之間的雜交反應(yīng)將兩個脂質(zhì)膜結(jié)合在一起[8]。

2?SNARE促進(jìn)膜融合的機(jī)理研究

在生物學(xué)上，融合蛋白作為促進(jìn)膜融合的催化劑可幫助兩個生物膜克服融合過程中生物膜之間的排斥力，進(jìn)而促進(jìn)膜融合[8]。常見的融合蛋白有SNARE蛋白及病毒融合蛋白[9]。SNARE蛋白是一類生物膜上細(xì)胞間特異性和細(xì)胞質(zhì)靶向蛋白的總稱，SNARE假說認(rèn)為SNARE蛋白由囊泡（v-）SNARE、目標(biāo)（t-）SNARE、N-乙基順丁烯二酰亞胺敏感性的融合蛋白（N-ethylmaleimide-sensitive factor，NSF）和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的可溶性NSF附著蛋白（Soluble NSF attachment protein，SNAP）組成。即使在NSF和SNAP不存在的情況下，囊泡（v-）和目標(biāo)（t-）SNAREs也會形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)[11]。囊泡融合是最早發(fā)現(xiàn)的SNARE介導(dǎo)的一類膜融合，在融合過程中，SNARE蛋白的復(fù)合結(jié)構(gòu)可誘導(dǎo)后續(xù)的膜融合，SNARE蛋白由疏水的碳末端跨膜域和水溶性的N端區(qū)域組成。在識別過程中，最初未結(jié)構(gòu)化的SNARE模體自組裝成四螺旋束，這種四螺旋束能被特定的蛋白解離。通常，螺旋束從氮末端開始形成，之后像拉鏈一樣向跨膜區(qū)移動，這種移動過程會對脂質(zhì)膜產(chǎn)生壓力，促進(jìn)融合孔的生成，繼而發(fā)生膜融合。病毒融合蛋白對于病毒進(jìn)入細(xì)胞的過程起重要作用。病毒入侵細(xì)胞的過程，首先是包裹在病毒周圍的融合多肽先嵌入宿主細(xì)胞的細(xì)胞膜，使融合蛋白的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，繼而推動兩個生物膜發(fā)生融合。融合多肽也可通過擾動宿主細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)促進(jìn)膜融合，這與SNARE蛋白的組成幾乎相似，即融合蛋白產(chǎn)生一個內(nèi)在的力，推動兩個生物膜發(fā)生接觸，最后導(dǎo)致膜融合。

此外，研究發(fā)現(xiàn)，具有卷曲螺旋序列的SNARE模體，可通過相互之間的平行作用形成SNARE復(fù)合結(jié)構(gòu)，如圖2所示[12，13]。這種復(fù)合結(jié)構(gòu)緊鄰跨膜區(qū)，表明SNARE復(fù)合結(jié)構(gòu)的自組裝可將突出囊泡和脂質(zhì)體膜結(jié)合在一起，SNARE復(fù)合結(jié)構(gòu)可提供膜融合所需能量。隨后，神經(jīng)元的SNARE結(jié)構(gòu)被證實是由4個平行的α-螺旋組成，2個來自SNAP-25，另外2個分別來自突出融合蛋白和突觸泡蛋白，不同膜上SNAREs蛋白的表征顯示SNARE結(jié)構(gòu)具有相似的四螺旋柱狀結(jié)構(gòu)。

3?天然膜融合蛋白類似物促進(jìn)膜融合的研究

3.1?通過DNA修飾的脂質(zhì)體研究膜融合過程

生物膜融合由SNARE家族蛋白嚴(yán)格調(diào)控，轉(zhuǎn)運(yùn)小泡和目標(biāo)蛋白分子間通過特異性識別發(fā)生相互作用，生成SNARE蛋白復(fù)合物，促使組成細(xì)胞膜的磷脂進(jìn)行重組，使相鄰的脂質(zhì)層發(fā)生融合。受SNARE促進(jìn)膜融合機(jī)理的啟發(fā)，Stengel等[8]利用膽固醇修飾的DNA鏈模擬這種識別過程，如圖3A所示，疏水端的膽固醇可自發(fā)地嵌入磷脂層，并作為DNA嵌入磷脂層的錨定端，這種膽固醇修飾的DNA鏈具有定向性，使雜交發(fā)生在鏈?zhǔn)絽^(qū)，具有互補(bǔ)序列的DNA鏈修飾的囊泡被拉近，進(jìn)而促進(jìn)膜融合。研究發(fā)現(xiàn)，嵌入膜內(nèi)的DNA鏈的數(shù)量對膜融合的速率有很大影響?；旌狭字哂休^高的融合效率和融合速率。 Beales等[14]的研究表明，DNA作為可促進(jìn)膜融合的配受體對，其螺旋的穩(wěn)定性受內(nèi)膜的表面張力調(diào)控，并且脂質(zhì)組成對嵌入脂質(zhì)體表面的互補(bǔ)DNA的融合溫度有很大影響。

2009年，Chan等[15]研究了不同DNA鏈的序列對DNA介導(dǎo)的膜融合的影響，通過在DNA鏈的不同端修飾磷脂，嵌入脂質(zhì)層之后的互補(bǔ)DNA可形成反向平行雜交，這種雜交方式可拉近兩個膜。然而，在2007年，他們在單個囊泡與基底脂質(zhì)層融合的實驗中觀察到，由磷脂修飾的DNA介導(dǎo)的膜融合過程中，70%的膜融合處于半融合狀態(tài)，只有5%的融合處于全融合狀態(tài)，如圖3B所示[16]。他們認(rèn)為，這可能是錨定在磷脂膜的DNA的甘油醚只插入了磷脂層的一半，半融合后，磷脂修飾的DNA在目標(biāo)膜中處于自由擴(kuò)散的狀態(tài)從而遠(yuǎn)離脂質(zhì)體。為了驗證這個猜想，他們引入茄尼醇修飾的DNA，茄尼醇是一類C45的類戊二烯醇，當(dāng)茄尼醇只存在于發(fā)生融合的其中一個囊泡或者兩者都有時，膜融合的速率提高了2～3倍，這些結(jié)果表明跨膜的錨定基團(tuán)可提高膜融合的效率。

磷脂修飾的DNA鏈不僅能誘導(dǎo)膜融合，而且可輔助SNARE介導(dǎo)膜融合。2015年，Xu等[17]利用磷脂修飾的DNA實時調(diào)控SNARE在膜融合中的作用。磷脂修飾的DNA鏈由21個堿基對組成，將其嵌在膜遠(yuǎn)端，通過堿基之間特異性互補(bǔ)雜交可將兩個脂質(zhì)體橋連在一起，嵌入在膜近端的一條鏈用于控制脂質(zhì)體之間的間隔距離。利用DNA的互補(bǔ)配對拉近膜距離的同時，t-SNARE和v-SNARE隨著距離的拉近發(fā)生相互作用，從而形成SNARE復(fù)合物，當(dāng)DNA的堿基數(shù)低于40時，可得到最大融合效率。作為一種操縱本地蛋白程序化的工具，磷脂修飾的DNA可用于調(diào)控其它生物過程。2018年，Sun等[18]利用DNA編程介導(dǎo)的膜融合策略，發(fā)展了向活細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有效遞送蛋白質(zhì)的方法。

在DNA介導(dǎo)的單個融合事件的研究手段成熟之后，Loffler等[19]利用DNA的可編程性研究了膜融合的級聯(lián)反應(yīng)。磷脂修飾的DNA介導(dǎo)的膜融合為自上而下地構(gòu)建納米反應(yīng)器提供了一個模板。DNA介導(dǎo)的級聯(lián)膜融合所需溫度低至50℃，這對于研究在脂質(zhì)體限域的水相反應(yīng)中調(diào)控水的活性對反應(yīng)的影響有極大的應(yīng)用潛能。有效的程序融合可促進(jìn)新的自下而上合成生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，如多成分人工細(xì)胞系統(tǒng)技術(shù)。這種具有靶向細(xì)胞膜特定位點(diǎn)脂質(zhì)體的融合技術(shù)在藥物靶向及基因傳遞方面有重要的應(yīng)用前景。

隨著DNA技術(shù)的發(fā)展，DNA納米結(jié)構(gòu)在細(xì)胞膜上的自組裝已成為一個強(qiáng)有力的研究工具[20]。與天然的生物膜相比，合成的磷脂膜結(jié)構(gòu)比較簡單，更利于模型構(gòu)建[21]。2017年，Peng等[22]在模擬細(xì)胞微環(huán)境的脂質(zhì)體膜上，實現(xiàn)了DNA納米柱的自組裝及自組裝的解離的過程。具有DNA手臂鏈的三維DNA納米柱可通過膽固醇修飾固定在膜表面。通過DNA鏈之間的雜交及腳手鏈介導(dǎo)的鏈置換可有效地調(diào)控DNA納米柱的自組裝。

3.2?利用卷曲螺旋多肽建立的膜融合研究模型

以上研究方法多是模擬了膜融合的過程，簡要概括了膜融合的基本特征。這些研究所用的模型多是脂質(zhì)體和脂質(zhì)體的融合，并未將融合事件擴(kuò)展至活細(xì)胞的研究上，這在很大程度上限制了膜融合在藥物遞送方面的研究。2016年，Mora等[23]受SNARE蛋白結(jié)構(gòu)啟發(fā)，建立了利用卷曲螺旋肽互補(bǔ)的相互作用進(jìn)行完全人工模擬的靶向膜融合模型。這個模型和SNARE介導(dǎo)的膜融合有類似的關(guān)鍵性特征。

超分子化學(xué)的發(fā)展為功能材料的設(shè)計提供了很多便捷方法。細(xì)胞膜內(nèi)的蛋白由于相互間的靜電斥力而很難發(fā)生相互作用，大分子之間的疏水相互作用則可彌補(bǔ)這方面的不足?；诘鞍踪|(zhì)之間的疏水相互作用，可對膜融合進(jìn)行特異性調(diào)控[24]。設(shè)計互補(bǔ)的卷曲螺旋組成脂肽嵌入脂質(zhì)體膜中，可有效且快速調(diào)控靶向性膜融合[23，25～28]。此類膜融合脂質(zhì)體是通過將磷脂和脂肽融合在有機(jī)溶劑中制備[27]。 Versluis等[29]設(shè)計了一種可基于互補(bǔ)脂肽對的，快速促進(jìn)膜融合的超分子系統(tǒng)。他們通過向普通脂質(zhì)體中添加水溶性的兩親性多肽誘導(dǎo)脂質(zhì)體膜融合。這種方法和常見的脂質(zhì)體制備的方法截然不同，普通脂質(zhì)體多基于融合肽、糖類、糖肽類及DNA復(fù)合物等，該方法可用于脂質(zhì)體和細(xì)胞膜的融合及細(xì)胞膜的刺激活化等[30]。

2013年，Zope等[31]利用光敏材料對促進(jìn)融合的肽進(jìn)行屏蔽，光敏材料的光誘導(dǎo)效應(yīng)可很快地去屏蔽，使肽鏈發(fā)生相互作用，從而促進(jìn)兩個脂質(zhì)體膜進(jìn)行融合，實現(xiàn)可控融合（圖4A）。2016年，Kong等[32]設(shè)計了一種基于卷曲螺旋組成的肽，通過其互補(bǔ)作用，靶向促進(jìn)膜融合（圖4B）。兩種卷曲螺旋肽分別為E和K，通過將E和K脂質(zhì)體混合在一起，膜融合可自發(fā)地進(jìn)行。在自然界中，膜融合受時間和空間的高度調(diào)控，從而保證融合的正確發(fā)生，維持生物體機(jī)能的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。同樣，其融合特性可用于載藥和基因運(yùn)輸?shù)哪と诤舷到y(tǒng)，從而控制膜融合發(fā)生的時間和部位。

4?膜融合研究在藥物運(yùn)輸方面的應(yīng)用

穿膜肽和脂質(zhì)體由于其良好的生物相容性和非入侵性而廣泛應(yīng)用于藥物運(yùn)輸?shù)难芯?。脂質(zhì)體的尺寸通常小于1 μm，是研究生物或生物物理膜性質(zhì)的常用模型; 另外，由于其生物相容性及低毒性，常被用作藥物運(yùn)輸系統(tǒng)。功能化修飾的脂質(zhì)體可向細(xì)胞質(zhì)內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)小分子，常見的功能分子有帶正電的磷脂、聚合物、抗體、細(xì)胞穿膜肽等。將水溶性的藥物分子包裹在脂質(zhì)體內(nèi)也是常用的藥物運(yùn)輸方法，但有關(guān)將親脂性的藥物包裹在脂質(zhì)體內(nèi)實現(xiàn)藥物運(yùn)輸?shù)难芯繄蟮垒^少。受細(xì)胞膜上SNARE蛋白的啟發(fā)，Mora等[23]開發(fā)了一種藥物運(yùn)輸系統(tǒng)用于靶向膜融合（圖5A），膜融合系統(tǒng)由兩條互補(bǔ)的兩親肽組成，兩條肽分別嵌在不同的膜上，其互補(bǔ)后形成的卷曲螺旋復(fù)合物可將兩個對立的細(xì)胞膜拉至較近的距離，從而促使膜融合的形成。

2017年，Yang等[33]利用脂質(zhì)層包裹的介孔二氧化硅納米顆粒，通過膜融合介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的傳遞。蛋白質(zhì)向細(xì)胞質(zhì)的運(yùn)輸是納米醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的一個具有挑戰(zhàn)性的課題，因為細(xì)胞攝取和溶酶體逃逸的效率很低，阻礙了其在臨床上的應(yīng)用。該工作設(shè)計了一種含有大孔徑（10 nm）圓盤狀腔的二氧化硅納米顆粒（MSNs），用于細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)遞送的研究，并以細(xì)胞色素C（cytC）為不透膜的蛋白質(zhì)研究模型。為確保膠體的穩(wěn)定性，MSNs表面涂覆了一個融合脂質(zhì)雙層（LB），細(xì)胞攝取由一對互補(bǔ)的卷曲螺旋肽誘導(dǎo)。卷曲螺旋肽誘導(dǎo)的膜融合可使細(xì)胞色素C有效地進(jìn)行細(xì)胞遞送，并引發(fā)細(xì)胞凋亡。在內(nèi)吞抑制劑的存在下，這些LB涂層MSNs的有效傳遞表明膜融合是細(xì)胞攝取的主要機(jī)制。這種用卷曲螺旋肽介導(dǎo)膜融合對于細(xì)胞內(nèi)有效遞送無機(jī)納米粒子或蛋白質(zhì)具有普適性。2018年，Bi等[34]利用脂質(zhì)包裹的磁性納米顆粒實現(xiàn)了磁場引發(fā)的藥物釋放，這種新的藥物遞送方法對于癌癥治療具有很大的應(yīng)用潛力。

互補(bǔ)的卷曲螺旋組成的肽鏈，如E4（（EIAALEK）4）和K4（（KIAALKE）4），其和脂質(zhì)體相連可組成一類常見的膜融合引發(fā)劑。受此啟發(fā)，Yang等[35]首次將這種卷曲螺旋肽用于藥物運(yùn)輸，制備E4肽修飾的脂質(zhì)體，并在其中包裹遠(yuǎn)紅外熒光素TOPRO-3碘負(fù)離子（E3-Lipo-TP3），結(jié)果表明，E4脂質(zhì)體可向膜表面表達(dá)K4肽的Hela細(xì)胞遞送TP3分子。此外，他們用脂質(zhì)體包裹E4-Lipo-DOX，證實該方法還可向細(xì)胞內(nèi)遞送DOX（圖5B）。將GUV（70% POPC和30%膽固醇）包裹的0.8 mmol/L光澤晶熒光染料和脂肽1孵育，得到功能化的GUV，隨后形成的二聚卷曲螺旋結(jié)構(gòu)可促使脂質(zhì)體的融合，從而實現(xiàn)目標(biāo)轉(zhuǎn)運(yùn)體3的靶向遞送。最后，在溶液中加入NaCl轉(zhuǎn)運(yùn)體3，將外部的氯化物轉(zhuǎn)化為內(nèi)部的鹽，導(dǎo)致脂質(zhì)體內(nèi)熒光素猝滅。研究表明，與游離的阿霉素相比，E4-Lipo-DOX具有更強(qiáng)的細(xì)胞毒性。為了證明E4/K4卷曲螺旋結(jié)構(gòu)適用于體內(nèi)的藥物運(yùn)輸，他們將E4-Lipo-DOX和E3-Lipo-TP3注射進(jìn)入移植有Hela-K的斑馬魚體內(nèi)，結(jié)果表明，E4脂質(zhì)體可進(jìn)入Hela-K細(xì)胞，E4-Lipo-DOX可抑制癌細(xì)胞的增殖。因此，卷曲螺旋結(jié)構(gòu)可有效且有選擇性地用于體內(nèi)的藥物運(yùn)輸。

5?總結(jié)與展望

脂質(zhì)轉(zhuǎn)染試劑及電穿孔試劑盒的開發(fā)研究對于細(xì)胞和活體的研究至關(guān)重要。然而，細(xì)胞及生物體是一個極其復(fù)雜的微環(huán)境，現(xiàn)有研究方法常具有復(fù)雜的機(jī)制，且其對細(xì)胞行為的影響不可預(yù)測。膜融合是所有生物體內(nèi)時刻都在發(fā)生，并且對于維持生物體的生命活動具有重要調(diào)控作用的事件，嚴(yán)格調(diào)控神經(jīng)突觸的傳導(dǎo)、內(nèi)吞、胞吐等生物過程。理解膜融合的基礎(chǔ)生物物理過程不僅有助于深入了解生命過程，而且能為材料科學(xué)開辟一個新的途徑，同時為藥物設(shè)計和基因的傳導(dǎo)提供一個強(qiáng)有力的工具。另一方面，膜融合和其它技術(shù)的結(jié)合，如DNA納米技術(shù)等，可很大程度上促進(jìn)膜融合領(lǐng)域的發(fā)展。但是，生物膜的組成并不像現(xiàn)有的研究設(shè)計模型那么簡單，其表面含有大量的蛋白及糖類，微小的刺激可能會引起細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)，而現(xiàn)有的研究方法并不能對所有細(xì)胞產(chǎn)生的行為進(jìn)行合理的解釋。建立正確的膜融合系統(tǒng)，使其組成更加接近真實的生物狀態(tài)，有助于深入了解生物的生命過程。

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