吳彥嬌 于水柔 唐嬋 鄭丹 賈宏梅 張紅石

摘要：本項目是對失眠大鼠進(jìn)行腹部推拿，通過檢測失眠大鼠血清腦腸肽中的p物質(zhì)和β內(nèi)啡肽來研究振腹推拿的方法對失眠大鼠的影響，從而進(jìn)一步對失眠進(jìn)行研究，本項目旨在運(yùn)用推拿手法幫助解決現(xiàn)在社會上因生理、心理等原因引起的失眠問題，減少藥物對身體的損害，提高護(hù)理的保健意識和社會保健意識[1]。

關(guān)鍵詞：振腹環(huán)揉法;失眠大鼠;研究

中圖分類號：G642.0? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A? ? ?文章編號：1674-9324（2019）44-0067-02

失眠是一種十分普遍的疾病，在睡眠障礙中受到主要的關(guān)注，失眠患者的主要表現(xiàn)有入睡困難、睡眠質(zhì)量下降和睡眠時間減少等表現(xiàn)[2]。不僅如此，長期失眠還可以造成記憶功能下降、注意功能下降、計劃功能下降，從而導(dǎo)致白天困倦，工作能力降低，在停止工作時容易出現(xiàn)日間嗜睡現(xiàn)象[3]。

一、實驗材料

1.實驗動物。本實驗動物由長春市億斯實驗動物技術(shù)有限責(zé)任公司（動物許可證號：SCXK（吉）-2016-0003，序號201900026508）提供，wistar大鼠30只，體重200—220g。實驗場所：長春中醫(yī)藥大學(xué)針灸經(jīng)絡(luò)研究所。

2.飼養(yǎng)環(huán)境。室內(nèi)溫度控制在20℃—22℃，相對濕度45%—65%，自然光，避免噪聲和其他干擾。將30只大鼠先適應(yīng)性喂養(yǎng)7天，大鼠自由進(jìn)食飼料和水，墊料保持干燥，7天后稱量體重。普通飼料按國家實驗動物飼養(yǎng)成分統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)配置[4]。

二、實驗分組

大鼠正常喂養(yǎng)1周后，按體重隨機(jī)分組，分為模型組、藥物組、推拿組，每組大鼠按自然序號進(jìn)行標(biāo)記，采用熒光涂抹技術(shù)，在大鼠身上用黃色熒光筆進(jìn)行標(biāo)記[5]。

三、實驗藥物與設(shè)備

（一）實驗藥物

對苯丙氨酸（PCPA），美國Sigma公司，CAS NO.742400-2。人參歸脾丸，貴州同濟(jì)堂制藥有限公司，批號：國藥準(zhǔn)字Z20010033[6]。配水為湯。戊巴比妥鈉，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號：WS20130601。p物質(zhì)試劑盒：南京建成生物工程研究所，p物質(zhì)凍干粉，批號：KIT2019012。β內(nèi)啡肽試劑盒：南京建成生物工程研究所，β內(nèi)啡肽凍干粉，批號：KIT2019016。

（二）實驗儀器

上海精密科學(xué)儀器有限公司JY10001電子秤;賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司BSA124S-CW精密電子秤;酶標(biāo)儀：伯騰酶標(biāo)儀BIOTek-SMAT;恒溫水浴箱：精宏XWTD-8222。

四、實驗方法

（一）實驗動物的失眠造模

30只大鼠同時進(jìn)行失眠造模，造模采用腹腔注射PCPA混懸液，連續(xù)注射2天，RCPA臨用前按大鼠100mg/kg用量，用弱堿性生理鹽水配置成混懸液備用，第一次腹腔注射36小時后，大鼠出現(xiàn)晝夜節(jié)律缺失[7]，白天與夜晚皆活動不斷，造模大鼠腹腔注射戊巴比妥30mg/Kg（預(yù)實驗測得引起100%大鼠睡眠的最小劑量）。提起大鼠尾巴[4]，將大鼠腹部朝上放在墊塊上記錄大鼠的睡眠潛伏期及睡眠持續(xù)時間，以翻正反射消失為發(fā)生睡眠。以翻正反射，提示造模成功。

（二）實驗方法

1.模型組：每天按照正常標(biāo)準(zhǔn)喂食、喂水。

2.藥物組：每天按照人∶大鼠=1∶30的比例，對藥物組大鼠灌胃按體重轉(zhuǎn)毫升數(shù)[8]。

3.推拿組：取穴及部位：中脘、神闕、中極，腹部。手法：摩法、振法。以爽身粉為推拿介質(zhì)，以臍為中心順時針掌摩全腹5分鐘[9，10]，以調(diào)暢氣機(jī);雙手指腹加團(tuán)揉全腹10分鐘，以調(diào)臟通腑、平衡陰陽;單掌按振中脘穴2分鐘，單掌掌振神闕穴3分鐘，單掌閃振中極穴5分鐘，以健脾和胃，補(bǔ)益氣血;隨呼吸掌按腹部，以神闕穴為中心，吸氣時深按，吐氣時輕抬，時間5分鐘，以引氣歸元，寧心安神。

五、觀測指標(biāo)

1.p物質(zhì)。ELISA檢測法：腹腔靜脈取血5ml，分離血清，用鼠p物質(zhì)ELISA檢測試劑盒檢測血清p物質(zhì)的濃度，嚴(yán)格按照試劑盒要求進(jìn)行操作。于波長450nm的酶儀上讀取各孔的OD值。

2.β內(nèi)腓肽。ELISA檢測法：腹腔靜脈取血5ml，分離血清，采用β內(nèi)啡肽ELISA試劑盒，嚴(yán)格按照試劑盒要求進(jìn)行操作。于波長450nm的酶儀上讀取各孔的OD值。

六、數(shù)據(jù)統(tǒng)計

本實驗數(shù)據(jù)分析擬采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件完成。ELISA數(shù)值計算，采用ELISAAcalc進(jìn)行計算。數(shù)據(jù)采用成組T檢驗，進(jìn)行兩兩對比分析。

七、結(jié)果（見下表）

八、討論

失眠是一種十分普遍的生理心理疾病，有報道稱全球約一半的成年人受到慢性失眠的影響。長期失眠不僅可以造成免疫力下降、內(nèi)分泌紊亂、心功能下降等軀體機(jī)能的損傷，還會引起焦慮、注意力下降等心理功能的紊亂，本項目是通過振腹推拿的方法研究對失眠大鼠的影響，旨在運(yùn)用推拿手法幫助解決現(xiàn)在社會上因生理、心理等原因引起的失眠問題，對于提高護(hù)理的保健意識和社會保健意識有積極的意義。提高失眠患者對于自身失眠狀態(tài)的認(rèn)識和重視程度，加強(qiáng)自我保健意識，幫助解決現(xiàn)在社會上因生理、心理等原因引起的失眠問題。推拿手法屬于中醫(yī)特色，對身體沒有傷害，屬于保健類的治療方法，和藥物治療相比，安全性較高，無副作用。通過本研究探討推拿和失眠的關(guān)系及對失眠大鼠睡眠的改善情況，為臨床治療失眠提供了相關(guān)依據(jù)。腹部推拿可以提高失眠大鼠的p物質(zhì)和β內(nèi)啡肽水平，對腦組織及晝夜節(jié)律變化有較好的輔助作用。

參考文獻(xiàn)：

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[2]王玥.慢性原發(fā)性失眠的臨床特點與血清免疫球蛋白的關(guān)系[D].上海：復(fù)旦大學(xué)，2010.

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[5]鮑娟.替普瑞酮誘導(dǎo)阿爾茨海默病大鼠海馬熱休克蛋白70表達(dá)及抗凋亡機(jī)制[J].中國神經(jīng)精神疾病雜志，2010，（11）：662-666.

[6]薛金.介入療法配合骨復(fù)活湯治療成人激素性早期股骨頭缺血壞死的臨床研究[D].石家莊：河北醫(yī)科大學(xué)，2010.

[7]李峰杰.酸棗仁、石菖蒲、夜交藤、百合、郁金5味中藥對對氯苯丙氨酸致失眠模型大鼠睡眠作用的影響[J].中國藥業(yè)，2017，（6）：1-4.

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[10]韓國偉.急性腦梗塞患者血漿中β-內(nèi)啡肽水平檢測分析[J].河南科技大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版），2003，（4）：286.