耿子軒
(鄭州工程技術(shù)學(xué)院,河南 鄭州 450000)
食用菌營(yíng)養(yǎng)豐富,味道鮮美,含有很多人體必需的多糖、維生素、礦物質(zhì)、氨基酸等營(yíng)養(yǎng)成分,屬于低脂肪、高蛋白的保健食品,食用菌還可以促進(jìn)其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收[1],含有很多稀有氨基酸,如2-二氨基異丁酸、4-氨基異丁酸、C-氨基-3-L-脯氨酸等,這些稀有氨基酸使很多蘑菇風(fēng)味鮮美、味道獨(dú)特,蘑菇中維生素的種類數(shù)目也遠(yuǎn)高于普通食物,富含葉酸、生物素、毗哆醇、泛酸、煙酸、維生素B12、維生素B2、維生素B1等多種維生素。作為一種很好的蛋白質(zhì)來(lái)源,食用菌有著“素中之葷”的稱號(hào),很多食用菌中還含有珍貴的藥用成分,然而食用菌被采后仍然會(huì)保持旺盛的呼吸作用,因此常溫下食用菌很快就會(huì)褐變、開傘、變味、品質(zhì)敗壞,難以長(zhǎng)期儲(chǔ)存[2]。選取新鮮鳳尾菇(Pleurotussajor-caju)提取出一種水提液,在提取水提液的過(guò)程中,會(huì)得到很多菌絲體和大量代謝產(chǎn)物,這些物質(zhì)中富含生物活性,對(duì)腎、心血管、肝臟、神經(jīng)系統(tǒng)等人體器官可以起到治病防病的作用,還具備提高免疫力、延緩衰老、消炎、抗腫瘤、抗細(xì)菌等功效。當(dāng)前食用菌水提液的提取技術(shù)發(fā)展迅速,利用新型提取技術(shù)對(duì)食用菌水提液進(jìn)行提取,獲取食用菌的菌絲體,提取食用菌水提液和菌絲體中的有效成分,并將其應(yīng)用在醫(yī)藥保健領(lǐng)域的研究目前已經(jīng)獲得了很大進(jìn)展,利用食用菌水提液制成的營(yíng)養(yǎng)液、口服液、食品添加劑等已經(jīng)被人們接受。并且,食用菌水提液的提取技術(shù)在食品工業(yè)領(lǐng)域也有極大的發(fā)展?jié)摿Γ貏e是食用菌水提液具備一定的抗疲勞能力,可能成為未來(lái)人類蛋白質(zhì)的主要來(lái)源。因而,通過(guò)小鼠運(yùn)動(dòng)試驗(yàn),對(duì)食用菌水提液的抗疲勞能力進(jìn)行了驗(yàn)證。
首先對(duì)鳳尾菇水提液進(jìn)行制備。選取市售新鮮鳳尾菇1 kg, 將鳳尾菇清洗干凈,加1000 mL蒸餾水,利用高速組織搗碎機(jī)將鳳尾菇打成懸液,并用pH為6.8~7.0、體積約懸液4倍的涼開水對(duì)懸液進(jìn)行約30 min的浸提,將其放置于冰箱中約12 h。用紗布對(duì)沉淀物進(jìn)行過(guò)濾,在過(guò)濾物中加入NaCl,平均100 mL濾液中需要加入0.7 g NaCl,將濾液煮沸并裝進(jìn)無(wú)菌瓶中密封。為了防止鳳尾菇水提液變質(zhì),將其儲(chǔ)存于冰箱中備用[3]。試驗(yàn)中用到的小鼠種類是昆明種小鼠,由昆明醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)部的動(dòng)物試驗(yàn)科提供,選取雄性、體重在18 g~22 g范圍內(nèi)的小鼠共150只。將動(dòng)物室調(diào)整為50%濕度、 25℃恒溫的環(huán)境,放入小鼠對(duì)其進(jìn)行3 d適應(yīng)性飼養(yǎng),飼養(yǎng)期間自由飲水、給予基礎(chǔ)飼料[4]。
試驗(yàn)中需要用到的試劑與儀器見(jiàn)表1、表2。
表1 試驗(yàn)試劑Tab.1 Experimental reagents
表2 試驗(yàn)儀器Tab.2 Experimental instruments
將適應(yīng)性飼養(yǎng)的小鼠分為鳳尾菇水提液組、對(duì)照組、空白組3組,每組30只小鼠[5]。在鳳尾菇水提液組中,分別用體積為 83 g·L-1、165 g·L-1、330 g·L-1的鳳尾菇水提液對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃,灌胃周期為30 d,每天1次;對(duì)照組和空白組分別用體積相同的紅牛飲料和結(jié)化水進(jìn)行灌胃,灌胃周期和次數(shù)與蘑菇水提液組完全相同。期間每周對(duì)小鼠進(jìn)行2次游泳訓(xùn)練,每次的訓(xùn)練時(shí)間為10 min,如圖1所示。
圖1 小鼠游泳訓(xùn)練圖Fig.1 Mouse swimming training chart
完成最后1次灌胃后,讓小鼠休息30 min,使小鼠尾根部負(fù)荷重量為自身重量的5%,將負(fù)重的小鼠放入游泳箱中。游泳箱中的水溫保持在(25.0±1.0)℃,水深高于30 cm,對(duì)各組小鼠的力竭游泳時(shí)間進(jìn)行記錄,力竭游泳時(shí)間是指從開始游泳到小鼠口鼻進(jìn)入水中8 s未抬頭的時(shí)間。小鼠結(jié)束負(fù)重游泳后,不加抗凝劑,分別對(duì)其進(jìn)行眼球采血,將采集的血液在冰箱中放置3 h,當(dāng)血液完全凝固后,在速度為3000 r·min-1的條件下進(jìn)行離心處理,離心時(shí)間為15 min。將分離出的血清取出備用。利用二乙酰一肟法對(duì)血清尿素氮進(jìn)行測(cè)定。血清尿素氮的含量取決于血清中的SOD活力,而SOD活力中的催化反應(yīng)式為:
利用SPSS 11.5軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,利用均數(shù)正負(fù)標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示試驗(yàn)結(jié)果,并利用單因素方差對(duì)各個(gè)組別進(jìn)行分析,P<0.01表示差異具有非常顯著性,P<0.05表示差異具有顯著性。
運(yùn)動(dòng)抗疲勞能力增強(qiáng)的最直接證據(jù)就是運(yùn)動(dòng)耐力得到延長(zhǎng)。根據(jù)表3小鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)間的試驗(yàn)數(shù)據(jù),在用鳳尾菇水提液給小鼠灌胃30 d后,其負(fù)重游泳時(shí)間相較空白組得到了很大提升,各個(gè)灌胃劑量的組別記錄均高于空白組。而對(duì)照組小鼠負(fù)重游泳時(shí)間相較空白組則并沒(méi)有很大的差異。相較于空白組,體積為 330 g·L-1、165 g·L-1、83 g·L-1的 3 個(gè)鳳尾菇水提液組,其小鼠負(fù)重游泳時(shí)間增長(zhǎng)量分別為56.83%、34.46%、22.45%,試驗(yàn)結(jié)果證明鳳尾菇水提液能夠明顯提升小鼠的運(yùn)動(dòng)耐力,即能夠提升小鼠的運(yùn)動(dòng)抗疲勞能力。
表3 小鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)間試驗(yàn)數(shù)據(jù)Tab.3 Experimental data of mouse exercise time
而血清尿素氮也是靈敏、理想的運(yùn)動(dòng)抗疲勞指標(biāo)。在進(jìn)行運(yùn)動(dòng)時(shí),機(jī)體會(huì)加強(qiáng)肌肉收縮、增大肌糖原消耗量,導(dǎo)致能量供給失衡,此時(shí)蛋白質(zhì)會(huì)進(jìn)行代謝,最終產(chǎn)生血清尿素氮。因此,運(yùn)動(dòng)后,機(jī)體的血清尿素氮含量會(huì)急劇升高,機(jī)體的運(yùn)動(dòng)負(fù)荷量越高,蛋白質(zhì)代謝越快,就會(huì)形成越多的尿素,血清尿素氮含量就會(huì)越高。通過(guò)圖2可知,3組蘑菇水提液組在運(yùn)動(dòng)后血清尿素氮的含量均低于對(duì)照組與空白組。說(shuō)明鳳尾菇水提液能夠顯著增強(qiáng)小鼠的運(yùn)動(dòng)耐受能力與運(yùn)動(dòng)負(fù)荷能力,也就是鳳尾菇水提液具有顯著的運(yùn)動(dòng)抗疲勞能力。
圖2 運(yùn)動(dòng)后小鼠血清尿素氮含量Fig.2 Serum urea nitrogen content in mice after exercise
運(yùn)動(dòng)后機(jī)體在多種因素的作用下會(huì)感受到疲勞,而疲勞最客觀、最直接的表現(xiàn)就是機(jī)體的運(yùn)動(dòng)耐力會(huì)降低,力竭游泳時(shí)間可認(rèn)為是運(yùn)動(dòng)耐力的代表反映指標(biāo)。通過(guò)表3可知,與對(duì)照組相比,鳳尾菇水提液能夠有效提高小鼠負(fù)重游泳時(shí)間,與空白組相比提升效果則更顯著,并且鳳尾菇水提液的劑量越高,小鼠的負(fù)重游泳時(shí)間越長(zhǎng),運(yùn)動(dòng)耐力越高,即提升運(yùn)動(dòng)抗疲勞能力的效果越顯著。而當(dāng)機(jī)體進(jìn)行運(yùn)動(dòng)時(shí)會(huì)比較缺氧,為滿足機(jī)體能量會(huì)進(jìn)行蛋白質(zhì)代謝從而產(chǎn)生血清尿素氮通過(guò)圖2可知,與對(duì)照組相比,鳳尾菇水提液能夠降低小鼠體內(nèi)血清尿素氮含量,增強(qiáng)小鼠的運(yùn)動(dòng)耐受能力與運(yùn)動(dòng)負(fù)荷能力,與空白組相比效果則更顯著,并且鳳尾菇水提液的劑量越高,小鼠的血清尿素氮含量越低,即提升運(yùn)動(dòng)抗疲勞能力的效果越顯著。綜上所述,通過(guò)對(duì)小鼠進(jìn)行血清尿素氮含量測(cè)定與負(fù)重游泳時(shí)間測(cè)試,可以發(fā)現(xiàn)鳳尾菇水提液能夠顯著提升小鼠的運(yùn)動(dòng)耐受能力、運(yùn)動(dòng)負(fù)荷能力與運(yùn)動(dòng)耐力,具備很好的運(yùn)動(dòng)抗疲勞效果。
鳳尾菇水提液中的多糖具備調(diào)節(jié)機(jī)體免疫機(jī)能、抗自由基、抗病毒、抗腫瘤等多種作用,是一種優(yōu)秀的免疫增強(qiáng)劑,并且通過(guò)試驗(yàn)證明,鳳尾菇水提液還能夠提升機(jī)體的運(yùn)動(dòng)抗疲勞能力,因此有必要對(duì)鳳尾菇水提液的機(jī)能與提取工藝進(jìn)行更深層次的研究。