530500廣西南寧市上林縣人民醫(yī)院，廣西 南寧

近年來，伴隨著醫(yī)療研究的不斷發(fā)展，自動血細胞分析儀在臨床中的應用愈發(fā)廣泛，在提高血細胞分析效率、提供血細胞參數(shù)以及血液直方圖方面具有積極作用。血小板聚集、小紅細胞以及大血小板等因素可直接影響血小板計數(shù)，臨床將血小板、紅細胞與白細胞直方圖特點相互結合，有助于初步判斷血小板計數(shù)。然而在實際的臨床工作中，發(fā)現(xiàn)血細胞分析儀檢測血小板計數(shù)，其結果具有一定的不穩(wěn)定性，所以應結合多種檢測方法進一步確定。故本次研究通過對比分析血細胞分析儀和血涂片顯微鏡下人工計數(shù)法分別檢測血小板計數(shù)結果，探究血小板異常直方圖在判斷血小板計數(shù)結果中的應用效果，現(xiàn)報告如下。

資料與方法

2019年1-3月收集靜脈血標本200例，男105例，女95例，年齡22～53歲，平均(35.97±2.04)歲。

方法：采用乙二胺四乙酸鉀(EDTA-K2)抗凝試管收集受檢者靜脈血2 mL，均為上午送檢住院患者空腹標本。使用儀器為血細胞分析儀及其配套試劑，測定血小板計數(shù)，該儀器已定期保養(yǎng)、質檢和維護，狀態(tài)穩(wěn)定。根據(jù)檢測結果分析紅細胞、白細胞、血小板直方圖形狀的不同，分為正常血小板直方圖組114例、大血小板直方圖組25例、血小板凝集直方圖組30例和小紅細胞干擾直方圖組31例。隨后以血小板血涂片計數(shù)值作為考察依據(jù)，將正常血小板直方圖組分為正常29例、增多40例以及減少45例。標本檢測當天并進行血涂片計數(shù)血小板數(shù)量，應用光學顯微鏡在血涂片體尾交界處血細胞分布均勻，無異常聚集或纖維蛋白絲區(qū)域計數(shù)10個油鏡視野血小板個數(shù)，套用公式計算血小板數(shù)量。公式[1]：血小板數(shù)(×109/L)=1個油鏡視野中血小板平均個數(shù)×15×109/L。

統(tǒng)計學處理：數(shù)據(jù)運用SPSS 17.0軟件處理；計量資料以(±s)表示，采用t檢驗；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

結 果

兩種方法對正常血小板組的測定結果：血小板直方圖分布正常，兩種檢測結果比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，見表1。

兩種方法對直方圖異常血小板計數(shù)的檢測結果：大血小板組和血小板凝集組經兩種方法檢測結果比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，且血細胞分析儀檢測結果偏低。兩種方法檢測小紅細胞干擾組的血小板計數(shù)結果比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，且血細胞分析儀檢測結果偏高，見表2。

討 論

分析血細胞分析儀的阻抗法檢測原理為通過稀釋后懸浮液的幫助，細胞可直接通過計數(shù)孔，繼而改變正負電極之間的直流電阻，影響脈沖，由于脈沖大小與細胞大小直接相關，采用脈沖累積法可直接統(tǒng)計出各個通道中脈沖的數(shù)量和大小，最終將直方圖制作完成。根據(jù)正常體積血小板直方圖的顯示，其主要集中在2～20 fl，通常情況下，25～30 fl更為接近橫坐標。本研究結果顯示，血小板計數(shù)正常、減少以及增高時，血細胞分析儀和血涂片計數(shù)法檢測結果比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，說明血小板計數(shù)值的增加或減少不會影響血細胞分析儀和血涂片計數(shù)法檢測結果。

由于血小板與紅細胞在同一個通道內測量，二者在體積上有明顯的差異，儀器設定了特定的閾值，將高于閾值定于紅細胞，反之為血小板。大血小板可在一定程度上影響血小板直方圖，如果發(fā)現(xiàn)血液中含有大血小板，其直方圖分布峰右側右移，在＞30 fl的某一點與橫坐標重合。觀察白細胞直方圖，在35 fl處明顯可見一小峰，經涂片染色鏡檢顯示有很多大血小板。如果血小板體積超過25 fl，多將其認定為小紅細胞，未計入血小板計數(shù)而使血細胞分析儀檢測結果偏低[2]。本研究結果顯示，大血小板組血細胞分析儀和血涂片計數(shù)法檢測結果比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

表1 兩種方法對正常血小板組的檢測結果比較(±s)

表1 兩種方法對正常血小板組的檢測結果比較(±s)

血小板計數(shù) n 血細胞分析儀 血涂片計數(shù) P正常 29 152±75 149±77 0.881增多 40 392±103 398±101 0.793減少 45 64±33 61±30 0.672

表2 兩種方法對直方圖異常血小板計數(shù)的檢測結果比較(±s)

表2 兩種方法對直方圖異常血小板計數(shù)的檢測結果比較(±s)

組別 n 血細胞分析儀 血涂片計數(shù) P大血小板組 25 79±37 113±36 0.002血小板凝集組 30 70±22 165±84 0.000小紅細胞干擾組 31 217±154 125±89 0.006

衛(wèi)生部印發(fā)《臨床輸血技術規(guī)范》有述及：“血小板計數(shù)低于50×109/L時已經考慮輸入血小板?！币虼烁鶕?jù)經驗，患者血小板低于50×109/L又無出血情況，則可信度不高。如果在血液標本中存在血小板聚集，在血小板直方圖中可明顯觀察到曲線峰變低，右側峰抬高呈拖尾狀，不與橫坐標重合。觀察白細胞直方圖，于35 fl的位置可見一小峰，采用涂片染色鏡檢，發(fā)現(xiàn)聚集成堆的血小板。本研究檢查結果顯示，血小板凝聚組血細胞分析儀和血涂片計數(shù)法檢測結果比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。說明血細胞分析儀檢測結果偏低，分析其原因為抽血不順暢、抗凝不完全以及部分EDTA依賴性血小板聚集。

血小板直方圖顯示右側峰抬起并上揚，遠離橫坐標，如果上翹峰的起始部位處于25 fl以下，則表示血小板分布異常，MCV＜60 fl，同時觀察白細胞直方圖，顯示分布正常，經血片鏡檢查發(fā)現(xiàn)許多小紅細胞。因血細胞分析儀同一通道可檢測到紅細胞和血小板，加之紅細胞數(shù)量較血小板數(shù)量多，故一旦將小紅細胞計入血小板計數(shù)中，也會嚴重影響血小板檢測結果[3]。本研究結果顯示，小紅細胞干擾組使用血細胞分析儀和血涂片計數(shù)法檢測結果比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

經過以上分析，臨床檢測血小板計數(shù)過程中應注意以下幾方面內容：①仔細觀察直方圖，未見圖形異常的情況下，應及時檢查是否伴隨大血小板、血小板聚集和小紅細胞干擾，并且通過血涂片計數(shù)的方法進行復核[4]，最后方可發(fā)出檢測報告，以此保證結果的準確性。②儀器檢測十分便捷，然而在臨床檢測過程中，切不可因貪圖便捷而忽視準確性，應將儀器檢測作為篩查性檢測方法，并結合血涂片計數(shù)法確定血小板計數(shù)。③檢測人員應不斷學習理論知識，全面了解直方圖，為今后的臨床診斷提供科學、理論依據(jù)。

綜上所述，應用血細胞分析儀測定血小板計數(shù)時，易受多種因素的影響，所以針對血小板異常直方圖，臨床應將血細胞分析儀檢測結果與血涂片相互結合，以此確定血小板計數(shù)，避免誤差，值得臨床推廣應用。