朱光來，齊富剛 ，王東博，陸 丹 ，胡繼悅，蔡朝霞

（1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇泰州 225300；2.泰州市海陵區(qū)鑫潤特種水產(chǎn)專業(yè)合作社，江蘇泰州 225300）

益生菌是保護宿主免受疾病侵害的有益微生物，在水產(chǎn)養(yǎng)殖系統(tǒng)（無論是在孵育和生長的水平上）中發(fā)揮著非常重要和關(guān)鍵的作用，因為微生物的活性可以直接影響水質(zhì)和水產(chǎn)動物的疾病防控（邱寶生等，2004）。用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的益生菌包括革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌、酵母和單細胞藻類。已有研究報道了益生菌被成功應(yīng)用于無脊椎動物的飼養(yǎng)中，且大多數(shù)益生菌可以添加在飼料中，它們可以通過胃在腸道中存活（郭慧玲等，2015）。目前，關(guān)于益生菌的作用模式還存在爭議，但其中有益菌群對病原菌的競爭排斥被很多學(xué)者接受（Gomez-Gill等，2000；Fuller，1992）。一些研究把促進動物生長歸因于益生菌的營養(yǎng)益處，如提高礦物質(zhì)和微量元素活性、產(chǎn)生重要的消化酶和維生素等（Holzapfel等，1998）。此外有研究表明，溶藻弧菌可能具有一些特點，能在幼蝦孵化過程防御疾病的感染（Gomez-Gill等，2000）。利用乳酸菌作為益生菌和非特異性免疫抑制劑，除了可以改善水質(zhì)和營養(yǎng)消化率外，還可以增加幼蟲存活率和水產(chǎn)動物屠體重（Anderson，1992）。近年來，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中利用乳酸菌及其代謝產(chǎn)物作為潛在益生菌的應(yīng)用越來越多，因為它可以促進幼苗生長，提高存活率和營養(yǎng)價值。此外，在日糧中添加益生菌可以促進牡蠣幼蟲的生長（Douillet和 Langdon，1994）。雖然益生菌已被證明是有效的，但目前在羅氏沼蝦養(yǎng)殖過程中使用的報道較少。因此，本研究旨在評估益生菌對羅氏沼蝦生長性能和屠體成分的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計 對照組和各處理組日糧組成及營養(yǎng)成分見表1。將250只蝦苗[平均體重（0.01±0.002）g]分為 5組，每組2個重復(fù)，每個重復(fù)25只，試驗共進行12周。除了益生菌比例變化外，試驗日糧的主要營養(yǎng)水平相同，處理組在飼料中分別添加1%、2%、3%、4%益生菌。試驗用益生菌含0.25 M蒜素，6×107cfu/g枯草芽孢桿菌以及3690 U/g酵素水解酶。5種日糧蛋白水平約為35%，能量為4.4 kcal/g。將干燥的原料粉碎成均勻的混合物，然后將混合后的飼料通過制粒機進行加工。每日按照幼苗體重的10%進行投喂，分別在早上9點和下午2點飼喂兩次。

表1 羅氏沼蝦日糧組成及營養(yǎng)水平

1.2 飼養(yǎng)管理 每個魚缸飼養(yǎng)大小均勻[（0.01±0.002）g]的羅氏沼蝦幼苗25只。在整個試驗期間，每個魚缸的總水量保持在20 L。利用氧氣瓶為所有水族箱提供連續(xù)氧氣。試驗開始前對幼蟲進行為期一周的馴化，以便適應(yīng)飼料。水族箱隔日進行清洗，更換約30%的水，每隔2 d用去氯自來水清洗一次。

1.3 生長性能 每隔2周對幼苗進行稱重，計算相關(guān)指標，計算公式如下：

特定生長速度/%=（末重-初重）/試驗天數(shù)×100；

歸一化生物指數(shù)/%=（末重×幼苗數(shù)量-初重×幼苗數(shù)量）×100；

蛋白效率=幼苗增重×幼苗數(shù)量/蛋白攝入量。

每天記錄幼苗的死亡數(shù)量，計算死亡數(shù)和存活數(shù)及存活率。

1.4 化學(xué)分析及水質(zhì) 試驗期間測定水質(zhì)常規(guī)指標（溫度、pH、溶解氧、亞硝酸鹽、磷酸鹽），試驗結(jié)束后對蝦進行屠宰，分析屠體蛋白質(zhì)、水分、脂肪和灰分含量。

1.5 數(shù)據(jù)分析 采用SPSS軟件單因素方差模型對各組測定指標的平均值進行分析，采用Turkey法進行多重比較。結(jié)果以“平均值±標準誤差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 水質(zhì) 由表2可知，整個試驗期間，對照組和處理組對水溫、溶解氧、pH、總堿度、亞硝酸鹽和磷酸鹽無顯著差異（P＞0.05），且各組水質(zhì)均符合羅氏沼蝦的生長需求。

2.2 生長性能 由表3可知，益生菌組較對照組顯著提高了羅氏沼蝦試驗的末重、特定生長率和歸一化生物指數(shù)（P＜0.05），其中處理2組的末重、特定生長率和歸一化生物指數(shù)在第6周最高（P＜0.05），處理3組在第8周直到試驗結(jié)束均最高（P ＜ 0.05）。

表2 各處理試驗期間的水質(zhì)

表3 益生菌對羅氏沼蝦生長性能的影響

表4 益生菌對羅氏沼蝦飼養(yǎng)效率的影響

2.3 飼養(yǎng)效率 由表4可知，與其他組相比，日糧添加2%和3%益生菌顯著降低羅氏沼蝦的料重比，顯著提高蛋白效率比（P＜0.05）。試驗前4周，各組對羅氏沼蝦的采食量無顯著影響（P＞0.05）。

2.4 存活率 由表5可知，處理2組和處理3組羅氏沼蝦存活率最高，分別達到76%和78%（P＜ 0.05）。

表5 益生菌對羅氏沼蝦存活率的影響

2.5 體成分 由表6可知，對照組和處理組羅氏沼蝦屠體水分和灰分含量無顯著差異（P＞0.05）。處理2組和處理3組羅氏沼蝦屠體蛋白組含量最高，處理4組最低（P＜0.05）。與處理2和處理3組相比，對照組、處理1和處理4組羅氏沼蝦屠體脂肪含量顯著提高（P＜0.05）。

3 討論

本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在大多數(shù)處理組中，添加益生菌顯著提高了蝦的存活率。由于日糧中添加益生菌顯著改變腸道菌群中芽孢桿菌的比例，蝦存活率的提高可能是由于益生菌降低了其他細菌（尤其是有害細菌）的數(shù)量，特別是在幼苗生長后期芽孢桿菌占優(yōu)勢。在蝦機體中，作為益生菌的芽孢桿菌可以同時在養(yǎng)殖水體和蝦的消化道中定植，芽孢桿菌也可以代替弧菌進入蝦的腸道，從而提高蝦的存活率，同時，芽孢桿菌能在營養(yǎng)和空間上超過其他細菌，并且能抑制其他細菌的繁殖（Rengpipat等，1998）。

表6 益生菌對羅氏沼蝦體成分的影響???????????????????????%

本研究中，所有添加益生菌的日糧，蝦生長速度均高于對照組，說明添加益生菌可提高蝦的生長性能和飼料利用率?？莶菅挎邨U菌可以產(chǎn)生淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等消化酶，提高腸道消化酶濃度，同時還可以通過合成維生素和輔助因子，或通過酶促反應(yīng)提高消化酶活性（Lee和Lee，1990）。接種芽孢桿菌后，對蝦的生長有顯著促進 作 用（Gullian等，2004）。El-Dakar和 Goher（2004）發(fā)現(xiàn)，接種枯草桿菌后，蝦的生長通常得到增強，因為益生菌可以使消化酶特異性活性增加，可能促進飼料消化和吸收，進而促進蝦的生長和存活，包括飼料轉(zhuǎn)化率和特定生長速率。相反，Shariff等（2001）發(fā)現(xiàn)，益生菌對南美對蝦和凡納濱對蝦的存活率和生長無顯著提高作用，這可能是由于物種間差異造成的。

試驗日糧添加益生菌可降低蝦的料重比，改善蛋白效率，這與Haroun等（2006）的研究結(jié)果一致。通過以上試驗可以發(fā)現(xiàn)，在羅氏沼蝦幼苗日糧中添加益生菌后，其生長速度和料比均有顯著改善，與Shelby等（2006）先前的研究數(shù)據(jù)相一致，表明使用益生菌生物原料為作為羅氏沼蝦飼料添加劑可以促進生長性能和營養(yǎng)利用率。但益生菌對羅氏沼蝦消化率的作用模式及其對免疫反應(yīng)和應(yīng)激抵抗的影響還有待進一步研究。

4 結(jié)論

日糧添加2%或3%益生菌可以提高羅氏沼蝦的生長性能。