王曉平，王 霞

（湘西民族職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖南吉首 416000）

在實(shí)際生產(chǎn)中，后備小母牛的飼養(yǎng)成本約占整個(gè)農(nóng)場(chǎng)成本的20%，同時(shí)犢牛在生命早期的生長(zhǎng)發(fā)育將對(duì)以后的產(chǎn)奶量產(chǎn)生重大影響。由于犢牛的免疫系統(tǒng)不完善，非常容易受環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)應(yīng)激的影響（包括突然斷奶、環(huán)境變化（冷應(yīng)激）和飼料中的抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)），易使?fàn)倥；疾『蜕L(zhǎng)受阻（趙曉靜等，2005）。犢牛突然斷奶會(huì)損害中性粒細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)和吞噬功能，削弱免疫系統(tǒng)，影響小牛隨后的健康和生長(zhǎng)性能（時(shí)發(fā)億等，2019）。由于幼齡動(dòng)物缺乏一個(gè)成熟的適應(yīng)性系統(tǒng)，該系統(tǒng)通過(guò)減少促炎反應(yīng)參與調(diào)節(jié)先天免疫。

豆粕是犢牛飼料中最常用的蛋白質(zhì)來(lái)源，但它含有破壞幼畜正常生長(zhǎng)的抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)，因此，這些抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)需要在喂養(yǎng)前去除或滅活。Feng等（2007）認(rèn)為，發(fā)酵可以降低抗?fàn)I養(yǎng)因子，提高養(yǎng)分消化率，增加蛋白質(zhì)含量和小肽含量，提高豆粕的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。因此，我們假設(shè)日糧用一定水平的發(fā)酵豆粕替代豆粕可以促進(jìn)生長(zhǎng)性能，降低寒冷環(huán)境下突然斷奶的促炎反應(yīng)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)選擇平均體重為（39.5±3.3）kg的荷斯坦?fàn)倥?9頭，隨機(jī)分為3組，3種試驗(yàn)日糧分別在基礎(chǔ)日糧中以0、8%和12%發(fā)酵豆粕替代豆粕。3種日糧原料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。試驗(yàn)原料發(fā)酵豆粕購(gòu)自上海源耀生物股份有限公司。

試驗(yàn)進(jìn)行9周，所有的小牛在59 d突然斷奶，在試驗(yàn)結(jié)束前被單獨(dú)關(guān)在籠子里。犢牛飼養(yǎng)環(huán)境溫度為（8.5±2.3）℃，豆粕與發(fā)酵豆粕的蛋白質(zhì)組分分析參考Busquet等（2005）的研究方法。

1.2 生長(zhǎng)性能和體況測(cè)定 從試驗(yàn)第1～9周，記錄每頭牛每日的采食量，試驗(yàn)第4天稱重1次，之后每7天稱重一次。試驗(yàn)結(jié)束后計(jì)算平均日增重、平均日采食量和飼料效率。分別在每周對(duì)犢牛的糞便和體況進(jìn)行評(píng)分（Lesmeister和Heinrichs等，2004），測(cè)定直腸溫度。在試驗(yàn)第30和60天測(cè)定犢牛胸圍、體長(zhǎng)、臀圍、體高和腰高。

表1 不同水平發(fā)酵豆粕日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 血液指標(biāo) 參考Kim等（2011）的研究方法分別在試驗(yàn)第57、60和62天頸靜脈采血，收集血漿用于測(cè)定中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、白細(xì)胞比例、葡萄糖、胰島素、白蛋白、球蛋白、總蛋白濃度、總抗氧化力和淀粉樣蛋白。用ELISA試劑盒分析白細(xì)胞介素1β的含量。

1.4 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SAS軟件進(jìn)行多因素方差分析，試驗(yàn)主因素為發(fā)酵豆粕水平和犢牛的周齡或日齡，發(fā)酵豆粕對(duì)各指標(biāo)的影響采用單因素方差分析模型，此外研究日糧處理與周齡或日糧對(duì)各指標(biāo)影響的交互效應(yīng)，組間均值的差異性用Turkey檢驗(yàn)進(jìn)行判定，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 豆粕與發(fā)酵豆粕化學(xué)分析 如表2所示，發(fā)酵豆粕的蛋白水平（48.2%）顯著高于豆粕（43.3%）（P＜0.05）。此外，發(fā)酵豆粕中小分子肽（2～3個(gè)氨基酸）顯著高于豆粕（P＜0.05），而大分子肽（3～10個(gè)氨基酸）顯著低于豆粕（P＜0.05）。此外，發(fā)酵豆粕較豆粕中非蛋白氮、慢速降解蛋白和未降解蛋白水平顯著提高（P＜0.05），而中速降解蛋白和慢速降解蛋白顯著降低（P＜0.05）。與豆粕相比，發(fā)酵豆粕中的瘤胃非降解蛋白和氨氮含量顯著升高（P＜0.05），而瘤胃降解蛋白顯著降低（P＜0.05）。

表2 豆粕和發(fā)酵豆粕蛋白組成

2.2 生長(zhǎng)性能 由表3可知，各組對(duì)1～9 w犢牛平均日采食量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。在9 w試驗(yàn)期中，處理與周齡對(duì)犢牛日增重的影響有顯著趨勢(shì)（P=0.08），其中8和12%發(fā)酵豆粕組日增重大于對(duì)照組。處理與周齡對(duì)第8周（斷奶前）和第9周（斷奶后）日增重的影響具有顯著交互作用（P＜0.05）。第8周各處理對(duì)犢牛飼料效率無(wú)顯著影響（P＞0.05），但12%發(fā)酵豆粕組較對(duì)照組顯著提高第9周的飼料效率（P＜0.05）。

2.3 生理特征 在整個(gè)9 w試驗(yàn)中（表4），糞便和健康評(píng)分及直腸溫度均不受日糧發(fā)酵豆粕的影響（P ＞ 0.05）。

由表5可知，試驗(yàn)第30天，12%豆粕組較對(duì)照組顯著提高犢牛體高和腰高（P＜0.05），同時(shí)也顯著提高60 d犢牛的體長(zhǎng)、體高和腰高（P＜0.05）。日糧處理和日齡對(duì)各體況指標(biāo)的影響均無(wú)顯著交互效應(yīng)（P＞0.05）。

表3 發(fā)酵豆粕替代豆粕對(duì)1～9周犢牛生長(zhǎng)性能的影響

表4 發(fā)酵豆粕替代豆粕對(duì)犢牛生理特征的影響

表5 發(fā)酵豆粕替代豆粕對(duì)犢牛身體結(jié)構(gòu)的影響

2.4 血液指標(biāo) 由表6可知，日糧處理和日齡對(duì)血液白細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響具有顯著交互效應(yīng)（P＜0.05），其中12%發(fā)酵豆粕組較對(duì)照組顯著提高斷奶后1 d白細(xì)胞計(jì)數(shù)（P＜0.05）。日糧處理與日糧對(duì)血液中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及其比值的影響均無(wú)顯著交互效應(yīng)（P＞0.05）。整個(gè)試驗(yàn)期間，各處理對(duì)胰島素和葡萄糖水平具有顯著影響，其中12%發(fā)酵豆粕組最低（P＜0.05）。

由表7可以看出，日糧處理對(duì)斷奶前2 d和斷奶后3 d血液白蛋白和球蛋白無(wú)顯著影響（P＞0.05），而日糧處理和日齡對(duì)球蛋白的影響具有顯著交互效應(yīng)（P＜0.05），但對(duì)淀粉樣蛋白和白細(xì)胞介素水平無(wú)顯著交互效應(yīng)（P＞0.05）。12%發(fā)酵豆粕組較氣體組顯著降低斷奶前2 d和斷奶后3 d血液淀粉樣蛋白和白細(xì)胞介素（P＜ 0.05）。

3 討論

斷奶是一個(gè)充滿應(yīng)激的過(guò)程，包括從以母乳為基礎(chǔ)的液體日糧過(guò)渡到各種固體飼料，這可能導(dǎo)致初期采食量、日增重降低、免疫系統(tǒng)發(fā)育受阻。在本研究中，我們用一定水平的發(fā)酵豆粕替代豆粕研究其對(duì)寒冷天氣下突然斷奶的荷斯坦?fàn)倥ＩL(zhǎng)性能和促炎反應(yīng)的潛在優(yōu)勢(shì)。本研究平均環(huán)境溫度為（8.5±2.3）℃。由于發(fā)酵豆粕蛋白含量高于豆粕，所以12%、8%和對(duì)照組日糧粗蛋白質(zhì)水平依次升高，這與Feng等（2007）的研究結(jié)果一致，蛋白質(zhì)含量增加的原因可能是由于發(fā)酵過(guò)程中碳水化合物的減少和微生物蛋白的產(chǎn)生有關(guān)。日糧添加發(fā)酵豆粕可以增加犢牛采食量，尤其是在斷奶前的第8周和斷奶后的第9周之間。此外，飼喂發(fā)酵豆粕的犢牛與豆粕組相比具有更高的日增重，這可能與發(fā)酵提高了豆粕的生物活性肽含量、粗蛋白質(zhì)水平和質(zhì)量。由于犢牛突然斷奶導(dǎo)致初期采食量減少，隨后體重減輕，而發(fā)酵豆粕可以改善飼料適口性，提高采食量，從而降低突然斷奶對(duì)日增重的負(fù)面影響。

有報(bào)道稱，寒冷天氣等慢性應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致胰島素水平降低，進(jìn)而使血液胰島素水平升高（Yan等，2016）。在斷奶應(yīng)激下，皮質(zhì)醇被釋放，增加葡萄糖和胰島素的濃度，以滿足細(xì)胞更高的能量需求。因此，與飼喂豆粕的犢牛相比，12%發(fā)酵豆粕組胰島素和葡萄糖水平較低，可能與其減輕斷奶應(yīng)激有關(guān)。此外，我們發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵豆粕組中性粒細(xì)胞比例較低，而淋巴細(xì)胞比例較高，這與Kim等（2012）的研究結(jié)果一致。Liu等（2007）研究報(bào)道，與飼喂豆粕的犢?；蜇i相比，感染細(xì)菌或脂多糖誘導(dǎo)后，發(fā)酵豆粕組血液免疫球蛋白較低。促炎介質(zhì)是消除感染所必需的，但過(guò)量會(huì)導(dǎo)致組織損傷，甚至感染性休克，同時(shí)促炎細(xì)胞因子的過(guò)度分泌可能導(dǎo)致應(yīng)激反應(yīng)，包括代謝變化、減少營(yíng)養(yǎng)分配（Chaudhry等，2013）。因此，過(guò)度激活的促炎癥反應(yīng)對(duì)宿主身體有害。在本試驗(yàn)中，發(fā)酵豆粕組降低了白細(xì)胞介素-1β、淀粉樣蛋白A抗炎因子水平，說(shuō)明飼喂發(fā)酵豆粕的犢牛能很好地適應(yīng)寒冷時(shí)期的斷奶應(yīng)激。

表6 發(fā)酵豆粕替代豆粕對(duì)犢牛斷奶前后血液指標(biāo)的影響

表7 發(fā)酵豆粕替代豆粕對(duì)犢牛斷奶前后血液生化指標(biāo)的影響

4 結(jié)論

綜上所述，在寒冷天氣下用發(fā)酵豆粕飼喂?fàn)倥？梢蕴岣呱L(zhǎng)性能，同時(shí)降低突然斷奶引起的促炎反應(yīng)。