陳小燕 ，潘月華，趙睿穎2，楊向榮，林曉杰

(1 臨沂市婦女兒童醫(yī)院，山東 臨沂 276000；2 濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院，山東 濟(jì)寧 272067)

核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體家族3(NLRP3)是NOD樣受體(NLRs)家族的一員。人體的巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞和樹突細(xì)胞等都表達(dá)NLRP3基因編碼的NLRP3蛋白[1]。目前，研究發(fā)現(xiàn)NLRP3基因的單核苷酸多態(tài)性大約有60多種位點(diǎn)，這些單核苷酸多態(tài)性改變都與炎癥小體的激活密切相關(guān)。但對于NLRP3基因的多態(tài)性與癌癥的發(fā)病是否相關(guān)，目前沒有得出一致的結(jié)論。Q705K基因是目前NLRP3基因多態(tài)性研究較多的一個位點(diǎn)，本文利用meta分析對其與癌癥發(fā)病風(fēng)險之間的相關(guān)性進(jìn)行了研究。

1 材料與方法

1.1文獻(xiàn)檢索策略 對Pubmed、WOS、EMBase、ESD和WOL等數(shù)據(jù)庫和網(wǎng)絡(luò)資源進(jìn)行檢索，檢索日期截至2017年6月30日，檢索詞分為兩組：第一組為“tumor”或“cancer”或“carcinogenesis”或“carcinoma”；第二組為 “rs 35829419”或“Q705K”。兩組之間用“and”連接，組內(nèi)用“or”連接。為保證能全面檢索研究的文獻(xiàn)，如果有需要進(jìn)一步查找，將根據(jù)檢索所獲得文獻(xiàn)的參考文獻(xiàn)再進(jìn)行檢索。由兩位人員分別進(jìn)行獨(dú)立的檢索。

1.2文獻(xiàn)的納入標(biāo)準(zhǔn) ①研究對象為人類，研究內(nèi)容為Q705K基因多態(tài)性與癌癥易感性的關(guān)聯(lián)性研究，研究類型為病例對照研究；②癌癥的診斷應(yīng)有明確的標(biāo)準(zhǔn)；③文章中必須包含基因型分布頻率；④文獻(xiàn)報道語言為英文；⑤當(dāng)同一文獻(xiàn)中進(jìn)行了分組研究，根據(jù)分組研究的對象是否為同一內(nèi)容，來決定是否全部納入。

1.3文獻(xiàn)信息收集與質(zhì)量評價 收集每項(xiàng)研究的下列不同信息：文章標(biāo)題、第一位作者、發(fā)表的時間、研究對象的種族、病例組與對照組的基因型分布、基因檢測法、癌癥類型、病例組和對照組的數(shù)量、對照人群的來源、基因分型所用的的標(biāo)本類型、哈迪-溫伯格平衡檢驗(yàn)(HWE)等信息。如果兩位人員采集的信息不一致，則重新核對信息來源。文獻(xiàn)質(zhì)量的評價見參考文獻(xiàn)[2]。

1.4統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用Review Manager5.0軟件，繪制漏斗圖判斷是否存在發(fā)表偏倚。敏感性分析采用逐項(xiàng)去除法。應(yīng)用I2判斷研究的異質(zhì)性，如果I2<50%，則采用固定效應(yīng)模式，反之則采用隨機(jī)效應(yīng)模式。統(tǒng)計(jì)OR 值和95%CI以及Z值。

2 結(jié)果

2.1文獻(xiàn)檢索結(jié)果 最初檢索出文獻(xiàn)45篇，經(jīng)過閱讀文獻(xiàn)標(biāo)題和摘要去除36篇，全文閱讀后去除了3篇基因型數(shù)據(jù)不全的文獻(xiàn)，最終納入6篇文獻(xiàn)，包含7個病例對照研究，基本信息見表1。其中癌癥患者1 222例，對照人員2 460例。

2.2Q705K基因多態(tài)性與癌癥易感性的Meta分析

2.2.1異質(zhì)性檢驗(yàn) 結(jié)果顯示：等位基因模型(C vs A)下存在明顯的異質(zhì)性(P<0.05，I2=87%)，該基因模型采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析；其它模型不存在異質(zhì)性，均采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行分析。結(jié)果見表2、封三圖1。

2.2.2發(fā)表偏倚評估 結(jié)果顯示，漏斗圖形狀在所有比較模型中沒有明顯的不對稱，以等位基因模型(CC vs CA)為例，見封三圖2。

表1 納入文獻(xiàn)的基本信息

備注：HC：醫(yī)院同期住院患者；CC：社區(qū)健康人群；PC：胰腺癌；CRC：結(jié)直腸癌；CML：慢性粒細(xì)胞白血??；MPM：惡性間皮瘤；MM：多發(fā)性骨髓瘤

表2 Q705K多態(tài)性與癌癥易感性關(guān)聯(lián)的總效應(yīng)分析

2.2.3敏感性檢驗(yàn) 在Review Manager5.0軟件中采用逐項(xiàng)去除的方法進(jìn)行敏感性檢驗(yàn)，去除任何一項(xiàng)研究后的效應(yīng)量與未去除該項(xiàng)研究之前的合并效應(yīng)量進(jìn)行比較，都沒有顯著差異，說明納入meta分析的文獻(xiàn)敏感性低，此次meta分析的結(jié)果穩(wěn)健可信。

3 討論

有研究顯示，炎癥與腫瘤的發(fā)生有密切關(guān)系，約25%的惡性腫瘤與慢性炎癥有關(guān)性[9-10]。在這一過程中，炎癥小體參與了多個環(huán)節(jié)，其活化狀態(tài)與機(jī)體的損傷程度和疾病的轉(zhuǎn)歸有關(guān)。在炎癥小體中，NLRP3分子是NLRP3炎癥小體活化的限速步驟，決定了其形成速度和活化程度[11-12]。炎癥小體的重要蛋白NLRP3蛋白由NLRP3 基因進(jìn)行編碼表達(dá)。NLRP3基因的突變可能引起相應(yīng)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)或功能異常，可能導(dǎo)致炎癥減弱或增強(qiáng)。Q705K基因的突變使NLRP3蛋白在表達(dá)過程中第705位的氨基酸由谷氨酰氨(Q)變?yōu)橘嚢彼?K)。變異后的NLRP3 蛋白更容易被激活，從而使炎癥程度和持續(xù)時間增強(qiáng)，導(dǎo)致Q705K基因發(fā)生突變的人群中某些疾病的患病率增高。有研究顯示，Q705K基因多態(tài)性是一種疾病易患因素，與多種疾病有關(guān)，包括心肌梗塞、結(jié)腸直腸癌等[13]。NLRP3基因多態(tài)性會導(dǎo)致NLRP3炎癥小體異常激活，使IL-1β的分泌增加，而研究證明IL-1β與腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展是有關(guān)的[14]。提示，NLRP3單核苷酸多態(tài)性可能參與了某些癌癥的發(fā)生或進(jìn)展。但對于NLRP3單核苷酸多態(tài)性與癌癥的易感性的關(guān)系，目前此研究還比較少，現(xiàn)有的研究數(shù)據(jù)中也存在爭論。根據(jù)已有的研究結(jié)果，筆者對NLRP3蛋白單核苷酸多態(tài)性與癌癥易感性的關(guān)聯(lián)進(jìn)行了Meta分析，結(jié)果顯示：Q705K基因多態(tài)性與癌癥的易感性無關(guān)。但是Verma等[8]發(fā)現(xiàn)，帶有A等位基因的個體與沒有A等位基因的個體相比，其結(jié)節(jié)性惡性黑色素瘤的發(fā)生率高于淺表擴(kuò)散性惡性黑色素瘤發(fā)生[13]。

目前，有關(guān)NLRP3的基因單核苷酸多態(tài)性與癌癥易感性的研究比較少，而且研究對象多為動物模型，在進(jìn)行的研究中，只包括中國、意大利、波蘭、瑞典等國家，而由于地域、種族與遺傳因素不同，其疾病與基因的相關(guān)性也可能完全不同。因此，今后需要在這一領(lǐng)域進(jìn)行更全面的研究，以獲得更客觀、可靠的結(jié)論。