隨著我國家兔產(chǎn)業(yè)迅速發(fā)展，急需在應用研究方面得到相應突破。隨著納米技術的應用，納米顆粒可以作為日糧中微量礦物質(zhì)的補充來源，這些微量礦物質(zhì)具有一些不同于普通礦物質(zhì)的新特性（張南南等，2017）。硒是動物生長、繁殖、激素生成、生理參數(shù)和代謝及體內(nèi)外器官必不可少的微量元素。硒可以以有機、無機或納米顆粒的形式進行補充，但硒納米粒子與其他硒源相比具有效率相當、生物利用度高、催化效率高、吸附能力強、毒性低等特點（付學鋒等，2008）。硒可以提高動物生產(chǎn)性能和抗氧化狀態(tài)，大蒜油具有促進生長、繁殖、激素分泌和動物新陳代謝的功能。飼糧中添加0.5 g/kg大蒜油對家兔睪丸重量、抗氧化狀態(tài)和睪酮激素有積極影響（El-Desoky N等，2017）。大蒜油還可以改善家兔免疫反應，降低血脂和肝臟的脂質(zhì)過氧化，增加肝臟抗氧化活性。家兔日糧硒水平具有很大差異，添加水平從0.05～0.4 mg/kg（Amer等，2019）。關于硒在雄性家兔營養(yǎng)中的生物學價值有待進一步研究。本研究主要比較了納米硒或大蒜油及二者組合對雄性家兔營養(yǎng)物質(zhì)消化率、精液質(zhì)量、睪酮和血液代謝物的影響，以期為其在雄性家兔中的應用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物、日糧和飼養(yǎng)管理 將160只新西蘭白兔（120日齡、雄性、普通級）隨機分為4組，每組40只（10只/重復）。試驗動物生產(chǎn)許可證：SCXK（魯）20150001，試驗動物質(zhì)量合格證：0002026。對照組飼喂基礎日糧，大蒜油組在基礎日糧中添加600 mg/kg大蒜油，納米硒組在基礎日糧中添加0.4 mg/kg納米硒，大蒜油+納米硒組在基礎日糧中添加0.4 mg/kg納米硒和600 mg/kg大蒜油，試驗從家兔120日齡開展到180日齡。日糧配方及營養(yǎng)水平見表1。采用不銹鋼代謝籠（寬×長×高：44 cm×50 cm×35 cm），配置自動飲水器和手動喂料機，在整個試驗期間，試驗環(huán)境每天光照12 h，黑暗12 h，室內(nèi)自然通風，室內(nèi)溫度26～31℃，相對濕度為45%～65%。在試驗周期內(nèi)，每周稱量一次家兔體重，記錄每周飼料用量，試驗結束后計算日增重、日采食量和料重比。

表1 日糧原料組成及營養(yǎng)成分

1.2 養(yǎng)分消化試驗 試驗結束前4 d開展消化試驗，每組選擇20只兔子隨機單獨在代謝籠中飼養(yǎng)，糞便和尿液分離。4 d內(nèi)每天記錄采食量，并收集每個代謝籠兔子的糞便，匯總、稱重，-20℃保存。糞便樣品在60℃干燥48 h，同時收集飼料樣品。飼料和糞樣用于分析常規(guī)養(yǎng)分。

養(yǎng)分消化率%=（養(yǎng)分攝入量-糞養(yǎng)分含量）/養(yǎng)分攝入量×100。

1.3 精液質(zhì)量與血液指標 試驗結束時采用假陰道收集家兔精液，記錄體積，用伊紅美藍染色法對200個精子細胞進行計數(shù)，評估活精子、死精子和異常精子占比。完整或部分紫紅色的精子細胞判定為死精，沒有染色的精子細胞判定為活精。采用光學顯微鏡，在100×放大倍數(shù)下，對精液標本在多個視野下進行直線運動精子百分率的判定。每個重復選擇10只家兔耳緣靜脈采血10 mL，分離血清，樣品用于測定尿素氮、尿素、肌酸酐和睪酮水平以及谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）活力。

1.4 統(tǒng)計分析 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析采用2×2方差分析的方法，試驗中兩個主因素是納米硒和大蒜油，利用SAS軟件一般線性模型分析納米硒、大蒜油的主要作用，以及納米硒與大蒜油之間的相互作用。用Ducan’s法進行多重比較，P＜0.05表示差異顯著，0.05＜P＜0.1表示有差異顯著趨勢。

2 結果與分析

2.1 生長性能 由表2可知，在整個試驗期間，動物沒有死亡，總體健康狀況良好，與不添加硒組相比，添加納米硒組動物的末重和日增重均顯著增加（P＜0.05）。各處理組對采食量無顯著影響（P＞0.05），但與不添加硒組相比，添加納米硒組的料重比得到顯著改善（P＜0.05）。

2.2 養(yǎng)分消化 在試驗周期內(nèi)（120～180 d），日糧添加納米硒、大蒜油或其組合對公兔的干物質(zhì)、有機物、粗蛋白質(zhì)和粗纖維消化率均有影響（表3）。日糧單獨添加納米硒顯著提高粗脂肪消化率（P＜0.05），增加干物質(zhì)、有機物、粗蛋白質(zhì)和粗纖維的消化率，但與不添加硒組相比，這些項目的影響均不顯著（P＞0.05）。日糧單獨添加大蒜油與未添加組相比顯著提高干物質(zhì)、有機物、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維消化率（P＜0.05）。此外，納米硒與大蒜油對干物質(zhì)、有機物、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗纖維消化率的影響具有顯著交互作用（P＜ 0.05）。

表2 納米硒和大蒜油對公兔生長性能的影響

2.3 精液質(zhì)量 由表4可知，在試驗結束時，日糧添加納米硒、大蒜油或其組合均顯著增加兔子的精液量、精子存活率和精子活力（P＜0.05）。納米硒與大蒜油對精液量有顯著影響（P＜0.05），但對精子存活率無顯著影響（P＞0.05）。納米硒、大蒜油及其組合對精液pH無顯著影響（P＞0.05）。與不添加硒和大蒜油的雄性家兔相比，添加硒和大蒜油的雄性家兔精子異常率顯著降低（P＜0.05）。但納米硒與大蒜油對雄性家兔精子異常率具有顯著交互作用趨勢（P=0.06）。

2.4 血液生化指標 由表5可知，飼喂納米硒或大蒜油或兩者混合飼料的兔子，與未添加組相比，血清ALT和AST活性顯著降低（P＜0.05）。與未添加硒組相比，添加納米硒、大蒜油或其組合對家兔血清尿素氮、尿素和肌酸酐均顯著降低（P＜0.05）。另一方面，大蒜油和納米硒對血清肌酸酐水平的影響無顯著交互效應（P＞0.05）。日糧同時添加大蒜油和納米硒較單獨添加這兩種物質(zhì)顯著提高了血清睪酮水平（P＜0.05），同時大蒜油和納米硒對血清睪酮水平的影響具有顯著交互效應（P＜0.05）。

表3 納米硒和大蒜油對雄性家兔養(yǎng)分消化率的影響

表4 納米硒和大蒜油對雄性家兔精液質(zhì)量的影響

表5 納米硒和大蒜油對雄性家兔血液生化指標的影響

3 討論

硒具有重要的生物學功能，是正常動物生長繁殖所必需的元素，可以調(diào)控機體能量、蛋白質(zhì)合成、代謝及氧化應激。目前關于家兔對硒的需要量推薦標準不一，如De Blas報道，在家兔飼料中添加少量硒（0.05 mg/kg）是可行的，而Strucklec等（1994）報道，在雌性新西蘭白兔日糧中添加0.1和0.3 mg/kg的硒可以促進生長，提高繁殖性能。本研究中，在日糧中添加0.4 mg/kg納米硒再補充大蒜油可以提高公兔的體重，這種作用可能與納米硒單獨或與大蒜油聯(lián)合使用可提高營養(yǎng)物質(zhì)消化率的能力有關。硒和植物源添加劑可體現(xiàn)出抗氧化活性，改善了日糧營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收（Mahima等，2012），從而提高本研究中家兔的生長性能和生產(chǎn)效率。

關于納米硒或硒源對家兔營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響，目前相關試驗研究還很有限。日糧添加0.4 mg/kg納米硒可以顯著改善雄性家兔干物質(zhì)、有機物、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪的消化率，其原因可能與硒提高家兔抗熱應激能力有關。此外，Saleh等（2013）的研究顯示，與對照組相比，在家兔日糧中添加亞麻仁油和0.3 mg/kg硒可顯著提高蛋白質(zhì)消化率和能量利用率，分別達到20%和11%。但與本研究中沒有添加大蒜油的處理組比較，添加大蒜油也可以提高家兔養(yǎng)分消化率，同時納米硒與大蒜油對養(yǎng)分消化率的影響具有交互效應。

在試驗結束時收集的精液中，納米硒組在精液量、精子存活率和精子活力各方面均有顯著提高。硒通過提高精子質(zhì)量和數(shù)量來改善繁殖性能和 抗氧化應激（Abdulrashid 和 Juniper，2016）。與熱應激條件下的對照組相比，添加硒后公兔的精液量、運動性、精子濃度、活精子數(shù)和正常精子數(shù)均顯著增加（Kamel，2012）。在本研究中，與未添加大蒜油組相比，在60 d的試驗日糧中添加大蒜油可以增加精液量、精子存活率和精子活力。大蒜油對精液量和精子質(zhì)量的積極影響可能是通過抗氧化防御機制，如調(diào)節(jié)細胞色素P450酶（Ghalehkandi，2014）。

此外，日糧添加納米硒顯著降低了血清尿素、肌酸酐、尿素氮、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性，并提高血清睪酮水平，這些結果表明，納米硒可以改善家兔的肝腎功能，從而減輕環(huán)境高溫的不利影響，這與Kamel（2012）的結果一致。

4 結論

日糧單獨添加0.4 mg/kg納米硒或600 mg/kg大蒜油或其混合物可以提高公兔營養(yǎng)物質(zhì)消化率、改善肝臟和腎臟功能及精液質(zhì)量，大蒜油和納米硒對上述指標的改善作用具有交互效應。