楊錫彤 徐弘揚(yáng) 馬 蓉 王光明

(大理大學(xué)第一附屬醫(yī)院1 基因檢測中心，2 神經(jīng)內(nèi)科，云南省大理市 671000，電子郵箱：836826492@qq.com)

缺血性腦卒中具有高發(fā)病率、高致殘率、高死亡率及高復(fù)發(fā)率等特點(diǎn)[1]。全球每年新增的缺血性腦卒中患者約為1 500萬，其中死亡者占20%，而失去自理能力者比例高達(dá)50%[2]。缺血性腦卒中是一種多因素導(dǎo)致的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，而流行病學(xué)研究表明其發(fā)生與遺傳因素有較大的關(guān)系[3]。因此，探索缺血性腦卒中的遺傳易感因素有助于篩查高危人群，從而達(dá)到一級預(yù)防的效果。

整合素是一種以二聚體形式存在于細(xì)胞表面的受體，由α和β亞基構(gòu)成，其能聯(lián)系細(xì)胞外基質(zhì)和調(diào)控胞內(nèi)的細(xì)胞支架與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而調(diào)控細(xì)胞的黏附、生存、分化、生長和遷移[4]。目前發(fā)現(xiàn)人體內(nèi)至少存在25種整合素，其中整合素α2是整合素家族重要的成員，其在血小板黏附、聚集及動(dòng)脈粥樣硬化性疾病形成中起重要作用[5]。整合素α2基因807位點(diǎn)(C或T)和873位點(diǎn)(G或A)存在多態(tài)性，與冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化、腦膠質(zhì)瘤等多種疾病相關(guān)[6]。既往國外相關(guān)研究結(jié)果顯示，整合素α2是北美人群患缺血性腦卒中的重要易感因素[7]；國內(nèi)相關(guān)研究也結(jié)果顯示，整合素α2基因807位點(diǎn)多態(tài)性與缺血性腦卒中具有相關(guān)性[8]。因此，我們推測整合素α2基因807位點(diǎn)的多態(tài)性可能與缺血性腦卒中的發(fā)病機(jī)制有關(guān)聯(lián)。本研究系統(tǒng)評價(jià)整合素α2基因807位點(diǎn)多態(tài)性與缺血性腦卒中的相關(guān)性，以期為相關(guān)臨床研究提供循證醫(yī)學(xué)參考。

1 資料與方法

1.1 檢索策略 在Cochrane Library、PubMed及中國知網(wǎng)、維普、萬方等數(shù)據(jù)庫中，檢索有關(guān)缺血性腦卒中與整合素α2基因807位點(diǎn)基因多態(tài)性相關(guān)性的文獻(xiàn)。為提高查全率和減少漏查率，進(jìn)一步對入選文獻(xiàn)的參考文獻(xiàn)進(jìn)行擴(kuò)大檢索，輔以文獻(xiàn)追溯法查找相關(guān)文獻(xiàn)。檢索時(shí)限為建庫至2018年9月。中文數(shù)據(jù)庫所用檢索詞主要為整合素α2、血小板糖蛋白、ITGA 2、缺血性腦卒中、腦梗死、腦缺血，外文數(shù)據(jù)庫所用檢索詞主要為integrin-α2、platelet glycoprotein、alpha 2、stroke、cerebral infarction、ischemia。

1.2 文獻(xiàn)納入及排除標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn)：① 納入的研究為評估整合素α2基因807位點(diǎn)多態(tài)性和缺血性腦卒中發(fā)病相關(guān)性的病例對照研究；② 病例組為缺血性腦卒中患者，對照組研究對象為健康人群；③ 文獻(xiàn)數(shù)據(jù)可用于計(jì)算比值比(odds ratio，OR)及其95%CI；④ 對照組基因型分布符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：① 綜述、重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)；② 數(shù)據(jù)描述不清或樣本資料交代不清，統(tǒng)計(jì)方法不恰當(dāng)?shù)奈墨I(xiàn)；③ 腦卒中診斷不明確；④ 非中、英文文獻(xiàn)；⑤ 動(dòng)物研究和基礎(chǔ)研究。

1.3 文獻(xiàn)質(zhì)量評估 采用Newcastle-Ottawa量表評價(jià)納入文獻(xiàn)的質(zhì)量。通過研究對象、試驗(yàn)設(shè)計(jì)、暴露因素3個(gè)方面(共8個(gè)條目)對文獻(xiàn)質(zhì)量進(jìn)行評價(jià)，評分滿分為9分，6分及以上的文獻(xiàn)認(rèn)為是高質(zhì)量文獻(xiàn)[9-10]。

1.4 數(shù)據(jù)提取 由2名研究者獨(dú)立篩選文獻(xiàn)、提取資料并進(jìn)行交叉核對，如觀點(diǎn)不一致通過討論進(jìn)行解決。提取的資料包括第一作者、發(fā)表時(shí)間、研究人群所在地區(qū)、樣本量、平均年齡、病例組和對照組的基因分布及性別分布、對照組遺傳平衡檢驗(yàn)結(jié)果。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用RevMan 5.3軟件進(jìn)行Meta分析。計(jì)數(shù)資料的效應(yīng)指標(biāo)以O(shè)R值及其95%CI表示。各研究間異質(zhì)性分析采用Q檢驗(yàn)，若P≥0.05、I2<50%，表示各研究間異質(zhì)性差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，采用固定效應(yīng)模型分析；若P<0.05、I2>50%，表示各研究間異質(zhì)性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，采用隨機(jī)效應(yīng)模型分析。采用漏斗圖評估發(fā)表偏倚，若漏斗圖上分布不對稱則存在偏倚，若分布對稱則不存在偏倚。本研究應(yīng)用5種遺傳模型處理所有數(shù)據(jù)，包括等位基因模型(T/C)、純合子模型(TT/CC)、雜合子模型(CT/CC)、顯性基因模型(CT+TT/CC)和隱性基因模型(TT/CC+CT)。Meta分析結(jié)果以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 納入文獻(xiàn)的基本特征 初步檢索獲得80篇文獻(xiàn)，按照納入排除標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行篩選，最終納入13篇文獻(xiàn)[11-23]，共計(jì)4 342例研究對象，其中病例組2 049例，對照組2 293例。納入文獻(xiàn)的基本特征見表1。

表1 納入文獻(xiàn)的基本特征

注：文獻(xiàn)[15]未納入男性患者；文獻(xiàn)[16]中病例組70例，對照組126例，未對兩組性別及年齡分布進(jìn)行描述；文獻(xiàn)[18]中病例組113例，對照組161例；文獻(xiàn)[22]中對照組220例，均未對性別分布進(jìn)行描述；*為平均年齡。

2.2 Meta分析結(jié)果

2.2.1 整合素α2基因807位點(diǎn)基因多態(tài)性與缺血性腦卒中發(fā)病的相關(guān)性：納入13篇文獻(xiàn)[11-23]共4 342例研究對象進(jìn)行Meta分析。結(jié)果顯示，與攜帶C等位基因者比較，攜帶T等位基因發(fā)生缺血性腦卒中的風(fēng)險(xiǎn)升高(均P<0.05)；在純合子、雜合子模型中，與攜帶CC基因型者比較，攜帶TT、CT基因型者發(fā)生缺血性腦卒中的風(fēng)險(xiǎn)升高(均P<0.05)；在隱性基因模型中，與攜帶CT、CC基因型者比較，攜帶TT基因型者發(fā)生缺血性腦卒中的風(fēng)險(xiǎn)升高(P<0.05)。在顯性基因模型中，攜帶CT、TT基因型者發(fā)生缺血性腦卒中的風(fēng)險(xiǎn)與攜帶CC基因型者比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。見表2及圖1～5。

表2 整合素α2基因C807T位點(diǎn)多態(tài)性與缺血性腦卒中發(fā)生的異質(zhì)性及Meta分析結(jié)果

圖1 整合素α2基因807位點(diǎn)等位基因模型與缺血性腦卒中發(fā)病相關(guān)性的Meta分析

圖2 整合素α2基因807位點(diǎn)純合子模型與缺血性腦卒中發(fā)病相關(guān)性的Meta分析

圖3 整合素α2基因807位點(diǎn)雜合子模型與缺血性腦卒中發(fā)病相關(guān)性的Meta分析

圖4 整合素α2基因807位點(diǎn)為顯性基因模型與缺血性腦卒中發(fā)病相關(guān)性的Meta分析

圖5 整合素α2基因807位點(diǎn)隱性基因模型與缺血性腦卒中發(fā)病相關(guān)性的Meta分析

2.2.2 亞組分析：以研究對象來源地區(qū)(中國與西方國家)為分層因素進(jìn)行亞組分型，有9篇[11,14,17-23]文獻(xiàn)的研究對象來自中國，有4篇[12-13,15-16]文獻(xiàn)的研究對象來自西方國家。結(jié)果顯示，在等位基因模型、純合子模型、雜合子模型和隱性基因模型中，中國人群整合素α2基因807位點(diǎn)多態(tài)性與缺血性腦卒中發(fā)病均存在相關(guān)性(均P<0.05)；在5種基因模型中，西方人群整合素α2基因807位點(diǎn)多態(tài)性與缺血性腦卒中均無相關(guān)性(均P>0.05)。見表3及圖6～10。

表3 不同基因模型的亞組分析結(jié)果

圖6 等位基因模型的亞組分析

圖7 純合子模型的亞組分析

圖8 雜合子模型的亞組分析

圖9 顯性基因模型的亞組分析

圖10 隱性基因模型的亞組分析

2.3 發(fā)表偏倚 各基因模型的漏斗圖上分布基本對稱，見圖11。

圖3 各基因模型漏斗圖

注：圖A為等位基因模型；圖B為純合子模型；圖C為雜合子模型；圖D為顯性基因模型；圖E為隱性基因模型。

3 討 論

傳統(tǒng)觀念認(rèn)為，腦卒中發(fā)生的危險(xiǎn)因素包括動(dòng)脈粥樣硬化、血脂異常、高血壓以及高同型半胱氨酸血癥等，但上述危險(xiǎn)因素僅能解釋部分腦卒中的病因，遺傳因素在腦卒中的發(fā)病中發(fā)揮著不可忽視的作用，因此腦卒中可認(rèn)為是遺傳、環(huán)境因素共同作用所導(dǎo)致的一種復(fù)雜性多基因遺傳性疾病[24]。整合素α2是重要的膠原蛋白受體，其在血小板和上皮細(xì)胞中高度表達(dá)，在炎癥反應(yīng)、動(dòng)脈粥樣硬化、缺血性腦卒中等中起到重要作用[25]。整合素α2在血小板和纖維膠原的黏附中起到重要的作用，黏附的過程會(huì)導(dǎo)致血小板的激活和血栓的形成，與血栓性疾病的發(fā)病有密切關(guān)系[26]。

關(guān)于整合素α2基因807位點(diǎn)基因多態(tài)性與缺血性腦卒中的研究較多，但研究結(jié)果不盡相同。Chen等[11]的研究表明，攜帶整合素α2基因807位點(diǎn)T等位基因人群的腦卒中發(fā)病率與非攜帶者無明顯差異，說明T等位基因與腦卒中的發(fā)生并無相關(guān)性。陳軍寧等[22]認(rèn)為，整合素α2作為黏附分子整合素家族的重要成員之一，在腦卒中的過程中“整合”細(xì)胞之間的相互聯(lián)系，從而介導(dǎo)血栓的形成過程，而整合素α2基因807位點(diǎn)的T等位基因可能是腦卒中的遺傳易感因素。相關(guān)研究得出不同的結(jié)果可能與納入不同地區(qū)人群有關(guān)。本研究系統(tǒng)評價(jià)了整合素α2基因807位點(diǎn)基因多態(tài)性與缺血性腦卒中的易感性，Meta分析結(jié)果顯示，在等位基因模型、純合子模型、雜合子模型和隱性基因模型中，整合素α2基因807位點(diǎn)基因多態(tài)性與缺血性腦卒中的發(fā)生均相關(guān)(均P<0.05)，而在顯性基因模型中未觀察到這種相關(guān)性，提示攜帶整合素α2基因807位點(diǎn)基因中等位基因T可增加缺血性腦卒中的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。此外，我們還以研究對象來源地區(qū)為分層因素進(jìn)行了亞組分析，結(jié)果顯示，等位基因模型、純合子模型、雜合子模型和隱性基因模型中，中國人群整合素α2基因807位點(diǎn)多態(tài)性與缺血性腦卒中發(fā)病均存在相關(guān)性(均P<0.05)；在5種基因模型中，西方人群整合素α2基因807位點(diǎn)多態(tài)性與缺血性腦卒中均無相關(guān)性(均P>0.05)。這提示在中西方人群中，整合素α2基因807位點(diǎn)基因多態(tài)性與缺血性腦卒中發(fā)病的易感性有差異，并且人群的差異可能是導(dǎo)致合并數(shù)據(jù)時(shí)異質(zhì)性大的原因。

本研究存在一定的局限性：納入的文獻(xiàn)僅限于中英文文獻(xiàn)，符合要求的文獻(xiàn)偏少；研究對象多為中國人群，少部分為西方人群，缺乏廣泛性和代表性；部分文獻(xiàn)中病例組和對照組的性別、年齡沒有完全匹配。

綜上所述，整合素α2基因807位點(diǎn)基因多態(tài)性與缺血性腦卒中發(fā)病易感性存在密切的關(guān)系，其中攜帶T等位基因可能是缺血性腦卒中發(fā)病的高危因素；中西方人群中整合素α2基因807位點(diǎn)基因多態(tài)性對缺血性腦卒中易感性影響有所不同。但由于本研究仍存在一定局限性，整合素α2基因807位點(diǎn)基因多態(tài)性與腦卒中易感性之間的相關(guān)性，仍有賴于大樣本、多中心、同質(zhì)性的病例對照研究以進(jìn)一步驗(yàn)證。