姜 成，趙斌鋒

（浙江金立源藥業(yè)有限公司，浙江 紹興 312369）

吡嘧司特鉀是由美國(guó)施貴寶公司首先研制合成的抑制抗原引起的變態(tài)反應(yīng)介質(zhì)釋放的藥物，1991 年在日本由BMS 公司以Pemirolastion（商品名）、Mitsubishi-Tokyo 公司以Alegysal（商品名）上市，主要用于治療輕中度過(guò)敏性支氣管哮喘、過(guò)敏性鼻炎、過(guò)敏性皮炎及眼結(jié)膜炎等[1]，劑型主要為片劑[2-3]。由于咀嚼片[4]具有易咀嚼、味道可口（掩味或可接受的味道）、尺寸及形狀適中、易崩解的特點(diǎn)，本文作者采用《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定的硬度、脆碎度和崩解度試驗(yàn)方法和要求[5]，進(jìn)行處方的優(yōu)化篩選；同時(shí)，按照《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定的試驗(yàn)方法，對(duì)其進(jìn)行了含量、溶出度和穩(wěn)定性考察，成功制備出符合《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定的吡嘧司特鉀咀嚼片。該劑型可以解決兒童患者用藥難題，為吡嘧司特鉀臨床用藥多樣化提供支持。

1 儀器與材料

MP5002 電子天平（上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司），RC8MD 溶出儀（天津天大天發(fā)科技有限公司），UV-2600 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（日本Shimadzu 公司），標(biāo)準(zhǔn)篩（上虞五四建材儀器廠），DHG-9246A 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司），ZPS008 實(shí)驗(yàn)室旋轉(zhuǎn)式壓片機(jī)（上海天祥健臺(tái)制藥器械有限公司），BJ-2A 崩解時(shí)限測(cè)定儀（天津國(guó)銘醫(yī)藥設(shè)備有限公司），YD-35 智能片劑硬度儀（天津天大天發(fā)科技有限公司），KBF720 穩(wěn)定性試驗(yàn)箱（德國(guó)Binder 公司）。

吡嘧司特鉀(浙江金立源藥業(yè)有限公司，批號(hào)0101820170412），蔗糖（南寧桂之隆藥用輔料有限公司），甘露醇、微晶纖維素（旭城株式會(huì)社），可溶性淀粉、羧甲基淀粉鈉、乳糖、硬酯酸鎂（安徽山河藥用輔料股份有限公司），預(yù)膠化淀粉（湖州展望藥業(yè)有限公司），阿司巴坦（西安泰華醫(yī)藥科技有限公司），桔子香精（泰興市三華食品添加劑廠），乙醇（湖南湘易康制藥有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 吡啶司特鉀嚼片的制備

2.1.1 制備工藝

按處方配比取吡嘧司特鉀、甘露醇、微晶纖維素、預(yù)膠化淀粉、羧甲基淀粉鈉、阿司巴坦和桔子香精，分別過(guò)80 目篩，混合均勻，以體積分?jǐn)?shù)70%的乙醇溶液作潤(rùn)濕劑，20 目篩濕法制粒，置80 ℃烘箱鼓風(fēng)干燥約2 h，18 目篩整粒，再混入處方量的硬脂酸鎂，壓片即得。

2.1.2 處方篩選

本品設(shè)計(jì)規(guī)格為5 mg，處方以吡嘧司特鉀為主藥，甘露醇為稀釋劑和矯味劑，預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素為稀釋劑，羧甲基淀粉鈉為崩解劑，阿司巴坦和桔子香精為矯味劑；硬脂酸鎂為潤(rùn)滑劑；體積分?jǐn)?shù)70%乙醇為潤(rùn)濕劑，通過(guò)對(duì)制粒情況和咀嚼片外觀性狀、口味、脆碎度以及崩解度項(xiàng)目的綜合考察，篩選最佳處方。各處方中吡嘧司特鉀均為5 mg、香精為3 mg、硬脂酸鎂3 mg，體積分?jǐn)?shù)70%乙醇適量，其他材料用量見(jiàn)表1。通過(guò)對(duì)不同處方工藝的制粒狀況和制成的咀嚼片的外觀性狀、口味、脆碎度以及崩解度考察，處方6 的各項(xiàng)常規(guī)檢查指標(biāo)較好，由此確立為本品的制備處方，考察結(jié)果見(jiàn)表2。

Table 1 Formulation of pemirolast potassium chewable tablets表1 吡嘧司特鉀咀嚼片的處方組成

2.2 吡啶司特鉀嚼片的含量測(cè)定

2.2.1 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

分別取吡嘧司特鉀對(duì)照品和空白輔料適量，用水溶解并稀釋使成每1 mL 含吡嘧司特鉀約10 μg 的溶液。按《中華人民共和國(guó)藥典》2015 年版四部分光光度法，在波長(zhǎng)200～400 nm 內(nèi)掃描測(cè)定。結(jié)果吡嘧司特鉀在波長(zhǎng)357 nm 處有最大吸收，且輔料成份溶液在波長(zhǎng)357 nm 處無(wú)吸收，故確定357 nm 為本品的檢測(cè)波長(zhǎng)。

Table 2 Investigation of formulation of pemirolast potassium chewable tablets表2 吡嘧司特鉀咀嚼片處方的考察結(jié)果

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

取吡嘧司特鉀對(duì)照品約20 mg，精密稱定，置于500 mL 量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別吸取上述溶液1、2、3、4 和5 mL 置于10 mL 量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。用紫外-可見(jiàn)分光光度儀在波長(zhǎng)357 nm 處分別測(cè)定吸光度，以質(zhì)量濃度對(duì)吸光度進(jìn)行回歸，其回歸方程為A=3.1×10-3+6.21×10-2ρ（r=0.999 8，n=5），吡嘧司特鉀水溶液的質(zhì)量濃度在3.6～18.0 μg·L-1內(nèi)線性良好。

2.2.3 精密度試驗(yàn)

取同一批號(hào)本品6 份各10 片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于吡嘧司特鉀5 mg），置于50 mL 量瓶中，用水溶解（必要時(shí)可超聲）并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液1 mL 置于10 mL 量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為供試溶液。按“2.2.5”條方法，在波長(zhǎng)357 nm 處測(cè)定吸光度，計(jì)算含量。結(jié)果測(cè)量值平均RSD 為0.51%，表明本方法的重現(xiàn)性及精密度較好。

2.2.4 回收率試驗(yàn)

田卓對(duì)馬老說(shuō)，我們“十大本土最具發(fā)展?jié)摿Ψ康禺a(chǎn)企業(yè)”評(píng)選活動(dòng)的策劃就是高先生做的，操作性很強(qiáng)，目前進(jìn)展得很順利，具體情況我會(huì)單獨(dú)向您匯報(bào)的。

按本品規(guī)格的50%、80%、100%（并以一定放大比例）分別精密稱取吡嘧司特鉀；再分別精密稱取混合粉適量（約相當(dāng)于吡嘧司特鉀10 mg），置于100 mL 量瓶中，用水溶解（必要時(shí)可超聲）并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液1 mL，置于10 mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試溶液。另取吡嘧司特鉀對(duì)照品約10 mg，精密稱定，置于100 mL 量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1 mL，置10 mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。按“2.2.5”條方法測(cè)定吸光度，計(jì)算得其平均回收率為99.44%（n=9），RSD 為0.55%。

2.2.5 含量測(cè)定

取本品10 片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于吡嘧司特鉀5 mg），置于50 mL量瓶中，用水溶解（必要時(shí)可超聲）并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液1 mL 置于10 mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為供試溶液。另取吡嘧司特鉀對(duì)照品適量，精密稱定，加水溶解并稀釋成每1 mL 含10 μg 的溶液，搖勻，作為對(duì)照溶液。結(jié)果20180618、20180619 和20180620三批樣品的含量質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為99.19%、98.96%和98.63%。

2.3 吡啶司特鉀嚼片的溶出度考察

2.3.1 溶出均一性考察

按《中華人民共和國(guó)藥典》2015 年版四部溶出度測(cè)定法，以水900 mL 為溶劑，轉(zhuǎn)速為100 r·min-1，依法操作。分別于5、10、15、30、45、60 和60 min 時(shí)取樣各10 mL，同時(shí)補(bǔ)加等量同溫度水，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試溶液；另取吡嘧司特鉀對(duì)照品約10 mg，精密稱定，置于100 mL 量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取1 mL，置于10 mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。將上述供試溶液和對(duì)照溶液在波長(zhǎng)357 nm 處分別測(cè)定吸光度，計(jì)算出每片在不同時(shí)間點(diǎn)的溶出度，結(jié)果見(jiàn)表3。結(jié)果顯示，吡嘧司特鉀咀嚼片10 min 溶出度平均值達(dá)95.39%，不同樣品測(cè)得的溶出度無(wú)顯著差異，溶出均一性良好，符合《中華人民共和藥典》規(guī)定的要求。

Table 3 Test results of dissolution homogeneity of pemirolastpotassium chewable tablets表3 吡嘧司特鉀咀嚼片溶出均一性試驗(yàn)結(jié)果

2.3.2 溶出度測(cè)定

取本品適量，照《中華人民共和國(guó)藥典》2015 年版四部溶出度測(cè)定法，以水900 mL 為溶劑，轉(zhuǎn)速為100 r·min-1，依法操作，于30 min 時(shí)取樣15 mL，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試溶液；另取吡嘧司特鉀對(duì)照品約10 mg，精密稱定，置于100 mL 量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1 mL，置10 mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。按“2.2.5”條方法測(cè)定并計(jì)算每片的溶出量。結(jié)果20180618、20180619 和20180620 三批樣品溶出度結(jié)果分別為99.01%、98.55%和98.37%。

2.4 吡啶司特鉀嚼片中有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)

取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于吡嘧司特鉀5 mg），精密稱定，置于50 mL 量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試溶液。量取供試溶液1 mL，置于100 mL 量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為預(yù)試溶液，即對(duì)照溶液。按《中華人民共和國(guó)藥典》2015 年版四部高效液相色譜法測(cè)定。色譜條件為：用十八烷基鍵合硅膠為填充劑，以水（用冰醋酸調(diào)pH 值至3.5）-甲醇（體積比60∶40）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為257 nm，理論板數(shù)以吡嘧司特鉀峰計(jì)算應(yīng)不低于2 500。取預(yù)試溶液20 μL 注入液相色譜儀中，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的10%～25%，再分別取供試溶液和對(duì)照溶液各20 μL 注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的兩倍，供試溶液中如有雜質(zhì)峰，量取各雜質(zhì)峰面積之和，與對(duì)照溶液主峰面積的1.5 倍比較。結(jié)果20180618、20180619 和20180620 三批產(chǎn)品中有關(guān)物質(zhì)的含量質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.23%、0.23%和0.22%。

2.5 吡啶司特鉀嚼片的穩(wěn)定性考察

2.5.1 吡嘧司特鉀咀嚼片的強(qiáng)度穩(wěn)定性試驗(yàn)

最佳處方樣品模擬商品包裝，分別在光照（4 500±500）lx、高溫（60 ℃）及高濕（75%）條件下，在第5 天、第10 天取樣，進(jìn)行外觀、含量、溶出度和有關(guān)物質(zhì)考察，結(jié)果見(jiàn)表4。結(jié)果表明：處方樣品在光照、高溫條件下考察10 d 后，各項(xiàng)檢查指標(biāo)均表現(xiàn)穩(wěn)定，表明該處方適合本品的制備，結(jié)合一般咀嚼片的貯存條件，本品仍宜室溫、遮光、密閉保存。

Table 4 Observation results of stress testing of pemirolast potassium chewable tablets表4 吡嘧司特鉀咀嚼片的強(qiáng)度穩(wěn)定性試驗(yàn)考察結(jié)果

2.5.2 吡嘧司特鉀咀嚼片的加速穩(wěn)定性試驗(yàn)

將三批模擬銷售包裝的樣品置于相對(duì)濕度為75%、溫度為40 ℃的條件下存放，分別于第1、2、3、6 月取樣，對(duì)樣品的性狀、溶出度、含量和有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行考察，結(jié)果見(jiàn)表5。結(jié)果表明：吡嘧司特鉀咀嚼片樣品在包裝條件下，高溫、高濕條件下存放6 個(gè)月后，各項(xiàng)檢查指標(biāo)均未見(jiàn)明顯變化。

Table 5 Test results of accelerated stability of pemirolast potassium chewable tablets表5 吡嘧司特鉀咀嚼片的高溫、高濕加速試驗(yàn)結(jié)果

2.5.3 吡嘧司特鉀咀嚼片的長(zhǎng)期留樣穩(wěn)定性考察

將三批模擬銷售包裝的吡嘧司特鉀咀嚼片，置溫度（25 ± 2）℃、相對(duì)濕度為60% ± 5%的條件下，分別于3、6、9、12 個(gè)月取樣，并對(duì)其性狀、溶出度、含量進(jìn)行考察，用高效液相色譜法進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢查，12 個(gè)月的長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6。

Table6 Test results of long-term stability of pemirolast potassium chewable tablets表6 吡嘧司特鉀咀嚼片樣品長(zhǎng)期留樣試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

3.1 劑型與處方選擇

吡嘧司特鉀劑型以傳統(tǒng)的片劑為主，后來(lái)又出現(xiàn)了外用的鼻噴劑[6]和滴眼液[3,7]，但針對(duì)不同適應(yīng)癥，尤其是兒童及動(dòng)物保健用藥使用傳統(tǒng)片劑有諸多不便。加之，咀嚼片[8]有溶出快和服用攜帶方便等優(yōu)點(diǎn)，所以該劑型作為首先。

處方選擇根據(jù)FDA 發(fā)布的咀嚼片關(guān)鍵質(zhì)量屬性指導(dǎo)原則，咀嚼片應(yīng)具備的四大特征：易咀嚼、味道可口（掩味或可接受的味道）、尺寸及形狀適中、易崩解，以有利于藥片破碎和活性成分溶出。咀嚼片的關(guān)鍵質(zhì)量屬性包括硬度、崩解時(shí)限、溶出度以及其他影響生物利用度和生物等效性的因素[9]，為處方篩選提供依據(jù)。

3.2 含量、溶出度和有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法

含量和溶出度常見(jiàn)報(bào)道有HPLC[7]、RP-HPLC[9-10]，紫外-可見(jiàn)分光光度法較為少見(jiàn)，雖然HPLC、RP-HPLC 有檢測(cè)精準(zhǔn)的優(yōu)點(diǎn)，但費(fèi)用高，且耗時(shí)。根據(jù)吡嘧司特鉀對(duì)紫外-可見(jiàn)光有顯著的特征吸收峰，確立采用紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定。驗(yàn)證表明，該方法可以滿足檢測(cè)要求和相應(yīng)的檢測(cè)精度，并且有省時(shí)省力、簡(jiǎn)單易行的優(yōu)點(diǎn)。

有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)采用HPLC 方法，專屬性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，吡嘧司特鉀與其降解物質(zhì)的分離效果令人滿意，溶劑水及輔料在此條件下無(wú)干擾，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，該方法精密度高、穩(wěn)定性好。因此采用本法作為吡嘧司特鉀咀嚼片的有關(guān)物質(zhì)檢查法。

3.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)考察

影響因素試驗(yàn)考察并沒(méi)有按照起草的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行全檢，只是有重點(diǎn)選擇性狀、溶出度和有關(guān)物質(zhì)作為考察重點(diǎn)，因?yàn)樵谔幏胶Y選一節(jié)中，已選取硬度、脆碎度和崩解度作為篩選依據(jù)。影響因素試驗(yàn)可以為處方調(diào)整提供支持，同時(shí)對(duì)產(chǎn)品的貯存和有效期的制定提供依據(jù)。

加速穩(wěn)定性和長(zhǎng)期留樣穩(wěn)定性試驗(yàn)為產(chǎn)品的有效期提供參考依據(jù)和數(shù)據(jù)。長(zhǎng)期留樣12 個(gè)月數(shù)據(jù)顯示各個(gè)考察項(xiàng)目未見(jiàn)明顯變化。