劉春燕　姜宏兵　牛書(shū)敏　董清清　張新　鄧朝暉

[摘要]目的 探討新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)（簡(jiǎn)稱兵團(tuán)）第十二師6189例女性宮頸高危型人乳頭瘤病毒（HPV）的感染情況。方法 收集2018年12月1日～2019年2月14日兵團(tuán)第十二師進(jìn)行健康體檢的6189例女性的宮頸分泌物，分別對(duì)其進(jìn)行HPV基因分型檢測(cè)，并結(jié)合年齡、HPV亞型以及混合感染情況，分析兵團(tuán)第十二師女性HPV感染的分布特征。結(jié)果 在6189例樣本中，HPV陽(yáng)性861例，感染率為13.9%，其中單一感染648例（75.3%），多重感染213例（24.7%）。各年齡組HPV感染率為：35～<40歲組14.1%，40～<45歲組12.7%，45～<50歲組13.4%，50～<55歲組13.1%，55～<60歲組15.8%，≥60歲組17.8%?！?5歲組與35～<55歲組的HPV感染率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=8.541，P<0.05）。感染率排在前5位的HPV亞型分別是52型（18.1%）、16型（12.8%）、53型（9.0%）、58型（8.5%）和51型（7.9%）。HPV 52型和16型是單一感染和多重感染的主要感染亞型，其感染率在≥60歲組人群中最高。結(jié)論 兵團(tuán)第十二師≥55歲女性是HPV感染的高風(fēng)險(xiǎn)人群，HPV 52型和16型為HPV主要感染亞型，對(duì)高危人群進(jìn)行HPV篩查將為宮頸癌的防治提供依據(jù)。

[關(guān)鍵詞]人乳頭瘤病毒;感染率;亞型;年齡分布

[中圖分類號(hào)] R737.33 ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A ? ? [文章編號(hào)] 1674-4721（2019）9（b）-0167-06

Analysis of high-risk human papilloma virus infection among 6189 women in a region of the crops

LIU Chun-yan? ?JIANG Hong-bing? ?NIU Shu-min? ?DONG Qing-qing? ?ZHANG Xin? ?DENG Zhao-hui

Department of Clinical Laboratory， Hospital of Xinjiang Production and Construction Corps， the Second Affiliated Hospital of Shihezi University Medical College， Xinjiang Uygur Autonomous Region， Urumqi? ?830002， China

[Abstract] Objective To investigate 6189 cases of cervical high-risk human papilloma virus （HPV） infection in 12th division of Xinjiang Production and Construction Corps （referred to as corps）. Methods A total of 6189 cervical secretions from healthy women over 35 years old in 12th division of the crops were collected from 1 December 2018 to 14 February 2019. HPV genotyping were performed， and the subtype distribution in different ages， mixed infection were analyzed. Results In 6189 samples， 861 cases were HPV positive， the infection rate was 13.9%， of which 648 cases （75.3%） were single infection and 213 cases （24.7%） were multiple infection. HPV infection rates in all age groups were， 14.1% in the 35-<40 years old group， 12.7% in the 40-<45 years old group， 13.4% in the 45-<50 years old group， 13.1% in the 50-<55 years old group， 15.8% in the 55-<60 years old group， 17.8% in the ≥60 years old group， and the difference between the ≥55 years old group and the 35-<55 years old group was statistically significant （χ2=8.541， P<0.05）. The HPV subtypes with the highest infection rate were type 52 （18.1%）， type 16 （12.8%）， type 53 （9.0%）， type 58 （8.5%） and type 51 （7.9%） respectively. HPV type 52 and 16 were the main subtypes of single infection and multiple infection， with the highest infection rate in the ≥60 age group. Conclusions Women ≥55 years old from the 12th division of the corps are high-risk groups for HPV infection. HPV types 52 and 16 are the main subtypes of HPV infection. HPV screening for high-risk groups will provide basis for the prevention and treatment of cervical cancer.

[Key words] Human papilloma virus; Infection rate; Subtype; Age distribution

宮頸癌發(fā)病率僅次于乳腺癌，是位居女性發(fā)病率第二位的惡性腫瘤[1]，高危型人乳頭瘤病毒（HPV）持續(xù)感染是宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變發(fā)生的主要因素[2-3]。目前已分離出200多種HPV的基因型，其中約40多種與生殖道病變相關(guān)[4]，不同型別的HPV，其致病力與宮頸癌的病理分型存在較大的差異[5]，因此，HPV的分型檢測(cè)已經(jīng)成為篩查和預(yù)防宮頸癌的關(guān)鍵問(wèn)題之一。另外，不同地區(qū)的HPV感染情況及基因類型的分布存在差異[6]，通過(guò)分析當(dāng)?shù)貐^(qū)域內(nèi)女性宮頸HPV的感染和基因類型情況，對(duì)篩查和防治宮頸癌具有重要的指導(dǎo)意義。本研究通過(guò)收集新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)（簡(jiǎn)稱兵團(tuán)）第十二師進(jìn)行健康體檢的6189例35歲以上女性的宮頸分泌物，并對(duì)其進(jìn)行HPV基因分型檢測(cè)，圍繞HPV的感染和分布情況展開(kāi)調(diào)查研究，旨在為本地區(qū)女性HPV感染的篩查和防治提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

收集2018年12月1日～2019年2月14日兵團(tuán)第十二師進(jìn)行健康體檢的6189例女性的宮頸分泌物進(jìn)行HPV的分型檢測(cè)，其中調(diào)查對(duì)象年齡為35～98歲，平均（48.57±7.0）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥35歲者;②有性行為史，但在樣本采集前的48 h內(nèi)沒(méi)有性行為者;③未孕且非行經(jīng)期者;④樣本采集前的3 d內(nèi)未進(jìn)行陰道沖洗或使用避孕藥膏等陰道內(nèi)用藥者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有細(xì)菌性、霉菌性、滴蟲(chóng)性陰道炎者;②有子宮切除史者。本研究經(jīng)兵團(tuán)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，調(diào)查對(duì)象均自愿參加本研究并簽署知情同意書(shū)。

1.2儀器與試劑

SLAN-96P全自動(dòng)醫(yī)用分析系統(tǒng)（上海宏石醫(yī)療科技有限公司）;高危型人乳頭瘤病毒核酸（分型）檢測(cè)試劑盒[聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）-熒光探針?lè)╙（湖南圣湘生物科技有限公司）。所檢測(cè)的高危型HPV亞型共有15種型別，分別為：16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66和68型。

1.3樣本采集與處理

樣本采集前用棉拭子拭去宮頸口的分泌物，將宮頸刷置于宮頸口，輕輕搓動(dòng)宮頸刷，使其順時(shí)針旋轉(zhuǎn)3～4圈，取得脫落細(xì)胞，慢慢取出宮頸刷，將其放入裝有細(xì)胞保存液的無(wú)菌樣本管中，充分漂洗，并在檢測(cè)前充分震蕩混勻。

1.4 HPV的基因型檢測(cè)

將“1.3”項(xiàng)所采集的樣本，用高危型HPV核酸（分型）檢測(cè)試劑盒中的核酸釋放劑進(jìn)行快速裂解，使樣本中的HPV DNA釋放，將其分成8或4個(gè)反應(yīng)管，利用HPV 15種型別的特異性引物及熒光探針，應(yīng)用PCR結(jié)合Taqman技術(shù)，分別進(jìn)行HPV的15種型別的特異性DNA片段進(jìn)行檢測(cè)。

1.5觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

通過(guò)對(duì)樣本的HPV基因進(jìn)行分型檢測(cè)，觀察HPV感染的類型、陽(yáng)性率、多重感染及在人群中的分布情況。其中HPV感染陽(yáng)性以宮頸分泌物HPV檢測(cè)的CT值（CT值=-3.601 lgN+45.19）為判斷標(biāo)準(zhǔn)，其中，CT值指的是當(dāng)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定的閾值時(shí)所需經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)，與HPV拷貝數(shù)（N）的對(duì)數(shù)（lgN）成負(fù)相關(guān)。HPV陽(yáng)性的判斷標(biāo)準(zhǔn)為：①CT值≤39為陽(yáng)性;②無(wú)CT值或CT值>39為陰性。若檢查結(jié)果出現(xiàn)1個(gè)陽(yáng)性基因型，則為單一感染;檢查結(jié)果出現(xiàn)2個(gè)陽(yáng)性基因型，則為雙重感染;檢查結(jié)果出現(xiàn)3個(gè)陽(yáng)性基因型，則為三重感染;檢查結(jié)果出現(xiàn)≥4個(gè)陽(yáng)性基因型，則為其他多重感染。陽(yáng)性率=HPV感染陽(yáng)性例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用率或構(gòu)成比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 HPV的感染情況

在6189例樣本中，HPV陽(yáng)性共861例，陽(yáng)性率為13.9%（861/6189），其中單一感染648例，多重感染213例（雙重感染163例、三重感染42例、其他多重感染8例）。單一感染與多重感染之比為3.04∶1.00。在多重感染中，以雙重感染最為多見(jiàn)，占多重感染的76.5%（163/213）。

2.2不同年齡組調(diào)查對(duì)象HPV感染情況的比較

將調(diào)查對(duì)象按年齡進(jìn)行分組，分別為35～<40歲組、40～<45歲組、45～<50歲組、50～<55歲組、55～<60歲組、≥60歲組。其中，55～<60歲組的HPV感染陽(yáng)性率高于40～<45歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），55～<60歲組的HPV感染陽(yáng)性率高于50～<55歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。≥60歲組的HPV感染陽(yáng)性率高于40～<45歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），≥60歲組的HPV感染陽(yáng)性率高于45～<50歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），≥60歲組的HPV感染陽(yáng)性率高于50～<55歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。其余各組間HPV感染陽(yáng)性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表1）。

其中≥55歲組（將55～<60組與≥60歲組調(diào)查對(duì)象合并）的HPV感染陽(yáng)性率高于35～<55歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=8.634，P<0.05），提示≥55歲女性是HPV感染的高發(fā)人群。

2.3 HPV感染亞型的分布情況

檢測(cè)861例HPV陽(yáng)性樣本中高危型HPV的15種亞型。在861例HPV陽(yáng)性樣本中，共檢出HPV 1134株，感染率排在前5位的亞型分別為52型（18.1%）、16型（12.8%）、53型（9.0%）、58型（8.5%）和51型（7.9%）。18型的感染率僅為3.5%（表2）。

2.4 HPV多重感染亞型的分布情況

在861例HPV陽(yáng)性樣本中共檢出HPV 1134株，其中單一感染的HPV 648例648株，雙重感染的HPV 163例326株，三重感染的HPV 42例126株，其他多重感染的HPV 8例34株。單一感染的感染率排在前5位的亞型分別為52、16、53、51和68型;雙重感染的感染率排在前5位的亞型分別為52、58、16、39和68型;三重感染的感染率排在前5位的亞型分別為52、16、51、58和53型;其他多重感染的感染率排在前5位的亞型分別為52、53、66、16和68型（表3）。

2.5不同年齡組調(diào)查對(duì)象HPV單一感染和多重感染的分布情況

本研究不同年齡組的HPV陽(yáng)性樣本中，以單一感染為主，也存在與其他亞型混合感染（表4）;其中55～<60歲女性是單一感染、雙重感染和其他多重感染的高發(fā)人群，≥60歲女性是單一感染、雙重感染、三重感染和其他多重感染的高發(fā)人群（圖1）。

2.6不同年齡組調(diào)查對(duì)象HPV 52型和16型的分布情況

本研究共檢出HPV 52型205例（表5），其中單一感染137例，與其他亞型混合感染68例;HPV 16型145例（表5），其中單一感染95例，與其他亞型混合感染50例。35～<40歲組和≥60歲組女性是HPV 52型感染的高危人群，≥60歲女性是HPV 16型感染的高發(fā)人群（圖2）。

3討論

宮頸癌是嚴(yán)重威脅女性健康的主要疾病之一，我國(guó)每年新發(fā)病例約占世界宮頸癌新發(fā)病例的28.0%，居于我國(guó)女性生殖道惡性腫瘤的首位[7]。有研究證實(shí)宮頸癌的發(fā)病與HPV感染有直接關(guān)系[8]，國(guó)際癌癥研究中心（International Agency for Research on Cancer，IARC）專題討論會(huì)（1995年）認(rèn)為HPV感染是宮頸癌發(fā)生的主要因素[9]。有研究[4]表明，有40多種HPV的基因型與宮頸的感染和病變相關(guān)。其中，高危型HPV亞型包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66和68型等，其持續(xù)感染與宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變的發(fā)生相關(guān)[10]。我國(guó)宮頸癌高發(fā)地區(qū)的HPV感染率為10%～20%，宮頸癌低發(fā)地區(qū)的HPV感染率為5%～10%[11]。本研究分析了兵團(tuán)第十二師6189例≥35歲女性進(jìn)行健康體檢的宮頸分泌物數(shù)據(jù)，其中，HPV的感染率為13.9%，與姚立麗等[12]的報(bào)道結(jié)果一致。研究結(jié)果提示，HPV感染在不同的年齡組存在兩個(gè)高峰[13-14]，年輕女性免疫系統(tǒng)不完善，性生活頻繁，易受到HPV的感染，是HPV感染的第一個(gè)高峰;第二個(gè)感染高峰常出現(xiàn)在女性絕經(jīng)以后，體內(nèi)激素水平波動(dòng)較大，導(dǎo)致機(jī)體免疫力下降，宿主對(duì)病毒感染的清除或抑制作用減弱，致使HPV出現(xiàn)持續(xù)感染。本研究的調(diào)查對(duì)象為35歲以上女性，未觀察年輕女性的HPV感染情況。分析不同年齡組感染率，35～<40、40～<45、45～<50和50～<55歲組的感染率基本接近，約為13.1%;≥60歲組感染率高達(dá)20.8%。但是，本研究中≥60歲入組的調(diào)查對(duì)象僅有428例，不足以代表高年齡段體檢人群的HPV感染率，因此，本研究同時(shí)比較了≥55歲組（將55～<60組與≥60歲組調(diào)查對(duì)象合并）與35～<55歲組人群的HPV感染率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果提示，≥55歲年齡組女性的HPV感染率上升至20.6%左右，出現(xiàn)感染率的第2個(gè)高峰。

不同地區(qū)的HPV基因型分布存在差異，調(diào)查顯示，HPV 16/18型是世界范圍內(nèi)也是歐美國(guó)家主要感染的基因亞型，亞洲地區(qū)HPV 52/58型為常見(jiàn)感染的基因亞型[15]。我國(guó)不同地域HPV基因型分布差異也較大，除了HPV 16/18型外，HPV 52/58型的感染比例也較高[16]。本研究結(jié)果提示，感染率排在前5位的基因亞型分別為52型（23.8%）、16型（16.8%）、53型（12.0%）、58型（11.1%）和51型（10.5%），基本與王麗娜等[6]的報(bào)道結(jié)果一致，研究對(duì)象為婦產(chǎn)科出現(xiàn)臨床癥狀就診的女性，多以HPV 16/18型感染為主[14]。本研究中HPV 52型的感染率占據(jù)首位，可能與納入人群為健康體檢女性相關(guān)[17]。魯靜等[18]研究發(fā)現(xiàn)，新疆南部維吾爾族女性感染HPV的主要基因型為HPV 16/18型，而本研究HPV 18型感染率僅為4.6%，可能與南北疆人群種族差異、居住環(huán)境、經(jīng)濟(jì)狀況、認(rèn)識(shí)不足、教育欠缺以及篩查技術(shù)手段等因素相關(guān)。不同的HPV基因型之間基本上沒(méi)有交叉保護(hù)性抗體，容易造成不同HPV基因型的多重感染。與姜丹等[19]的研究結(jié)果接近，本研究HPV感染以單一感染為主，單一感染與多重感染的比例約為3∶1，其中單一感染和多重感染都以HPV 52型為主。HPV 16型在單一感染中占14.7%，隨著感染HPV亞型的增加，HPV 16型的比例略有下降，可能與HPV 16型單獨(dú)感染具有較強(qiáng)的致病性相關(guān)[14]，但其仍然是多重感染中主要的感染亞型之一。分析單一感染和多重感染在不同年齡組的感染率發(fā)現(xiàn)，≥55歲女性的感染率均比其他年齡組升高，更易發(fā)生HPV單一或多重感染，這可能與中老年人機(jī)體免疫力下降相關(guān)[14]。

本研究中，HPV單一感染或多重感染均以HPV 52/16型為主，HPV 52型在≥60歲組女性中的感染率最高，其次是35～<40歲組人群;HPV 16型在≥60歲組人群中的感染率最高。本研究結(jié)果提示，兵團(tuán)第十二師女性宮頸HPV感染的分布特征及年齡特點(diǎn)為：≥55歲女性是HPV感染的高風(fēng)險(xiǎn)人群，這些高危型HPV感染造成的宮頸上皮內(nèi)瘤變是可逆轉(zhuǎn)的癌前期病變，對(duì)宮頸上皮內(nèi)瘤變的早期干預(yù)可起到積極作用，可有效地預(yù)防宮頸癌的發(fā)生。本課題組將采用液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)對(duì)HPV陽(yáng)性樣本進(jìn)行細(xì)胞學(xué)診斷，分析HPV 52/16型在不同程度的宮頸上皮內(nèi)瘤變的分布特征，為兵團(tuán)第十二師宮頸癌的二級(jí)預(yù)防提供必要的流行病學(xué)數(shù)據(jù)，對(duì)該地區(qū)宮頸癌疫苗的接種工作具有一定的參考意義。

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（收稿日期：2019-03-18? ?本文編輯：孟慶卿）